《凝集反應(yīng)》教學(xué)課件

第九章凝集反響第九章凝集反響1學(xué)習(xí)目標(biāo)1.解釋凝集反響的概念。2.解釋直接凝集反響、間接凝集反響、協(xié)同凝集反響的原理。3.說出抗人球蛋白試驗的應(yīng)用。4.了解自身紅細(xì)胞凝集。學(xué)習(xí)目標(biāo)1.解釋凝集反響的概念。2凝集反響細(xì)菌、螺旋體、紅細(xì)胞或細(xì)胞性抗原等顆粒性抗原，或可溶性抗原（或抗體）與載體顆粒結(jié)合成致敏顆粒后，它們與相應(yīng)抗體（或抗原）發(fā)生特異性反應(yīng)，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。凝集反響細(xì)菌、螺旋體、紅細(xì)胞或細(xì)胞性抗原等顆粒性抗原3抗原抗原排斥抗原抗體凝集反響Y抗原抗原抗原YYYYYYYYYYYYYYYYY凝集原：凝集反響中的抗原。凝集素：凝集參與反響的抗體抗原抗原排斥抗原抗體凝集反響Y抗原抗原抗原YYYYYYYYY4反應(yīng)階段：抗原抗體的特異性結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象反應(yīng)特點：IgM的作用比IgG大數(shù)百倍IgG與抗原結(jié)合后，常不出現(xiàn)凝集反應(yīng)，稱不完全抗體凝集反響反應(yīng)階段：凝集反響5可見反響形成可見反響形成6第一節(jié)直接凝集反響直接凝集反應(yīng)：

顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。第一節(jié)直接凝集反響直接凝集反應(yīng)：7YYY+方法評價：簡便和快速、敏感度低，用于定性試驗臨床應(yīng)用：菌種鑒定、血清學(xué)分型、血型鑒定及抗體效價測定。第一節(jié)直接凝集反響YYY+方法評價：簡便和快速、敏感度低，用于定性試驗第一節(jié)8一、玻片凝集試驗YYY+一、玻片凝集試驗YYY+9《凝集反應(yīng)》教學(xué)課件10方法評價:定性試驗簡便和快速敏感度低臨床應(yīng)用:菌種鑒定血清學(xué)分型血型鑒定一、玻片凝集試驗方法評價:臨床應(yīng)用:一、玻片凝集試驗11

在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。二、試管凝集試驗在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，120.50.50.50.50.5棄掉0.5

試管凝集試驗原理結(jié)果

1234567菌液0.50.50.50.50.5棄掉0.513試管凝集試驗試管凝集試驗14結(jié)果+很小的凝集顆粒混濁-無凝集現(xiàn)象與對照一樣++小、局部凝集塊中等混濁+++大多凝集管底輕度混濁++++大的凝集塊清亮凝集程度沉淀上清結(jié)果+很小的凝集顆?；鞚?無凝集現(xiàn)象與對照一樣++小、局部凝15管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測血清的滴度管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測血清的滴度16方法評價：半定量試驗簡便、快速敏感度低可有假陽性臨床應(yīng)用：WidalreactionWeil-felixreactionWrighttest:布魯菌病穿插配血試驗二、試管凝集試驗方法評價：臨床應(yīng)用：二、試管凝集試驗17一、玻片凝集反響:未知抗原+抗體凝集團塊混濁?二、試管凝集反響：定量抗原+系列稀釋抗體不同程度的凝集反響YESNO確定抗體的滴度一、玻片凝集反響:未知抗原+抗體凝集團塊?二、試管凝集反181.O凝集、H凝集與Vi凝集2.穿插反響與凝集吸收試驗三、與凝集反響有關(guān)的概念1.O凝集、H凝集與Vi凝集三、與凝集反響有關(guān)的概念191、O凝集、H凝集與Vi凝集1、O凝集、H凝集與Vi凝集20穿插凝集反響ABAC乙菌

甲菌2、穿插凝集反響有凝集吸收試驗穿插凝集反響ABAC乙菌甲菌21共同抗原與穿插反響抗原1抗原2+

+抗血清穿插反響2、穿插凝集反響有凝集吸收試驗共同抗原與穿插反響抗原1抗原2+

+抗血清穿插反響2、穿插凝222、穿插凝集反響有凝集吸收試驗?zāi)赵囼?用一種過量的細(xì)菌抗原與發(fā)生穿插凝集反響的抗血清相結(jié)合。可將其共同抗體吸去，剩下抗體只能與特異性抗原起反響，這種試驗即稱凝集吸收試驗。2、穿插凝集反響有凝集吸收試驗?zāi)赵囼?23第二節(jié)間接凝集反響間接凝集反應(yīng):

