CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測定儀使用說明課件

CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測定儀使用說明上海博納新技術(shù)研究所2006年2月CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測定儀使用說明上海博納新技術(shù)研究1農(nóng)殘常識1

有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑的特點(diǎn)。兩類農(nóng)藥的作用機(jī)理均為抑制動物體內(nèi)乙酰膽堿酯酶的活性，破壞神經(jīng)傳導(dǎo)，引起一系列的神經(jīng)中毒癥狀，直至死亡。二者的主要區(qū)別在于：有機(jī)磷類殺蟲、殺螨劑對乙酰膽堿酯酶的抑制是不可逆的，而氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑對乙酰膽堿酯酶的抑制是可逆的。農(nóng)殘常識1有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑的特2農(nóng)殘常識2

酶抑制率法和酶系酶源：國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》推薦的酶抑制率法能方便、快速、準(zhǔn)確、成本低廉檢測出農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留，也同時肯定了乙酰膽堿酯酶酶系作為快速檢測推薦試劑的活性量和具體要求。近年來，我們通過對動物源和植物源的多種丁酰膽堿酯酶、乙酰膽堿酯酶進(jìn)行檢測實(shí)驗(yàn)和比較研究，發(fā)現(xiàn)乙酰膽堿酯酶對農(nóng)藥的檢測敏感度和綜合指標(biāo)優(yōu)于丁酰膽堿酯酶；確定了有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酸有較專一性的抑制作用；分析出在抑制率70%以下，大多數(shù)農(nóng)藥濃度和乙酰膽堿酯酶抑制率呈較好的線性關(guān)系，并能實(shí)現(xiàn)對單種農(nóng)藥的定量分析；解決了酶的活性和穩(wěn)定性控制等技術(shù)農(nóng)殘常識2酶抑制率法和酶系酶源：國家標(biāo)準(zhǔn)GB3農(nóng)殘常識3

什么是間接比色法:由于只有當(dāng)?shù)孜锱c產(chǎn)物之間，在光學(xué)性質(zhì)或其它理化性質(zhì)有顯著差異時，才可能直接用分光光度計(jì)法測定，因此對酶活性濃度的監(jiān)測大多是采用間接監(jiān)測法。如對膽堿酯酶的測定：底物（硫代乙酰膽堿）及酶水解產(chǎn)物（硫代膽堿和乙酸）并不具有顏色，不能用分光光度計(jì)法測定。所以必須設(shè)法在原來反應(yīng)體系中添加一些試劑，這些試劑必須不與酶作用也不影響酶活性，同時又能與酶反應(yīng)物迅速作用，產(chǎn)生可以被直接測定的物質(zhì)。這就產(chǎn)生了Ellman的膽堿酯酶測定法即間接連續(xù)監(jiān)測法。目前國內(nèi)大多廠家生產(chǎn)的快速農(nóng)藥測定儀都采用了Ellman的膽堿酯酶測定法即間接比色法。該方法通過監(jiān)測底物（硫代乙酰膽堿），酶水解產(chǎn)物硫代膽堿與添加的二硫代硝基苯甲酸（DTNB）作用立刻生成黃色化合物的反應(yīng)速度來測定酶活性變化。農(nóng)殘常識3什么是間接比色法:由于只有當(dāng)?shù)孜锱c產(chǎn)物4農(nóng)殘常識4

什么是固定時間法:早期這類方法常被命名為“終點(diǎn)法”、“二點(diǎn)法”、“固定時間法”和“取樣法”。該方法先選擇一段固定的時間（固定為3分鐘），先讓酶與底物在一定溫度下進(jìn)行一段固定的時間（固定為3分鐘）的化學(xué)反應(yīng)，并根據(jù)呈色測出底物和產(chǎn)物的變化用比色法對反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行評定。由于“二點(diǎn)法”容易受到干擾，并產(chǎn)生誤差，使檢測穩(wěn)定性較低。農(nóng)殘常識4什么是固定時間法:早期這類方法常被命名為“5農(nóng)殘常識5

什么是連續(xù)監(jiān)測法：50年代，Warburg首先用分光光度計(jì)測定酶的活性。該方法不需停止酶反應(yīng)就可測定反應(yīng)物的變化，容易觀察到反應(yīng)的整個過程和干擾情況（通過繪制反應(yīng)曲線）。因此逐步取代了固定時間法成為目前測酶活性的主要方法。該方法是利用連續(xù)對反應(yīng)過程進(jìn)行高靈敏度檢測，并通過繪制整個酶反應(yīng)曲線避開延滯期和非線性反應(yīng)期，只在線性反應(yīng)期測定最大反應(yīng)初速度。由于儀器的高精密度，連續(xù)監(jiān)測法能在很短時間，甚至在1分鐘反應(yīng)時間內(nèi)就能準(zhǔn)確測定出活性的抑制率。農(nóng)殘常識5什么是連續(xù)監(jiān)測法：50年代，Warburg6技術(shù)指標(biāo)CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測定儀的技術(shù)指標(biāo)：?測量波長：410nm?通道數(shù)：4?檢測用樣品器皿：10mm比色皿?光電流漂移：<1%

(3min)?

