無菌區(qū)與設備清洗消毒滅菌的設計及驗證講義課件

無菌區(qū)與設備清洗消毒滅菌的設計及驗證錢應璞2010年5月20日濟南2022/12/171無菌區(qū)與設備清洗消毒滅菌的設計及驗證2022/12/131無菌藥品工藝再驗證的主要內容驗證類型驗證內容再驗證周期藥監(jiān)部門或法規(guī)要求的強制性無菌操作的培養(yǎng)基灌裝試驗至少二次/年計量器具的強制檢定一次/年設備的清洗驗證，高效過濾器檢漏一次/年發(fā)生變更時的“改變”性工藝參數的改變或工藝路線的變更原料、包裝材料質量標準的改變或產品包裝形式設備的改變生產處方的修改或批量級的改變常規(guī)檢測表時系統(tǒng)存在著影響質量的變遷跡象每隔一段時間進行的“定期”關鍵潔凈區(qū)的空調凈化系統(tǒng)與工藝用水系統(tǒng)二次/年無菌藥品生產過程中使用的滅菌設備二次/年2022/12/172無菌藥品工藝再驗證的主要內容驗證類型驗證內容再驗證周期藥監(jiān)部設備、器具清洗消毒滅菌目的確立可靠的清潔方法和程序，以防止藥品在生產過程中受到污染和交叉污染。原則設備的設計、選型、安裝、改造和維護必須符合預定用途，應盡可能降低發(fā)生污染、交叉污染、混淆和差錯，便于操作、清潔、維護，以及必要時進行的消毒或滅菌。要求規(guī)定具體而完整的清潔方法、清潔用設備或工具、清潔劑的名稱和配制方法、保護已清潔設備在使用前免受污染的方法、已清潔設備最長的保存時限、使操作者能以可重現的、有效的方式對各類設備進行清潔。2022/12/173設備、器具清洗消毒滅菌目的2022/12/133設備、器具清洗消毒滅菌對設備消毒或滅菌，應規(guī)定消毒或滅菌的具體方法、消毒劑的名稱和配制方法；設備生產結束至清潔前所允許的最長間隔時限；范圍通常只有接觸產品設備表面的清潔規(guī)程需要驗證。非接觸產品部分也應考慮；驗證的階段選定清潔方法，制定清潔規(guī)程（開發(fā)階段）；制定驗證方案（參照物、取樣點、合格標準、取樣方法和檢驗方法）；實施驗證，獲取數據，評價并提出結論；監(jiān)控及再驗證。2022/12/174設備、器具清洗消毒滅菌對設備消毒或滅菌，應規(guī)定消毒或滅菌的具歐洲清潔與清潔驗證的有關法規(guī)介紹生產設備的設計應使其能被易于并徹底清潔，其清潔應該根據詳細與書面化的程序進行，并只能儲藏在清潔與干燥的環(huán)境中。清洗與清潔設備的選擇與使用不應使其成為污染的來源；應進行清潔驗證，以確認清潔程序的有效性。在設定產物殘余物，清潔劑與微生物污染的限定值時，其合理性應科學地基于所涉及的各種材料的特性；使用對于檢測殘余物或污染物具有敏感性的，經驗證的分析方法，每一分析方法的檢測范圍應足以每感地檢測到達到一定水平的殘余物或污染。2022/12/175歐洲清潔與清潔驗證的有關法規(guī)介紹生產設備的設計應使其能被易于設備、器具清洗清潔從設備表面去除可見及不可見物質的過程：活性成份及活性物質的衍生物；清潔劑（來自清潔過程）；微生物（來自物料污染、清潔污染）；消毒劑；潤滑劑；環(huán)境污染物質；設備運行過程中釋放出的異物；沖洗水中殘留的異物。清潔驗證去除上述污染物，防止可能發(fā)生的污染和交叉污染（混淆）2022/12/176設備、器具清洗清潔2022/12/136設備、器具清洗清潔方法分類手工清洗由操作人員拆、擦洗或用高壓水槍清洗；機械磨擦，效果較好，但重現性差；自動清洗由自動控制進行沖洗的清洗，有的帶干燥功能；溶解、沖擊法去污，有些部位不容易清潔，但重現性好；半自動清洗以上兩種方式相結合的清洗過程；2022/12/177設備、器具清洗清潔方法分類2022/12/137設備、器具清洗清洗原理的基礎溶劑移動到表面擴散與對流溶劑和塵垢“反應”反應產物通過擴散與對流進行遠離表面的移動；清洗的程序拆卸方法預洗/檢查要求清洗（清潔劑、方法、時間、溫度范圍）淋洗（用符合藥典標準的水、固定的方法和固定的時間）裝配：按說明書、示意圖要求裝配）2022/12/178設備、器具清洗清洗原理的基礎2022/12/138設備、器具清洗干燥：明確方式和參數檢查；符合設定標準，包括目檢貯存：保持設備及系統(tǒng)完好狀態(tài)的方法，如倒置、放在層流罩下、在線滅菌、規(guī)定存放時間；在線清洗系統(tǒng)的設計必須滿足特定工藝的清潔要求；在線清洗溶液與所有被污染的表面接觸并持續(xù)補充溶關鍵變量的自動控制。濃度（在線清洗溶液的）；溫度；時間（在線清洗溶液暴露的）；壓力；2022/12/179設備、器具清洗干燥：明確方式和參數2022/12/139器具清洗與滅菌工藝的設計思路器具清洗的關鍵是應具有“可重復性”，為得到可重現的和一致的結果和清洗結果方便列入文件，GMP要求在生產過程中所有接觸藥品的部件，如玻璃器皿，容器，桶，管道，灌裝部件等，都必須采用“可重復”，“能被記錄”的清潔方式來去除殘留雜質。人工清洗無法驗證和重復，所有直接或間接接觸藥液的容器具均采用CIP或器具清洗機清洗，以避免難以驗證的手動清洗；經過初步手工清洗后，放入器具清洗機進行清洗。之后進行裝配，所有器具有滅菌前，都應使用適用于蒸汽和環(huán)氧乙烷兩種方法滅菌的呼吸材料進行適當無菌包裝。再進入濕熱滅菌柜滅菌。對需要傳入A/B級使用器具也必須進行雙層包裝。2022/12/1710器具清洗與滅菌工藝的設計思路器具清洗的關鍵是應具有“可重復性典型工藝系統(tǒng)的清洗清潔方法在線清洗（CIP）-設備處于原位，通?？勺詣涌刂埔部砂胱詣樱缍鄠€容器的洗滌采用洗滌CIP機組清洗；離線清洗-小型設備和工器具適合。取清洗殘余水樣確認參考清洗驗證標準殘留物小于等于10ppmpH值：與原來注射用水一致；雜菌小于25cfn/ml;內毒素小于0.25EU/ml；2022/12/1711典型工藝系統(tǒng)的清洗清潔方法2022/12/1311工藝系統(tǒng)清洗確認清潔驗證中常見參考方法加參考品法加入容易測試（化合物）成分的方法，經清潔后測殘留；限度試驗法在注射用水中加入理論計算量的組分，使之剛好是殘留控制標準，然后將淋洗水樣用同一方法進行比較；參照物增量法將某個要控制組分的量加大，解決量小無法測試的問題，再測清潔后的殘留；濃縮法將樣品濃縮，測試后計算。2022/12/1712工藝系統(tǒng)清洗確認清潔驗證中常見參考方法2022/12/131工藝系統(tǒng)清洗確認最難清洗產品活性物質的溶解度（水/清洗劑）；劑型；活性物質在產品中的濃度；輔料的物理及化學性質；一些特殊的工藝過程（加熱、勻化、混合等）；清洗工的經驗。