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Python下實現(xiàn)Fisher富集分析方法Fisher's精確概率方法利用超幾何分布的原理推斷每個基因集中的目標基因(ADR基因)的比例是否與整個基因組中目標基因(ADR基因)的比例相同。包括2個原假設:①基因是否目標基因(ADR基因);②基因是否屬于的功能基因集(如GOTerm),如表:ADR基因 非ADR基因 合計功能基因集 n n M1112非功能基因集n21n非功能基因集n21n22N-M合計N-K合計注示:N表示全基因組中基因總數(shù);M表示功能基因集中的基因個數(shù),K表示ADR基因數(shù)目.。Fisher's得分表示k個ADR基因中至少有x個被功能基因集注釋的概率:i=0例如我們要研究藥物相關基因和功能term之間的相關性,可以利用下面兩種情況Drug顯著基因非drug顯著基因合計功能基因集“11“12M非功能基因集“21“22N-M合計KN-KN(全基因組個數(shù))miRNA靶基因非miRNA靶基因 合計功能基因集 “I】 “I? M非功能基因集“21 “2 N—M合計N(所有miRNA靶K N-K 基因個數(shù))接下來我們介紹下如何通過Python語言利用FISHER精確檢驗實現(xiàn)功能富集分析。在Python語言中,F(xiàn)isher精確檢驗主要依賴于scipy.stats包以及numpy包,安裝和調用命令如下:FileQditFermatRunOptionsWindowsHelpfromfutureijaportdivisionfromscipy.statsijnportfisher^xact,hypergeom,binomimportnumpyslsnpfromrandomLmportshuffleimportoperatorimportrandom假設我們有一個待查基因集,命名為interest,我們想知道這個基因集和通路path之間的相關性,即這個interest基因集是否可以顯著富集到通路path中,通路path中包含基因個數(shù)為num_sp,另外還有一個背景基因集,即全部的基因個數(shù),命名為num_allgene。接下來就是如何計算四格表,pathnonpathinterestabnum_interestgenenoninterestcdnum_allgene-num_interestgenenum_spnum_allgene-num_sp這里a為待查基因集和通路基因集的交集,b為不在通路path的待查基因個數(shù),c為不屬于interest待查基因的通路基因個數(shù)。計算過程如下forspinallpath:nuin_sp=Len[sp]-1|(set(sp](genelist)]b=nwnint已t巳stgEn已一日c=nwn_sp-a盯二fLiirrim"I"Im門a—riitttimti—h巳二審h巳工巳梵日匸~tI[[曰f[<^詛]])a,b,c,d分別為四個表的四個得分值,紅圈內的函數(shù)即為利用四格表計算的顯著性得分。函數(shù)fisher_exact()返回的是一個列表,列表第二個值就是我們要的P值了。最后我們以P小于0.05作為顯著性閾值,通過下面命令進行篩選ifpvalue<0.05:print(sp[O]+'\t'+'pvalue')以上過程是對于一個通路path而言的,如果對于所有的KEGG通路,或者是GOterm,通過一個迭代循環(huán),就可以實現(xiàn)批處理的富集分析。最后一步就是FDR校正,由于經過對所有KEGG通路或GOterm進行富集分析,fisher精確檢驗會輸出一列P值,往往存在假陽性,因此需要經過FDR校正。這里采用的FDR校正方法為BH校正法。命令如下d.2tbh_<r>ipa_jcs(pvj:|ir_pv—[]:return['m=_enCpv}argsfpv二zip(*sozted(enumerat已(pv),Non已”operator.itemg已七t已r))ifpv[0]<Jorpv[一丄]>1:riizcVa_ucError("p-va_ue3mustbebetween0an.dL1'}qvril -ni* [0]mincoeff-pv>110已丄jes[ar^s[-1..=mincccztfc-rjin (nL-2T-1f-l):coeff- /]/float(j+l}/
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