臨床微生物標(biāo)本采集和運送規(guī)范課件

臨床微生物標(biāo)本采集和運送規(guī)范劉云洪1臨床微生物標(biāo)本采集和運送規(guī)范劉云洪1主要內(nèi)容一、微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則二、臨床各類標(biāo)本的采集、運送及保存規(guī)范三、微生物室對微生物標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)與處理方法2主要內(nèi)容一、微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則2一、微生物檢查的標(biāo)本采集、

運送原則3一、微生物檢查的標(biāo)本采集、

運送原則3標(biāo)本采集、運送規(guī)范化的意義正確的標(biāo)本采集、運送、保存和處理對于提高培養(yǎng)結(jié)果的陽性率以及保證微生物室的工作質(zhì)量至關(guān)重要。正確的標(biāo)本采集和運送是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！不規(guī)范的標(biāo)本采集、保存和運送是導(dǎo)致細(xì)菌培養(yǎng)陽性率低、臨床符合率差的重要原因。規(guī)范的標(biāo)本采集和運送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的關(guān)鍵！4標(biāo)本采集、運送規(guī)范化的意義正確的標(biāo)本采集、運送、保存和處理對微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則

1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查。2.盡量在抗菌藥物使用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗菌藥物，應(yīng)于下次抗菌藥物應(yīng)用前采集。應(yīng)在感染的急性期或傷口局部治療前采集標(biāo)本。3.選擇正確的解剖部位，并以適當(dāng)?shù)募夹g(shù)、方法與容器收集足量的標(biāo)本。4.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，將污染情形降至最低。5.收集真正感染病灶處的標(biāo)本，且避免鄰近區(qū)域微生物的污染。6.采用無菌衛(wèi)材收集標(biāo)本，并裝于堅固且密合性佳的無菌容器中。容器須滅菌處理，防止?jié)B漏，但不得使用消毒劑。標(biāo)本中不可添加防腐劑。7.采樣后立即送檢，最好在2h內(nèi)。如不能及時送檢，應(yīng)將標(biāo)本置于適當(dāng)?shù)膬Υ姝h(huán)境待送，但存放一般不能超過24h。5微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則1.及時采集微生物標(biāo)本作病原微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則8.盡量不要以棉花拭子收集標(biāo)本。以棉拭子采集的標(biāo)本如咽拭子、傷口拭子等宜插入恰當(dāng)?shù)倪\送培養(yǎng)基送檢。淋球菌培養(yǎng)等標(biāo)本應(yīng)使用專用的纖維拭子，不得使用一般棉拭子。9.混有正常菌群的標(biāo)本如痰、尿液等，不可置肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢。10.每份標(biāo)本都應(yīng)貼上標(biāo)簽并標(biāo)明必要信息，在檢驗申請單上填寫足夠的有關(guān)臨床資料。包括病人情況（病區(qū)、病人姓名、住院號）和標(biāo)本情況（標(biāo)本類型、檢驗?zāi)康?、采集部位、采集方法、采集時間等）11.同一天同一檢測目的的標(biāo)本（血液標(biāo)本除外）一般只需檢測一次（份）。涂片檢查最好和細(xì)菌培養(yǎng)同時做！6微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則8.盡量不要以棉花拭子收集標(biāo)本二、臨床各類標(biāo)本的采集、運送及保存規(guī)范7二、臨床各類標(biāo)本的采集、運送及保存規(guī)范7血培養(yǎng)的采集、運送規(guī)范采集程序:皮膚消毒程序：推薦三步法（酒精→碘伏→酒精）培養(yǎng)瓶消毒程序：75%酒精消毒靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序采血量：成人8-10ml，兒童1-3ml。骨髓采集量1-2ml采血時間和數(shù)量:采血時間:在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前0.5-1h，或于寒戰(zhàn)或發(fā)燒后1h內(nèi)采血。采血數(shù)量：盡量在使用抗菌藥之前（感染性心內(nèi)膜炎除外），在24h內(nèi)采集2-3份血培養(yǎng)。采血間隔：在采集血培養(yǎng)后的2-5天內(nèi)不需要再重復(fù)采血（除外心內(nèi)膜炎和導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥）標(biāo)本運送：立即送檢，室溫保存，切勿冷藏。8血培養(yǎng)的采集、運送規(guī)范采集程序:8血培養(yǎng)的采集規(guī)范皮膚消毒程序（三步法）:①70％酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上②用一根蘸有碘酊或碘伏的棉簽消毒皮膚（1％-2％碘酊作用30s或10％碘伏60s），從穿刺點向外以1.5cm-2cm直徑畫圈消毒。③70％酒精脫碘：用70％酒精涂去碘液，待酒精干燥后采血。培養(yǎng)瓶消毒程序：打開塑料瓶蓋用70%酒精（不能用碘酒）消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60s，注入血液之前用無菌紗布或棉簽擦干表面殘余酒精。靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序：可戴乳膠手套固定靜脈（不可接觸穿刺點），用注射器無菌穿刺取血后，直接注入血培養(yǎng)瓶中（勿換針頭），并輕輕顛倒混勻數(shù)次以防血液凝固。立即送檢，切勿冷藏！