2022/12/1713工藝系統(tǒng)清洗確認最難清洗產品2022/12/1313工藝系統(tǒng)清洗確認確定最難清潔部位和取樣點死角清潔劑不易接觸到的部位；壓力小、流速很低的部位；容易吸附殘留物的部位；殘留物限度的確定最小批量；最具有活性的產品；最大日服用劑量。2022/12/1714工藝系統(tǒng)清洗確認確定最難清潔部位和取樣點2022/12/13工藝系統(tǒng)清洗確認清洗程度的檢測清潔后設備的目檢化學檢驗棉簽擦拭取樣，確定殘留在設備表面活性物質的濃度；沖洗溶劑取樣，確定殘留在設備表面活性物質的濃度，適用于棉簽無法取樣的部件；最終沖洗水取樣，確定殘留在設備表面所有水溶性物質及清潔劑的殘留量。微生物檢驗棉簽取樣檢驗最終沖洗水取樣檢驗總有機碳（TOC）測試測量擦洗或沖洗后的水樣中總有機碳的量。2022/12/1715工藝系統(tǒng)清洗確認清洗程度的檢測2022/12/1315工藝系統(tǒng)清洗確認分析方法確認分析方法：能夠檢測出殘留物或污染物。特定的物質可以檢出；在允許的清潔限度內可以檢出（靈敏度）靈敏度和特殊性HPLC、GC、光譜法、TOC；驗證分析方法應該包括：精密度、線性和選擇性；回收率；再現性；檢測限能夠檢測出已確定限度的殘留物/污染物。2022/12/1716工藝系統(tǒng)清洗確認分析方法2022/12/1316

消毒滅菌方法的設計與確認2022/12/1717

2022/12/1317藥品無菌性的形成原理無菌相關的術語無菌保證值（SAL）：指經滅菌后非無菌品的概率。最終滅菌產品非無菌呂的概率不超過百萬分之一，即SAL≤10-6；非最終滅菌產品非無菌品的概率不超過千分之一，即SAL≤10-3

Z值：當某種微生物的D值下降（或上升）一個對數單位時，其溫度應升高（或降低）度數。FT：指T攝氏度下的滅菌時間；F0：指標準滅菌時間。將121℃作為標準滅菌溫度，當Z設定為10℃時，滅菌程序賦予被滅菌品121℃下的等效滅菌時間；2022/12/1718藥品無菌性的形成原理無菌相關的術語2022/12/1318藥品無菌性的形成原理D值-微生物耐熱參數

在特定滅菌條件下，使微生物殺滅90%（下降一個對數單位）所需的分鐘數。影響D值的因素：使用的微生物；微生物貯存條件；復蘇和培養(yǎng)條件；滅菌柜工作時間；起始溫度；培養(yǎng)基懸置及復蘇類型；滅菌后段持續(xù)時間及溫度；蒸汽飽和度；包裝情況。2022/12/1719藥品無菌性的形成原理D值-微生物耐熱參數2022/12/13注射劑無菌性的形成原理注射劑無菌性的形成的三種主要工藝濕熱滅菌工藝；干熱滅菌工藝；除菌過濾工藝。2022/12/1720注射劑無菌性的形成原理注射劑無菌性的形成的三種主要工藝202注射劑的無菌標準最終滅菌產品普遍接受的無菌標準滅菌后，最終滅菌注射劑或其它關鍵設備微生物存活的概率達到10-6，即一百萬個已滅菌物品或制劑中存活的微生物低于一個。非最終滅菌產品的無菌標準產品中微生物存活的概率達到10-3，即保證1000個制劑中存活的微生物數低于一個。2022/12/1721注射劑的無菌標準最終滅菌產品普遍接受的無菌標準2022/12濕熱滅菌工藝濕熱滅菌工藝的用途藥品小容量注射劑玻璃瓶；塑料瓶；軟包裝材料。器材：過濾器；膠塞；工器具；配料罐、接收罐；藥液、工藝用水管道；灌裝用具；無菌工作服、口罩、手套。2022/12/1722濕熱滅菌工藝濕熱滅菌工藝的用途2022/12/1322干熱滅菌工藝干熱滅菌工藝的用途金屬、玻璃制品/工具和干粉的滅菌與除熱原干熱滅菌參照溫度干熱滅菌中孢子的D值是變化的；干熱滅菌溫度分布均一性及穿透性均不如濕熱滅菌；國際上以121℃為標準滅菌溫度，相應滅菌時間以F0表示；干熱滅菌一般取170℃為標準參照溫度，相應滅菌時間以FH表示；中國藥典中規(guī)定的是：160-170℃2小時以上；170-180℃1小時以上；250℃45分鐘以上。2022/12/1723干熱滅菌工藝干熱滅菌工藝的用途2022/12/1323干熱滅菌工藝干熱滅菌與去熱原的關系去熱原工藝條件比孢子殺滅程序要苛刻得多，通常相當于標準干熱滅菌進行FH的數十倍；如果干熱法去熱原工藝能使細菌內毒素下降3個對數單位，就不必再進行微生物的生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗。2022/12/1724干熱滅菌工藝干熱滅菌與去熱原的關系2022/12/1324潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌2022/12/17252022/12/1325潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控無菌藥品中污染菌的來源生產環(huán)境；操作人員；原料及內包裝材料；工藝用水、氮氣、壓縮空氣；生產設備：藥液（粉）接收罐、灌藥機、工器具；生產區(qū)域使用的清潔工具及消毒劑等。以微生物鑒別系統(tǒng)為調查手段API系統(tǒng)（AnalyticalProfileIndex);FDA對菌的種屬比細菌的數量更重視；要求：希望能夠最大限度的把被污染的藥品檢查出來；要盡量克服無菌檢查的局限性。2022/12/1726潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控無菌藥品中污染菌的來源2潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈室內人員管理與微生物監(jiān)控人員行為的污染和控制措施人眼可見最小顆粒為30微米；坐著不動能產生100000個顆粒；行走能產生5000000個顆粒；跑動能產生15000000個顆粒；微生物在空氣和體內外表面；包括細菌、病毒、霉菌和酵母菌；人體攜帶的微生物數量驚人，且根據個人衛(wèi)生習慣的不同因人而異。2022/12/1727潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈室內人員管理與微生物潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控管理人員應具有能務，資格和經驗；組織機構完善、關鍵崗位人員配備合理；生產，工程，維護，保潔等部門所有員工的培訓；潔凈廠房；衛(wèi)生學；微生物學；潔凈/無菌區(qū)域內行為的培訓。制訂健康規(guī)定，行為規(guī)范，服裝規(guī)則；控制人員到最小量，出入控制。