江蘇省新沂市第一學(xué)校2023學(xué)年高二生物第二學(xué)期期末檢測(cè)試題（含解析）

2023學(xué)年高二年級(jí)下學(xué)期生物模擬測(cè)試卷注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列相關(guān)敘述正確的是A．西瓜的種子屬于組織層次B．—條蛔蟲是個(gè)體層次，也屬于細(xì)胞層次C．生物的生活環(huán)境也屬于生命系統(tǒng)的一部分D．一片森林中所有動(dòng)物和植物構(gòu)成的進(jìn)群落2．某哺乳動(dòng)物的一種成熟細(xì)胞不含DNA。下圖中能正確表示在一定O2濃度范圍內(nèi)，K+進(jìn)入該細(xì)胞的速度與O2濃度關(guān)系的是A． B．C． D．3．從某社區(qū)隨機(jī)抽取男女各200人，調(diào)查中發(fā)現(xiàn)女性色盲基因的攜帶者為18人，患者6人，男性患者12人，則該群體中色盲基因的頻率是A．5.25%B．8%C．10.5%D．7%4．試管嬰兒、試管苗和克隆羊這三者可以說是現(xiàn)代生物科技的杰出成果，下列對(duì)其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述，正確的是（1）都屬于無性生殖（2）都不會(huì)發(fā)生基因重組（3）都利用了細(xì)胞工程的技術(shù)（4）都體現(xiàn)了己分化的細(xì)胞具有全能性（5）試管嬰兒的培育依賴體外受精技術(shù)、胚胎體外培養(yǎng)、胚胎移植等相關(guān)技術(shù)A．（3）（4） B．（2）（3） C．（1）（3） D．（3）（5）5．若要利用某目的基因(見圖甲)和P1噬菌體載體(見圖乙)構(gòu)建重組DNA(見圖丙),限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是()A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體6．把蠶豆植株放在濕潤的空氣中照光一段時(shí)間后，取蠶豆葉下表皮制作臨時(shí)裝片，先在清水中觀察，然后用0.3g/mL蔗糖溶液取代清水，繼續(xù)觀察，結(jié)果如下圖所示。對(duì)此現(xiàn)象的推斷最合理的是A．清水進(jìn)入保衛(wèi)細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞的代謝，從而導(dǎo)致氣孔開放B．蔗糖溶液中保衛(wèi)細(xì)胞因失水而形態(tài)發(fā)生改變,從而導(dǎo)致氣孔關(guān)閉C．葉片在清水中蒸騰作用減弱導(dǎo)致氣孔開放D．蔗糖進(jìn)入保衛(wèi)細(xì)胞后，細(xì)胞吸水導(dǎo)致氣孔關(guān)閉7．飯后，大量的葡萄糖吸收到人體內(nèi)，此時(shí)A．胰島素和胰高血糖素分泌都增多 B．胰島素分泌減少胰高血糖素分泌增多C．胰島素和胰高血糖素分泌都減少 D．胰島素分泌增多和胰高血糖素分泌減少8．（10分）光合作用的過程可分為光反應(yīng)和暗反應(yīng)兩個(gè)階段，下列說法正確的是（）A．葉綠體的類囊體膜上進(jìn)行光反應(yīng)和暗反應(yīng)B．葉綠體的類囊體膜上進(jìn)行暗反應(yīng)，不進(jìn)行光反應(yīng)C．葉綠體基質(zhì)中進(jìn)行暗反應(yīng)，不進(jìn)行光反應(yīng)D．葉綠體基質(zhì)中可進(jìn)行光反應(yīng)和暗反應(yīng)二、非選擇題9．（10分）金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白。某研究小組計(jì)劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增獲得目的基因，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌，用于重金屬廢水的凈化處理。PCR擴(kuò)增過程示意圖圖像，請(qǐng)回答下列問題：（1）從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA，通過______________獲得cDNA用于PCR擴(kuò)增。（2）設(shè)計(jì)一對(duì)與MT基因兩端序列互補(bǔ)配對(duì)的引物（引物1和引物2），為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，在引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn)。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成______________，而造成引物自連。（3）圖中步驟1代表____________________，步驟2代表退火，步驟3代表延伸，這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。（4）PCR擴(kuò)增時(shí)，退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過高會(huì)破______________的堿基配對(duì)。