2023屆西安高三二診模擬考試生物試卷含解析

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫在答題卡上。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號(hào)?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無(wú)效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列有關(guān)細(xì)胞生命歷程的敘述錯(cuò)誤的是A．細(xì)胞都要經(jīng)過(guò)發(fā)生、生長(zhǎng)、成熟、衰老和凋亡的過(guò)程B．在細(xì)胞衰老的過(guò)程中，細(xì)胞的生理狀態(tài)和化學(xué)反應(yīng)都會(huì)發(fā)生復(fù)雜的變化C．被病原體感染的細(xì)胞的清除屬于細(xì)胞壞死D．紫外線及其他射線通過(guò)損傷細(xì)胞內(nèi)的DNA分子導(dǎo)致細(xì)胞癌變2．對(duì)農(nóng)田、果園等人工生態(tài)系統(tǒng)，下列采取的方法不合理的是（）A．通過(guò)增加或延長(zhǎng)食物鏈來(lái)提高生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，提高能量利用率B．通過(guò)模擬動(dòng)物信息吸引大量傳粉動(dòng)物可提高果樹(shù)的傳粉效率和結(jié)實(shí)率C．通過(guò)不斷施肥、灌溉以及消滅所有病蟲(chóng)害使單一作物的農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)保持穩(wěn)定D．通過(guò)運(yùn)用群落的空間結(jié)構(gòu)原理來(lái)發(fā)展立體農(nóng)業(yè)可充分利用空間和資源3．下列有關(guān)教材實(shí)驗(yàn)中使用的試劑和實(shí)驗(yàn)原理的敘述，正確的是（）A．制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片觀察線粒體時(shí)，需在潔凈載玻片中央滴一滴生理鹽水B．鹽酸在觀察細(xì)胞有絲分裂和觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布實(shí)驗(yàn)中的作用相同C．向某溶液中加入斐林試劑，水浴加熱后出現(xiàn)磚紅色沉淀，說(shuō)明該溶液中含有葡萄糖D．在提取純凈的動(dòng)物細(xì)胞膜和植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)中水的作用原理相近4．下列對(duì)組成細(xì)胞和生物體的有機(jī)物的描述中，正確的是（）A．雌性激素與生長(zhǎng)激素都能與雙縮脲試劑作用呈現(xiàn)紫色B．細(xì)胞核內(nèi)的核酸只含脫氧核糖，細(xì)胞質(zhì)中的核酸只含核糖C．葡萄糖、乳酸、多肽分別是光合作用、細(xì)胞呼吸、翻譯的產(chǎn)物D．1分子ATP水解時(shí)脫去兩個(gè)磷酸基團(tuán)可形成1分子腺嘌呤脫氧核苷酸5．不同層次的生命系統(tǒng)均需要物質(zhì)和能量不斷地輸入和輸出，下面敘述不正確的是（）A．人體成熟的紅細(xì)胞利用無(wú)氧呼吸獲得所需的能量B．衰老細(xì)胞膜通透性改變使物質(zhì)運(yùn)輸能力降低并影響到細(xì)胞的新陳代謝C．光合速率大于呼吸速率時(shí)，植物體可積累生長(zhǎng)所需的有機(jī)物D．生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者固定的能量大于消費(fèi)者和分解者呼吸作用消耗的能量即可維持生態(tài)系統(tǒng)正常的功能6．下列有關(guān)“一定”的說(shuō)法中，全部正確的一組是①經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工的蛋白質(zhì)，一定是分泌蛋白②細(xì)胞生物的遺傳物質(zhì)，一定是DNA③無(wú)論是真核細(xì)胞還是原核細(xì)胞，其“系統(tǒng)邊界”一定是細(xì)胞膜④植物細(xì)胞內(nèi)的色素，一定含有C、H、0、N、Mg⑤組成細(xì)胞的各種化學(xué)元素，在無(wú)機(jī)自然界一定能夠找到⑥種群J型增長(zhǎng)的數(shù)學(xué)模型公式（Nt=N0)中的是指增長(zhǎng)速率，其數(shù)值一定大于1A．①②③ B．④⑤⑥ C．①④⑥ D．②③⑤二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）如圖是利用克隆技術(shù)進(jìn)行人類疾病治療的示意圖，圖中①～④表示細(xì)胞，A-C表示過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）過(guò)程A表示的細(xì)胞工程技術(shù)是____，該過(guò)程用患者的體細(xì)胞作為供核細(xì)胞，用[①]____作為提供細(xì)胞質(zhì)的細(xì)胞。