暗電流漂移：<1%

(3min)?抑制率顯示范圍：0-100%

?

抑制率測量范圍：10-100%?

農(nóng)藥檢測：（用甲胺磷農(nóng)藥標(biāo)樣測試）?抑制率示值誤差：±10%?抑制率重復(fù)性誤差：5%技術(shù)指標(biāo)CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測定儀的技術(shù)指標(biāo)：7第一部分試劑配制第二部分聯(lián)機(jī)使用第三部分單機(jī)使用第四部分相關(guān)技巧與常識目錄第一部分試劑配制目錄8第一部分

試劑配制

第一部分

試劑配制91、試劑的配制提取液：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加

510ml蒸餾水溶解。酶試劑：用移液槍取3.1ml提取液，加入酶試劑瓶中。顯色劑：用移液槍取20ml提取液，加入顯色劑瓶，溶解后倒入棕色瓶中。底物：用移液槍取3.1ml蒸餾水，加入底物瓶中。1、試劑的配制提取液：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加

102、試劑的保存及注意事項(xiàng)返回目錄1、本試劑適用的國家標(biāo)準(zhǔn)為：GB/T5009.199-2003。2、未配制的試劑，要保存在0℃以下的冷凍箱里。

（保質(zhì)期可達(dá)1年）3、配制好的酶和底物試劑，要保存在4℃的冷藏箱內(nèi)。（保質(zhì)期為一周）4、配制好的提取液常溫下可以長期保存。5、配制好的顯色劑需避光保存；常溫或冷藏，可以

保存1年。2、試劑的保存及注意事項(xiàng)返回目錄1、本試劑適用的國家標(biāo)準(zhǔn)為：11第二部分

聯(lián)機(jī)使用

第二部分

聯(lián)機(jī)使用

12第一步儀器連接第一步儀器連接131、連接電源將儀器的電源接頭和數(shù)據(jù)信號線接好。如圖：1、連接電源將儀器的電源接頭和數(shù)據(jù)信號線接好。如圖：142、連接電腦把RS232/RS485的轉(zhuǎn)換器接入電腦主機(jī)背后的COM口（串口）上，然后把數(shù)據(jù)信號線與轉(zhuǎn)換器連接上，這樣就完成了儀器與電腦的硬件連接。2、連接電腦把RS232/RS485的轉(zhuǎn)換器接入電腦15第二步檢測操作第二步檢測操作16安裝“農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測軟件”把“農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測軟件”光盤放入電腦光驅(qū)中，等自動讀取或在光盤目錄下找到并雙擊“setup”后，按提示點(diǎn)擊“下一步”安裝。安裝完成以后，桌面上會出現(xiàn)“食品質(zhì)量安全檢測平臺”的圖標(biāo)。安裝完成桌面上出現(xiàn)的圖標(biāo)安裝“農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測軟件”把“農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測17儀器設(shè)置首先按儀器“設(shè)置”鍵，選擇為“受控”。然后再打開檢測軟件，檢測軟件的用戶名默認(rèn)為“管理員”，密碼是“111111”。這樣檢測軟件對檢測儀器進(jìn)行控制了。檢測軟件登陸儀器設(shè)置首先按儀器“設(shè)置”鍵，選擇為“受控”。然后再打開檢測18操作步驟整個的實(shí)驗(yàn)操作過程可以分為三個大部分：調(diào)0、調(diào)100空白對照樣品分析操作步驟整個的實(shí)驗(yàn)操作過程可以分為三個大部分：調(diào)0、調(diào)10019調(diào)0/100注：以上是一個檢測窗口的步驟，其他三個窗口都是如此。

等待10-15秒

按“確定”

放入黑塊

等待10-15秒

按“確定”