退火溫度的設(shè)定與引物長(zhǎng)度、堿基組成有關(guān)，長(zhǎng)度相同但______________的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。（5）如果PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，則可以采取的改進(jìn)措施有______________（填序號(hào)：①升高退火溫度②降低退火溫度③重新設(shè)計(jì)引物）。10．（14分）Ⅰ農(nóng)家樂是新興的旅游休閑形式。某大型農(nóng)家樂內(nèi)有果樹種植園、魚塘、牧場(chǎng)等休閑區(qū)。圖1是果樹種植園進(jìn)行改造前后的昆蟲變化調(diào)查圖，圖2是池塘區(qū)的生物群落圖解。請(qǐng)回答：（1）果樹種植園中調(diào)查各類昆蟲的種群密度能否都用樣方法？為什么？_______。（2）據(jù)圖1分析，復(fù)合種植園中害蟲明顯減少，原因是_____的比例增加，通過種間關(guān)系消滅害蟲。害蟲的增長(zhǎng)受到抑制，這是生物群落內(nèi)部_____的結(jié)果。（3）果樹種植園的柑橘可以較多地吸收SO2又可食用，由此體現(xiàn)了生物多樣性的_____價(jià)值。（4）牧場(chǎng)區(qū)的雞糞是優(yōu)良的魚類飼料，適量的投入魚塘可以提高魚的產(chǎn)量，這是_____營養(yǎng)級(jí)的能量流向了魚體內(nèi)。Ⅱ下表是圖2池塘生態(tài)系統(tǒng)中草魚的能量流動(dòng)情況：（5）由此表數(shù)據(jù)可知，草魚同化的能量為_____。（6）實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，放養(yǎng)的草食性魚高強(qiáng)度的攝食使水草量急劇下降，最終會(huì)導(dǎo)致草型池塘變?yōu)樵逍统靥粒@個(gè)過程屬于群落的_____。（7）為了幫助人們合理地調(diào)節(jié)生態(tài)系統(tǒng)中_____關(guān)系，使能量_____流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠?，這是我們要研究能量流動(dòng)的意義之一。11．（14分）某校課外興趣小組對(duì)某種品牌的酸奶中乳酸菌的數(shù)量進(jìn)行了測(cè)定。取6支滅菌的試管，分別加入9mL滅菌的生理鹽水，編號(hào)為B1、B2、B3、B4、B5、B6；吸取1mL酸奶樣液加入試管B1中，混合均勻；然后另取一支吸管從B1中吸取1mL溶液，加入B2中，依次類推，最后從試管B6中取0.1mL樣液進(jìn)行涂布計(jì)數(shù)，涂布三個(gè)平板，其菌落數(shù)分別為251、265、276個(gè)。請(qǐng)回答下列問題：（1）乳酸是乳酸菌___________呼吸的產(chǎn)物，進(jìn)行的場(chǎng)所是：______________________。（2）制備乳酸菌的培養(yǎng)基過程中，對(duì)培養(yǎng)皿滅菌的常用方法是___________。平板冷凝后，倒置的目的是___________。（3）該興趣小組對(duì)乳酸菌接種所采用的方法是___________。根據(jù)三個(gè)平板中的菌落數(shù)，可推測(cè)原酸奶中乳酸菌的濃度為___________個(gè)/mL，該方法測(cè)定的乳酸菌的含量和實(shí)際值相比，一般___________（填“偏大”或“偏小”）。（4）為了使測(cè)量結(jié)果更加準(zhǔn)確，對(duì)照組的設(shè)置是___________。12．2017年11月27日，世界上首例用體細(xì)胞克隆的靈長(zhǎng)類動(dòng)物--猴在中國科學(xué)院神經(jīng)研究所誕生?？寺『锬Ｐ蛯檠芯咳说哪X疾病、免疫缺陷、腫瘤和代謝紊亂等的新療法和藥物開發(fā)方面提供有效工具。請(qǐng)回答下列問題：（1）用體細(xì)胞克隆動(dòng)物是通過核移植來實(shí)現(xiàn)的，哺乳動(dòng)物核移植包括體細(xì)胞核移植和___________，前者核移植的難度明顯髙于后者，原因是_______________________。（2）體細(xì)胞核移植的過程中，需要將采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到________________期時(shí)，用微型吸管將___________吸出。再通過電刺激使兩細(xì)胞融合，以構(gòu)建重組胚胎。為使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致，需要對(duì)供、受體母猴用激素進(jìn)行___________處理。（3）為提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技術(shù),操作時(shí)一般選用發(fā)育至___________期的胚胎進(jìn)行分割。分割后的胚胎經(jīng)培養(yǎng)、移植后能發(fā)育成多個(gè)新個(gè)體，這是因?yàn)閮?nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞在發(fā)育上具有___________。

