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現(xiàn)代生物技術(shù)內(nèi)容的復(fù)習(xí)
合肥九中王艷艷現(xiàn)代生物技術(shù)內(nèi)容的復(fù)習(xí)
植物細(xì)胞工程
理論基礎(chǔ)?―――細(xì)胞全能性:
概念?
原因(物質(zhì)基礎(chǔ))?
各種細(xì)胞全能性大小比較?
是不是所有的細(xì)胞具有?
理論上,什么樣的細(xì)胞具有,而實(shí)際上?
植物細(xì)胞工程
理論基礎(chǔ)?―――細(xì)胞全能細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是什么?(離體狀態(tài),一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?激素?和其他一些外界條件?)生物體內(nèi)已經(jīng)分化的細(xì)胞為何不能表達(dá)出全能性?植物組織培養(yǎng)的成功證明了?細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是什么?(離體狀態(tài)植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程
離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體
植物體的什么部位適合做外植體?是不是一定要用體細(xì)胞?離體的植物器官、組織或細(xì)胞能不能直接拿來(lái)做植物組織培養(yǎng)?在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,為什么要進(jìn)行一系列的消毒,滅菌,并且要求無(wú)菌操作?
植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程
離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體需要什么條件才能發(fā)生脫分化?脫分化的概念?愈傷組織的特點(diǎn)?離體的器官、組織或細(xì)胞如果不進(jìn)行脫分化處理,能否培養(yǎng)成完整植物體?
植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體再分化的概念?決定植物細(xì)胞脫分化、再分化的關(guān)鍵因素是什么?植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)再植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用?離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體培育無(wú)病毒植物(怎樣獲得無(wú)病毒植株?)單倍體育種(花藥離體培養(yǎng)階段)大規(guī)模的植物細(xì)胞培養(yǎng)--生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素和殺蟲劑等植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用?離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用?
離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體制造人工種子;(?什么是人工種子?人工種子應(yīng)由哪幾部分構(gòu)成?有哪些優(yōu)點(diǎn)?)
快速繁殖(哪些植物需要?)植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用?離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體植物體細(xì)胞雜交基本過(guò)程
什么是原生質(zhì)體?為何要制備原生質(zhì)體?如何制備?如果將去除細(xì)胞壁的植物細(xì)胞放在等滲溶液中,細(xì)胞呈現(xiàn)什么形狀?理由是什么?人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法?
植物體細(xì)胞雜交基本過(guò)程什么是原生質(zhì)體?植物體細(xì)胞雜交基本過(guò)程原生質(zhì)體融合后就形成雜種細(xì)胞?
植物體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)有何區(qū)別和聯(lián)系?
植物體細(xì)胞雜交基本過(guò)程原生質(zhì)體融合后就形成雜種細(xì)胞?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在??jī)?nèi)環(huán)境可以為細(xì)胞提供?體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液的成分是?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在??jī)?nèi)環(huán)境動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程取材?為什么動(dòng)物細(xì)胞要分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)?如何分散?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程取材?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分?用胃蛋白酶行嗎?
胰蛋白酶真的不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程為什么要定期用胰蛋白酶把培養(yǎng)細(xì)胞從瓶壁上脫離?原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的概念?細(xì)胞株和細(xì)胞系的概念?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程為什么要定期用胰蛋白酶把培養(yǎng)細(xì)胞從瓶壁上動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用從動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的看其應(yīng)用:用于檢測(cè)有毒物質(zhì)――――檢測(cè)原理??jī)?yōu)點(diǎn)?大規(guī)模地生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品,如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等;為皮膚大面積燒傷的病人提供移植用的皮膚――優(yōu)點(diǎn)?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用從動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的看其應(yīng)用:動(dòng)物細(xì)胞融合
人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有?動(dòng)物細(xì)胞融合與精子和卵細(xì)胞的融合有什么不同?誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞是不是就是雜種細(xì)胞?融合后的細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出什么樣的表型特征?動(dòng)物細(xì)胞融合人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有?單克隆抗體的制備
運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞工程的什么技術(shù)手段?制備單克隆抗體時(shí),為什么要選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞?關(guān)鍵環(huán)節(jié)?
單克隆抗體的制備運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞工程的什么技術(shù)手段?單克隆抗體
單克隆抗體的概念及特點(diǎn)?(化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)、靈敏度高,產(chǎn)量也大大高于血清抗體)單克隆抗體的應(yīng)用?
單克隆抗體
單克隆抗體的概念及特點(diǎn)?(化學(xué)性質(zhì)單一體細(xì)胞核移植技術(shù)
例:1997年,美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)(Lucinda)的奶牛,年產(chǎn)奶量為30.8t,創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛,年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸,而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3~4t。(1)能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎?
(2)如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你,你將如何對(duì)它進(jìn)行克?。矿w細(xì)胞核移植技術(shù)
例:1997年,美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)體細(xì)胞核移植技術(shù)在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?
用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,想一想,這是為什么?
你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物,是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?為什么?體細(xì)胞核移植技術(shù)在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什哺乳動(dòng)物的克隆
用到哪些現(xiàn)代生物技術(shù)?為什么用去核卵細(xì)胞或卵母細(xì)胞?克隆動(dòng)物的成功證明了?克隆動(dòng)物的意義?哺乳動(dòng)物的克隆用到哪些現(xiàn)代生物技術(shù)?