2022/12/1728潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控管理人員應具有能務，資格潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈/無菌區(qū)域消毒滅菌消毒對付微生物的一種手段；其目的是消除其活性或者破壞微生物；在地上、墻上、玻璃上、固定管路的外部、貯罐外部、盥洗盆、人員的手表面噴灑消毒劑；注意：消毒可以使孢子、微生物產生耐受性；滅菌：以完全殺滅微生物（包括芽孢和頑固的有機體）為目的；消滅一切有機體以及完全鏟除其恢復活性能力的手段。2022/12/1729潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈/無菌區(qū)域消毒滅菌2潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑定義能消除以細胞繁殖形態(tài)出現微生物污染的化學物質。理想的消毒劑抗菌譜廣；低毒或無毒；無腐蝕性，無污染；有洗滌作用；穩(wěn)定性好；作用迅速；作用持久；價格低廉；2022/12/1730潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑定義2022/12/1330潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑驗證通過特定的微生物與某消毒劑在規(guī)定的使用濃度下，接觸規(guī)定的時間后，對微生物進行培養(yǎng)、計數，考察消毒劑的消毒/殺菌效果。2022/12/1731潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑驗證2022/12/1331潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑的使用無菌區(qū)域使用的消毒劑須通過0.22微米的無菌過濾；為克服耐藥性，應輪流使用不同種類的消毒劑；使用消毒劑消毒后，只能用消毒或滅菌的清潔工具；使用消毒劑的人員要接受相關的培訓；消毒劑應有專門的進入各生產區(qū)域的途徑；異常情況的處理方案；帶菌實驗器具和耗材要滅菌處理。2022/12/1732潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑的使用2022/12/1332潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌影響消毒劑使用的因素菌種；培養(yǎng)基組分；接觸時間；中和劑的種類；表面張力；樣品量；測試/驗證方法；接種；培養(yǎng)時間/溫度；pH值；滲透壓；回收率；培養(yǎng)基性質。2022/12/1733潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌影響消毒劑使用的因素2022/12/潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈室常用消毒劑醇類：醇類消毒劑使微生物的蛋白質變性，在沒有水的情形下，蛋白質不易被變性，在乙醇中加入一些水會使殺菌效力更佳。酚類化合物：廣譜抑菌，對革蘭氏陽笥細菌和革蘭氏陰性細菌以及真菌均有殺傷作用。酚類消毒劑適宜用水溶液或含乙醇的水溶液配制。有效濃度為400ppm到1300ppm之間。季銨鹽類化合物：季銨鹽類化合物在酸性或堿性環(huán)境均能殺死細菌或真菌，在堿性環(huán)境中的殺菌效力稍強一些。如新潔爾滅溶液（0.05%-0.1%的苯扎溴銨溶液）。液體滅菌劑和殺孢子劑：次氯酸鈉、二氧化氯、過氧化氫、戊二醛、甲醛和過氧乙酸等；消毒劑定期交替使用不同消毒劑是為了防止環(huán)境中微生物對同一種消毒劑產生抗性影響實際的消毒效果。2022/12/1734潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈室常用消毒劑2022潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌無菌生產場地常用化學熏蒸對區(qū)域進行滅菌，亦稱大消毒；滅菌介質甲醛氣體/戊二醛；石碳酸與乳酸混合氣體（1：1）氣化雙氧水；臭氧、紫外線；滅菌方法對室內換氣速度的影響氣體熏蒸的廢氣排除速度與熏蒸方法有關；氣體熏蒸的廢氣排除與中和處理與否有關；與HVAC系統(tǒng)中的排風與新風系統(tǒng)設計有關，通常希望新風在排廢氣時的進風量與回風量相等。與自動控制水平有關。通過化學氣體殘留測試確認系統(tǒng)是否滿足工藝要求的滅菌周期。甲醛消毒與排氣至人員可以進入周期為24小時。2022/12/1735潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌無菌生產場地常用化學熏蒸對區(qū)域進行滅潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌氣體滅菌的細菌挑戰(zhàn)試驗方法：每個試驗位置的配養(yǎng)皿內有含107個枯草桿菌的試紙2張；設定滅菌程序熏蒸后取一張試紙作菌檢（普通肉湯配養(yǎng)基37℃，72小時），如果無菌則試驗完成，但屬實驗不成功。須減少藥量重新熏蒸直至為陽性，即有菌有各另一張試紙作含菌數試驗；合格標準：滅菌后枯草桿菌殘留104為合格（即下降3個對數單位）；熏蒸無菌后室內殘留量的測試。應有殘余濃度小于1-2ppm。2022/12/1736潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌氣體滅菌的細菌挑戰(zhàn)試驗2022/12潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌甲醛或殺孢子空間滅菌效果驗證實例通過用生物指示劑進行細菌挑戰(zhàn)性試驗，消毒劑滅菌前后表面微生物檢測，來檢查其的滅菌效果；接受標準：生產指示劑挑戰(zhàn)性試驗接受標準：含菌量為105-106和103的菌條消毒后，無菌條件下放入配套增菌液中于37℃培養(yǎng)72小時，陽性對照為加入未消毒菌條的增菌液，陰性對照為未加指未劑的增菌液；空間熏蒸消毒的方法：在無菌區(qū)有一套獨立的熏蒸消毒系統(tǒng)，使消毒劑在各房間內形式霧狀水氣滲透到潔凈區(qū)的每一角落，通過驗證確定消毒的劑量、空間的溫濕度、熏蒸時間和霧化程序。