（2）對(duì)②進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)瓶置于含適量CO2的培養(yǎng)箱中，以維持培養(yǎng)液的____相對(duì)穩(wěn)定；培養(yǎng)液中需添加一定量的___，以防止污染；培養(yǎng)液中加入____因子，可促進(jìn)C過(guò)程的進(jìn)行。（3）胚胎干細(xì)胞可從圖中[③]____獲取，用某染料鑒定該胚胎干細(xì)胞是否為活細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)活細(xì)胞不能被染色，其原因是活細(xì)胞膜對(duì)物質(zhì)的吸收具有____。若胚胎正常發(fā)育，④將發(fā)育成_____。8．（10分）基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段。如圖是基因工程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）從基因文庫(kù)中提取的目的基因通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，所用的酶與細(xì)胞內(nèi)同類酶的差異在于該酶______________。（2）進(jìn)行①過(guò)程時(shí)，需用______________酶切開(kāi)載體以插入目的基因。若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過(guò)表達(dá)載體而不能直接將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞，原因是應(yīng)___________________（答出兩點(diǎn)即可）。（3）若圖中宿主細(xì)胞為大腸桿菌，一般情況下②過(guò)程不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是____________________________；已轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞（大腸桿菌）指的是____________________________。（4）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用______________的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在蛋白質(zhì)純化的過(guò)程中應(yīng)添加______________的抑制劑。9．（10分）患者男，48歲，發(fā)熱伴寒戰(zhàn)，入院進(jìn)行血液B超及CT檢查，疑似肝膿腫。其中細(xì)菌性肝膿腫的主要病原菌是：大腸埃希菌、克雷伯菌、鏈球菌、金黃色葡菊球菌、厭氧菌等。近年來(lái)，克雷伯桿菌感染導(dǎo)致的細(xì)菌性肝膿腫患者比例有增高的趨勢(shì)，為確定致病原因需要進(jìn)行細(xì)菌的培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn)檢查病原體種類。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）細(xì)菌培養(yǎng)一般在30~37℃，pH調(diào)至____________，進(jìn)行無(wú)菌操作。對(duì)接種環(huán)等金屬用具，直接在灑精燈火焰的____________灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇?。?）微生物接種的方法很多，最常用的方法有____________法。雖然這些技術(shù)的操作方法各不相同，但是，其核心都是防止雜菌的污染，保證____________________________________。（3）區(qū)分細(xì)菌種類可以通過(guò)多種途徑，如生化試驗(yàn)IMVC試驗(yàn)可用于腸道桿菌鑒定，其中大腸埃希菌、克雷伯菌鑒定結(jié)果分別是++--.--++；還可以通過(guò)菌落特征，如菌落的____________等的不同來(lái)區(qū)別。常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是_____________，測(cè)定細(xì)菌數(shù)量的方法還有____________法，無(wú)論哪種方法得到的細(xì)菌數(shù)量都是____________值。10．（10分）國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升鮮奶產(chǎn)品中大腸桿菌數(shù)不得超過(guò)個(gè)，鮮奶中大腸桿菌的數(shù)目可用濾膜法來(lái)測(cè)定，流程為：用濾膜過(guò)濾1ml待測(cè)牛奶→牛奶中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。（1）制備培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中能夠同時(shí)提供氮源和碳源的是_____________（填“蛋白胨”“乳糖”或“”），從培養(yǎng)基功能上劃分，EMB培養(yǎng)基屬于_____________。