拿出黑塊

按“”鍵按“”鍵按“”鍵

按“”鍵調(diào)0/100注：以上是一個檢測窗口的步驟，其他三個窗口都是如20空白對照

用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入比色池

按“開始對照分析”鍵

等待對照結(jié)束

用大移液槍抽取2.5ml提取液放入試管中空白對照用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中用小移液槍21裝入對照

按“裝入對照分析”鍵選擇所需對照選擇需要裝入對照的通道號（在通道號碼前√）

按“讀取”鍵完成裝入工作

注：對照結(jié)束后，對照曲線會自動保存.（標(biāo)準(zhǔn)對照庫中已有30種蔬菜的對照，在做這30種蔬菜時，請參照這些對照。）

裝入對照按“裝入對照分析”鍵選擇所需對照選擇需要裝入對照的22裝入標(biāo)準(zhǔn)對照庫

按“裝入對照分析”鍵選擇所需的空白對照和相應(yīng)的樣品修正值選擇需要裝入對照的通道號（在通道號碼前√）

按“讀取”鍵完成裝入工作

裝入標(biāo)準(zhǔn)對照庫按“裝入對照分析”鍵選擇所需的空白對照和相應(yīng)23用天平稱取1克果蔬剪成2cm見方

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中

靜置15分鐘（或震蕩1分鐘）

用大移液槍從燒杯中抽取2.5ml浸泡液移至空試管中

用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中靜置15分鐘

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入比色池

按“開始樣品分析”鍵

等待檢測結(jié)果

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中靜置124第三步保存檢測結(jié)果第三步保存檢測結(jié)果25保存檢測結(jié)果樣品結(jié)束后，系統(tǒng)自動彈出“檢測結(jié)果”對話框

選擇該通道所測蔬菜名

填寫（選擇）檢測單位

按“退出”鍵

填寫（選擇）被檢單位和生產(chǎn)單位

按“保存”鍵，保存檢測結(jié)果保存檢測結(jié)果樣品結(jié)束后，系統(tǒng)自動彈出“檢測結(jié)果”對話框選擇26備注“統(tǒng)計(jì)分析”中的“農(nóng)殘檢測數(shù)據(jù)查詢統(tǒng)計(jì)”對話框有所有保存過的檢測數(shù)據(jù)，在該對話框中有“開始日期“、“結(jié)束日期”、“果蔬品種”、“被檢單位”等九項(xiàng)選項(xiàng)，對這些選項(xiàng)進(jìn)行組合選擇后，再按“查詢”鍵，就可以將您需要的信息從所有的數(shù)據(jù)中篩選出來。另外，“農(nóng)殘檢測數(shù)據(jù)查詢統(tǒng)計(jì)”對話框中還有“統(tǒng)計(jì)分析”和“轉(zhuǎn)存”等功能，當(dāng)選擇出需要的檢測數(shù)據(jù)后，就可以按“統(tǒng)計(jì)分析”鍵或者“轉(zhuǎn)存”鍵，對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析或制成相應(yīng)報(bào)表。如果需要打印單項(xiàng)檢測結(jié)果，則點(diǎn)選該結(jié)果后，按“打印當(dāng)前記錄”鍵，瀏覽打印效果，再按打印鍵后打印。返回目錄備注“統(tǒng)計(jì)分析”中的“農(nóng)殘檢測數(shù)據(jù)查詢統(tǒng)計(jì)”對話框27第三部分

單機(jī)使用第三部分

單機(jī)使用28第一步設(shè)置儀器第一步設(shè)置儀器291、連接電源將儀器電源連接好，（如需打印，則要將專用打印機(jī)連接到儀器的打印接口上。）如圖：

1、連接電源將儀器電源連接好，（如需打印，則要將專用打印機(jī)連302、儀器設(shè)置

打開儀器開關(guān)后，按提示進(jìn)入儀器操作主界面。按“設(shè)置”鍵進(jìn)入儀器設(shè)置功能，在“設(shè)置”里可以對“通道選擇”、“日期”、“打印方式”、“對照查詢”等進(jìn)行設(shè)置。設(shè)置完成后再按“設(shè)置”鍵退回到主界面。

通道選擇日期設(shè)置2、儀器設(shè)置打開儀器開關(guān)后，按提示進(jìn)入儀器操作主界面。按“31第二步檢測操作第二步檢測操作32操作步驟整個的操作步驟分為三個大步驟：調(diào)0、調(diào)100空白對照樣品分析操作步驟整個的操作步驟分為三個大步驟：調(diào)0、調(diào)100空白對照33調(diào)0/100

