不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠主動(dòng)脈順應(yīng)性的影響

不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠主動(dòng)脈順應(yīng)性的影響作者：呂昊文，夏瑩蘋(píng)，張曼，等來(lái)源：《衛(wèi)生職業(yè)教育》2017年第23期摘要：目的探討不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠動(dòng)脈血管收縮反應(yīng)及血清抗氧化水平的影響。方法雄性SD大鼠32只，按照心理應(yīng)激方案進(jìn)行心理干預(yù)，建立慢性復(fù)合性心理應(yīng)激模型。適應(yīng)性游泳一周后按不同運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度隨機(jī)分為4組，即應(yīng)激對(duì)照組、力竭運(yùn)動(dòng)組、中量運(yùn)動(dòng)組、小量運(yùn)動(dòng)組。除應(yīng)激對(duì)照組大鼠正常飼養(yǎng)外，其他3組大鼠進(jìn)行游泳運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，4周后測(cè)定大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)對(duì)去甲腎上腺素（NA）的反應(yīng)性，檢測(cè)血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的變化。結(jié)果（1）4組大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)的收縮反應(yīng)對(duì)NA均呈濃度依賴性增高。與應(yīng)激對(duì)照組相比，力竭運(yùn)動(dòng)組和小量運(yùn)動(dòng)組大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)收縮反應(yīng)增強(qiáng)（P<0.05），中量運(yùn)動(dòng)組大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)收縮反應(yīng)減弱（PV0.05），小量運(yùn)動(dòng)組大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)順應(yīng)性較力竭運(yùn)動(dòng)組弱（P<0.05）°（2）與應(yīng)激對(duì)照組相比，力竭運(yùn)動(dòng)組大鼠SOD活性低、MDA含量高（P<0.05），中量運(yùn)動(dòng)組大鼠SOD活性高、MDA含量低（P<0.05），小量運(yùn)動(dòng)組SOD活性和MDA含量無(wú)顯著性差異（P>0.05）。結(jié)論中量運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度具有改善慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠血管順應(yīng)性以及調(diào)節(jié)血清抗氧化水平的作用，可通過(guò)改善動(dòng)脈血管的功能和控制動(dòng)脈粥樣硬化（AS）危險(xiǎn)因素起到防治AS的作用。力竭運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度會(huì)使慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠主動(dòng)脈的收縮反應(yīng)增強(qiáng)，抗氧化酶活力降低，并不能控制AS危險(xiǎn)因素，反而加劇了AS的發(fā)展進(jìn)程。小量運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度會(huì)使慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠主動(dòng)脈的收縮反應(yīng)增強(qiáng)，但對(duì)血液氧化與抗氧化水平的調(diào)控作用并不明顯，不能起到防治AS的作用。關(guān)鍵詞：慢性復(fù)合性心理應(yīng)激；運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度；血管順應(yīng)性中圖分類號(hào)：G424.31文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1671-1246（2017）23-0076-03心理應(yīng)激因素在心血管病的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，可促使機(jī)體釋放大量應(yīng)激激素引起血流動(dòng)力學(xué)改變、血管內(nèi)皮損傷、血管免疫炎性反應(yīng)，從而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化（AS）發(fā)生、發(fā)展。當(dāng)機(jī)體處于慢性心理應(yīng)激狀態(tài)下，組織、細(xì)胞內(nèi)活性氧族（ROS）生成增加和（或）清除能力降低，引起體內(nèi)、細(xì)胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生與抗氧化之間失衡，導(dǎo)致氧自由基及其相關(guān)代謝產(chǎn)物過(guò)量聚集，損害血管內(nèi)皮，促使炎性細(xì)胞聚集于內(nèi)膜下，導(dǎo)致AS斑塊不斷發(fā)展［1］。本研究通過(guò)建立慢性復(fù)合性心理應(yīng)激動(dòng)物模型，測(cè)定不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠血管順應(yīng)性的影響，從動(dòng)脈血管收縮反應(yīng)的變化討論不同運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠主動(dòng)脈血管彈性的影響；從血清抗氧化水平變化分析不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠血清氧化與抗氧化平衡的調(diào)控作用。探討慢性復(fù)合性心理應(yīng)激對(duì)機(jī)體的影響，為防治心身疾病、改變亞健康狀態(tài)提供思路和理論依據(jù)。