植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
主要原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖
培養(yǎng)基的物理質(zhì)固體液體
培養(yǎng)基的成分少量水、礦質(zhì)元素、蔗糖維生素、植物激素、有機(jī)添加劑如甘氨酸和瓊脂等較多水、無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖、維生素、氨基酸及動(dòng)物血清
培養(yǎng)結(jié)果一般是培育成植株也可只培育成胚狀體用于制人工種子培育成細(xì)胞株或細(xì)胞系
培養(yǎng)目的(用途)快速繁殖、培養(yǎng)無(wú)病毒植株制成人工種子、大規(guī)模培育轉(zhuǎn)基因植物,生產(chǎn)生物制品獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品,如生產(chǎn)單抗,用于皮膚移植,檢測(cè)有毒物質(zhì)等都需要適宜的溫度、酸堿度和無(wú)菌條件也有植物細(xì)胞培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)主要原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞
植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)(基本相同)
原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性
培養(yǎng)基的物理性質(zhì)固體液體
方法去掉細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使體細(xì)胞分散后直接誘導(dǎo)細(xì)胞融合
誘導(dǎo)融合的手段物理法:離心、振動(dòng)、電刺激化學(xué)法:常用的如誘導(dǎo)劑聚乙二醇(PEG)(同
(同前)還可用滅活的病毒誘導(dǎo)
融合過(guò)程包括膜融合、質(zhì)融合和核融合,其中膜融合是細(xì)胞融合的關(guān)鍵,核融合是在雜種細(xì)胞的第一次有絲分裂時(shí)進(jìn)行的,植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是雜種細(xì)胞產(chǎn)生出新的細(xì)胞壁
篩選都需要
目的再通過(guò)植物組織培養(yǎng)過(guò)程獲得雜種植株再通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程制備單抗
植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)(基本相同)發(fā)酵工程的內(nèi)容
1.
菌種的選育:為何要選育?如何從自然界分離菌種?如何選育?谷氨酸發(fā)酵中選擇什么樣的菌種來(lái)進(jìn)行谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)?為什么?如何獲得這樣的菌種?發(fā)酵工程的內(nèi)容1.
菌種的選育:發(fā)酵工程的內(nèi)容2.培養(yǎng)基的配制需注意什么問(wèn)題?(培養(yǎng)基配制的三個(gè)基本原則;盡量降低成本)谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)的培養(yǎng)基的原料和分類?
該培養(yǎng)基從化學(xué)成分和物理性質(zhì)上屬于何種類型的培養(yǎng)基?(天然、液體培養(yǎng)基)這種培養(yǎng)基在工業(yè)生產(chǎn)上有何好處?
發(fā)酵工程的內(nèi)容2.培養(yǎng)基的配制發(fā)酵工程的內(nèi)容3.滅菌:滅菌的目的?雜菌指什么?什么東西需滅菌?滅菌方法?發(fā)酵工程的內(nèi)容3.滅菌:發(fā)酵工程的內(nèi)容4.擴(kuò)大培養(yǎng)和接種:為何要進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)?怎樣進(jìn)行?和發(fā)酵過(guò)程所需的條件是否一致?接種時(shí)應(yīng)注意什么?發(fā)酵工程的內(nèi)容4.擴(kuò)大培養(yǎng)和接種:發(fā)酵工程的內(nèi)容5.發(fā)酵過(guò)程:為什么說(shuō)發(fā)酵過(guò)程是發(fā)酵的中心環(huán)節(jié)?
需檢測(cè)哪些項(xiàng)目?需控制哪些發(fā)酵條件?控制的原因?這些條件為何會(huì)變化?怎樣控制?實(shí)際生產(chǎn)中為何常用連續(xù)培養(yǎng)的方法?發(fā)酵工程的內(nèi)容5.發(fā)酵過(guò)程:發(fā)酵工程的內(nèi)容谷氨酸發(fā)酵過(guò)程的條件控制?谷氨酸發(fā)酵過(guò)程的前期處理?發(fā)酵、發(fā)酵工程及發(fā)酵過(guò)程概念的差異?發(fā)酵工程的內(nèi)容谷氨酸發(fā)酵過(guò)程的條件控制?發(fā)酵工程的內(nèi)容6.分離提純:分離提純的方法?如何制成味精?(從發(fā)酵工程的兩大類產(chǎn)品聯(lián)系其應(yīng)用)
發(fā)酵工程的內(nèi)容6.分離提純:發(fā)酵工程的應(yīng)用
1.在醫(yī)藥方面:
(
1)發(fā)酵工程能生產(chǎn)人們所需的藥品。例如:通過(guò)青霉發(fā)酵能生產(chǎn)青霉素。
(
2)通過(guò)發(fā)酵工程能生產(chǎn)基因藥品。例如:將合成的人的胰島素基因轉(zhuǎn)移到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)構(gòu)建成“工程菌”,再通過(guò)培養(yǎng)“工程菌”即可獲得人的胰島素。
發(fā)酵工程的應(yīng)用
1.在醫(yī)藥方面:
(
1)發(fā)酵工程能生
2在食品工業(yè)方面:
(
1)發(fā)酵工程能為人們提供豐富優(yōu)質(zhì)的傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品。
如:生產(chǎn)呻酒,果酒等。
(
2)發(fā)酵工程能生產(chǎn)各種食品添加劑:
酸味劑:檸檬酸、乳酸等。
鮮味劑:谷氨酸等。
色
素:β-胡蘿卜素等。
甜味劑:高果糖漿等。
2在食品工業(yè)方面:
(
1)發(fā)酵工程能為人們提供豐富3.發(fā)酵工程能為解決人類糧食短缺問(wèn)題開辟新途徑。
例如:通過(guò)發(fā)酵可獲得大量的微生物菌體——單細(xì)胞蛋白。20世紀(jì)80年代中期全世界的單細(xì)胞蛋白年產(chǎn)量已達(dá)2.0x107t,廣泛用于食品加工和飼料中。生產(chǎn)一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如維生素、氨基酸等3.發(fā)酵工程能為解決人類糧食短缺問(wèn)題開辟新途徑。
例基因工程的概念基因工程的別名基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)/遺傳工程操作環(huán)境生物體外操作對(duì)象基因操作水平DNA分子水平基本過(guò)程剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)結(jié)果人類需要的基因產(chǎn)物基因工程的概念基因工程的別名基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)/遺
基因工程的基本步驟:
1.提取目的基因:
什么是目的基因?