在主界面狀態(tài)下，按0/100鍵，根據(jù)屏幕提示逐一調(diào)1-4通道的0值，再調(diào)1-4通道的100值，最后按“確定”鍵結(jié)束。調(diào)0/100在主界面狀態(tài)下，按0/100鍵，根據(jù)屏幕提34空白對照注：對照的時間默認(rèn)為3分鐘，如需修改，則先要在“設(shè)置”中進(jìn)行設(shè)置。用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入第一通道的比色池

按“對照”鍵，并選擇“新建”

等待對照結(jié)束

用大移液槍抽取2.5ml提取液放入試管中空白對照注：對照的時間默認(rèn)為3分鐘，如需修改，則先要在“設(shè)置35用天平稱取1克果蔬剪成2cm見方

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中

靜置15分鐘

用大移液槍從燒杯中抽取2.5ml浸泡液移至空試管中

用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中靜置15分鐘

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入比色池

按“樣品”鍵

等待檢測結(jié)果

注：按“樣品”鍵后，四個通道同時進(jìn)行檢測。

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中靜置136第三步數(shù)據(jù)打印及退出

第三步數(shù)據(jù)打印及退出37數(shù)據(jù)打印及退出返回目錄按“打印”鍵

按“確定”鍵

用△/▽鍵選擇檢測數(shù)據(jù)的編號

按“打印”鍵進(jìn)行打印

按“確定”鍵退出打印狀態(tài)

數(shù)據(jù)打印及退出返回目錄按“打印”鍵按“確定”鍵用△/▽鍵38第四部分

相關(guān)技巧與常識第四部分

相關(guān)技巧與常識39常見問題及相關(guān)技巧11.儀器聯(lián)機(jī)操作的情況下，在檢測過程中或者開始檢測時，電腦出現(xiàn)“沒有檢測到指定的設(shè)備……”，是怎么回事？一般來說出現(xiàn)這種提示說明您的檢測儀與電腦硬件連接出現(xiàn)問題，檢查的步驟如下：第一步、確定檢測軟件的設(shè)備設(shè)置中相關(guān)設(shè)置與硬件連接相匹配；第二步、電腦串口通訊故障，檢測方法：重新啟動電腦，確認(rèn)是否故障依然存在，如果故障依然存在，檢查下一步；第三步、更換一下電腦串口，并在檢測軟件的設(shè)備設(shè)置中進(jìn)行相應(yīng)的改動，或者換一臺電腦，確認(rèn)故障是否存在，如果故障解決，則表明是電腦本身的問題，否則可進(jìn)行下一步檢查；第四步、更換RS232485轉(zhuǎn)換器，確認(rèn)問題是否存在,如果故障解決，則表明為RS232485轉(zhuǎn)換器連接不通。常見問題及相關(guān)技巧11.儀器聯(lián)機(jī)操作的情況下，在檢測過程中或40常見問題及相關(guān)技巧22.儀器聯(lián)機(jī)操作的情況下，調(diào)100時看不到紅線是怎么回事？首先我們要學(xué)會看圖譜，圖譜的橫坐標(biāo)為時間，縱坐標(biāo)為投射比，我們所所的調(diào)100準(zhǔn)確的所是指將投射比值調(diào)整為100％。圖譜在沒有拖拉的情況下，最高只能顯示到100，如果在調(diào)100的過程中，其投射比值大于100，那樣就看不到紅線了，但圖譜右邊的小白框中有數(shù)字顯示，你只要正常的調(diào)0/100就可以了。另外，對于小白框內(nèi)數(shù)字，顯示的是當(dāng)前的投射比值。在做對照或調(diào)0/100時，小白框內(nèi)的數(shù)字前有一短紅線，在做樣品時則為短綠線。大家不要把這個短線認(rèn)為是負(fù)號。常見問題及相關(guān)技巧22.儀器聯(lián)機(jī)操作的情況下，調(diào)100時看不41常見問題及相關(guān)技巧33.如何檢測儀器的重現(xiàn)性？做一空白對照后，做一個雙倍量的樣品，然后一分為二，先后或同時做檢測，即：取2克樣品，加10ml提取液浸泡，然后取5ml檢液，分別加0.2ml的酶、顯色劑，15分鐘后，如果直接加0.2ml底物，然后一分為二在兩個通道中同時做檢測，則是檢查不同通道的重現(xiàn)性；如果15分鐘后先將溶液一分為二，先后加入0.1ml底物做檢測，則是檢查同一通道的重現(xiàn)性。4.如何添加品種名稱？一般來說有兩種添加方法：A.可以在基礎(chǔ)數(shù)據(jù)維護(hù)中進(jìn)行添加。B.在檢測結(jié)果彈出是，通過進(jìn)行添加。另外，在添加時一定要按“增加”鍵，填好相關(guān)信息后按“保存”完成。常見問題及相關(guān)技巧33.如何檢測儀器的重現(xiàn)性？42常見問題及相關(guān)技巧45.如何升級檢測軟件？對于檢測軟件的升級有兩種方法：A.在線升級：打開檢測軟件并連接因特網(wǎng)，然后在幫助中選擇在線升級。B.本地升級：執(zhí)行新版檢測軟件的安裝程序，選擇“修復(fù)或升級”項(xiàng)，然后按照提示完成安裝即可。6.如何上傳數(shù)據(jù)？上傳數(shù)據(jù)有三個步驟：1）打開“設(shè)備”菜單中的“系統(tǒng)選項(xiàng)”，并將注冊ID號和ID密碼填寫好；2）打開“統(tǒng)計(jì)匯總”菜單中的“農(nóng)殘檢測數(shù)據(jù)查詢統(tǒng)計(jì)”，通過查詢項(xiàng)將需要上傳的數(shù)據(jù)查詢出來；3）按“上傳”鍵完成上傳數(shù)據(jù)的操作。常見問題及相關(guān)技巧45.如何升級檢測軟件？43常見問題及相關(guān)技巧5返回目錄7.檢測中需要注意哪些事項(xiàng)？A.蔬菜不能剪切的太小，一般以2cm見方為好；B.對于顏色深的蔬菜盡量取莖、葉各一半為好；C.對于果品，可以順皮削下一塊或取皮下部分；D.對于有味蔬菜可以使用檢測軟件的對照標(biāo)樣庫來檢測；E.對于有雜質(zhì)或沉淀物及較渾濁的檢液可以采用雙倍取樣，過濾后再檢測；F.移液槍的槍頭不能互相污染；G.在移液槍將試劑加入檢液時，一定要保證槍頭垂直于液面，不能將試劑加到試管壁上。常見問題及相關(guān)技巧5返回目錄7.檢測中需要注意哪些事項(xiàng)？44上海博納新技術(shù)研究所2006年2月謝謝觀看！上海博納新技術(shù)研究所謝謝觀看！45CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測定儀使用說明上海博納新技術(shù)研究所2006年2月CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測定儀使用說明上海博納新技術(shù)研究46農(nóng)殘常識1