參考答案（含答案詳細(xì)解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【答案解析】

生命系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)層次包括：細(xì)胞——組織——器官——系統(tǒng)——個(gè)體——種群——群落——生態(tài)系統(tǒng)——生物圈?！绢}目詳解】A.西瓜的種子屬于器官層次，A錯(cuò)誤。B.蛔蟲是多細(xì)胞生物，不屬于細(xì)胞層次，B錯(cuò)誤。C.生態(tài)系統(tǒng)有生物群落和無機(jī)環(huán)境組成，故生物的生活環(huán)境也屬于生命系統(tǒng)的一部分，C正確。D.一片森林中的所有生物才構(gòu)成群落，并不只是動(dòng)物和植物，D錯(cuò)誤?！敬鸢更c(diǎn)睛】注意：?jiǎn)渭?xì)胞生物既是個(gè)體層次，又是細(xì)胞層次，沒有組織、器官和系統(tǒng)等層次；植物沒有系統(tǒng)層次。2、A【答案解析】哺乳動(dòng)物成熟細(xì)胞中不含DNA，則為成熟紅細(xì)胞，無細(xì)胞核和成套的細(xì)胞器，所以只能進(jìn)行無氧呼吸，所以對(duì)鉀離子吸收與氧氣濃度無關(guān)。3、D【答案解析】

基因頻率是指種群基因庫中，某基因占該基因及其等位基因的比例，由于色盲是X染色體隱性遺傳，Y染色體上沒有色盲基因及其等位基因，因此色盲基因的基因頻率是色盲基因數(shù)目÷（女性人數(shù)×2+男性人數(shù)）×100%?！绢}目詳解】由題意知，該工廠中的色盲基因數(shù)是18+6×2+12=36，群體中色盲基因的基因頻率是36÷（200×2+200）×100%=7%。故選：D?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題旨在考查學(xué)生對(duì)基因頻率概念及計(jì)算方法的理解和掌握。4、D【答案解析】

試管嬰兒是采用體外受精、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)形成的，屬于有性生殖，該過程能夠發(fā)生基因重組，也可能發(fā)生變異，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性；試管苗是采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成的，屬于無性生殖，能保持母本性狀，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，該過程沒有發(fā)生基因重組，但可能發(fā)生變異；克隆羊是采用核移植、胚胎移植等技術(shù)形成的，屬于無性生殖，體現(xiàn)了動(dòng)物體細(xì)胞核的全能性，該過程沒有發(fā)生基因重組，但可能發(fā)生變異?！绢}目詳解】（1）試管嬰兒是體外受精和胚胎移植后形成的，屬于有性生殖，（1）錯(cuò)誤；（2）試管嬰兒是有性生殖形成的，發(fā)生了基因重組，（2）錯(cuò)誤；（3）試管嬰兒、試管苗和克隆羊都利用了細(xì)胞工程的技術(shù)，（3）正確；（4）試管嬰兒是由受精卵發(fā)育來的，受精卵是沒有分化的細(xì)胞，（4）錯(cuò)誤；（5）試管嬰兒的培育依賴體外受精技術(shù)、胚胎體外培養(yǎng)、胚胎移植等相關(guān)技術(shù)，（5）正確；故正確的有（3）（5），D正確。5、D【答案解析】

A、用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，產(chǎn)生相同的黏性末端，用DNA連接酶連接時(shí)可能會(huì)發(fā)生反向連接，故A項(xiàng)錯(cuò)誤；B、用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因會(huì)產(chǎn)生兩種DNA片段，一種含有目的基因，一種不含目的基因（該片段相當(dāng)于只用EcoRⅠ切割），故B項(xiàng)錯(cuò)誤；C、用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，也能產(chǎn)生相同的黏性末端，可能會(huì)發(fā)生反向連接，故C項(xiàng)錯(cuò)誤；D、只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，才能產(chǎn)生不同的黏性末端，防止發(fā)生反向連接，這樣目的基因插入運(yùn)載體后，RNA聚合酶的移動(dòng)方向肯定與圖丙相同，故D項(xiàng)正確。故選D。【答案點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是要看準(zhǔn)切割后目的基因插入的方向，只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，構(gòu)建的重組DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移動(dòng)方向才一定與圖丙相同。6、B【答案解析】