獲取目的基因的方法有哪些?圖中所示的方法為?
基因工程的基本步驟:
1.提取目的基因:基因工程的基本步驟:2.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合:運(yùn)載體的作用?
運(yùn)載體必須具備的條件是什么?
運(yùn)載體的種類?
最常用的運(yùn)載體是什么?
基因工程的基本步驟:2.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合:基因工程的基本步驟:為何要使用同一種限制酶來(lái)分別切割目的基因和質(zhì)粒?(作用特點(diǎn)?這體現(xiàn)了酶的?專一性)也決定了限制酶具有?(多樣性)結(jié)果?為什么要使用DNA連接酶?基因工程的基本步驟:為何要使用同一種限制酶來(lái)分別切割目的基因基因工程的基本步驟:要想將某個(gè)特定基因與質(zhì)粒相連,需要用幾種DNA限制性內(nèi)切酶和幾種DNA連接酶處理?
為什么細(xì)菌中限制酶不剪切細(xì)菌本身的DNA?基因工程的基本步驟:要想將某個(gè)特定基因與質(zhì)粒相連,需要用幾種基因工程的基本步驟:3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的途徑?將含目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌受體細(xì)胞的過(guò)程中常用到哪種化學(xué)試劑?其作用是什么?常用的受體細(xì)胞有哪些?基因工程的基本步驟:3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:基因工程的基本步驟:4.目的基因的檢測(cè)和表達(dá):在目的基因的檢測(cè)過(guò)程中,檢測(cè)的對(duì)象是什么?為何要進(jìn)行檢測(cè)?舉例說(shuō)明如何檢測(cè)?轉(zhuǎn)基因生物形成的標(biāo)志?基因工程的基本步驟:4.目的基因的檢測(cè)和表達(dá):生物工程各分支領(lǐng)域之間的關(guān)系
人們通常將基因工程和細(xì)胞工程看做生物工程的上游處理技術(shù),將發(fā)酵工程和酶工程看做生物工程的下游處理技術(shù)?;蚬こ毯图?xì)胞工程可以為發(fā)酵工程和酶工程提供菌種。無(wú)論從微生物得到酶或用遺傳工程菌獲得產(chǎn)品,都必須依賴發(fā)酵工程技術(shù)。生物工程各分支領(lǐng)域之間的關(guān)系人們通常將基因工程和細(xì)胞工程看生物工程各分支領(lǐng)域之間的關(guān)系酶工程可以為基因工程、細(xì)胞工程和發(fā)酵工程提供所需的工具酶。酶工程中酶的生產(chǎn)一般要通過(guò)發(fā)酵工程來(lái)進(jìn)行。細(xì)胞工程最主要和基礎(chǔ)的技術(shù)是動(dòng)植物細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù),而基因工程中受體細(xì)胞的培養(yǎng)和篩選,胚胎工程中動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)都需要細(xì)胞培養(yǎng)的技術(shù)。
生物工程各分支領(lǐng)域之間的關(guān)系酶工程可以為基因工程、細(xì)胞工程和現(xiàn)代生物技術(shù)內(nèi)容與生命的物質(zhì)基礎(chǔ)和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)
組成細(xì)胞的元素和化合物――植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、基因工程和發(fā)酵工程中微生物的培養(yǎng)都需要提供一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):培養(yǎng)基比較(植物組織培養(yǎng)的,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的,發(fā)酵工程的,基因工程的)且都需要滅菌(或消毒)和無(wú)菌操作
現(xiàn)代生物技術(shù)內(nèi)容與生命的物質(zhì)基礎(chǔ)和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)組成細(xì)胞的元素和
細(xì)胞的顯微結(jié)構(gòu)與亞顯微結(jié)構(gòu)――細(xì)胞工程中就要在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上按照人們的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品:植物體細(xì)胞雜交要去除細(xì)胞壁,要誘導(dǎo)融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁;細(xì)胞融合證明細(xì)胞膜具有流動(dòng)性;細(xì)胞器移植;核移植等基因工程中的質(zhì)粒;發(fā)酵工程中更是離不開微生物細(xì)胞
細(xì)胞的顯微結(jié)構(gòu)與亞顯微結(jié)構(gòu)――細(xì)胞的增殖——基因工程,發(fā)酵工程中微生物的培養(yǎng)要涉及微生物的分裂植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都要發(fā)生真核細(xì)胞的有絲分裂;細(xì)胞的增殖——
細(xì)胞的分化與細(xì)胞的全能性――植物組織培養(yǎng),植物體細(xì)胞雜交,胚胎分割,克隆動(dòng)物,試管嬰兒
細(xì)胞的癌變――單克隆抗體的制備,“生物導(dǎo)彈”,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中的細(xì)胞系細(xì)胞的衰老――動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中的取材,細(xì)胞代數(shù)問(wèn)題,細(xì)胞株、細(xì)胞系等
細(xì)胞的分化與細(xì)胞的全能性――現(xiàn)代生物技術(shù)與生物的新陳代謝