2022/12/1737潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌甲醛或殺孢子空間滅菌效果驗證實例20潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑用量：37-40%甲醛：12-15ml/m3，中和用25-28%氨水（12-15ml/m3）；殺孢子劑為22%的過氧化氫及4.5%的過氧乙酸，60ml/m3，5%的稀釋液（也可根據潔凈廠房設施及地面抗氧化的能力適當提高濃度）；空間熏蒸消毒的條件：調整萬級無菌區(qū)域空調為消毒狀態(tài)；甲醛：設定無菌區(qū)域溫度為35-40℃，濕度為65-75%；熏蒸4小時；殺孢子劑：設定無菌區(qū)域溫度為20-25℃，濕度為40-50%，熏蒸2小時。2022/12/1738潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑用量：2022/12/1338潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌測試方法生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗：確定生物指示劑的擺放位置，放在生產重點區(qū)域，及污染高風險區(qū)域，避免回風口。消毒前將生物指示劑放入潔凈區(qū)的各個測試點，使菌條暴露在空氣下，消毒結束后待潔凈區(qū)無刺激性氣味后進入潔凈區(qū)收回菌條，無菌條件下依次將菌條放入配套增菌液中，在37培養(yǎng)24小時、48小時、72小時，記錄結果。同時做陽性對照和陰性對照；表面微生物測試：檢測人員分別在消毒前后進入潔凈區(qū)，對地面、墻面、窗臺設備等進行表面微生物檢測，比較結果，驗證甲醛或殺孢子劑的滅菌效果。2022/12/1739潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌測試方法2022/12/1339潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控2022/12/17402022/12/1340潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控無菌設施環(huán)境監(jiān)控程序懸浮粒子監(jiān)測浮游菌監(jiān)測表面活菌監(jiān)測人員攜帶的活菌監(jiān)測溫度和濕度監(jiān)控壓差監(jiān)控環(huán)境監(jiān)測的樣品表面樣品：從關鍵環(huán)境內部和外部通過擦拭和/或接觸皿收集取得?；罹?粒子：在關鍵區(qū)域內部和外部空氣中，通過被動或主動方法收集取得。人員監(jiān)測：從操作員頭部、肩膀、胸部和手部表面取得的樣品。2022/12/1741潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控無菌設施環(huán)境監(jiān)控程序2022/12潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控潔凈/無菌環(huán)境的微生物控制，主要使用傳統(tǒng)的沉降菌測試法和浮游菌采樣檢測法來判斷。浮游菌采樣儀工作原理抽真空，空氣進入；微生物與培養(yǎng)基撞擊后粘在培養(yǎng)基上面；取樣培養(yǎng)基，送檢；特點：采樣速度快，待機時間長；減少菌落的重疊；無需對結果進行校正；微生物還原率高；可根據需要設定取樣體積和延時時間。2022/12/1742潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控潔凈/無菌環(huán)境的微生物控制，主要使?jié)崈?無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控灌裝關鍵控制點要求連續(xù)檢測的空氣質量潔凈度浮游菌沉降菌2022/12/1743潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控灌裝關鍵控制點要求連續(xù)檢測的空氣質潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控監(jiān)控報警限度表示和糾偏限度標準對于微生物測試的取樣頻次，如果出現下列情況應考慮修改，在評估以下情況后，也應確定其它項目的測試頻次：連續(xù)超過報警限度和糾偏限度；停工時間比預計延長；關鍵區(qū)域內發(fā)現有傳染的試劑；在生產期間，空氣凈化系統(tǒng)進行任何重大的維修；環(huán)境設施的限制引起工藝的改變；日常操作記錄反映出傾向性的數據；凈化和消毒規(guī)程的改變；引起生物污染的事故等。2022/12/1744潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控監(jiān)控報警限度表示和糾偏限度標準20謝謝！2022/12/17452022/12/13451、機遇對于有準備的頭腦有特別的親和力。2、不求與人相比，但求超越自己，要哭就哭出激動的淚水，要笑就笑出成長的性格！3、在你內心深處，還有無窮的潛力，有一天當你回首看時，你就會知道這絕對是真的。4、無論你覺得自己多么的了不起，也永遠有人比你更強；無論你覺得自己多么的不幸，永遠有人比你更加不幸。5、不要浪費你的生命，在你一定會后悔的地方上。6、放棄該放棄的是無奈，放棄不該放棄的是無能；不放棄該放棄的是無知，不放棄不該放棄的是執(zhí)著。7、不要輕易用過去來衡量生活的幸與不幸！每個人的生命都是可以綻放美麗的，只要你珍惜。8、千萬別迷戀網絡游戲，要玩就玩好人生這場大游戲。9、過錯是暫時的遺憾，而錯過則是永遠的遺憾！10、人生是個圓，有的人走了一輩子也沒有走出命運畫出的圓圈，其實，圓上的每一個點都有一條騰飛的切線。11、沒有壓力的生活就會空虛；沒有壓力的青春就會枯萎；沒有壓力的生命就會黯淡。12、我以為挫折、磨難是鍛煉意志、增強能力的好機會?！u韜奮13、你不能左右天氣，但可以改變心情。你不能改變容貌，但可以掌握自己。你不能預見明天，但可以珍惜今天。14、我們總是對陌生人太客氣，而對親密的人太苛刻。15、人之所以痛苦，在于追求錯誤的東西。16、知道自己要干什么，夜深人靜，問問自己，將來的打算，并朝著那個方向去實現。而不是無所事事和做一些無謂的事。17、逆境是成長必經的過程，能勇于接受逆境的人，生命就會日漸的茁壯。18、哪里有天才，我是把別人喝咖啡的功夫，都用在工作上的。——魯迅19、所謂天才，那就是假話，勤奮的工作才是實在的?！獝鄣仙?0、做一個決定，并不難，難的是付諸行動，并且堅持到底。21、不要因為自己還年輕，用健康去換去金錢，等到老了，才明白金錢卻換不來健康。22、如果你不給自己煩惱，別人也永遠不可能給你煩惱，煩惱都是自己內心制造的。