將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象第二節(jié)間接凝集反響間接凝集反應(yīng):24載體可溶性抗原致敏致敏顆粒NS凝集顆粒間接凝集試驗示意圖載體可溶性抗原致敏致敏顆粒NS凝集顆粒間接凝集試驗示意圖25載體種類及其處理方法紅細(xì)胞：

新鮮紅細(xì)胞吸附蛋白質(zhì)的能力差。一般先醛化后應(yīng)用。聚苯乙烯膠乳顆粒：

可物理吸附蛋白質(zhì)；常制備帶有化學(xué)活性基團的顆粒載體種類及其處理方法紅細(xì)胞：26正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗間接凝集反響的類型正向間接凝集試驗間接凝集反響的類型27用抗原致敏載體--檢測抗體一、正向間接凝集試驗用抗原致敏載體--檢測抗體一、正向間接凝集試驗28二、反向間接凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原二、反向間接凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原29三、間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原三、間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原30間接凝集抑制試驗待測抗原抗體特異結(jié)合抗原抗體復(fù)合物NS＋致敏顆粒無凝集顆粒陽性間接凝集抑制試驗待測抗原抗體特異結(jié)合抗原抗體復(fù)合物NS＋致敏31間接凝集抑制試驗待測抗原抗體無結(jié)合抗原抗體分散NS＋致敏顆粒有凝集顆粒陰性間接凝集抑制試驗待測抗原抗體無結(jié)合抗原抗體分散NS＋致敏顆粒32《凝集反應(yīng)》教學(xué)課件33第三節(jié)其他凝集反應(yīng)第三節(jié)其他凝集反應(yīng)34SPA:SPA-IgGFc;SPA抗體致敏------測抗原一、協(xié)同凝集試驗SPA:SPA-IgGFc;一、協(xié)同凝集試驗35

原理圖IgGSPASPA-IgG待測抗原SPA-IgG-待測抗原凝集顆粒混合參加原理圖IgGSPASPA-IgG待測抗原SPA-IgG36抗球蛋白試驗又稱Coombs試驗二、抗人球蛋白凝集試驗抗球蛋白試驗又稱二、抗人球蛋白凝集試驗371945年由Coombs建立的一種抗球蛋白參與的間接血凝試驗，檢測抗紅細(xì)胞不完全抗體的一種非常經(jīng)典的方法。二、抗人球蛋白凝集試驗1945年由Coombs建立的一種抗球蛋白參與的間接血凝試驗381、直接Coombs試驗不完全抗體檢測紅細(xì)胞上抗體1、直接Coombs試驗不完全抗體檢測紅細(xì)胞上抗體392、間接Coombs試驗檢測血清中的抗紅細(xì)胞抗體2、間接Coombs試驗檢測血清中的抗紅細(xì)胞抗體40臨床應(yīng)用：在輸血上的應(yīng)用血型抗原抗體的檢查對新生兒溶血性貧血性疾病的診斷對溶血性貧血的研究對細(xì)菌或立克次體的不完全抗體檢查抗人球蛋白凝集試驗臨床應(yīng)用：抗人球蛋白凝集試驗41自身紅細(xì)胞凝集試驗未經(jīng)致敏的受檢者新鮮紅細(xì)胞試劑：抗人O型紅細(xì)胞的單克隆抗體臨床應(yīng)用：HIV檢測、HBV檢測自身紅細(xì)胞凝集試驗未經(jīng)致敏的受檢者新鮮紅細(xì)胞臨床應(yīng)用：HIV42自身紅細(xì)胞凝集試驗自身紅細(xì)胞凝集試驗43膠乳凝集試驗?zāi)z乳凝集試驗44《凝集反應(yīng)》教學(xué)課件45明膠凝集試驗