1.酶與現(xiàn)代生物技術(shù):(1)生物工程本身需要酶:如基因工程中需限制酶、DNA連接酶等;細(xì)胞工程中需纖維素酶、果膠酶,胰蛋白酶等;發(fā)酵工程酶工程更是離不開酶(2)生物工程生產(chǎn)酶:基因工程為一些特定酶的生產(chǎn)提供菌種,通過(guò)發(fā)酵工程可以獲得特定的酶現(xiàn)代生物技術(shù)與生物的新陳代謝1.酶與現(xiàn)代生物技術(shù):
(3)
酶的專一性與多樣性在生物工程中有體現(xiàn)――如限制酶的作用特點(diǎn)及種類,DNA連接酶的特定作用,去除植物細(xì)胞壁的酶解法,動(dòng)物細(xì)胞工程中胰蛋白酶的運(yùn)用,微生物代謝旺盛和其體內(nèi)酶的種類繁多密切相關(guān)(4)
酶的催化作用需要適宜的條件――植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、基因工程和發(fā)酵工程的微生物培養(yǎng)中都需要提供合適的溫度和酸堿度
2.細(xì)胞的代謝產(chǎn)物:細(xì)胞的代謝廢物――
有害代謝廢物的積累是細(xì)胞培養(yǎng)、發(fā)酵工程中需要注意的問(wèn)題微生物(包括轉(zhuǎn)基因菌種)、植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞的一些特定的代謝產(chǎn)物――是現(xiàn)代生物技術(shù)的產(chǎn)品
2.細(xì)胞的代謝產(chǎn)物:3.新陳代謝的類型:(1)
植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中有蔗糖,且培養(yǎng)的一段時(shí)間內(nèi)要求無(wú)光――異養(yǎng);(2)
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)――說(shuō)明其代謝類型?(3)
發(fā)酵工程中培養(yǎng)的微生物多為異養(yǎng)需氧型,也有異養(yǎng)厭氧型,要根據(jù)所培養(yǎng)的微生物的不同代謝類型提供培養(yǎng)條件3.新陳代謝的類型:現(xiàn)代生物技術(shù)與生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)
1植物的激素調(diào)節(jié)――植物組織培養(yǎng)中要用到生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素2.動(dòng)物的激素調(diào)節(jié)――動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基中要含有動(dòng)物血清3.微生物代謝的調(diào)節(jié)――運(yùn)用于微生物菌種的選育(如誘變選育出不能合成高絲氨酸脫氫酶的黃色短桿菌用于生產(chǎn)賴氨酸;通過(guò)一定的手段使谷氨酸棒狀桿菌的細(xì)胞膜通透性增大利于谷氨酸的生產(chǎn));發(fā)酵過(guò)程中溫度和酸堿度的人工調(diào)控現(xiàn)代生物技術(shù)與生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)1植物的激素調(diào)節(jié)――植物組織培生物工程與生殖
(1)核移植、體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)等技術(shù)對(duì)動(dòng)物的生殖提供了幫助,動(dòng)物胚胎移植能夠提高動(dòng)物的繁殖率:(可屬于細(xì)胞工程?)如試管嬰兒、試管牛―――有性生殖;克隆羊―――無(wú)性生殖
(2)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于快速繁殖試管苗,培養(yǎng)無(wú)病毒植株,制人工種子等,植物組織培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)能夠提高自然繁殖率比較低的名貴花卉、瀕危物種等的無(wú)性繁殖率。一般情況是無(wú)性生殖,但外植體是花藥對(duì)話,即進(jìn)行的是花藥離體培養(yǎng)就屬于有性生殖生物工程與生殖(1)核移植、體外受精、胚胎移植、胚胎分割、(3)基因工程和細(xì)胞融合能夠克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,實(shí)現(xiàn)親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的種間雜交。細(xì)胞工程不僅可以在植物與植物之間、動(dòng)物與動(dòng)物之間、微生物與微生物之間進(jìn)行雜交,甚至可以在動(dòng)物與植物與微生物之間進(jìn)行融合,形成前所未有的雜交物種。(3)基因工程和細(xì)胞融合能夠克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,實(shí)現(xiàn)親緣(4)
微生物的生殖:一般利用其無(wú)性生殖及繁殖速度快:發(fā)酵工程中的擴(kuò)大培養(yǎng)及發(fā)酵過(guò)程中的微生物(包括工程菌)繁殖:發(fā)酵工程正是利用了微生物繁殖速度快這一特點(diǎn),通過(guò)人工培養(yǎng)在短時(shí)間內(nèi)快速繁殖產(chǎn)生大量后代,從而獲得大量的代謝產(chǎn)物或單細(xì)胞菌體本身。如培養(yǎng)酵母菌時(shí)根據(jù)不同需要控制條件使它進(jìn)行不同的生殖方式?;蚬こ讨欣梦⑸锉旧淼目焖俜敝吃诙虝r(shí)間內(nèi)獲得大量的目的基因。
(4)
微生物的生殖:(5)病毒增殖―――借用病毒增殖過(guò)程中的侵染細(xì)胞的途徑可以將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;利用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合;而在發(fā)酵工程中及細(xì)胞工程中要防止病毒的增殖,所以需要滅菌或消毒,及取用不含病毒等外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng)來(lái)獲取無(wú)病毒植株(5)病毒增殖―――現(xiàn)代生物技術(shù)與遺傳和變異
1.
遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ):基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段,生物的體細(xì)胞中含有全套的遺傳信息,基因通過(guò)一定的路徑表達(dá)來(lái)體現(xiàn)生物的性狀,細(xì)胞中含有一定的基因就有可能表現(xiàn)一定的性狀,所有的生物共用一套遺傳密碼子,所以某種真核生物的基因不僅可以在其他真核生物細(xì)胞中表達(dá),也可以在原核生物細(xì)胞中表達(dá)――細(xì)胞的全能性;基因工程,細(xì)胞融合有價(jià)值的基礎(chǔ);
現(xiàn)代生物技術(shù)與遺傳和變異1.
遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ):原核生物的基因與真核生物的基因結(jié)構(gòu)上有差異
,真核生物的基因含有不表達(dá)的DNA片段,不能直接用于基因的擴(kuò)增和表達(dá),因此在獲取真核細(xì)胞中的目的基因時(shí)一般不用人工合成基因的方法。
原核生物的基因與真核生物的基因結(jié)構(gòu)上有差異,真核生物的基因可遺傳的變異的來(lái)源與現(xiàn)代生物技術(shù)中的育種問(wèn)題
(1)生物工程與育種的關(guān)系:增加育種方式,可以做到定向育種,培育出傳統(tǒng)的育種方式不可能培育出的品種,大大提高育種速度。生物工程本身需通過(guò)育種獲得菌種可遺傳的變異的來(lái)源與現(xiàn)代生物技術(shù)中的育種問(wèn)題(1)生物工程(2)基因突變――誘變育種的原理,可獲取發(fā)酵工程中所需的菌種,另外基因工程中也需要一些特定的菌種基因重組―――基因工程,細(xì)胞工程中進(jìn)行了人工的基因重組,可以造就定向的變異,可以根據(jù)人們的意愿改造生物的遺傳特性,甚至創(chuàng)造新的生命類型。能夠克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,不受物種生殖隔離的限制,可以使人、動(dòng)物、植物、微生物的基因進(jìn)行人為地相互轉(zhuǎn)移。(2)基因突變――誘變育種的原理,可獲取發(fā)酵工程中所需的菌種染色體數(shù)目的變異―――單倍體育種:先進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株,再利用秋水仙素使其染色體加倍獲得純合體。大大縮短育種年限。使育種質(zhì)量與進(jìn)程大大提高。(3)植物組織培養(yǎng):可以獲得無(wú)病毒品種染色體數(shù)目的變異―――單倍體育種:先進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)獲得單倍現(xiàn)代生物技術(shù)與生態(tài)問(wèn)題
1.生態(tài)因素:非生物因素―――光、溫度、氧和水等是細(xì)胞工程、發(fā)酵工程中需考慮的和調(diào)控的。生物因素―――種間關(guān)系中的競(jìng)爭(zhēng)、寄生關(guān)系是細(xì)胞工程、發(fā)酵工程中消毒和滅菌的原因;種內(nèi)關(guān)系中的種內(nèi)斗爭(zhēng)是影響到發(fā)酵過(guò)程中微生物數(shù)量變化的因素之一現(xiàn)代生物技術(shù)與生態(tài)問(wèn)題1.生態(tài)因素:2.種群數(shù)量的變化―――根據(jù)影響微生物群體生長(zhǎng)的相關(guān)因素,在發(fā)酵工程中注意營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的供給,有害代謝產(chǎn)物的積累,發(fā)酵條件的控制。如連續(xù)培養(yǎng)方法的運(yùn)用可以有助于延長(zhǎng)穩(wěn)定期、提高代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量。
2.種群數(shù)量的變化―――根據(jù)影響微生物群體生長(zhǎng)的相關(guān)因素,在
有利于生態(tài)環(huán)境的方面:(1)開發(fā)生物技術(shù)殺蟲新方法:防治效率高,專一性強(qiáng),不污染環(huán)境,轉(zhuǎn)基因生物天敵:
微生物殺蟲劑
農(nóng)用抗生素
(2)治理環(huán)境污染:利用基因工程、細(xì)胞工程可獲得同時(shí)能分解多種有毒物質(zhì)的新型菌種,如“超級(jí)細(xì)菌”可用于治理石油污染
有利于生態(tài)環(huán)境的方面(3)培育轉(zhuǎn)基因固氮生物進(jìn)行生物固氮,減少化肥使用量.避免帶來(lái)了土地板結(jié),肥力下降;本身化肥的生產(chǎn)和使用還會(huì)導(dǎo)致環(huán)境污染,因此減少了環(huán)境污染。(4)
環(huán)境監(jiān)測(cè):如利用DNA探針可以檢測(cè)水中病毒含量;利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對(duì)影響有毒有害物質(zhì)檢測(cè)(5)保護(hù)瀕危物種,保護(hù)生物多樣性:植物組織培養(yǎng),克隆動(dòng)物,試管動(dòng)物(6)