23、命運負責洗牌，但是玩牌的是我們自己！24、再長的路，一步步也能走完，再短的路，不邁開雙腳也無法到達。25、成功，往往住在失敗的隔壁！26、大多數人想要改造這個世界，但卻罕有人想改造自己。27、人生是一場旅行，在乎的不是目的地，是沿途的風景以及看風景的心情。28、偉大的事業(yè)不是靠力氣、速度和身體的敏捷完成的，而是靠性格、意志和知識的力量完成的。29、人生最大的喜悅是每個人都說你做不到，你卻完成它了！30、在實現理想的路途中，必須排除一切干擾，特別是要看清那些美麗的誘惑。31、激情，這是鼓滿船帆的風。風有時會把船帆吹斷；但沒有風，帆船就不能航行。32、滴水穿石不是靠力，而是因為不舍晝夜。33、忍別人所不能忍的痛，吃別人所別人所不能吃的苦，是為了收獲得不到的收獲。34、時間是個常數，但也是個變數。勤奮的人無窮多，懶惰的人無窮少?！謬?5、不同的信念，決定不同的命運！36、只有你學會把自己已有的成績都歸零，才能騰出空間去接納更多的新東西，如此才能使自己不斷的超越自己。37、突破心理障礙，才能超越自己。38、人不怕走在黑夜里，就怕心中沒有陽光。9、過錯是暫時的遺憾，而錯過則是永遠的遺憾！10、人生是個圓，有的人走了一輩子也沒有走出命運畫出的圓圈，其實，圓上的每一個點都有一條騰飛的切線。11、沒有壓力的生活就會空虛；沒有壓力的青春就會枯萎；沒有壓力的生命就會黯淡。12、我以為挫折、磨難是鍛煉意志、增強能力的好機會。——鄒韜奮13、你不能左右天氣，但可以改變心情。你不能改變容貌，但可以掌握自己。你不能預見明天，但可以珍惜今天。14、我們總是對陌生人太客氣，而對親密的人太苛刻。39、生命里最重要的事情是要有個遠大的目標，并借助才能與堅毅來完成它?！璧?0、工作中，你要把每一件小事都和遠大的固定的目標結合起來。41、大部分人往往對已經失去的機遇捶胸頓足，卻對眼前的機遇熟視無睹20、對所學知識內容的興趣可能成為學習動機?！澘品?/p>

21、游手好閑地學習，并不比學習游手好閑好?！s翰·貝勒斯

22、讀史使人明智，讀詩使人靈秀，數學使人周密，自然哲學使人精邃，倫理學使人莊重，邏輯學使人善辯?！喔?/p>

23、我們在我們的勞動過程中學習思考，勞動的結果，我們認識了世界的奧妙，于是我們就真正來改變生活了?！郀柣?/p>

24、我們要振作精神，下苦功學習。下苦功，三個字，一個叫下，一個叫苦，一個叫功，一定要振作精神，下苦功?！珴蓶|

25、我學習了一生，現在我還在學習，而將來，只要我還有精力，我還要學習下去?！獎e林斯基1、機遇對于有準備的頭腦有特別的親和力。46無菌區(qū)與設備清洗消毒滅菌的設計及驗證錢應璞2010年5月20日濟南2022/12/1747無菌區(qū)與設備清洗消毒滅菌的設計及驗證2022/12/131無菌藥品工藝再驗證的主要內容驗證類型驗證內容再驗證周期藥監(jiān)部門或法規(guī)要求的強制性無菌操作的培養(yǎng)基灌裝試驗至少二次/年計量器具的強制檢定一次/年設備的清洗驗證，高效過濾器檢漏一次/年發(fā)生變更時的“改變”性工藝參數的改變或工藝路線的變更原料、包裝材料質量標準的改變或產品包裝形式設備的改變生產處方的修改或批量級的改變常規(guī)檢測表時系統(tǒng)存在著影響質量的變遷跡象每隔一段時間進行的“定期”關鍵潔凈區(qū)的空調凈化系統(tǒng)與工藝用水系統(tǒng)二次/年無菌藥品生產過程中使用的滅菌設備二次/年2022/12/1748無菌藥品工藝再驗證的主要內容驗證類型驗證內容再驗證周期藥監(jiān)部設備、器具清洗消毒滅菌目的確立可靠的清潔方法和程序，以防止藥品在生產過程中受到污染和交叉污染。原則設備的設計、選型、安裝、改造和維護必須符合預定用途，應盡可能降低發(fā)生污染、交叉污染、混淆和差錯，便于操作、清潔、維護，以及必要時進行的消毒或滅菌。要求規(guī)定具體而完整的清潔方法、清潔用設備或工具、清潔劑的名稱和配制方法、保護已清潔設備在使用前免受污染的方法、已清潔設備最長的保存時限、使操作者能以可重現的、有效的方式對各類設備進行清潔。2022/12/1749設備、器具清洗消毒滅菌目的2022/12/133設備、器具清洗消毒滅菌對設備消毒或滅菌，應規(guī)定消毒或滅菌的具體方法、消毒劑的名稱和配制方法；設備生產結束至清潔前所允許的最長間隔時限；范圍通常只有接觸產品設備表面的清潔規(guī)程需要驗證。非接觸產品部分也應考慮；驗證的階段選定清潔方法，制定清潔規(guī)程（開發(fā)階段）；制定驗證方案（參照物、取樣點、合格標準、取樣方法和檢驗方法）；實施驗證，獲取數據，評價并提出結論；監(jiān)控及再驗證。2022/12/1750設備、器具清洗消毒滅菌對設備消毒或滅菌，應規(guī)定消毒或滅菌的具歐洲清潔與清潔驗證的有關法規(guī)介紹生產設備的設計應使其能被易于并徹底清潔，其清潔應該根據詳細與書面化的程序進行，并只能儲藏在清潔與干燥的環(huán)境中。清洗與清潔設備的選擇與使用不應使其成為污染的來源；應進行清潔驗證，以確認清潔程序的有效性。在設定產物殘余物，清潔劑與微生物污染的限定值時，其合理性應科學地基于所涉及的各種材料的特性；使用對于檢測殘余物或污染物具有敏感性的，經驗證的分析方法，每一分析方法的檢測范圍應足以每感地檢測到達到一定水平的殘余物或污染。2022/12/1751歐洲清潔與清潔驗證的有關法規(guī)介紹生產設備的設計應使其能被易于設備、器具清洗清潔從設備表面去除可見及不可見物質的過程：活性成份及活性物質的衍生物；清潔劑（來自清潔過程）；微生物（來自物料污染、清潔污染）；消毒劑；潤滑劑；環(huán)境污染物質；設備運行過程中釋放出的異物；沖洗水中殘留的異物。清潔驗證去除上述污染物，防止可能發(fā)生的污染和交叉污染（混淆）2022/12/1752設備、器具清洗清潔2022/12/136設備、器具清洗清潔方法分類手工清洗由操作人員拆、擦洗或用高壓水槍清洗；機械磨擦，效果較好，但重現性差；自動清洗由自動控制進行沖洗的清洗，有的帶干燥功能；溶解、沖擊法去污，有些部位不容易清潔，但重現性好；半自動清洗以上兩種方式相結合的清洗過程；2022/12/1753設備、器具清洗清潔方法分類2022/12/137設備、器具清洗清洗原理的基礎溶劑移動到表面擴散與對流溶劑和塵垢“反應”反應產物通過擴散與對流進行遠離表面的移動；清洗的程序拆卸方法預洗/檢查要求清洗（清潔劑、方法、時間、溫度范圍）淋洗（用符合藥典標準的水、固定的方法和固定的時間）裝配：按說明書、示意圖要求裝配）2022/12/1754設備、器具清洗清洗原理的基礎2022/12/138設備、器具清洗干燥：明確方式和參數檢查；符合設定標準，包括目檢貯存：保持設備及系統(tǒng)完好狀態(tài)的方法，如倒置、放在層流罩下、在線滅菌、規(guī)定存放時間；在線清洗系統(tǒng)的設計必須滿足特定工藝的清潔要求；在線清洗溶液與所有被污染的表面接觸并持續(xù)補充溶關鍵變量的自動控制。