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組清潔級(jí)健康雄性SD大鼠32只，體重180?210g（由寧夏醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供），隨機(jī)分為4組，即A（應(yīng)激對(duì)照組）、B（力竭運(yùn)動(dòng)組）、C（中量運(yùn)動(dòng)組）、D（小量運(yùn)動(dòng)組）組，每組8只，分籠飼養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，飼養(yǎng)期間通風(fēng)良好，自然光照，自由進(jìn)食水。1.2建立模型按照改進(jìn)后的IpekYalcin等［2］提出的心理應(yīng)激方案對(duì)4組大鼠進(jìn)行心理干預(yù)，模擬人類抑郁、憤怒、焦慮等多重情緒體驗(yàn)，具體方案為：(1)禁食12h；(2)禁水12h；(3)10°C冷水游泳6min；(4)尾根1cm處夾尾1min；(5)潮濕飼養(yǎng)12h；(6)110dB噪音刺激1h；(7)高速水平振蕩45min；(8)晝夜顛倒；(9)傾斜飼養(yǎng)(無(wú)鋸末的小鼠籠子傾斜45度)12h；(10)束縛12h。以上應(yīng)激方式每天隨機(jī)使用1?2種，使動(dòng)物不能預(yù)料刺激的發(fā)生，連續(xù)刺激30天。1.3運(yùn)動(dòng)干預(yù)方法大鼠游泳池的規(guī)格為直徑60cm的塑料大桶，水深55cm，水溫(32±1)C。運(yùn)動(dòng)干預(yù)前，對(duì)B組、C組、D組大鼠先進(jìn)行一周適應(yīng)性游泳訓(xùn)練(1次/天)，隨機(jī)選取兩只大鼠負(fù)重自身體重的4%，以大鼠所能承受的最長(zhǎng)游泳時(shí)間即力竭時(shí)間為標(biāo)準(zhǔn)，來(lái)劃分運(yùn)動(dòng)量的大小。力竭時(shí)間：游泳動(dòng)作明顯失調(diào)，不能堅(jiān)持，沉入水底5s不能回到水面的時(shí)間［3］。B組的運(yùn)動(dòng)干預(yù)時(shí)間為力竭時(shí)間，C組和D組的運(yùn)動(dòng)干預(yù)時(shí)間是力竭時(shí)間的70%和40%［4］。各運(yùn)動(dòng)干預(yù)組大鼠按劃定運(yùn)動(dòng)量進(jìn)行游泳運(yùn)動(dòng)，1次/天，5天/周，共4周。A組大鼠正常飼養(yǎng)。1.4實(shí)驗(yàn)方法1.4.1樣本制備4周后，大鼠休息24h，禁食24h，以20%烏拉坦(0.5ml/kg)進(jìn)行腹腔麻醉，心臟取血，分離血清，保存在-80C冰箱待測(cè)；迅速取出心臟，用生理鹽水洗掉殘余血液，濾紙吸干，按W(g)：V(ml)=1：9生理鹽水制成10%組織勻漿液。根據(jù)所測(cè)指標(biāo)要求離心后取上清液，放-80C冰箱保存。1.4.2動(dòng)脈血管順應(yīng)性測(cè)定［5］取大鼠胸主動(dòng)脈血管，剔除血管周圍結(jié)締組織，剪成3mm寬的血管環(huán)。將胸主動(dòng)脈血管環(huán)懸掛于預(yù)置10mlPSS緩沖液的離體器官組織浴槽內(nèi)，37C恒溫，持續(xù)通以95%02和5%CO2的混合氣體。將血管環(huán)靜息張力調(diào)到1g，期間每15min更換一次PSS緩沖液，平衡1h，待血管環(huán)張力穩(wěn)定后，加入60mmolKCl重復(fù)刺激兩次，以誘發(fā)最大收縮張力。中間更換PSS緩沖液恢復(fù)至基礎(chǔ)張力后，平衡30min開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。向浴槽中加入去甲腎上腺素(NA)，使其終濃度依次為10-10?10-5M。以KCl誘發(fā)的血管環(huán)最大收縮幅度為100%，以加入NA后的血管環(huán)張力幅度與其KCl平均值比率反映血管張力變化。1.4.3指標(biāo)測(cè)定血清超氧化物歧化酶(S0D)測(cè)定采用黃嘌吟氧化酶法，丙二醛(MDA)測(cè)定采用硫代巴比妥酸法。試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(x土s)表示，兩樣本均數(shù)間比較采用Student’st檢驗(yàn)，多樣本均數(shù)間比較采用單因素方差分析(one-wayANOVA)。P<0.05表示差異有顯著性。2結(jié)果2.1力竭運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠血管順應(yīng)性的影響(見(jiàn)圖1)4組大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)的收縮反應(yīng)對(duì)NA均呈濃度依賴性增高。與應(yīng)激對(duì)照組相比，力竭運(yùn)動(dòng)組和小量運(yùn)動(dòng)組大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)收縮反應(yīng)性升高（PV0.05），中量運(yùn)動(dòng)組大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)收縮反應(yīng)性降低（PV0.05），其中小量運(yùn)動(dòng)組大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)反應(yīng)性低于力竭運(yùn)動(dòng)組（PV0.05）。2.2力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠血清抗氧化水平的影響（見(jiàn)圖2、3）與應(yīng)激對(duì)照組相比，中量運(yùn)動(dòng)組大鼠血清SOD活性高、MDA含量低（PV0.05），力竭運(yùn)動(dòng)組大鼠血清SOD活性低、MDA含量高（PV0.05），小量運(yùn)動(dòng)組SOD活性和MDA含量無(wú)顯著性差異（P>0.05）。3討論大量研究證實(shí)，心理應(yīng)激在心身疾病和亞健康發(fā)展過(guò)程中起重要作用，而運(yùn)動(dòng)作為一種疾病預(yù)防手段越來(lái)越受到人們的關(guān)注。關(guān)于運(yùn)動(dòng)防治動(dòng)脈粥樣硬化的早期研究顯示，有氧運(yùn)動(dòng)通過(guò)改善血脂代謝和控制動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素而起到防治動(dòng)脈粥樣硬化的作用及潛在的抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。SOD對(duì)機(jī)體的氧化和抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用，能清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷。血清MDA含量反映體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，間接反映細(xì)胞損傷程度。