注意：從靜脈取血；不要與血氣和血沉標(biāo)本一起采血；不推薦血入瓶前換針頭；不推薦靜脈血直接入瓶；不宜在靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口采血（除非懷疑導(dǎo)管相關(guān)性血流感染）。9血培養(yǎng)的采集規(guī)范皮膚消毒程序（三步法）:①70％酒精擦拭靜脈血培養(yǎng)的采血量成人采血量5-10ml（最好8-10ml），兒童采血量1-3ml（不超過總血量的1％）。血液和肉湯之比為1：5~1：10。骨髓采集量1-2ml。成人菌血癥血液含菌量很低（通常＜1CFU/ml）,因此增加送檢血液量可以提升檢出率;而兒童菌血癥血液含菌量常超過100CFU/ml，是成人10-100倍，因此采集血量少于成人不會影響培養(yǎng)陽性率。1CFU=1百萬個細(xì)菌。10血培養(yǎng)的采血量成人采血量5-10ml（最好8-10ml），兒血培養(yǎng)的采集時間、數(shù)量和間隔采集時間：據(jù)研究表明：細(xì)菌通常在病人寒戰(zhàn)和發(fā)燒前1小時進(jìn)入血流，因此規(guī)范規(guī)定在病人發(fā)熱高峰前1小時抽血。考慮到方便操作，建議常規(guī)血培養(yǎng)應(yīng)盡量在使用抗菌藥物前，于病人寒戰(zhàn)或發(fā)熱開始時30-60分鐘內(nèi)，同時于不同部位采集2-3份血培養(yǎng)，除非懷疑有感染性心內(nèi)膜炎或其他靜脈內(nèi)感染，才可分開時段采集。采集數(shù)量：在24h內(nèi)采集2～3份血培養(yǎng)(一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單份血培養(yǎng))。入院前兩周內(nèi)接受抗菌藥物治療的患者,連續(xù)3d,每天采集2份。采血間隔：采血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，不需要重復(fù)采血培養(yǎng)（因為治療后的2至5天內(nèi)血液中的感染細(xì)菌不會馬上消失）。11血培養(yǎng)的采集時間、數(shù)量和間隔采集時間：據(jù)研究表明：細(xì)菌通常在特殊的全身和局部感染患者采血建議可疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎,應(yīng)在不同部位采集2～3份血標(biāo)本。不明原因發(fā)熱,如隱性膿腫,傷寒熱和波浪熱,先采集2～3份血標(biāo)本,24～36h后估計體溫升高之前(通常在下午)再采集2份以上。可疑菌血癥或真菌菌血癥,但血培養(yǎng)持續(xù)陰性,應(yīng)改變血培養(yǎng)方法,以獲得罕見的或苛養(yǎng)的微生物?？梢杉?xì)菌性心內(nèi)膜炎,在1～2h內(nèi)采集3份血標(biāo)本,如果24h后陰性,再采集3份以上的血標(biāo)本。12特殊的全身和局部感染患者采血建議可疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌腦脊液標(biāo)本采集送檢規(guī)范采集時間：最好在抗菌藥物使用前采集。采集方法：通常用腰穿的方法采集腦脊液，整個過程需以最嚴(yán)格的無菌操作技術(shù)進(jìn)行。采集量應(yīng)≥2ml。標(biāo)本運送：抽取出的腦脊髓液分置于無菌試管內(nèi)，迅速送至細(xì)微生物室。如不能立即送檢，將標(biāo)本保存于35℃溫箱或室溫，不可放置于冰箱。13腦脊液標(biāo)本采集送檢規(guī)范采集時間：最好在抗菌藥物使用前采集。1其他無菌體液的采集運送規(guī)范無菌采集是培養(yǎng)成功的首要因素。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢（腦膜炎球菌有自溶酶，離體后回迅速自溶。肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌離體后極易死亡。）。延遲送檢時一定不能放冰箱，肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等對溫度敏感的細(xì)菌在冰箱會很快死亡。各種無菌體液標(biāo)本，如胸腹水、漿膜腔積液及各種穿刺液等亦可注入血培養(yǎng)瓶以提高培養(yǎng)的陽性率。14其他無菌體液的采集運送規(guī)范無菌采集是培養(yǎng)成功的首要因素。14尿液標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：盡量在抗菌藥物使用前（多數(shù)藥物從尿道排泄）。采集方法：清潔中段尿法。采集中段尿時要先用肥皂清洗女性的外陰和男性的外生殖器包括包皮內(nèi)，然后用清水沖洗。把開始的尿液棄掉，然后取中段的尿液。標(biāo)本運送：留取尿液后2h內(nèi)送達(dá)實驗室，不能立即送檢者，可暫存4℃冰箱（不超過6h）。注意事項：長期留置導(dǎo)尿管的患者應(yīng)在更換新管時留取尿標(biāo)本。導(dǎo)尿留取尿液時，集尿袋內(nèi)的尿液和導(dǎo)尿管末端的尿液不能用于培養(yǎng)。15尿液標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：盡量在抗菌藥物使用前（多數(shù)藥物

痰標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：盡量在使用抗菌藥物之前采集方法：自然咳痰：以晨痰為佳?？忍登皯?yīng)清潔口腔如刷牙和漱口，然后用力咳出呼吸道深部痰，直接吐入于無菌容器中。痰少或無痰者可用3-5%NaCl水溶液5ml霧化吸入5min導(dǎo)痰（氣道高反應(yīng)如哮喘病人不宜采用此法）。對于難于自然咳痰者可用微生物室提供的一次性無菌吸痰杯抽取氣管深部分泌物。小兒取痰法最好用微生物實驗室提供的一次性無菌吸痰杯抽取氣管深部分泌物。采集數(shù)量：對于細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2～3天。不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變。標(biāo)本運送：標(biāo)本應(yīng)盡快送檢（1-2h內(nèi)），如不能及時送檢，室溫保存≤2h，4℃冰箱保存≤24h。16痰標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：盡量在使用抗菌藥物之前16生殖道標(biāo)本采集送檢規(guī)范應(yīng)由臨床醫(yī)師采集，用無菌棉拭子采集。淋球菌檢查時，不論男女尿道及子宮頸均需用拭子插入尿道及子宮頸3cm深取樣送檢，要避免受陰道分泌物污染。若懷疑年幼女童有淋病性陰道炎時，則標(biāo)本由陰道外圍部位取得。男性懷疑有急性淋病時，則由尿道取分泌物標(biāo)本作涂片及培養(yǎng)，若懷疑有慢性淋病、前列腺炎、精囊炎，標(biāo)本可由醫(yī)師采集前列腺或精囊液。標(biāo)本采集后立即送檢，禁止冷藏！17生殖道標(biāo)本采集送檢規(guī)范應(yīng)由臨床醫(yī)師采集，用無菌棉拭子采集。淋糞便標(biāo)本采集運送規(guī)范