濃度（在線清洗溶液的）；溫度；時間（在線清洗溶液暴露的）；壓力；2022/12/1755設備、器具清洗干燥：明確方式和參數2022/12/139器具清洗與滅菌工藝的設計思路器具清洗的關鍵是應具有“可重復性”，為得到可重現的和一致的結果和清洗結果方便列入文件，GMP要求在生產過程中所有接觸藥品的部件，如玻璃器皿，容器，桶，管道，灌裝部件等，都必須采用“可重復”，“能被記錄”的清潔方式來去除殘留雜質。人工清洗無法驗證和重復，所有直接或間接接觸藥液的容器具均采用CIP或器具清洗機清洗，以避免難以驗證的手動清洗；經過初步手工清洗后，放入器具清洗機進行清洗。之后進行裝配，所有器具有滅菌前，都應使用適用于蒸汽和環(huán)氧乙烷兩種方法滅菌的呼吸材料進行適當無菌包裝。再進入濕熱滅菌柜滅菌。對需要傳入A/B級使用器具也必須進行雙層包裝。2022/12/1756器具清洗與滅菌工藝的設計思路器具清洗的關鍵是應具有“可重復性典型工藝系統(tǒng)的清洗清潔方法在線清洗（CIP）-設備處于原位，通?？勺詣涌刂埔部砂胱詣?，例如多個容器的洗滌采用洗滌CIP機組清洗；離線清洗-小型設備和工器具適合。取清洗殘余水樣確認參考清洗驗證標準殘留物小于等于10ppmpH值：與原來注射用水一致；雜菌小于25cfn/ml;內毒素小于0.25EU/ml；2022/12/1757典型工藝系統(tǒng)的清洗清潔方法2022/12/1311工藝系統(tǒng)清洗確認清潔驗證中常見參考方法加參考品法加入容易測試（化合物）成分的方法，經清潔后測殘留；限度試驗法在注射用水中加入理論計算量的組分，使之剛好是殘留控制標準，然后將淋洗水樣用同一方法進行比較；參照物增量法將某個要控制組分的量加大，解決量小無法測試的問題，再測清潔后的殘留；濃縮法將樣品濃縮，測試后計算。2022/12/1758工藝系統(tǒng)清洗確認清潔驗證中常見參考方法2022/12/131工藝系統(tǒng)清洗確認最難清洗產品活性物質的溶解度（水/清洗劑）；劑型；活性物質在產品中的濃度；輔料的物理及化學性質；一些特殊的工藝過程（加熱、勻化、混合等）；清洗工的經驗。2022/12/1759工藝系統(tǒng)清洗確認最難清洗產品2022/12/1313工藝系統(tǒng)清洗確認確定最難清潔部位和取樣點死角清潔劑不易接觸到的部位；壓力小、流速很低的部位；容易吸附殘留物的部位；殘留物限度的確定最小批量；最具有活性的產品；最大日服用劑量。2022/12/1760工藝系統(tǒng)清洗確認確定最難清潔部位和取樣點2022/12/13工藝系統(tǒng)清洗確認清洗程度的檢測清潔后設備的目檢化學檢驗棉簽擦拭取樣，確定殘留在設備表面活性物質的濃度；沖洗溶劑取樣，確定殘留在設備表面活性物質的濃度，適用于棉簽無法取樣的部件；最終沖洗水取樣，確定殘留在設備表面所有水溶性物質及清潔劑的殘留量。微生物檢驗棉簽取樣檢驗最終沖洗水取樣檢驗總有機碳（TOC）測試測量擦洗或沖洗后的水樣中總有機碳的量。2022/12/1761工藝系統(tǒng)清洗確認清洗程度的檢測2022/12/1315工藝系統(tǒng)清洗確認分析方法確認分析方法：能夠檢測出殘留物或污染物。特定的物質可以檢出；在允許的清潔限度內可以檢出（靈敏度）靈敏度和特殊性HPLC、GC、光譜法、TOC；驗證分析方法應該包括：精密度、線性和選擇性；回收率；再現性；檢測限能夠檢測出已確定限度的殘留物/污染物。2022/12/1762工藝系統(tǒng)清洗確認分析方法2022/12/1316

消毒滅菌方法的設計與確認2022/12/1763

2022/12/1317藥品無菌性的形成原理無菌相關的術語無菌保證值（SAL）：指經滅菌后非無菌品的概率。最終滅菌產品非無菌呂的概率不超過百萬分之一，即SAL≤10-6；非最終滅菌產品非無菌品的概率不超過千分之一，即SAL≤10-3

Z值：當某種微生物的D值下降（或上升）一個對數單位時，其溫度應升高（或降低）度數。FT：指T攝氏度下的滅菌時間；F0：指標準滅菌時間。將121℃作為標準滅菌溫度，當Z設定為10℃時，滅菌程序賦予被滅菌品121℃下的等效滅菌時間；2022/12/1764藥品無菌性的形成原理無菌相關的術語2022/12/1318藥品無菌性的形成原理D值-微生物耐熱參數

在特定滅菌條件下，使微生物殺滅90%（下降一個對數單位）所需的分鐘數。影響D值的因素：使用的微生物；微生物貯存條件；復蘇和培養(yǎng)條件；滅菌柜工作時間；起始溫度；培養(yǎng)基懸置及復蘇類型；滅菌后段持續(xù)時間及溫度；蒸汽飽和度；包裝情況。2022/12/1765藥品無菌性的形成原理D值-微生物耐熱參數2022/12/13注射劑無菌性的形成原理注射劑無菌性的形成的三種主要工藝濕熱滅菌工藝；干熱滅菌工藝；除菌過濾工藝。2022/12/1766注射劑無菌性的形成原理注射劑無菌性的形成的三種主要工藝202注射劑的無菌標準最終滅菌產品普遍接受的無菌標準滅菌后，最終滅菌注射劑或其它關鍵設備微生物存活的概率達到10-6，即一百萬個已滅菌物品或制劑中存活的微生物低于一個。非最終滅菌產品的無菌標準產品中微生物存活的概率達到10-3，即保證1000個制劑中存活的微生物數低于一個。2022/12/1767注射劑的無菌標準最終滅菌產品普遍接受的無菌標準2022/12濕熱滅菌工藝濕熱滅菌工藝的用途藥品小容量注射劑玻璃瓶；塑料瓶；軟包裝材料。器材：過濾器；膠塞；工器具；配料罐、接收罐；藥液、工藝用水管道；灌裝用具；無菌工作服、口罩、手套。2022/12/1768濕熱滅菌工藝濕熱滅菌工藝的用途2022/12/1322干熱滅菌工藝干熱滅菌工藝的用途金屬、玻璃制品/工具和干粉的滅菌與除熱原干熱滅菌參照溫度干熱滅菌中孢子的D值是變化的；干熱滅菌溫度分布均一性及穿透性均不如濕熱滅菌；國際上以121℃為標準滅菌溫度，相應滅菌時間以F0表示；干熱滅菌一般取170℃為標準參照溫度，相應滅菌時間以FH表示；中國藥典中規(guī)定的是：160-170℃2小時以上；170-180℃1小時以上；250℃45分鐘以上。2022/12/1769干熱滅菌工藝干熱滅菌工藝的用途2022/12/1323干熱滅菌工藝干熱滅菌與去熱原的關系去熱原工藝條件比孢子殺滅程序要苛刻得多，通常相當于標準干熱滅菌進行FH的數十倍；如果干熱法去熱原工藝能使細菌內毒素下降3個對數單位，就不必再進行微生物的生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗。2022/12/1770干熱滅菌工藝干熱滅菌與去熱原的關系2022/12/1324潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌2022/12/17712022/12/1325潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控無菌藥品中污染菌的來源生產環(huán)境；操作人員；原料及內包裝材料；工藝用水、氮氣、壓縮空氣；生產設備：藥液（粉）接收罐、灌藥機、工器具；生產區(qū)域使用的清潔工具及消毒劑等。以微生物鑒別系統(tǒng)為調查手段API系統(tǒng)（AnalyticalProfileIndex);FDA對菌的種屬比細菌的數量更重視；要求：希望能夠最大限度的把被污染的藥品檢查出來；要盡量克服無菌檢查的局限性。2022/12/1772潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控無菌藥品中污染菌的來源2潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈室內人員管理與微生物監(jiān)控人員行為的污染和控制措施人眼可見最小顆粒為30微米；坐著不動能產生100000個顆粒；行走能產生5000000個顆粒；跑動能產生15000000個顆粒；微生物在空氣和體內外表面；包括細菌、病毒、霉菌和酵母菌；人體攜帶的微生物數量驚人，且根據個人衛(wèi)生習慣的不同因人而異。2022/12/1773潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈室內人員管理與微生物潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控管理人員應具有能務，資格和經驗；組織機構完善、關鍵崗位人員配備合理；生產，工程，維護，保潔等部門所有員工的培訓；潔凈廠房；衛(wèi)生學；微生物學；潔凈/無菌區(qū)域內行為的培訓。制訂健康規(guī)定，行為規(guī)范，服裝規(guī)則；控制人員到最小量，出入控制。2022/12/1774潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控管理人員應具有能務，資格潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈/無菌區(qū)域消毒滅菌消毒對付微生物的一種手段；其目的是消除其活性或者破壞微生物；在地上、墻上、玻璃上、固定管路的外部、貯罐外部、盥洗盆、人員的手表面噴灑消毒劑；注意：消毒可以使孢子、微生物產生耐受性；滅菌：以完全殺滅微生物（包括芽孢和頑固的有機體）為目的；消滅一切有機體以及完全鏟除其恢復活性能力的手段。2022/12/1775潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈/無菌區(qū)域消毒滅菌2潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑定義能消除以細胞繁殖形態(tài)出現微生物污染的化學物質。理想的消毒劑抗菌譜廣；低毒或無毒；無腐蝕性，無污染；有洗滌作用；穩(wěn)定性好；作用迅速；作用持久；價格低廉；2022/12/1776潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑定義2022/12/1330潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑驗證通過特定的微生物與某消毒劑在規(guī)定的使用濃度下，接觸規(guī)定的時間后，對微生物進行培養(yǎng)、計數，考察消毒劑的消毒/殺菌效果。2022/12/1777潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑驗證2022/12/1331潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑的使用無菌區(qū)域使用的消毒劑須通過0.22微米的無菌過濾；為克服耐藥性，應輪流使用不同種類的消毒劑；使用消毒劑消毒后，只能用消毒或滅菌的清潔工具；使用消毒劑的人員要接受相關的培訓；消毒劑應有專門的進入各生產區(qū)域的途徑；異常情況的處理方案；帶菌實驗器具和耗材要滅菌處理。2022/12/1778潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑的使用2022/12/1332潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌影響消毒劑使用的因素菌種；培養(yǎng)基組分；接觸時間；中和劑的種類；表面張力；樣品量；測試/驗證方法；接種；培養(yǎng)時間/溫度；pH值；滲透壓；回收率；培養(yǎng)基性質。2022/12/1779潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌影響消毒劑使用的因素2022/12/潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈室常用消毒劑醇類：醇類消毒劑使微生物的蛋白質變性，在沒有水的情形下，蛋白質不易被變性，在乙醇中加入一些水會使殺菌效力更佳。酚類化合物：廣譜抑菌，對革蘭氏陽笥細菌和革蘭氏陰性細菌以及真菌均有殺傷作用。酚類消毒劑適宜用水溶液或含乙醇的水溶液配制。有效濃度為400ppm到1300ppm之間。季銨鹽類化合物：季銨鹽類化合物在酸性或堿性環(huán)境均能殺死細菌或真菌，在堿性環(huán)境中的殺菌效力稍強一些。如新潔爾滅溶液（0.05%-0.1%的苯扎溴銨溶液）。液體滅菌劑和殺孢子劑：次氯酸鈉、二氧化氯、過氧化氫、戊二醛、甲醛和過氧乙酸等；消毒劑定期交替使用不同消毒劑是為了防止環(huán)境中微生物對同一種消毒劑產生抗性影響實際的消毒效果。2022/12/1780潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌與微生物監(jiān)控潔凈室常用消毒劑2022潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌無菌生產場地常用化學熏蒸對區(qū)域進行滅菌，亦稱大消毒；滅菌介質甲醛氣體/戊二醛；石碳酸與乳酸混合氣體（1：1）氣化雙氧水；臭氧、紫外線；滅菌方法對室內換氣速度的影響氣體熏蒸的廢氣排除速度與熏蒸方法有關；氣體熏蒸的廢氣排除與中和處理與否有關；與HVAC系統(tǒng)中的排風與新風系統(tǒng)設計有關，通常希望新風在排廢氣時的進風量與回風量相等。