有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑的特點(diǎn)。兩類農(nóng)藥的作用機(jī)理均為抑制動物體內(nèi)乙酰膽堿酯酶的活性，破壞神經(jīng)傳導(dǎo)，引起一系列的神經(jīng)中毒癥狀，直至死亡。二者的主要區(qū)別在于：有機(jī)磷類殺蟲、殺螨劑對乙酰膽堿酯酶的抑制是不可逆的，而氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑對乙酰膽堿酯酶的抑制是可逆的。農(nóng)殘常識1有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑的特47農(nóng)殘常識2

酶抑制率法和酶系酶源：國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》推薦的酶抑制率法能方便、快速、準(zhǔn)確、成本低廉檢測出農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留，也同時肯定了乙酰膽堿酯酶酶系作為快速檢測推薦試劑的活性量和具體要求。近年來，我們通過對動物源和植物源的多種丁酰膽堿酯酶、乙酰膽堿酯酶進(jìn)行檢測實(shí)驗(yàn)和比較研究，發(fā)現(xiàn)乙酰膽堿酯酶對農(nóng)藥的檢測敏感度和綜合指標(biāo)優(yōu)于丁酰膽堿酯酶；確定了有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酸有較專一性的抑制作用；分析出在抑制率70%以下，大多數(shù)農(nóng)藥濃度和乙酰膽堿酯酶抑制率呈較好的線性關(guān)系，并能實(shí)現(xiàn)對單種農(nóng)藥的定量分析；解決了酶的活性和穩(wěn)定性控制等技術(shù)農(nóng)殘常識2酶抑制率法和酶系酶源：國家標(biāo)準(zhǔn)GB48農(nóng)殘常識3