采集時間：腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采集；沙門菌感染、腸熱癥應(yīng)在第2周或第3周采集。采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有膿血和黏液的部位的糞便2-3克，（如液狀糞便取絮狀物1-3ml）盛于無菌的、密封的、不吸水的容器內(nèi)送檢；對不易獲得糞便患者及幼兒，可用直腸拭子采集。標(biāo)本應(yīng)盡快送檢，不能及時送檢的標(biāo)本，室溫保存≤2h懷疑沙門菌、志賀菌以外的細(xì)菌引起腹瀉時如大腸埃希菌0157:H7的病例，送檢前臨床醫(yī)生須通知實驗室，并于檢驗單上特別注明，以便提高此菌的分離率。18糞便標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采眼、耳、鼻、喉標(biāo)本

采集運送規(guī)范眼、耳、鼻、喉標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，防止干燥，禁止冷藏。應(yīng)注明具體標(biāo)本來源如眼標(biāo)本注明是眼瞼、結(jié)膜還是角膜，并注明左眼還是右眼。19眼、耳、鼻、喉標(biāo)本

采集運送規(guī)范眼、耳、鼻、喉標(biāo)本采集后應(yīng)立膿液或傷口分泌物標(biāo)本

采集運送規(guī)范采集方法：閉鎖膿腫：一般用穿刺或手術(shù)引流的方法采集，不能用拭子。消毒覆于膿腫表面的皮膚，用注射器將膿腫內(nèi)容物吸出。然后切開膿腫、引流，取部分膿腫壁送檢。開放病灶和膿腫：用無菌鹽水擦去表面滲出物，用蘸有無菌生理鹽水的拭子采集潰瘍基底部或邊緣部的標(biāo)本，置于無菌管中送檢。燒傷傷口：清創(chuàng)，出現(xiàn)滲出物后用拭子用力采集病灶基底部或邊緣的標(biāo)本。也可送組織標(biāo)本。膿皰或水皰：酒精消毒使之干燥，對于患兒用23號針頭挑破膿皰，拭子采集膿皰液和基底部標(biāo)本。20膿液或傷口分泌物標(biāo)本

采集運送規(guī)范采集方法：20膿液或傷口分泌物標(biāo)本

采集運送規(guī)范注意事項迅速送往實驗室，1小時內(nèi)不能培養(yǎng)應(yīng)將標(biāo)本冷藏。皮膚消毒對培養(yǎng)結(jié)果至關(guān)重要。不要僅送檢膿液。膿液不能代表傷口特點，應(yīng)在病灶活動區(qū)域或基底部采集標(biāo)本。除非有滲出物，干燥、結(jié)痂傷口一般不做培養(yǎng)標(biāo)記：不要只寫“傷口”標(biāo)記標(biāo)本，應(yīng)有專門的描述和解剖來源。注明滲出液來自開放傷口還是閉合傷口。小兒要求：小兒感染常出現(xiàn)皮疹如水泡等，應(yīng)在這些地方仔細(xì)采集標(biāo)本培養(yǎng)以發(fā)現(xiàn)病原體。創(chuàng)傷標(biāo)本如沒有炎性細(xì)胞說明可能只是采集了表皮正常菌群，與疾病過程無關(guān)，應(yīng)重新采集。21膿液或傷口分泌物標(biāo)本

采集運送規(guī)范注意事項21標(biāo)本的儲存

標(biāo)本在尚未進(jìn)行檢驗或未能立即送檢時，必須儲存在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境下，以防止病原菌死亡，或因共生菌滋生過多，使得病原菌分離不出來，下表簡介各類標(biāo)本儲存的環(huán)境：

儲存環(huán)境標(biāo)本來源4℃冰箱痰、尿液、糞便、氣管沖洗物、導(dǎo)尿管、靜脈導(dǎo)管、膿液和傷口分泌物細(xì)菌或真菌培養(yǎng)；無菌體液（胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液、膽汁）真菌培養(yǎng)；支原體培養(yǎng)；衣原體檢查；血清學(xué)檢查（包括ASO、RF、肥達(dá)反應(yīng)）室溫（25℃）腦脊液、生殖道、眼、耳、鼻、喉、血培養(yǎng)、血管導(dǎo)管尖、活檢組織細(xì)菌或真菌培養(yǎng)；無菌體液（胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液、膽汁）細(xì)菌培養(yǎng)；厭氧菌培養(yǎng)；淋球菌培養(yǎng)標(biāo)本22標(biāo)本的儲存標(biāo)本在尚未進(jìn)行檢驗或未能立即送檢時，必須儲存三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的