（2）為檢測(cè)該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，對(duì)于該培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_____________。（3）培養(yǎng)與統(tǒng)計(jì)：在適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)選擇顏色為_(kāi)____________的菌落數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果如下：培養(yǎng)時(shí)間12h24h平板對(duì)照組123對(duì)照組123大腸桿菌菌落數(shù)（個(gè)）01321211450132121145其他細(xì)菌菌落數(shù)（個(gè)）112253222244112253222244（4）培養(yǎng)12h和24h的大腸桿菌菌落特征有何差異？_____________。（5）根據(jù)表中的數(shù)據(jù)不能判斷該鮮奶樣品中的大腸桿菌數(shù)是否超標(biāo)，請(qǐng)說(shuō)明理由：_____________。11．（15分）表型模擬是指生物體的基因型并未發(fā)生變化，但由于外界環(huán)境條件的改變，表型上卻發(fā)生改變的現(xiàn)象。果蠅的長(zhǎng)翅（V）對(duì)殘翅（v）為顯性，基因位于常染色體上。下表是果蠅表現(xiàn)型與幼蟲(chóng)的基因型、幼蟲(chóng)培養(yǎng)溫度的關(guān)系。果蠅幼蟲(chóng)基因型幼蟲(chóng)的培養(yǎng)溫度果蠅表現(xiàn)型VV或Vv正常溫度25℃長(zhǎng)翅35℃殘翅（表型模擬）vv25℃或35℃殘翅請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）“表型模擬”現(xiàn)象說(shuō)明生物的性狀是由____________控制，但又受____________影響。（2）“表型模擬”殘翅果蠅出現(xiàn)的直接原因可能是高溫（35℃）降低了催化翅形成的____________，從而使果蠅的翅膀不能正常生長(zhǎng)發(fā)育。（3）現(xiàn)有長(zhǎng)翅果蠅、正常溫度下培養(yǎng)的殘翅果蠅、35℃溫度下培養(yǎng)的殘翅果蠅等材料供選擇，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)遺傳實(shí)驗(yàn)判斷一只雄性殘翅果蠅是屬于純合子（vv）還是“表型模擬”。要求寫出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論__________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、C【解析】

衰老細(xì)胞中，細(xì)胞內(nèi)水分減少，細(xì)胞萎縮，體積變小，但細(xì)胞核體積增大，染色質(zhì)固縮，染色加深；細(xì)胞膜通透性功能改變，物質(zhì)運(yùn)輸功能降低；細(xì)胞色素隨著細(xì)胞衰老逐漸累積；有些酶的活性降低；呼吸速度減慢，新陳代謝減慢。細(xì)胞凋亡是由基因決定的，屬于正常的生命現(xiàn)象，對(duì)生物體有利；細(xì)胞壞死是由外界環(huán)境因素引起的，是不正常的細(xì)胞死亡，對(duì)生物體有害。紫外線、X射線等會(huì)損傷細(xì)胞中的DNA分子，使原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變，導(dǎo)致正常細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂失控而變成癌細(xì)胞?！驹斀狻緼.細(xì)胞都有發(fā)生、生長(zhǎng)、成熟、衰老和凋亡的過(guò)程，A正確；B.細(xì)胞衰老的過(guò)程是細(xì)胞生理狀態(tài)和化學(xué)反應(yīng)發(fā)生復(fù)雜變化的過(guò)程，B正確；C.被病原體感染的細(xì)胞的清除屬于細(xì)胞凋亡，C錯(cuò)誤；D.紫外線及其他射線會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞癌變，其原理是損傷細(xì)胞內(nèi)的DNA分子，D正確。2、C【解析】

1、信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)中的作用（1）個(gè)體：生命活動(dòng)的正常進(jìn)行，離不開(kāi)信息的作用。（2）種群：生物種群的繁衍，離不開(kāi)信息傳遞。（3）群落和生態(tài)系統(tǒng)：能調(diào)節(jié)生物的種間關(guān)系，經(jīng)維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定。2、群落的空間結(jié)構(gòu)包括垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)?！驹斀狻緼、人們可以通過(guò)增加或延長(zhǎng)食物鏈來(lái)提高生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，獲得更多的產(chǎn)品，提高能量的利用率，A正確；B、通過(guò)模擬動(dòng)物信息，實(shí)現(xiàn)了繁殖信息的傳遞，有利于提高果樹(shù)的傳粉效率和結(jié)實(shí)率，B正確；C、單一作物的農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)不利于維持穩(wěn)定，C錯(cuò)誤；D、立體農(nóng)業(yè)運(yùn)用的是群落的空間結(jié)構(gòu)原理，可以充分利用空間和資源，D正確。故選C。3、D【解析】