分析圖形，植物在清水中葉片中氣孔是開放的，而在質(zhì)量濃度為0.3g/mL的蔗糖溶液中氣孔是關(guān)閉的。氣孔是植物吸收二氧化碳的結(jié)構(gòu)，氣孔的開與關(guān)將直接影響到植物的光合作用。質(zhì)壁分離的原因分析：外因：外界溶液濃度＞細(xì)胞液濃度；內(nèi)因：原生質(zhì)層相當(dāng)于一層半透膜，細(xì)胞壁的伸縮性小于原生質(zhì)層；表現(xiàn)：液泡由大變小，細(xì)胞液顏色由淺變深，原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離?！绢}目詳解】由圖可以看出，清水中的保衛(wèi)細(xì)胞吸水后，保衛(wèi)細(xì)胞膨脹，使氣孔開放，并不是清水促進(jìn)代謝增強(qiáng)使氣孔開放，A錯(cuò)誤；0.3g/mL蔗糖溶液濃度大于細(xì)胞液，保衛(wèi)細(xì)胞因失水而形態(tài)發(fā)生改變,從而導(dǎo)致氣孔關(guān)閉，B正確；葉片在清水中由于氣孔開放而導(dǎo)致蒸騰作用增強(qiáng)，C錯(cuò)誤；由于細(xì)胞膜具有選擇透過性，蔗糖分子不能進(jìn)入細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選B?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題以信息的形式考查細(xì)胞的吸水與失水，意在考查考生提取信息處理信息的能力。7、D【答案解析】

胰島素和胰高血糖素在血糖調(diào)節(jié)時(shí)起拮抗作用?！绢}目詳解】飯后,大量的葡萄糖吸收到人體內(nèi),使血糖含量升高,胰島素是唯一降低血糖的激素,胰島素的含量會(huì)升高使血糖濃度下降,維持血糖平衡;而在胰島素分泌增加的同時(shí)會(huì)抑制胰高血糖素的分泌,因此胰島素分泌增多和胰高血糖素分泌減少,故選:D8、C【答案解析】

試題分析：光反應(yīng)是在葉綠體內(nèi)囊狀結(jié)構(gòu)的薄膜上進(jìn)行的，該過程必須在有光的條件下才能進(jìn)行；暗反應(yīng)是在葉綠體內(nèi)的基質(zhì)中進(jìn)行的，該過程有光無光均可，故選C?！敬鸢更c(diǎn)睛】屬于基礎(chǔ)題，較簡(jiǎn)單，教師可通過兩個(gè)階段的比較突破重點(diǎn)知識(shí)。二、非選擇題9、逆轉(zhuǎn)錄堿基互補(bǔ)配對(duì)變性引物與模板GC含量高②③【答案解析】

PCR技術(shù)：

1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2、原理：DNA復(fù)制。

3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。

4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈；PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開?！绢}目詳解】（1）PCR擴(kuò)增目的基因，首先要有目的基因作為模板，所以從高表達(dá)MT

蛋白的生物組織中提取mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，從而用于PCR擴(kuò)增。（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒，首先要用限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，所以位于目的基因兩端的引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn)，設(shè)計(jì)的引物之間不能有堿基互補(bǔ)配對(duì)，否則引物自連，而不能與模板相連。

（3）圖中步驟1、2、3分別代表變性、退火、延伸，這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。

（4）退火表示引物與模板相連，若退火溫度過高會(huì)破壞引物與模板的堿基配對(duì)；由于G-C之間有三個(gè)氫鍵，A-T之間有兩個(gè)氫鍵，所以G-C含量越高的引物，退火溫度越高。

（5）PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，可能是退火溫度過高，導(dǎo)致引物與模板不能相連或引物間相互配對(duì)，引物自連，不能與模板相連，因此，可通過②降低退火溫度或③重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行改進(jìn)?！敬鸢更c(diǎn)睛】易錯(cuò)點(diǎn)：PCR技術(shù)的核心部分就是Taq酶，這種酶可以忍耐較高的溫度而不至于在高溫變性過程中失活而無法發(fā)揮作用；PCR技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。10、不能；因?yàn)橛行├ハx活動(dòng)能力強(qiáng)、活動(dòng)范圍廣肉食性和寄生性昆蟲負(fù)反饋調(diào)節(jié)間接和直接第一（或“第1”）146J/(cm1·a)次生演替（或演替）能量流動(dòng)持續(xù)高效【答案解析】