標(biāo)準(zhǔn)與處理方法總的拒收標(biāo)準(zhǔn)申請錯誤：如糞便、咳出痰液、尿液、下生殖道標(biāo)本要求做厭氧培養(yǎng)，陰道分泌物要求做淋球菌涂片標(biāo)識錯誤：無標(biāo)簽或標(biāo)簽不完整，或標(biāo)本標(biāo)識與申請單標(biāo)識不一致；沒有標(biāo)出標(biāo)本采集時間及部位；沒有在申請單上注明標(biāo)本來源和送檢目的等送檢錯誤：送檢延誤。容器錯誤：沒有用無菌容器，容器破裂或滲漏標(biāo)本不符合要求雙份標(biāo)本（同一天兩份相同檢測的標(biāo)本，血液標(biāo)本除外）23三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的

標(biāo)準(zhǔn)與處理方法總的拒收標(biāo)準(zhǔn)23三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)與處理方法拒收標(biāo)準(zhǔn)

處理方式

申請單注明的標(biāo)本種類與送檢標(biāo)本不符

與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求審核并重送符合要求的標(biāo)本。申請單上填寫項目不全或與標(biāo)本的標(biāo)簽不符或容器上未貼標(biāo)簽與原送檢部門聯(lián)系，要求補充完整申請單或重貼標(biāo)簽或重送標(biāo)本。檢驗單上未注明樣本來源和培養(yǎng)項目或僅注明身體部位者（如胸、腿）

查詢申請醫(yī)師，補足標(biāo)本信息。僅有申請單無標(biāo)本或無菌容器內(nèi)無標(biāo)本與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標(biāo)本標(biāo)本外漏及明顯受污染（如開塞）與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，建議重送標(biāo)本。標(biāo)本收集不符合采集要求

退回申請單，及時通知臨床，告知正確收集方法，要求重送標(biāo)本樣本混入消毒液或防腐劑退回申請單，及時通知臨床，建議重送標(biāo)本。送檢延誤，超過要求送檢時限聯(lián)系送檢部門，退回申請單，要求重送標(biāo)本。24三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)與處理方法拒收標(biāo)準(zhǔn)處理方式三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)與處理方法拒絕標(biāo)準(zhǔn)處理方式標(biāo)本量過少或已明顯干燥與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標(biāo)本。申請項目不適合如血液培養(yǎng)同時要求涂片革蘭氏染色，肛門或直腸標(biāo)本請求做革蘭染色，以檢查淋球菌。

聯(lián)系申請醫(yī)師，建議刪去請求革蘭染色項目送檢容器不當(dāng)或破損滲漏與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標(biāo)本。穿刺液標(biāo)本嚴(yán)重凝固，無菌部位標(biāo)本（如腦脊液、膿、穿刺液、尿液等）為非無菌管采集。退回申請單，并注明標(biāo)本不當(dāng)，要求重送標(biāo)本。一支拭子同時做細(xì)菌、支原體、衣原體及真菌培養(yǎng)詢問醫(yī)師并補送標(biāo)本，如不能補送，則按醫(yī)師要求優(yōu)先次序處理同一天同一病人重復(fù)送多次同一檢測目的的相同樣本（血液標(biāo)本除外）一般只檢查一次即可，可與臨床醫(yī)生進(jìn)行協(xié)商。25三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)與處理方法拒絕標(biāo)準(zhǔn)處理方式標(biāo)微生物室項目檢驗周期表

序號檢驗項目標(biāo)本送達(dá)時限標(biāo)本接收至進(jìn)行檢驗時間檢驗的周期（標(biāo)本接收至報告發(fā)出時間）1肥達(dá)氏反應(yīng)無無上午送檢下午出下午送檢第二天下午出2普通細(xì)菌培養(yǎng)+藥敏（包括尿、膿液、分泌物、生殖道、等）2小時1小時陰性結(jié)果2天陽性結(jié)果隨時與醫(yī)生聯(lián)系，3天后出正式報告3普通細(xì)菌培養(yǎng)+藥敏（包括痰、糞便、鼻咽喉拭子等）2小時1小時陰性結(jié)果1天陽性結(jié)果隨時與醫(yī)生聯(lián)系，2天后出正式報告4血培養(yǎng)立即1小時陽性結(jié)果隨時電話與臨床醫(yī)生聯(lián)系，正式報告3天以上，陰性結(jié)果7天5漿膜腔積液、膽汁、眼部標(biāo)本、腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)15分鐘30分鐘陰性結(jié)果2天陽性結(jié)果隨時與醫(yī)生聯(lián)系，3天后出正式報告6真菌培養(yǎng)1小時2小時陽性結(jié)果隨時報告陰性結(jié)果7天7涂片找真菌、淋球菌等1小時2小時當(dāng)天下午8涂片找抗酸桿菌1小時2小時當(dāng)天下午26微生物室項目檢驗周期表序號檢驗項目標(biāo)本送達(dá)時限標(biāo)本接細(xì)菌培養(yǎng)報告單的解釋