1．質(zhì)壁分離的原理：當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí)，細(xì)胞就會(huì)通過(guò)滲透作用而失水，細(xì)胞液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到溶液中，使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí)，原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁分離。2．質(zhì)壁分離復(fù)原的原理：當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí)，細(xì)胞就會(huì)通過(guò)滲透作用而吸水，外界溶液中的水分就通過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到細(xì)胞液中，整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來(lái)的狀態(tài)，緊貼細(xì)胞壁,使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原?！驹斀狻緼、制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片觀察線粒體時(shí)，在潔凈載玻片中央滴一滴用生理鹽水配制的健那綠染液，A錯(cuò)誤；B、鹽酸在觀察細(xì)胞有絲分裂中的作用是解離，而在觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布實(shí)驗(yàn)中的作用是改變細(xì)胞膜的通透性，進(jìn)而使染色劑容易進(jìn)入，B錯(cuò)誤；C、向某溶液中加入斐林試劑，水浴加熱后出現(xiàn)磚紅色沉淀，說(shuō)明該溶液中含有可溶性還原糖，C錯(cuò)誤；D、在提取純凈的動(dòng)物細(xì)胞膜和植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)中利用了滲透作用的原理，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果都是吸水或失水造成的，D正確。故選D。4、C【解析】

ATP的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)式是A-P~P~P，其中A代表腺苷，T是三的意思，P代表磷酸基團(tuán)。1分子ATP脫去1個(gè)磷酸基團(tuán)可形成1分子ADP，1分子ATP脫去兩個(gè)磷酸基團(tuán)可形成1分子AMP?！驹斀狻緼、性激素的本質(zhì)的固醇類，不能和雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中均既含有DNA，又含有RNA，只是細(xì)胞核內(nèi)的核酸主要是DNA（含有脫氧核糖），細(xì)胞質(zhì)中的核酸主要是RNA（含有核糖），B錯(cuò)誤；C、葡萄糖、乳酸、多肽分別是光合作用、細(xì)胞呼吸、翻譯的產(chǎn)物，C正確。D、1分子ATP脫去兩個(gè)磷酸基團(tuán)可形成1分子AMP，即腺嘌呤核糖核苷酸，D錯(cuò)誤。故選C。5、D【解析】

沒(méi)有線粒體的真核生物細(xì)胞只能進(jìn)行無(wú)氧呼吸。代謝旺盛的細(xì)胞與外界進(jìn)行物質(zhì)交換的能力強(qiáng)。凈光合速率=總光合速率-呼吸速率，當(dāng)凈光合速率大于0時(shí)，植物可積累有機(jī)物，表現(xiàn)為生長(zhǎng)?！驹斀狻緼、人體成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有線粒體，只能進(jìn)行無(wú)氧呼吸，利用無(wú)氧呼吸獲得所需的能量，A正確；B、衰老細(xì)胞中細(xì)胞膜通透性改變，物質(zhì)運(yùn)輸功能降低，細(xì)胞的新陳代謝減弱，B正確；C、植物體光合速率大于呼吸速率時(shí)，可積累生長(zhǎng)所需的有機(jī)物，C正確；D、生態(tài)系統(tǒng)的能量輸入為生產(chǎn)者固定的太陽(yáng)能，能量輸出為各種生物（包括生產(chǎn)者、消費(fèi)者和分解者）呼吸散失的能量，生產(chǎn)者固定的能量大于消費(fèi)者和分解者呼吸作用消耗的能量時(shí)，生態(tài)系統(tǒng)的能量積累可能為負(fù)值，此時(shí)生態(tài)系統(tǒng)的功能不能正常運(yùn)行，D錯(cuò)誤。故選D。6、D【解析】