利于物質(zhì)循環(huán):例如發(fā)酵工程中常利用一些工農(nóng)業(yè)的廢棄物做培養(yǎng)基的原料有利于生態(tài)環(huán)境的方面(3)培育轉(zhuǎn)基因固氮生物進(jìn)行生物固氮,減不利于生態(tài)環(huán)境的方面
1.轉(zhuǎn)基因作物的高額利潤(rùn)會(huì)促使種植者放棄那些經(jīng)濟(jì)價(jià)值較低但對(duì)農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)具有特別重要意義的其他作物。2.轉(zhuǎn)基因作物的環(huán)境安全性問(wèn)題
基因污染:轉(zhuǎn)基因作物本身成為雜草的可能性;具有除草劑耐性因子的轉(zhuǎn)基因作物的遺傳因子可能通過(guò)授粉和種子遷移傳播給野生植物。獲得這些耐性后的野生植物有可能會(huì)變成對(duì)一般除草劑有耐性的“超級(jí)”雜草。為了清除這些雜草,將不得不使用更強(qiáng)大的,濃度更大的除草劑,這必然會(huì)引起土壤板結(jié)、土質(zhì)變壞、藥物殘留等,從而對(duì)生態(tài)環(huán)境造成破壞。不利于生態(tài)環(huán)境的方面1.轉(zhuǎn)基因作物的高額利潤(rùn)會(huì)促使種植者放轉(zhuǎn)基因作物可能產(chǎn)生新的病毒或疾病;轉(zhuǎn)基因作物對(duì)非目標(biāo)生物的危害轉(zhuǎn)基因作物作為外來(lái)種對(duì)新環(huán)境的入侵,使生物多樣性受到威脅;轉(zhuǎn)基因作物對(duì)生態(tài)系統(tǒng)及生態(tài)過(guò)程的影響;其他一些不可預(yù)計(jì)的風(fēng)險(xiǎn)。高中生物現(xiàn)代生物技術(shù)內(nèi)容的復(fù)習(xí)課件現(xiàn)代生物技術(shù)與人體健康
(一)有利方面制備基因工程疫苗
:
疾病快速診斷技術(shù):
可利用單克隆抗體診斷藥箱、DNA探針、酶?jìng)鞲衅鞯瓤焖贉?zhǔn)確診斷各種疾病,如血糖快速測(cè)試儀化驗(yàn)血糖靈敏度高、速度快疾病治療:藥物的生產(chǎn),基因治療提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):如氨基酸,維生素等;轉(zhuǎn)基因食物水質(zhì)監(jiān)測(cè):如多酚氧化酶?jìng)鞲衅鳎珼NA探針檢測(cè)水中病毒
現(xiàn)代生物技術(shù)與人體健康(一)有利方面(二)轉(zhuǎn)基因食物的食用安全性問(wèn)題:
1.標(biāo)記基因的傳遞可能引起的抗生素耐性2.轉(zhuǎn)基因食品引起食物過(guò)敏的可能性3.毒性方面4.因?yàn)榻粨Q遺傳物質(zhì),可能產(chǎn)生新的有害生物或增強(qiáng)有害生物的危害性,甚至引起疾病的流行
(二)轉(zhuǎn)基因食物的食用安全性問(wèn)題:5.倫理方面6.有些影響,還需要經(jīng)過(guò)很長(zhǎng)時(shí)間才能表現(xiàn)和監(jiān)測(cè)出來(lái)。
5.倫理方面科學(xué)是把雙刃劍
生物安全是指對(duì)由現(xiàn)代生物技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用可能產(chǎn)生的負(fù)面影響即對(duì)生物多樣性保護(hù)和持續(xù)利用、生態(tài)環(huán)境保護(hù)和人體健康產(chǎn)生潛在有害影響所采取的有效預(yù)防和控制措施,從而達(dá)到保護(hù)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人體健康的目的。因此,生物安全日益引起人們的重視??茖W(xué)是把雙刃劍
生物安全是指對(duì)由現(xiàn)代生物技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用
微生物的五大共性體積小,面積大;吸收多,轉(zhuǎn)化快;生長(zhǎng)旺,繁殖快;適應(yīng)強(qiáng),易變異;分布廣,種類多
微生物的五大共性體積小,面積大;微生物與現(xiàn)代生物技術(shù)
微生物與基因工程:①充當(dāng)基因工程運(yùn)載體:微生物本身(如病毒和噬菌體),微生物細(xì)胞中的質(zhì)粒;②基因工程中的工具酶,幾乎均來(lái)自各種微生物;③作為基因工程中的受體,至今用得最多的都是具有優(yōu)越體制、培養(yǎng)容易和能高效表達(dá)供體性狀的各種微生物細(xì)胞;微生物與現(xiàn)代生物技術(shù)微生物與基因工程:目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞也是借鑒微生物侵染細(xì)胞的方式④基因工程的直接成果往往可以獲得“工程菌”
⑤盡管基因工程中的供體可以是其他任何生物對(duì)象,但是,微生物卻是一種常用的獨(dú)特基因供體,而且整個(gè)微生物界將是一個(gè)最為富饒的供體基因庫(kù)。如微生物可以提供抗蟲、抗病毒、抗干旱、抗鹽堿、抗高溫等多種抗性基因目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞也是借鑒微生物侵染細(xì)胞的方式
微生物與細(xì)胞工程:滅活的病毒可以誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合;微生物自身的細(xì)胞工程――可以誘導(dǎo)不同的親菌體融合,篩選后獲得“工程細(xì)胞”微生物為細(xì)胞工程提供工具酶細(xì)胞工程中的滅菌和消毒