1.我院對病原菌的藥物敏感試驗，是用紙片瓊脂擴散法（又稱Kirby-Bauer試驗）測定抑菌圈的大小，再根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)得出“敏感”“耐藥”“中介”的判斷，在化驗單上，分別標(biāo)注“S”“R”“I”。27細(xì)菌培養(yǎng)報告單的解釋1.我院對病原菌的藥物敏感試驗，是用紙2.為什么細(xì)菌藥敏的抗生素和別的醫(yī)院不一樣，而且還有很多其它抗生素沒有做藥敏試驗？答：(1)細(xì)菌藥敏的抗生素如何選擇：主要是根據(jù)本醫(yī)院擁有的抗生素情況、臨床使用抗生素的特點（比如兒童和成人的區(qū)別）以及CLSI標(biāo)準(zhǔn)等選擇，盡量選擇符合我們醫(yī)院實際情況的抗生素組合。(2)在整套藥敏試驗中，已經(jīng)包含了本醫(yī)院臨床上常見抗生素類別。每一類抗生素里所選擇的是具有標(biāo)志性的抗生素，它的結(jié)果可以“預(yù)報”同類其它抗生素。(3)我們盡量在每張報告單的評語欄里注明抗生素的“預(yù)報”情況以供參考。282.為什么細(xì)菌藥敏的抗生素和別的醫(yī)院不一樣，而且還有很多其它3.為什么有時出現(xiàn)細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果與臨床感染情況不符？答：主要有五種可能：(1)用藥后，細(xì)菌受到抑制，或假死，或死亡，或在抗生素作用下形成L型細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果無細(xì)菌生長，造成假陰性。(2)標(biāo)本在采樣時未按規(guī)范操作導(dǎo)致“標(biāo)本不合格”，以致檢出的病原菌，非患者感染的真正病原菌。(3)采樣或送檢或培養(yǎng)時，標(biāo)本受到污染，以致把污染菌當(dāng)成病原菌。(4)一些厭氧菌感染，我們做普通培養(yǎng)無細(xì)菌生長，但實際感染仍存在。(5)一些生長非常緩慢的細(xì)菌（如分枝桿菌）感染，我們做普通細(xì)菌培養(yǎng)，在兩天內(nèi)尚未形成肉眼可見菌落以致漏檢。293.為什么有時出現(xiàn)細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果與臨床感染情況不符？294.為什么有時藥敏結(jié)果與臨床用藥的療效不符？答：主要有三種可能：(1)體外藥敏試驗和體內(nèi)藥物療效確實有差異，因為體外與體內(nèi)的環(huán)境不同，有的細(xì)菌可以利用體內(nèi)的一些物質(zhì)生成抵抗抗生素的成分，能使抗生素失效，故存在一些體外敏感的抗生素，體內(nèi)卻耐藥。(2)由于采樣不當(dāng)或污染等等原因，使檢出的病原菌不正確，故藥敏結(jié)果全不對。具體說明見上。(3)用藥劑量不同：藥敏實驗的藥敏濃度與實際劑量有較大差異。304.為什么有時藥敏結(jié)果與臨床用藥的療效不符？30如對細(xì)菌培養(yǎng)及相關(guān)檢驗有任何疑問，歡迎與微生物實驗室聯(lián)系、交流，并請多提寶貴意見！31如對細(xì)菌培養(yǎng)及相關(guān)檢驗有任何疑問，歡迎3232臨床微生物標(biāo)本采集和運送規(guī)范劉云洪33臨床微生物標(biāo)本采集和運送規(guī)范劉云洪1主要內(nèi)容一、微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則二、臨床各類標(biāo)本的采集、運送及保存規(guī)范三、微生物室對微生物標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)與處理方法34主要內(nèi)容一、微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則2一、微生物檢查的標(biāo)本采集、

運送原則35一、微生物檢查的標(biāo)本采集、

運送原則3標(biāo)本采集、運送規(guī)范化的意義正確的標(biāo)本采集、運送、保存和處理對于提高培養(yǎng)結(jié)果的陽性率以及保證微生物室的工作質(zhì)量至關(guān)重要。正確的標(biāo)本采集和運送是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！不規(guī)范的標(biāo)本采集、保存和運送是導(dǎo)致細(xì)菌培養(yǎng)陽性率低、臨床符合率差的重要原因。規(guī)范的標(biāo)本采集和運送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的關(guān)鍵！36標(biāo)本采集、運送規(guī)范化的意義正確的標(biāo)本采集、運送、保存和處理對微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則

1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查。2.盡量在抗菌藥物使用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗菌藥物，應(yīng)于下次抗菌藥物應(yīng)用前采集。應(yīng)在感染的急性期或傷口局部治療前采集標(biāo)本。3.選擇正確的解剖部位，并以適當(dāng)?shù)募夹g(shù)、方法與容器收集足量的標(biāo)本。4.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，將污染情形降至最低。5.收集真正感染病灶處的標(biāo)本，且避免鄰近區(qū)域微生物的污染。6.采用無菌衛(wèi)材收集標(biāo)本，并裝于堅固且密合性佳的無菌容器中。容器須滅菌處理，防止?jié)B漏，但不得使用消毒劑。標(biāo)本中不可添加防腐劑。7.采樣后立即送檢，最好在2h內(nèi)。如不能及時送檢，應(yīng)將標(biāo)本置于適當(dāng)?shù)膬Υ姝h(huán)境待送，但存放一般不能超過24h。37微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則1.及時采集微生物標(biāo)本作病原微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則8.盡量不要以棉花拭子收集標(biāo)本。以棉拭子采集的標(biāo)本如咽拭子、傷口拭子等宜插入恰當(dāng)?shù)倪\送培養(yǎng)基送檢。淋球菌培養(yǎng)等標(biāo)本應(yīng)使用專用的纖維拭子，不得使用一般棉拭子。9.混有正常菌群的標(biāo)本如痰、尿液等，不可置肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢。10.每份標(biāo)本都應(yīng)貼上標(biāo)簽并標(biāo)明必要信息，在檢驗申請單上填寫足夠的有關(guān)臨床資料。包括病人情況（病區(qū)、病人姓名、住院號）和標(biāo)本情況（標(biāo)本類型、檢驗?zāi)康?、采集部位、采集方法、采集時間等）11.同一天同一檢測目的的標(biāo)本（血液標(biāo)本除外）一般只需檢測一次（份）。涂片檢查最好和細(xì)菌培養(yǎng)同時做！38微生物檢查的標(biāo)本采集、運送原則8.盡量不要以棉花拭子收集標(biāo)本二、臨床各類標(biāo)本的采集、運送及保存規(guī)范39二、臨床各類標(biāo)本的采集、運送及保存規(guī)范7血培養(yǎng)的采集、運送規(guī)范采集程序:皮膚消毒程序：推薦三步法（酒精→碘伏→酒精）培養(yǎng)瓶消毒程序：75%酒精消毒靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序采血量：成人8-10ml，兒童1-3ml。骨髓采集量1-2ml采血時間和數(shù)量:采血時間:在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前0.5-1h，或于寒戰(zhàn)或發(fā)燒后1h內(nèi)采血。采血數(shù)量：盡量在使用抗菌藥之前（感染性心內(nèi)膜炎除外），在24h內(nèi)采集2-3份血培養(yǎng)。采血間隔：在采集血培養(yǎng)后的2-5天內(nèi)不需要再重復(fù)采血（除外心內(nèi)膜炎和導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥）標(biāo)本運送：立即送檢，室溫保存，切勿冷藏。40血培養(yǎng)的采集、運送規(guī)范采集程序:8血培養(yǎng)的采集規(guī)范皮膚消毒程序（三步法）:①70％酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上②用一根蘸有碘酊或碘伏的棉簽消毒皮膚（1％-2％碘酊作用30s或10％碘伏60s），從穿刺點向外以1.5cm-2cm直徑畫圈消毒。③70％酒精脫碘：用70％酒精涂去碘液，待酒精干燥后采血。培養(yǎng)瓶消毒程序：打開塑料瓶蓋用70%酒精（不能用碘酒）消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60s，注入血液之前用無菌紗布或棉簽擦干表面殘余酒精。靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序：可戴乳膠手套固定靜脈（不可接觸穿刺點），用注射器無菌穿刺取血后，直接注入血培養(yǎng)瓶中（勿換針頭），并輕輕顛倒混勻數(shù)次以防血液凝固。立即送檢，切勿冷藏！