什么是間接比色法:由于只有當(dāng)?shù)孜锱c產(chǎn)物之間，在光學(xué)性質(zhì)或其它理化性質(zhì)有顯著差異時，才可能直接用分光光度計(jì)法測定，因此對酶活性濃度的監(jiān)測大多是采用間接監(jiān)測法。如對膽堿酯酶的測定：底物（硫代乙酰膽堿）及酶水解產(chǎn)物（硫代膽堿和乙酸）并不具有顏色，不能用分光光度計(jì)法測定。所以必須設(shè)法在原來反應(yīng)體系中添加一些試劑，這些試劑必須不與酶作用也不影響酶活性，同時又能與酶反應(yīng)物迅速作用，產(chǎn)生可以被直接測定的物質(zhì)。這就產(chǎn)生了Ellman的膽堿酯酶測定法即間接連續(xù)監(jiān)測法。目前國內(nèi)大多廠家生產(chǎn)的快速農(nóng)藥測定儀都采用了Ellman的膽堿酯酶測定法即間接比色法。該方法通過監(jiān)測底物（硫代乙酰膽堿），酶水解產(chǎn)物硫代膽堿與添加的二硫代硝基苯甲酸（DTNB）作用立刻生成黃色化合物的反應(yīng)速度來測定酶活性變化。農(nóng)殘常識3什么是間接比色法:由于只有當(dāng)?shù)孜锱c產(chǎn)物49農(nóng)殘常識4

什么是固定時間法:早期這類方法常被命名為“終點(diǎn)法”、“二點(diǎn)法”、“固定時間法”和“取樣法”。該方法先選擇一段固定的時間（固定為3分鐘），先讓酶與底物在一定溫度下進(jìn)行一段固定的時間（固定為3分鐘）的化學(xué)反應(yīng)，并根據(jù)呈色測出底物和產(chǎn)物的變化用比色法對反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行評定。由于“二點(diǎn)法”容易受到干擾，并產(chǎn)生誤差，使檢測穩(wěn)定性較低。農(nóng)殘常識4什么是固定時間法:早期這類方法常被命名為“50農(nóng)殘常識5

什么是連續(xù)監(jiān)測法：50年代，Warburg首先用分光光度計(jì)測定酶的活性。該方法不需停止酶反應(yīng)就可測定反應(yīng)物的變化，容易觀察到反應(yīng)的整個過程和干擾情況（通過繪制反應(yīng)曲線）。因此逐步取代了固定時間法成為目前測酶活性的主要方法。該方法是利用連續(xù)對反應(yīng)過程進(jìn)行高靈敏度檢測，并通過繪制整個酶反應(yīng)曲線避開延滯期和非線性反應(yīng)期，只在線性反應(yīng)期測定最大反應(yīng)初速度。由于儀器的高精密度，連續(xù)監(jiān)測法能在很短時間，甚至在1分鐘反應(yīng)時間內(nèi)就能準(zhǔn)確測定出活性的抑制率。農(nóng)殘常識5什么是連續(xù)監(jiān)測法：50年代，Warburg51技術(shù)指標(biāo)CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測定儀的技術(shù)指標(biāo)：?測量波長：410nm?通道數(shù)：4?檢測用樣品器皿：10mm比色皿?光電流漂移：<1%

(3min)?

暗電流漂移：<1%

(3min)?抑制率顯示范圍：0-100%

?

抑制率測量范圍：10-100%?

農(nóng)藥檢測：（用甲胺磷農(nóng)藥標(biāo)樣測試）?抑制率示值誤差：±10%?抑制率重復(fù)性誤差：5%技術(shù)指標(biāo)CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測定儀的技術(shù)指標(biāo)：52第一部分試劑配制第二部分聯(lián)機(jī)使用第三部分單機(jī)使用第四部分相關(guān)技巧與常識目錄第一部分試劑配制目錄53第一部分

試劑配制

第一部分

試劑配制541、試劑的配制提取液：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加

510ml蒸餾水溶解。酶試劑：用移液槍取3.1ml提取液，加入酶試劑瓶中。顯色劑：用移液槍取20ml提取液，加入顯色劑瓶，溶解后倒入棕色瓶中。底物：用移液槍取3.1ml蒸餾水，加入底物瓶中。1、試劑的配制提取液：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加

552、試劑的保存及注意事項(xiàng)返回目錄1、本試劑適用的國家標(biāo)準(zhǔn)為：GB/T5009.199-2003。2、未配制的試劑，要保存在0℃以下的冷凍箱里。

（保質(zhì)期可達(dá)1年）3、配制好的酶和底物試劑，要保存在4℃的冷藏箱內(nèi)。（保質(zhì)期為一周）4、配制好的提取液常溫下可以長期保存。5、配制好的顯色劑需避光保存；常溫或冷藏，可以