①經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工的蛋白質(zhì)，不一定是分泌蛋白，如溶酶體中的酶，①錯(cuò)誤；②細(xì)胞生物的遺傳物質(zhì)，一定是DNA，②正確；③真核細(xì)胞和原核細(xì)胞的“系統(tǒng)邊界”都是細(xì)胞膜，③正確；④植物細(xì)胞內(nèi)的色素不一定含有Mg，只有葉綠素含有Mg，④錯(cuò)誤；⑤組成細(xì)胞的各種化學(xué)元素，在無(wú)機(jī)自然界一定能夠找到，沒(méi)有一種元素是生物界所特有的，⑤正確；⑥種群J型增長(zhǎng)的數(shù)學(xué)模型公式（Nt=N0)中的是指增長(zhǎng)速率，其數(shù)值不一定大于1，⑥錯(cuò)誤。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、核移植次級(jí)卵母細(xì)胞pH抗生素分化誘導(dǎo)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)選擇透過(guò)性胎膜和胎盤【解析】

使用該技術(shù)對(duì)人某些疾病進(jìn)行治療時(shí)，需要患者提供相應(yīng)的遺傳物質(zhì)進(jìn)而通過(guò)細(xì)胞工程等培育相應(yīng)的組織和器官。核移植技術(shù)需要利用患者的細(xì)胞核提供遺傳物質(zhì)，需要次級(jí)卵母細(xì)胞提供細(xì)胞質(zhì)。胚胎在正常發(fā)育時(shí)，會(huì)產(chǎn)生胎盤和胎膜以便保護(hù)胚胎發(fā)育并獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?！驹斀狻浚?）過(guò)程A顯示將患者的細(xì)胞核取出，移植到去掉核的細(xì)胞中，該過(guò)程為核移植；其中次級(jí)卵母細(xì)胞中含有大量的細(xì)胞質(zhì)，一般來(lái)充當(dāng)受體細(xì)胞；（2）保證環(huán)境中二氧化碳的穩(wěn)定可以使得維持溶液中pH的穩(wěn)定；為防止雜菌和其它生物的影響，一般在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要添加抗生素；C過(guò)程是由胚胎干細(xì)胞增殖分化為組織和器官，所以需要加入分化誘導(dǎo)因子，促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化；（3）當(dāng)受精卵開(kāi)始發(fā)育時(shí)可以產(chǎn)生滋養(yǎng)層和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，胚胎干細(xì)胞可以從內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中獲?。患?xì)胞膜具有選擇透過(guò)性，當(dāng)細(xì)胞存活，細(xì)胞膜的選擇透過(guò)性會(huì)阻止染料進(jìn)入細(xì)胞；胚胎正常發(fā)育時(shí)，滋養(yǎng)層后續(xù)會(huì)發(fā)育成胎膜和胎盤?！军c(diǎn)睛】該題重點(diǎn)考察了細(xì)胞工程和胚胎工程的綜合性問(wèn)題，運(yùn)用克隆的技術(shù)來(lái)培育新的器官和組織進(jìn)行移植，因此需要患者來(lái)提供細(xì)胞核，后續(xù)進(jìn)行胚胎發(fā)育時(shí)，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層的細(xì)胞形成外胚層，下方的細(xì)胞形成內(nèi)胚層，滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)育為胎兒的胎膜和胎盤。8、耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）限制（或限制性核酸內(nèi)切）目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)、目的基因無(wú)表達(dá)所需啟動(dòng)子目的基因無(wú)表達(dá)所需的終止子未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力弱已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達(dá)的細(xì)胞蛋白酶缺陷型蛋白酶【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA??分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要特殊的耐高溫的DNA聚合酶。（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需用限制酶將載體切開(kāi)，以便目的基因的插入；若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過(guò)表達(dá)載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)、目的基因無(wú)表達(dá)所需啟動(dòng)子和終止子。