注意：從靜脈取血；不要與血氣和血沉標(biāo)本一起采血；不推薦血入瓶前換針頭；不推薦靜脈血直接入瓶；不宜在靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口采血（除非懷疑導(dǎo)管相關(guān)性血流感染）。41血培養(yǎng)的采集規(guī)范皮膚消毒程序（三步法）:①70％酒精擦拭靜脈血培養(yǎng)的采血量成人采血量5-10ml（最好8-10ml），兒童采血量1-3ml（不超過總血量的1％）。血液和肉湯之比為1：5~1：10。骨髓采集量1-2ml。成人菌血癥血液含菌量很低（通常＜1CFU/ml）,因此增加送檢血液量可以提升檢出率;而兒童菌血癥血液含菌量常超過100CFU/ml，是成人10-100倍，因此采集血量少于成人不會影響培養(yǎng)陽性率。1CFU=1百萬個細(xì)菌。42血培養(yǎng)的采血量成人采血量5-10ml（最好8-10ml），兒血培養(yǎng)的采集時間、數(shù)量和間隔采集時間：據(jù)研究表明：細(xì)菌通常在病人寒戰(zhàn)和發(fā)燒前1小時進(jìn)入血流，因此規(guī)范規(guī)定在病人發(fā)熱高峰前1小時抽血?？紤]到方便操作，建議常規(guī)血培養(yǎng)應(yīng)盡量在使用抗菌藥物前，于病人寒戰(zhàn)或發(fā)熱開始時30-60分鐘內(nèi)，同時于不同部位采集2-3份血培養(yǎng)，除非懷疑有感染性心內(nèi)膜炎或其他靜脈內(nèi)感染，才可分開時段采集。采集數(shù)量：在24h內(nèi)采集2～3份血培養(yǎng)(一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單份血培養(yǎng))。入院前兩周內(nèi)接受抗菌藥物治療的患者,連續(xù)3d,每天采集2份。采血間隔：采血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，不需要重復(fù)采血培養(yǎng)（因為治療后的2至5天內(nèi)血液中的感染細(xì)菌不會馬上消失）。43血培養(yǎng)的采集時間、數(shù)量和間隔采集時間：據(jù)研究表明：細(xì)菌通常在特殊的全身和局部感染患者采血建議可疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎,應(yīng)在不同部位采集2～3份血標(biāo)本。不明原因發(fā)熱,如隱性膿腫,傷寒熱和波浪熱,先采集2～3份血標(biāo)本,24～36h后估計體溫升高之前(通常在下午)再采集2份以上?？梢删Y或真菌菌血癥,但血培養(yǎng)持續(xù)陰性,應(yīng)改變血培養(yǎng)方法,以獲得罕見的或苛養(yǎng)的微生物?？梢杉?xì)菌性心內(nèi)膜炎,在1～2h內(nèi)采集3份血標(biāo)本,如果24h后陰性,再采集3份以上的血標(biāo)本。44特殊的全身和局部感染患者采血建議可疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌腦脊液標(biāo)本采集送檢規(guī)范采集時間：最好在抗菌藥物使用前采集。采集方法：通常用腰穿的方法采集腦脊液，整個過程需以最嚴(yán)格的無菌操作技術(shù)進(jìn)行。采集量應(yīng)≥2ml。標(biāo)本運送：抽取出的腦脊髓液分置于無菌試管內(nèi)，迅速送至細(xì)微生物室。如不能立即送檢，將標(biāo)本保存于35℃溫箱或室溫，不可放置于冰箱。45腦脊液標(biāo)本采集送檢規(guī)范采集時間：最好在抗菌藥物使用前采集。1其他無菌體液的采集運送規(guī)范無菌采集是培養(yǎng)成功的首要因素。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢（腦膜炎球菌有自溶酶，離體后回迅速自溶。肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌離體后極易死亡。）。延遲送檢時一定不能放冰箱，肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等對溫度敏感的細(xì)菌在冰箱會很快死亡。各種無菌體液標(biāo)本，如胸腹水、漿膜腔積液及各種穿刺液等亦可注入血培養(yǎng)瓶以提高培養(yǎng)的陽性率。46其他無菌體液的采集運送規(guī)范無菌采集是培養(yǎng)成功的首要因素。14尿液標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：盡量在抗菌藥物使用前（多數(shù)藥物從尿道排泄）。采集方法：清潔中段尿法。采集中段尿時要先用肥皂清洗女性的外陰和男性的外生殖器包括包皮內(nèi)，然后用清水沖洗。把開始的尿液棄掉，然后取中段的尿液。標(biāo)本運送：留取尿液后2h內(nèi)送達(dá)實驗室，不能立即送檢者，可暫存4℃冰箱（不超過6h）。注意事項：長期留置導(dǎo)尿管的患者應(yīng)在更換新管時留取尿標(biāo)本。導(dǎo)尿留取尿液時，集尿袋內(nèi)的尿液和導(dǎo)尿管末端的尿液不能用于培養(yǎng)。47尿液標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：盡量在抗菌藥物使用前（多數(shù)藥物