將病毒抗原或重組抗原吸附于粉紅色明膠顆粒上，當(dāng)致敏顆粒與樣品血清作用時，若血清含有抗病毒抗體則可形成肉眼可見的粉紅色凝集

明膠凝集試驗將病毒抗原或重組抗原吸附于粉紅色明膠顆粒46間接凝集反響的應(yīng)用抗原的檢測

反向間接凝集試驗可用于檢測病原體的可溶性抗原，也可用于檢測各種蛋白質(zhì)成分?？贵w的檢測

檢測細(xì)菌、病毒、寄生蟲等感染后產(chǎn)生的抗體。

間接凝集反響的應(yīng)用抗原的檢測47小結(jié)

凝集反應(yīng)是指細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原或表面包被抗原的顆粒性載體與相應(yīng)抗體結(jié)合后，可出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象?？梢苑譃橹苯幽磻?yīng)和間接凝集反應(yīng)。在臨床檢驗中最常用的為間接血凝試驗、膠乳凝集試驗和明膠試驗?？骨虻鞍自囼炗址Q為Coombs試驗，是檢測抗紅細(xì)胞不完全抗體的一種很有用的方法。直接Coombs試驗用于病人紅細(xì)胞上不完全抗體檢測；間接Coombs試驗用于檢測游離的血清中的不完全抗體。小結(jié)凝集反應(yīng)是指細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原或表面包被抗原48第九章凝集反響第九章凝集反響49學(xué)習(xí)目標(biāo)1.解釋凝集反響的概念。2.解釋直接凝集反響、間接凝集反響、協(xié)同凝集反響的原理。3.說出抗人球蛋白試驗的應(yīng)用。4.了解自身紅細(xì)胞凝集。學(xué)習(xí)目標(biāo)1.解釋凝集反響的概念。50凝集反響細(xì)菌、螺旋體、紅細(xì)胞或細(xì)胞性抗原等顆粒性抗原，或可溶性抗原（或抗體）與載體顆粒結(jié)合成致敏顆粒后，它們與相應(yīng)抗體（或抗原）發(fā)生特異性反應(yīng)，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。凝集反響細(xì)菌、螺旋體、紅細(xì)胞或細(xì)胞性抗原等顆粒性抗原51抗原抗原排斥抗原抗體凝集反響Y抗原抗原抗原YYYYYYYYYYYYYYYYY凝集原：凝集反響中的抗原。凝集素：凝集參與反響的抗體抗原抗原排斥抗原抗體凝集反響Y抗原抗原抗原YYYYYYYYY52反應(yīng)階段：抗原抗體的特異性結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象反應(yīng)特點：IgM的作用比IgG大數(shù)百倍IgG與抗原結(jié)合后，常不出現(xiàn)凝集反應(yīng)，稱不完全抗體凝集反響反應(yīng)階段：凝集反響53可見反響形成可見反響形成54第一節(jié)直接凝集反響直接凝集反應(yīng)：

顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。第一節(jié)直接凝集反響直接凝集反應(yīng)：55YYY+方法評價：簡便和快速、敏感度低，用于定性試驗臨床應(yīng)用：菌種鑒定、血清學(xué)分型、血型鑒定及抗體效價測定。第一節(jié)直接凝集反響YYY+方法評價：簡便和快速、敏感度低，用于定性試驗第一節(jié)56一、玻片凝集試驗YYY+一、玻片凝集試驗YYY+57《凝集反應(yīng)》教學(xué)課件58方法評價:定性試驗簡便和快速敏感度低臨床應(yīng)用:菌種鑒定血清學(xué)分型血型鑒定一、玻片凝集試驗方法評價:臨床應(yīng)用:一、玻片凝集試驗59

在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。二、試管凝集試驗在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，600.50.50.50.50.5棄掉0.5