保存1年。2、試劑的保存及注意事項(xiàng)返回目錄1、本試劑適用的國家標(biāo)準(zhǔn)為：56第二部分

聯(lián)機(jī)使用

第二部分

聯(lián)機(jī)使用

57第一步儀器連接第一步儀器連接581、連接電源將儀器的電源接頭和數(shù)據(jù)信號線接好。如圖：1、連接電源將儀器的電源接頭和數(shù)據(jù)信號線接好。如圖：592、連接電腦把RS232/RS485的轉(zhuǎn)換器接入電腦主機(jī)背后的COM口（串口）上，然后把數(shù)據(jù)信號線與轉(zhuǎn)換器連接上，這樣就完成了儀器與電腦的硬件連接。2、連接電腦把RS232/RS485的轉(zhuǎn)換器接入電腦60第二步檢測操作第二步檢測操作61安裝“農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測軟件”把“農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測軟件”光盤放入電腦光驅(qū)中，等自動讀取或在光盤目錄下找到并雙擊“setup”后，按提示點(diǎn)擊“下一步”安裝。安裝完成以后，桌面上會出現(xiàn)“食品質(zhì)量安全檢測平臺”的圖標(biāo)。安裝完成桌面上出現(xiàn)的圖標(biāo)安裝“農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測軟件”把“農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測62儀器設(shè)置首先按儀器“設(shè)置”鍵，選擇為“受控”。然后再打開檢測軟件，檢測軟件的用戶名默認(rèn)為“管理員”，密碼是“111111”。這樣檢測軟件對檢測儀器進(jìn)行控制了。檢測軟件登陸儀器設(shè)置首先按儀器“設(shè)置”鍵，選擇為“受控”。然后再打開檢測63操作步驟整個的實(shí)驗(yàn)操作過程可以分為三個大部分：調(diào)0、調(diào)100空白對照樣品分析操作步驟整個的實(shí)驗(yàn)操作過程可以分為三個大部分：調(diào)0、調(diào)10064調(diào)0/100注：以上是一個檢測窗口的步驟，其他三個窗口都是如此。

等待10-15秒

按“確定”

放入黑塊

等待10-15秒

按“確定”

拿出黑塊

按“”鍵按“”鍵按“”鍵

按“”鍵調(diào)0/100注：以上是一個檢測窗口的步驟，其他三個窗口都是如65空白對照

用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入比色池

按“開始對照分析”鍵

等待對照結(jié)束

用大移液槍抽取2.5ml提取液放入試管中空白對照用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中用小移液槍66裝入對照

按“裝入對照分析”鍵選擇所需對照選擇需要裝入對照的通道號（在通道號碼前√）

按“讀取”鍵完成裝入工作

注：對照結(jié)束后，對照曲線會自動保存.（標(biāo)準(zhǔn)對照庫中已有30種蔬菜的對照，在做這30種蔬菜時，請參照這些對照。）

裝入對照按“裝入對照分析”鍵選擇所需對照選擇需要裝入對照的67裝入標(biāo)準(zhǔn)對照庫

按“裝入對照分析”鍵選擇所需的空白對照和相應(yīng)的樣品修正值選擇需要裝入對照的通道號（在通道號碼前√）

按“讀取”鍵完成裝入工作

裝入標(biāo)準(zhǔn)對照庫按“裝入對照分析”鍵選擇所需的空白對照和相應(yīng)68用天平稱取1克果蔬剪成2cm見方

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中

靜置15分鐘（或震蕩1分鐘）

用大移液槍從燒杯中抽取2.5ml浸泡液移至空試管中

用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中靜置15分鐘

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入比色池

按“開始樣品分析”鍵

等待檢測結(jié)果

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中靜置169第三步保存檢測結(jié)果第三步保存檢測結(jié)果70保存檢測結(jié)果樣品結(jié)束后，系統(tǒng)自動彈出“檢測結(jié)果”對話框