痰標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：盡量在使用抗菌藥物之前采集方法：自然咳痰：以晨痰為佳?？忍登皯?yīng)清潔口腔如刷牙和漱口，然后用力咳出呼吸道深部痰，直接吐入于無菌容器中。痰少或無痰者可用3-5%NaCl水溶液5ml霧化吸入5min導(dǎo)痰（氣道高反應(yīng)如哮喘病人不宜采用此法）。對于難于自然咳痰者可用微生物室提供的一次性無菌吸痰杯抽取氣管深部分泌物。小兒取痰法最好用微生物實驗室提供的一次性無菌吸痰杯抽取氣管深部分泌物。采集數(shù)量：對于細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2～3天。不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變。標(biāo)本運送：標(biāo)本應(yīng)盡快送檢（1-2h內(nèi)），如不能及時送檢，室溫保存≤2h，4℃冰箱保存≤24h。48痰標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：盡量在使用抗菌藥物之前16生殖道標(biāo)本采集送檢規(guī)范應(yīng)由臨床醫(yī)師采集，用無菌棉拭子采集。淋球菌檢查時，不論男女尿道及子宮頸均需用拭子插入尿道及子宮頸3cm深取樣送檢，要避免受陰道分泌物污染。若懷疑年幼女童有淋病性陰道炎時，則標(biāo)本由陰道外圍部位取得。男性懷疑有急性淋病時，則由尿道取分泌物標(biāo)本作涂片及培養(yǎng)，若懷疑有慢性淋病、前列腺炎、精囊炎，標(biāo)本可由醫(yī)師采集前列腺或精囊液。標(biāo)本采集后立即送檢，禁止冷藏！49生殖道標(biāo)本采集送檢規(guī)范應(yīng)由臨床醫(yī)師采集，用無菌棉拭子采集。淋糞便標(biāo)本采集運送規(guī)范

采集時間：腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采集；沙門菌感染、腸熱癥應(yīng)在第2周或第3周采集。采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有膿血和黏液的部位的糞便2-3克，（如液狀糞便取絮狀物1-3ml）盛于無菌的、密封的、不吸水的容器內(nèi)送檢；對不易獲得糞便患者及幼兒，可用直腸拭子采集。標(biāo)本應(yīng)盡快送檢，不能及時送檢的標(biāo)本，室溫保存≤2h懷疑沙門菌、志賀菌以外的細(xì)菌引起腹瀉時如大腸埃希菌0157:H7的病例，送檢前臨床醫(yī)生須通知實驗室，并于檢驗單上特別注明，以便提高此菌的分離率。50糞便標(biāo)本采集運送規(guī)范采集時間：腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采眼、耳、鼻、喉標(biāo)本

采集運送規(guī)范眼、耳、鼻、喉標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，防止干燥，禁止冷藏。應(yīng)注明具體標(biāo)本來源如眼標(biāo)本注明是眼瞼、結(jié)膜還是角膜，并注明左眼還是右眼。51眼、耳、鼻、喉標(biāo)本

采集運送規(guī)范眼、耳、鼻、喉標(biāo)本采集后應(yīng)立膿液或傷口分泌物標(biāo)本

采集運送規(guī)范采集方法：閉鎖膿腫：一般用穿刺或手術(shù)引流的方法采集，不能用拭子。消毒覆于膿腫表面的皮膚，用注射器將膿腫內(nèi)容物吸出。然后切開膿腫、引流，取部分膿腫壁送檢。開放病灶和膿腫：用無菌鹽水擦去表面滲出物，用蘸有無菌生理鹽水的拭子采集潰瘍基底部或邊緣部的標(biāo)本，置于無菌管中送檢。燒傷傷口：清創(chuàng)，出現(xiàn)滲出物后用拭子用力采集病灶基底部或邊緣的標(biāo)本。也可送組織標(biāo)本。膿皰或水皰：酒精消毒使之干燥，對于患兒用23號針頭挑破膿皰，拭子采集膿皰液和基底部標(biāo)本。52膿液或傷口分泌物標(biāo)本