微生物與細(xì)胞工程:微生物與發(fā)酵工程:發(fā)酵工程的主角就是各種具有特定基因(可以是天然具有的,也可能是通過(guò)誘變或轉(zhuǎn)基因技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)獲得的)的微生物菌種,通過(guò)發(fā)酵工程,微生物可以為人類提供各種各樣的產(chǎn)品,包括各種
特殊的代謝產(chǎn)物及微生物菌體本身;在發(fā)酵工程中需注意消滅除菌種以外的其他微生物,滅菌和無(wú)菌接種是其中非常重要的步驟微生物與發(fā)酵工程:請(qǐng)指教謝謝大家請(qǐng)指教現(xiàn)代生物技術(shù)內(nèi)容的復(fù)習(xí)
合肥九中王艷艷現(xiàn)代生物技術(shù)內(nèi)容的復(fù)習(xí)
植物細(xì)胞工程
理論基礎(chǔ)?―――細(xì)胞全能性:
概念?
原因(物質(zhì)基礎(chǔ))?
各種細(xì)胞全能性大小比較?
是不是所有的細(xì)胞具有?
理論上,什么樣的細(xì)胞具有,而實(shí)際上?
植物細(xì)胞工程
理論基礎(chǔ)?―――細(xì)胞全能細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是什么?(離體狀態(tài),一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?激素?和其他一些外界條件?)生物體內(nèi)已經(jīng)分化的細(xì)胞為何不能表達(dá)出全能性?植物組織培養(yǎng)的成功證明了?細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是什么?(離體狀態(tài)植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程
離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體
植物體的什么部位適合做外植體?是不是一定要用體細(xì)胞?離體的植物器官、組織或細(xì)胞能不能直接拿來(lái)做植物組織培養(yǎng)?在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,為什么要進(jìn)行一系列的消毒,滅菌,并且要求無(wú)菌操作?
植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程
離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體需要什么條件才能發(fā)生脫分化?脫分化的概念?愈傷組織的特點(diǎn)?離體的器官、組織或細(xì)胞如果不進(jìn)行脫分化處理,能否培養(yǎng)成完整植物體?
植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體再分化的概念?決定植物細(xì)胞脫分化、再分化的關(guān)鍵因素是什么?植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)再植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用?離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體培育無(wú)病毒植物(怎樣獲得無(wú)病毒植株?)單倍體育種(花藥離體培養(yǎng)階段)大規(guī)模的植物細(xì)胞培養(yǎng)--生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素和殺蟲劑等植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用?離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用?
離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)
↓脫分化愈傷組織↓再分化根、芽
↓植物體制造人工種子;(?什么是人工種子?人工種子應(yīng)由哪幾部分構(gòu)成?有哪些優(yōu)點(diǎn)?)
快速繁殖(哪些植物需要?)植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用?離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體植物體細(xì)胞雜交基本過(guò)程
什么是原生質(zhì)體?為何要制備原生質(zhì)體?如何制備?如果將去除細(xì)胞壁的植物細(xì)胞放在等滲溶液中,細(xì)胞呈現(xiàn)什么形狀?理由是什么?人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法?
植物體細(xì)胞雜交基本過(guò)程什么是原生質(zhì)體?植物體細(xì)胞雜交基本過(guò)程原生質(zhì)體融合后就形成雜種細(xì)胞?
植物體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)有何區(qū)別和聯(lián)系?