選擇該通道所測蔬菜名

填寫（選擇）檢測單位

按“退出”鍵

填寫（選擇）被檢單位和生產(chǎn)單位

按“保存”鍵，保存檢測結(jié)果保存檢測結(jié)果樣品結(jié)束后，系統(tǒng)自動彈出“檢測結(jié)果”對話框選擇71備注“統(tǒng)計(jì)分析”中的“農(nóng)殘檢測數(shù)據(jù)查詢統(tǒng)計(jì)”對話框有所有保存過的檢測數(shù)據(jù)，在該對話框中有“開始日期“、“結(jié)束日期”、“果蔬品種”、“被檢單位”等九項(xiàng)選項(xiàng)，對這些選項(xiàng)進(jìn)行組合選擇后，再按“查詢”鍵，就可以將您需要的信息從所有的數(shù)據(jù)中篩選出來。另外，“農(nóng)殘檢測數(shù)據(jù)查詢統(tǒng)計(jì)”對話框中還有“統(tǒng)計(jì)分析”和“轉(zhuǎn)存”等功能，當(dāng)選擇出需要的檢測數(shù)據(jù)后，就可以按“統(tǒng)計(jì)分析”鍵或者“轉(zhuǎn)存”鍵，對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析或制成相應(yīng)報(bào)表。如果需要打印單項(xiàng)檢測結(jié)果，則點(diǎn)選該結(jié)果后，按“打印當(dāng)前記錄”鍵，瀏覽打印效果，再按打印鍵后打印。返回目錄備注“統(tǒng)計(jì)分析”中的“農(nóng)殘檢測數(shù)據(jù)查詢統(tǒng)計(jì)”對話框72第三部分

單機(jī)使用第三部分

單機(jī)使用73第一步設(shè)置儀器第一步設(shè)置儀器741、連接電源將儀器電源連接好，（如需打印，則要將專用打印機(jī)連接到儀器的打印接口上。）如圖：

1、連接電源將儀器電源連接好，（如需打印，則要將專用打印機(jī)連752、儀器設(shè)置

打開儀器開關(guān)后，按提示進(jìn)入儀器操作主界面。按“設(shè)置”鍵進(jìn)入儀器設(shè)置功能，在“設(shè)置”里可以對“通道選擇”、“日期”、“打印方式”、“對照查詢”等進(jìn)行設(shè)置。設(shè)置完成后再按“設(shè)置”鍵退回到主界面。

通道選擇日期設(shè)置2、儀器設(shè)置打開儀器開關(guān)后，按提示進(jìn)入儀器操作主界面。按“76第二步檢測操作第二步檢測操作77操作步驟整個的操作步驟分為三個大步驟：調(diào)0、調(diào)100空白對照樣品分析操作步驟整個的操作步驟分為三個大步驟：調(diào)0、調(diào)100空白對照78調(diào)0/100

在主界面狀態(tài)下，按0/100鍵，根據(jù)屏幕提示逐一調(diào)1-4通道的0值，再調(diào)1-4通道的100值，最后按“確定”鍵結(jié)束。調(diào)0/100在主界面狀態(tài)下，按0/100鍵，根據(jù)屏幕提79空白對照注：對照的時間默認(rèn)為3分鐘，如需修改，則先要在“設(shè)置”中進(jìn)行設(shè)置。用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入第一通道的比色池

按“對照”鍵，并選擇“新建”

等待對照結(jié)束

用大移液槍抽取2.5ml提取液放入試管中空白對照注：對照的時間默認(rèn)為3分鐘，如需修改，則先要在“設(shè)置80用天平稱取1克果蔬剪成2cm見方

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中

靜置15分鐘

用大移液槍從燒杯中抽取2.5ml浸泡液移至空試管中

用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中靜置15分鐘

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入比色池

按“樣品”鍵

等待檢測結(jié)果

注：按“樣品”鍵后，四個通道同時進(jìn)行檢測。

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中靜置181第三步數(shù)據(jù)打印及退出

第三步數(shù)據(jù)打印及退出82數(shù)據(jù)打印及退出返回目錄按“打印”鍵

按“確定”鍵

用△/▽鍵選擇檢測數(shù)據(jù)的編號

按“打印”鍵進(jìn)行打印

按“確定”鍵退出打印狀態(tài)

數(shù)據(jù)打印及退出返回目錄按“打印”鍵按“確定”鍵用△/▽鍵83第四部分

相關(guān)技巧與常識第四部分

相關(guān)技巧與常識84常見問題及相關(guān)技巧11.儀器聯(lián)機(jī)操作的情況下，在檢測過程中或者開始檢測時，電腦出現(xiàn)“沒有檢測到指定的設(shè)備……”，是怎么回事？一般來說出現(xiàn)這種提示說明您的檢測儀與電腦硬件連接出現(xiàn)問題，檢查的步驟如下：第一步、確定檢測軟件的設(shè)備設(shè)置中相關(guān)設(shè)置與硬件連接相匹配；第二步、電腦串口通訊故障，檢測方法：重新啟動電腦，確認(rèn)是否故障依然存在，如果故障依然存在，檢查下一步；第三步、更換一下電腦串口，并在檢測軟件的設(shè)備設(shè)置中進(jìn)行相應(yīng)的