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):與應(yīng)激對(duì)照組相比，力竭運(yùn)動(dòng)組大鼠血清MDA含量升高，而SOD活性下降，表明力竭運(yùn)動(dòng)會(huì)使慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠內(nèi)源性氧自由基脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)，降低抗氧化酶活力；中量運(yùn)動(dòng)組大鼠血清MDA含量下降，SOD活性升高，提示中量運(yùn)動(dòng)可提高慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠的抗氧化酶活力，減輕脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，中量運(yùn)動(dòng)可通過(guò)其抗氧化作用減輕慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠的氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而改善動(dòng)脈血管功能，提高血管順應(yīng)性。力竭運(yùn)動(dòng)使慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠的抗氧化酶活力及血管順應(yīng)性降低。小量運(yùn)動(dòng)對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠血液氧化與抗氧化水平的調(diào)控作用并不明顯。有研究顯示，長(zhǎng)期生活在應(yīng)激狀態(tài)下可使機(jī)體出現(xiàn)持續(xù)的焦慮、抑郁，這些負(fù)性情緒使神經(jīng)內(nèi)分泌功能紊亂、免疫功能下降，對(duì)心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后產(chǎn)生很大影響[6]。長(zhǎng)期處于慢性復(fù)合性心理應(yīng)激狀態(tài)會(huì)出現(xiàn)主動(dòng)脈損傷。血管順應(yīng)性增高是指血管功能發(fā)生的急性改變，是心血管疾病發(fā)生發(fā)展的重要機(jī)制。血管順應(yīng)性是判斷動(dòng)脈健康狀況的一項(xiàng)指標(biāo)。主動(dòng)脈功能損傷主要表現(xiàn)為血管收縮功能增強(qiáng)和舒張功能減弱。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與應(yīng)激對(duì)照組相比，力竭運(yùn)動(dòng)組和小量運(yùn)動(dòng)組大鼠胸主動(dòng)脈收縮反應(yīng)增強(qiáng)，中量運(yùn)動(dòng)組大鼠胸主動(dòng)脈收縮反應(yīng)減弱，其中，小量運(yùn)動(dòng)組大鼠胸主動(dòng)脈血管順應(yīng)性低于力竭運(yùn)動(dòng)組，表明中量運(yùn)動(dòng)在一定程度上能夠改善慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠的動(dòng)脈血管功能，力竭運(yùn)動(dòng)和小量運(yùn)動(dòng)均會(huì)加劇慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠血管的損傷程度。與小量運(yùn)動(dòng)相比，力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠血管的損傷更嚴(yán)重。綜上所述，中量運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度具有改善慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠血管順應(yīng)性以及調(diào)節(jié)血清抗氧化水平的作用，可通過(guò)改善動(dòng)脈血管功能、控制AS危險(xiǎn)因素起到防治AS的作用。力竭運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度會(huì)使慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠主動(dòng)脈的收縮反應(yīng)增強(qiáng)，抗氧化酶活力降低，加劇血管損傷，且不能控制AS危險(xiǎn)因素，反而加劇了AS的發(fā)展進(jìn)程。小量運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度會(huì)使慢性復(fù)合性心理應(yīng)激下大鼠主動(dòng)脈的收縮反應(yīng)增強(qiáng)，造成血管損傷，對(duì)血液氧化與抗氧化水平的調(diào)控作用并不明顯，不能對(duì)AS起到防治作用。參考文獻(xiàn)：GuHF，TangYZ.Psychologicalstress，immuneresponseandatherosc-lerosis[J].Atherosclerosis，2012，223（1）：69-77.IpekYalcin，F(xiàn)aziletAksu，CatherineBelzung.Effectsofdesipramineandtramadolinachronicmildstressmodeinmiceareteredbyyonhimbinbutnotpindolol[J].EuropeanJournalofPharmacology，2005，14（2-3）：165-174.[3]王長(zhǎng)青，郝曉東，劉麗萍，等.游泳訓(xùn)練后大鼠骨骼肌細(xì)胞自由基代謝、線粒體膜電位變化與細(xì)胞凋亡的關(guān)系[J].中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志，2002，21（3）：256-260.FabianoFernandesdasilva，RentoAparecidodeSouza，MarcosTadeuTavaresPacheco.EffectsOfdifferentSwimmingExerciseIntensititiesonBoneTissueCompositioninMice:APamanSpectroscopyStudy[J].PhotoraedicineandLasterSurgery，2010（1-9）：127-133.楊振，吳偉，劉法東，等.有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂肥胖大鼠胸主動(dòng)脈血管反應(yīng)性的影響[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015（5）：531