采集運送規(guī)范采集方法：20膿液或傷口分泌物標(biāo)本

采集運送規(guī)范注意事項迅速送往實驗室，1小時內(nèi)不能培養(yǎng)應(yīng)將標(biāo)本冷藏。皮膚消毒對培養(yǎng)結(jié)果至關(guān)重要。不要僅送檢膿液。膿液不能代表傷口特點，應(yīng)在病灶活動區(qū)域或基底部采集標(biāo)本。除非有滲出物，干燥、結(jié)痂傷口一般不做培養(yǎng)標(biāo)記：不要只寫“傷口”標(biāo)記標(biāo)本，應(yīng)有專門的描述和解剖來源。注明滲出液來自開放傷口還是閉合傷口。小兒要求：小兒感染常出現(xiàn)皮疹如水泡等，應(yīng)在這些地方仔細(xì)采集標(biāo)本培養(yǎng)以發(fā)現(xiàn)病原體。創(chuàng)傷標(biāo)本如沒有炎性細(xì)胞說明可能只是采集了表皮正常菌群，與疾病過程無關(guān)，應(yīng)重新采集。53膿液或傷口分泌物標(biāo)本

采集運送規(guī)范注意事項21標(biāo)本的儲存

標(biāo)本在尚未進(jìn)行檢驗或未能立即送檢時，必須儲存在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境下，以防止病原菌死亡，或因共生菌滋生過多，使得病原菌分離不出來，下表簡介各類標(biāo)本儲存的環(huán)境：

儲存環(huán)境標(biāo)本來源4℃冰箱痰、尿液、糞便、氣管沖洗物、導(dǎo)尿管、靜脈導(dǎo)管、膿液和傷口分泌物細(xì)菌或真菌培養(yǎng)；無菌體液（胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液、膽汁）真菌培養(yǎng)；支原體培養(yǎng)；衣原體檢查；血清學(xué)檢查（包括ASO、RF、肥達(dá)反應(yīng)）室溫（25℃）腦脊液、生殖道、眼、耳、鼻、喉、血培養(yǎng)、血管導(dǎo)管尖、活檢組織細(xì)菌或真菌培養(yǎng)；無菌體液（胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液、膽汁）細(xì)菌培養(yǎng)；厭氧菌培養(yǎng)；淋球菌培養(yǎng)標(biāo)本54標(biāo)本的儲存標(biāo)本在尚未進(jìn)行檢驗或未能立即送檢時，必須儲存三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的

標(biāo)準(zhǔn)與處理方法總的拒收標(biāo)準(zhǔn)申請錯誤：如糞便、咳出痰液、尿液、下生殖道標(biāo)本要求做厭氧培養(yǎng)，陰道分泌物要求做淋球菌涂片標(biāo)識錯誤：無標(biāo)簽或標(biāo)簽不完整，或標(biāo)本標(biāo)識與申請單標(biāo)識不一致；沒有標(biāo)出標(biāo)本采集時間及部位；沒有在申請單上注明標(biāo)本來源和送檢目的等送檢錯誤：送檢延誤。容器錯誤：沒有用無菌容器，容器破裂或滲漏標(biāo)本不符合要求雙份標(biāo)本（同一天兩份相同檢測的標(biāo)本，血液標(biāo)本除外）55三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的

標(biāo)準(zhǔn)與處理方法總的拒收標(biāo)準(zhǔn)23三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)與處理方法拒收標(biāo)準(zhǔn)

處理方式

申請單注明的標(biāo)本種類與送檢標(biāo)本不符

與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求審核并重送符合要求的標(biāo)本。申請單上填寫項目不全或與標(biāo)本的標(biāo)簽不符或容器上未貼標(biāo)簽與原送檢部門聯(lián)系，要求補充完整申請單或重貼標(biāo)簽或重送標(biāo)本。檢驗單上未注明樣本來源和培養(yǎng)項目或僅注明身體部位者（如胸、腿）

查詢申請醫(yī)師，補足標(biāo)本信息。僅有申請單無標(biāo)本或無菌容器內(nèi)無標(biāo)本與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標(biāo)本標(biāo)本外漏及明顯受污染（如開塞）與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，建議重送標(biāo)本。標(biāo)本收集不符合采集要求

退回申請單，及時通知臨床，告知正確收集方法，要求重送標(biāo)本樣本混入消毒液或防腐劑退回申請單，及時通知臨床，建議重送標(biāo)本。送檢延誤，超過要求送檢時限聯(lián)系送檢部門，退回申請單，要求重送標(biāo)本。56三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)與處理方法拒收標(biāo)準(zhǔn)處理方式三、細(xì)菌室對微生物標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)與處理方法拒絕標(biāo)準(zhǔn)處理方式標(biāo)本量過少或已明顯干燥與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標(biāo)本。申請項目不適合如血液培養(yǎng)同時要求涂片革蘭氏染色，肛門或直腸標(biāo)本請求做革蘭染色，以檢查淋球菌。

聯(lián)系申請醫(yī)師，建議刪去請求革蘭染色項目送檢容器不當(dāng)或破損滲漏與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標(biāo)本。穿刺液標(biāo)本嚴(yán)重凝固，無菌部位標(biāo)本（如腦脊液、膿、穿刺液、尿液等）為非無菌管采集。退回申請單，并注明標(biāo)本不當(dāng)，要求重送標(biāo)本。一支拭子同時做細(xì)菌、支原體、衣原體及真菌培養(yǎng)詢問醫(yī)師并補送標(biāo)本，如不能補送，則按醫(yī)師要求優(yōu)先次序處理同一天同一病人重復(fù)送多次同一檢測目的的相同樣本（血液標(biāo)本除外）一般只檢查一次即可，可與臨床醫(yī)生進(jìn)行協(xié)商。57三、細(xì)菌室對微生