調(diào)查種群密度常用的方法有樣方法和標(biāo)志重捕法，樣方法常用于調(diào)查植物種群密度，昆蟲卵的密度，蚜蟲、跳蝻的密度等；標(biāo)志重捕法常用于活動(dòng)能力強(qiáng)和范圍大的動(dòng)物，如哺乳類、鳥類、爬行類、兩棲類、魚類和昆蟲等動(dòng)物。據(jù)圖1分析，復(fù)合種植園中植食性害蟲比例明顯減少，肉食性和寄生性昆蟲的比例增加，腐生性昆蟲比例也上升。吐中，同化的能量=攝入食物中所含的能量-糞便中的能量=用于生長(zhǎng)發(fā)育繁殖的能量+呼吸作用散失的能量。【題目詳解】（1）果樹種植園中調(diào)查各類昆蟲的種群密度不能都用樣方法，因?yàn)橛行├ハx活動(dòng)能力強(qiáng)、活動(dòng)范圍廣，不適合用樣方法。（1）據(jù)圖1分析，復(fù)合種植園中害蟲明顯減少，原因是肉食性和寄生性昆蟲的比例增加，通過種間關(guān)系消滅害蟲；害蟲的增長(zhǎng)受到抑制，這是生物群落內(nèi)部負(fù)反饋調(diào)節(jié)的結(jié)果。（3）果樹種植園的柑橘可以較多地吸收SO1體現(xiàn)了生物多樣性的間接價(jià)值，其可食用體現(xiàn)了生物多樣性的直接價(jià)值。（4）動(dòng)物糞便中的能量屬于上一營養(yǎng)級(jí)的能量，所以牧場(chǎng)區(qū)的雞糞適量的投入魚塘，這是第一營養(yǎng)級(jí)的能量流向了魚體內(nèi)。（5）根據(jù)題意分析，草魚同化的能量=攝入食物中所含的能量-糞便中的能量=516-170=146KJ（cm1．a(chǎn)）。（6）草型池塘變?yōu)樵逍统靥?，這個(gè)過程屬于群落的次生演替。（7）研究能量流動(dòng)的意義是幫助人們合理地調(diào)節(jié)生態(tài)系統(tǒng)中能量流動(dòng)關(guān)系，使能量持續(xù)高效流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠帧！敬鸢更c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是了解生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)的過程和特點(diǎn)，弄清楚幾種能量之間的關(guān)系，能夠根據(jù)公式和表格數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)的計(jì)算。11、無氧細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)干熱滅菌法既可以防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)稀釋涂布平板法2.64×109偏小另增設(shè)一組培養(yǎng)基，接種等量無菌生理鹽水，其他操作均相同【答案解析】試題分析：制備培養(yǎng)基過程中，對(duì)培養(yǎng)皿滅菌的常用方法是干熱滅菌法，對(duì)培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。倒平板時(shí)，溫度太低會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基凝固，無法鋪展均勻，溫度太高，可能會(huì)燙傷手指等，因此倒平板時(shí)培養(yǎng)基的溫度不能太低也不能太高；待平板冷凝后，要將平板倒置，其目的是防止平板冷凝后，培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染，同時(shí)又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)。分離微生物常用的方法:平板劃線法和稀釋涂布平板法，但要對(duì)微生物分離后再計(jì)數(shù),則只能采用稀釋涂布平板法。(1)乳酸是乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸的產(chǎn)物，無氧呼吸的場(chǎng)所是乳酸菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。(2)制備培養(yǎng)基過程中，對(duì)培養(yǎng)皿滅菌的常用方法是干熱滅菌法，對(duì)培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。平板冷凝后將平板倒置的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染，同時(shí)又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)。(3)取6支滅菌的試管，分別加入9mL滅菌的生理鹽水，標(biāo)號(hào)B1、B2、B3、B4、B5、B6，吸取1mL酸奶樣液中加入試管B1中，然后另取一支吸管從B2中吸取1mL溶液，加入B2中，依此類推，最后從試管B6中取0.1mL樣液進(jìn)行涂布計(jì)數(shù)，這種接種方法是稀釋涂布法。根據(jù)操作步驟可推知，得到101、102、103、104、105、106倍的稀釋液。從試管B6中取0.1mL樣液進(jìn)行涂布計(jì)數(shù)，三個(gè)平板中菌落數(shù)分別為251、265、276個(gè),可推測(cè)原酸奶中乳酸菌的濃度為(251+265+276)÷3×10×106=2.64×109個(gè)/mL。稀釋涂布平板法測(cè)定活菌數(shù)目時(shí)，因?yàn)橄噜彽募?xì)