（3）若受體細(xì)胞是大腸桿菌（微生物），由于未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力弱，則需要用鈣離子處理大腸桿菌，使之成為感受態(tài)細(xì)胞；已轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞（大腸桿菌）指的是已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達(dá)的細(xì)胞。（4）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解，為防止蛋白質(zhì)被降解，可以選用不能產(chǎn)生該蛋白酶的缺陷細(xì)菌以及使用能夠抑制蛋白酶活性的藥物，因此為防止蛋白質(zhì)被降解，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在蛋白質(zhì)純化的過(guò)程中應(yīng)添加蛋白酶的抑制劑。【點(diǎn)睛】本題主要考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，主要考查學(xué)生從圖中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題作出解釋的能力。9、中性或微堿性充分燃燒層平板劃線法和稀釋涂布平板培養(yǎng)物的純度大小、形狀、顏色稀釋涂布平板法顯微鏡直接計(jì)數(shù)估計(jì)【解析】

統(tǒng)計(jì)細(xì)菌數(shù)量的方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)，在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，采用稀釋涂布平板法來(lái)培養(yǎng)細(xì)菌。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)細(xì)菌，但菌落數(shù)往往比活菌的試劑數(shù)目低，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。另一種方法是直接計(jì)數(shù)法，這種方法要借助顯微鏡，且統(tǒng)計(jì)的數(shù)目也包括死亡的細(xì)菌?！驹斀狻浚?）微生物生命活動(dòng)需要一定的條件，不同的微生物需要不同的培養(yǎng)溫度和pH，細(xì)菌生活的溫度一般在30~37℃，pH調(diào)至中性或微堿性，霉菌一般在25~28℃，pH調(diào)至酸性培養(yǎng)。接種時(shí)，對(duì)接種環(huán)等金屬用具通常用灼燒滅菌法，具體做法是：直接在灑精燈火焰的充分燃燒層灼燒。（2）微生物接種方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，還包括斜面接種和穿刺接種等方法。雖然這些技術(shù)的操作方法各不相同，但是其核心都是要防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度。（3）區(qū)分細(xì)菌種類可以通過(guò)多種途徑，如通過(guò)鑒別菌落的特征或通過(guò)生化試驗(yàn)完成，故大腸埃希菌、克雷伯菌鑒定結(jié)果可通過(guò)菌落的大小、形態(tài)、顏色等的不同來(lái)區(qū)別。常用來(lái)統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量的方法是稀釋涂布平板法，顯微鏡直接計(jì)數(shù)也可以測(cè)定細(xì)菌數(shù)量，但都是估計(jì)值?！军c(diǎn)睛】熟知微生物培養(yǎng)的有關(guān)操作是解答本題的關(guān)鍵，另懂得菌落的含義以及菌落的特征是解答本題的另一關(guān)鍵！10、蛋白胨鑒別培養(yǎng)基將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)1~2d黑色培養(yǎng)24h的菌落較大（或培養(yǎng)12h的菌落較?。?duì)照組有其他細(xì)菌菌落，說(shuō)明培養(yǎng)基制作不合格或無(wú)菌操作存在問(wèn)題，需重做實(shí)驗(yàn)【解析】

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，蛋白胨可以提供碳源、氮源和維生素。添加了伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基上，大腸桿菌可以和伊紅美藍(lán)發(fā)生反應(yīng)形成黑色菌落，從而鑒別大腸桿菌。整個(gè)微生物培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)中需要防止其它雜菌的干擾，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)。【詳解】（1）蛋白胨可以同時(shí)提供碳源和氮源，乳糖只能提供碳源，氯化鈉只能提供無(wú)機(jī)鹽；按功能分，EMB培養(yǎng)基可以通過(guò)伊紅美藍(lán)鑒別大腸桿菌的有無(wú)，屬于鑒別培養(yǎng)基；