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文檔簡介
實驗六
維生素C含量的測定
(2,6-D滴定法)一、目的意義人類營養(yǎng)中最重要的維生素之一。缺乏時引起壞血病。果蔬品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。不同栽培條件,不同成熟度都可以影響水果、蔬菜中維生素C的含量。水果、蔬菜保鮮貯藏必須測定維生素C含量,了解果蔬品質(zhì)量的高低。測定方法:滴定管活塞操作滴定操作2.6-二氯酚靛酚滴定法滴定操作2.6-二氯酚靛酚滴定法維生素C:強的還原性將染料2.6-D還原成無色的2.6-D2.6-二氯酚靛酚:強的氧化性中性/堿性:藍(lán)色酸性:紅色還原型抗壞血酸氧化型2.6-二氯酚靛酚
(紅色)還原型2.6-二氯酚靛酚(無色)氧化型2.6-二氯酚靛酚(藍(lán)色)
O=C|HO—C‖HO—C|H—C|HO—CH|CH2OHO
O=C|O=C|O=C|H—C|HO—CH|CH2OHO脫氫抗壞血酸=N——O-Cl|O=
|Cl=N——OHCl|O=
|ClN——OHCl|HO
|Cl
——
|HH+OH-三、操作步驟1.樣品提取5g新鮮蔬菜少量2%草酸石英砂充分研磨成勻漿用2%草酸洗入容量瓶,并定容至100mL干燥濾紙過濾快速勻漿?為什么?2.染料標(biāo)定及樣品中Vc測定試劑(ml)空白染料標(biāo)定1染料標(biāo)定2樣品測定1樣品測定22%草酸100000標(biāo)準(zhǔn)Vc0101000樣品提取液00010102,6-D滴定值y1Vy0
取5個50mL干燥潔凈的三角瓶,編號,按下表操作:
y1---滴定空白所用染料ml數(shù)
y0---滴定樣品所用染料ml數(shù)A---1mL染料溶液相當(dāng)?shù)目箟难岬膍g數(shù)四、結(jié)果計算樣品重(g)×100×10010抗壞血酸含量(mg/100g鮮重)
=(y0-y1)×A從上述標(biāo)定求出五、注意事項1.Vc不穩(wěn)定,在空氣中易被氧化,研磨時,盡可能要快,以減少Vc的氧化。2.2%草酸可以有效抑制Vc氧化酶活性。若用樣品含有大量Fe2+,可用8%醋酸溶液提取,因在2%草酸中Fe2+
仍可以還原2,6-D,改用8%醋酸溶液提取,F(xiàn)e2+不會很快與染料起作用。3.維生素C提取時要避光、避免與銅鐵接觸,以免Vc氧化。4.樣品提取液定容時若泡沫太多,可加幾滴乙醚或辛酸、丁醇消除泡沫后再定容。5.當(dāng)樣品本身帶有顏色時,可以用白陶土脫色。6.
滴定時間一般不超過2分鐘,滴定終點以淡紅色存在30秒為準(zhǔn)。因為樣品中某些雜質(zhì)亦能還原2,6-D,但速度較Vc慢,假如滴定速度過慢,其它物質(zhì)也會還原2,6-D。六、思考
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