與自動控制水平有關。通過化學氣體殘留測試確認系統(tǒng)是否滿足工藝要求的滅菌周期。甲醛消毒與排氣至人員可以進入周期為24小時。2022/12/1781潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌無菌生產場地常用化學熏蒸對區(qū)域進行滅潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌氣體滅菌的細菌挑戰(zhàn)試驗方法：每個試驗位置的配養(yǎng)皿內有含107個枯草桿菌的試紙2張；設定滅菌程序熏蒸后取一張試紙作菌檢（普通肉湯配養(yǎng)基37℃，72小時），如果無菌則試驗完成，但屬實驗不成功。須減少藥量重新熏蒸直至為陽性，即有菌有各另一張試紙作含菌數試驗；合格標準：滅菌后枯草桿菌殘留104為合格（即下降3個對數單位）；熏蒸無菌后室內殘留量的測試。應有殘余濃度小于1-2ppm。2022/12/1782潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌氣體滅菌的細菌挑戰(zhàn)試驗2022/12潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌甲醛或殺孢子空間滅菌效果驗證實例通過用生物指示劑進行細菌挑戰(zhàn)性試驗，消毒劑滅菌前后表面微生物檢測，來檢查其的滅菌效果；接受標準：生產指示劑挑戰(zhàn)性試驗接受標準：含菌量為105-106和103的菌條消毒后，無菌條件下放入配套增菌液中于37℃培養(yǎng)72小時，陽性對照為加入未消毒菌條的增菌液，陰性對照為未加指未劑的增菌液；空間熏蒸消毒的方法：在無菌區(qū)有一套獨立的熏蒸消毒系統(tǒng)，使消毒劑在各房間內形式霧狀水氣滲透到潔凈區(qū)的每一角落，通過驗證確定消毒的劑量、空間的溫濕度、熏蒸時間和霧化程序。2022/12/1783潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌甲醛或殺孢子空間滅菌效果驗證實例20潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑用量：37-40%甲醛：12-15ml/m3，中和用25-28%氨水（12-15ml/m3）；殺孢子劑為22%的過氧化氫及4.5%的過氧乙酸，60ml/m3，5%的稀釋液（也可根據潔凈廠房設施及地面抗氧化的能力適當提高濃度）；空間熏蒸消毒的條件：調整萬級無菌區(qū)域空調為消毒狀態(tài)；甲醛：設定無菌區(qū)域溫度為35-40℃，濕度為65-75%；熏蒸4小時；殺孢子劑：設定無菌區(qū)域溫度為20-25℃，濕度為40-50%，熏蒸2小時。2022/12/1784潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌消毒劑用量：2022/12/1338潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌測試方法生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗：確定生物指示劑的擺放位置，放在生產重點區(qū)域，及污染高風險區(qū)域，避免回風口。消毒前將生物指示劑放入潔凈區(qū)的各個測試點，使菌條暴露在空氣下，消毒結束后待潔凈區(qū)無刺激性氣味后進入潔凈區(qū)收回菌條，無菌條件下依次將菌條放入配套增菌液中，在37培養(yǎng)24小時、48小時、72小時，記錄結果。同時做陽性對照和陰性對照；表面微生物測試：檢測人員分別在消毒前后進入潔凈區(qū)，對地面、墻面、窗臺設備等進行表面微生物檢測，比較結果，驗證甲醛或殺孢子劑的滅菌效果。2022/12/1785潔凈/無菌環(huán)境的消毒滅菌測試方法2022/12/1339潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控2022/12/17862022/12/1340潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控無菌設施環(huán)境監(jiān)控程序懸浮粒子監(jiān)測浮游菌監(jiān)測表面活菌監(jiān)測人員攜帶的活菌監(jiān)測溫度和濕度監(jiān)控壓差監(jiān)控環(huán)境監(jiān)測的樣品表面樣品：從關鍵環(huán)境內部和外部通過擦拭和/或接觸皿收集取得?；罹?粒子：在關鍵區(qū)域內部和外部空氣中，通過被動或主動方法收集取得。人員監(jiān)測：從操作員頭部、肩膀、胸部和手部表面取得的樣品。2022/12/1787潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控無菌設施環(huán)境監(jiān)控程序2022/12潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控潔凈/無菌環(huán)境的微生物控制，主要使用傳統(tǒng)的沉降菌測試法和浮游菌采樣檢測法來判斷。浮游菌采樣儀工作原理抽真空，空氣進入；微生物與培養(yǎng)基撞擊后粘在培養(yǎng)基上面；取樣培養(yǎng)基，送檢；特點：采樣速度快，待機時間長；減少菌落的重疊；無需對結果進行校正；微生物還原率高；可根據需要設定取樣體積和延時時間。2022/12/1788潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控潔凈/無菌環(huán)境的微生物控制，主要使?jié)崈?無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控灌裝關鍵控制點要求連續(xù)檢測的空氣質量潔凈度浮游菌沉降菌2022/12/1789潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控灌裝關鍵控制點要求連續(xù)檢測的空氣質潔凈/無菌環(huán)境的微生物監(jiān)控監(jiān)控報警限度表示和糾偏限度標準對于微生物測試的取樣頻次，如果出現下列情況應考慮修改，在