試管凝集試驗原理結(jié)果

1234567菌液0.50.50.50.50.5棄掉0.561試管凝集試驗試管凝集試驗62結(jié)果+很小的凝集顆?；鞚?無凝集現(xiàn)象與對照一樣++小、局部凝集塊中等混濁+++大多凝集管底輕度混濁++++大的凝集塊清亮凝集程度沉淀上清結(jié)果+很小的凝集顆?；鞚?無凝集現(xiàn)象與對照一樣++小、局部凝63管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測血清的滴度管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測血清的滴度64方法評價：半定量試驗簡便、快速敏感度低可有假陽性臨床應(yīng)用：WidalreactionWeil-felixreactionWrighttest:布魯菌病穿插配血試驗二、試管凝集試驗方法評價：臨床應(yīng)用：二、試管凝集試驗65一、玻片凝集反響:未知抗原+抗體凝集團塊混濁?二、試管凝集反響：定量抗原+系列稀釋抗體不同程度的凝集反響YESNO確定抗體的滴度一、玻片凝集反響:未知抗原+抗體凝集團塊?二、試管凝集反661.O凝集、H凝集與Vi凝集2.穿插反響與凝集吸收試驗三、與凝集反響有關(guān)的概念1.O凝集、H凝集與Vi凝集三、與凝集反響有關(guān)的概念671、O凝集、H凝集與Vi凝集1、O凝集、H凝集與Vi凝集68穿插凝集反響ABAC乙菌

甲菌2、穿插凝集反響有凝集吸收試驗穿插凝集反響ABAC乙菌甲菌69共同抗原與穿插反響抗原1抗原2+

+抗血清穿插反響2、穿插凝集反響有凝集吸收試驗共同抗原與穿插反響抗原1抗原2+

+抗血清穿插反響2、穿插凝702、穿插凝集反響有凝集吸收試驗?zāi)赵囼?用一種過量的細(xì)菌抗原與發(fā)生穿插凝集反響的抗血清相結(jié)合?？蓪⑵涔餐贵w吸去，剩下抗體只能與特異性抗原起反響，這種試驗即稱凝集吸收試驗。2、穿插凝集反響有凝集吸收試驗?zāi)赵囼?71第二節(jié)間接凝集反響間接凝集反應(yīng):

將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象第二節(jié)間接凝集反響間接凝集反應(yīng):72載體可溶性抗原致敏致敏顆粒NS凝集顆粒間接凝集試驗示意圖載體可溶性抗原致敏致敏顆粒NS凝集顆粒間接凝集試驗示意圖73載體種類及其處理方法紅細(xì)胞：

新鮮紅細(xì)胞吸附蛋白質(zhì)的能力差。一般先醛化后應(yīng)用。聚苯乙烯膠乳顆粒：

可物理吸附蛋白質(zhì)；常制備帶有化學(xué)活性基團的顆粒載體種類及其處理方法紅細(xì)胞：74正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗間接凝集反響的類型正向間接凝集試驗間接凝集反響的類型75用抗原致敏載體--檢測抗體一、正向間接凝集試驗用抗原致敏載體--檢測抗體一、正向間接凝集試驗76二、反向間接凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原二、反向間接凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原77三、間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原三、間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原78間接凝集抑制試驗待測抗原抗體特異結(jié)合抗原抗體復(fù)合物NS＋致敏顆粒無凝集顆粒陽性間接凝集抑制試驗待測抗原抗體特異結(jié)合抗原抗體復(fù)合物NS＋致敏79間接凝集抑制試驗待測抗原抗體無結(jié)合抗原抗體分散NS＋致敏顆粒有凝集顆粒陰性間接凝集抑制試驗待測抗原抗體無結(jié)合抗原抗體分散NS＋致敏顆粒80《凝集反應(yīng)》教學(xué)課件81第三節(jié)其他凝集反應(yīng)第三節(jié)其他凝集反應(yīng)82SPA:SPA-IgGFc;SPA抗體致敏------測抗原一、協(xié)同凝集試驗SPA:SPA-IgGFc;一、協(xié)同凝集試驗83

原理圖IgGSPASPA-IgG待測抗原SPA-IgG-待測抗原凝集顆?；旌蠀⒓釉韴DIgGSPASPA-IgG待測抗原SPA-IgG84抗球蛋白試驗又稱Coombs試驗二、抗人球蛋白凝集試驗抗球蛋白試驗又稱二、抗人球蛋白凝集試驗851945年由Coombs建立的一種抗球蛋白參與的間接血凝試驗，檢測抗紅細(xì)胞不完全抗體的一種非常經(jīng)典的方法。二、抗人球蛋白凝集試驗1945年由Coombs建立的一種抗球蛋白參與的間接血凝試驗861、直接Coombs試驗不完全抗體檢測紅細(xì)胞上抗體1、直接Coombs試驗不完全抗體檢測紅細(xì)胞上抗體872、間接Coombs試驗檢測血清中的抗紅細(xì)胞抗體2、間接Coombs試驗檢測血清中的抗