植物體細(xì)胞雜交基本過(guò)程原生質(zhì)體融合后就形成雜種細(xì)胞?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在??jī)?nèi)環(huán)境可以為細(xì)胞提供?體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液的成分是?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在??jī)?nèi)環(huán)境動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程取材?為什么動(dòng)物細(xì)胞要分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)?如何分散?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程取材?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分?用胃蛋白酶行嗎?
胰蛋白酶真的不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程為什么要定期用胰蛋白酶把培養(yǎng)細(xì)胞從瓶壁上脫離?原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的概念?細(xì)胞株和細(xì)胞系的概念?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本過(guò)程為什么要定期用胰蛋白酶把培養(yǎng)細(xì)胞從瓶壁上動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用從動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的看其應(yīng)用:用于檢測(cè)有毒物質(zhì)――――檢測(cè)原理??jī)?yōu)點(diǎn)?大規(guī)模地生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品,如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等;為皮膚大面積燒傷的病人提供移植用的皮膚――優(yōu)點(diǎn)?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用從動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的看其應(yīng)用:動(dòng)物細(xì)胞融合
人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有?動(dòng)物細(xì)胞融合與精子和卵細(xì)胞的融合有什么不同?誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞是不是就是雜種細(xì)胞?融合后的細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出什么樣的表型特征?動(dòng)物細(xì)胞融合人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有?單克隆抗體的制備
運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞工程的什么技術(shù)手段?制備單克隆抗體時(shí),為什么要選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞?關(guān)鍵環(huán)節(jié)?
單克隆抗體的制備運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞工程的什么技術(shù)手段?單克隆抗體
單克隆抗體的概念及特點(diǎn)?(化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)、靈敏度高,產(chǎn)量也大大高于血清抗體)單克隆抗體的應(yīng)用?
單克隆抗體
單克隆抗體的概念及特點(diǎn)?(化學(xué)性質(zhì)單一體細(xì)胞核移植技術(shù)
例:1997年,美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)(Lucinda)的奶牛,年產(chǎn)奶量為30.8t,創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛,年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸,而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3~4t。(1)能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎?
(2)如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你,你將如何對(duì)它進(jìn)行克???體細(xì)胞核移植技術(shù)
例:1997年,美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)體細(xì)胞核移植技術(shù)在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?
用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,想一想,這是為什么?
你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物,是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?為什么?體細(xì)胞核移植技術(shù)在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什哺乳動(dòng)物的克隆
用到哪些現(xiàn)代生物技術(shù)?為什么用去核卵細(xì)胞或卵母細(xì)胞?克隆動(dòng)物的成功證明了?克隆動(dòng)物的意義?哺乳動(dòng)物的克隆用到哪些現(xiàn)代生物技術(shù)?
植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
主要原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖
培養(yǎng)基的物理質(zhì)固體液體
培養(yǎng)基的成分少量水、礦質(zhì)元素、蔗糖維生素、植物激素、有機(jī)添加劑如甘氨酸和瓊脂等較多水、無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖、維生素、氨基酸及動(dòng)物血清
培養(yǎng)結(jié)果一般是培育成植株也可只培育成胚狀體用于制人工種子培育成細(xì)胞株或細(xì)胞系
培養(yǎng)目的(用途)快速繁殖、培養(yǎng)無(wú)病毒植株制成人工種子、大規(guī)模培育轉(zhuǎn)基因植物,生產(chǎn)生物制品獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品,如生產(chǎn)單抗,用于皮膚移植,檢測(cè)有毒物質(zhì)等都需要適宜的溫度、酸堿度和無(wú)菌條件也有植物細(xì)胞培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)主要原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞
植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)(基本相同)
原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性
培養(yǎng)基的物理性質(zhì)固體液體
方法去掉細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使體細(xì)胞分散后直接誘導(dǎo)細(xì)胞融合
誘導(dǎo)融合的手段物理法:離心、振動(dòng)、電刺激化學(xué)法:常用的如誘導(dǎo)劑聚乙二醇(PEG)(同
(同前)還可用滅活的病毒誘導(dǎo)
融合過(guò)程包括膜融合、質(zhì)融合和核融合,其中膜融合是細(xì)胞融合的關(guān)鍵,核融合是在雜種細(xì)胞的第一次有絲分裂時(shí)進(jìn)行的,植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是雜種細(xì)胞產(chǎn)生出新的細(xì)胞壁
篩選都需要
目的再通過(guò)植物組織培養(yǎng)過(guò)程獲得雜種植株再通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程制備單抗
植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)(基本相同)發(fā)酵工程的內(nèi)容
1.
菌種的選育:為何要選育?如何從自然界分離菌種?如何選育?谷氨酸發(fā)酵中選擇什么樣的菌種來(lái)進(jìn)行谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)?為什么?如何獲得這樣的菌種?發(fā)酵工程的內(nèi)容1.
菌種的選育:發(fā)酵工程的內(nèi)容2.培養(yǎng)基的配制需注意什么問(wèn)題?(培養(yǎng)基配制的三個(gè)基本原則;盡量降低成本)谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)的培養(yǎng)基的原料和分類?
該培養(yǎng)基從化學(xué)成分和物理性質(zhì)上屬于何種類型的培養(yǎng)基?(天然、液體培養(yǎng)基)這種培養(yǎng)基在工業(yè)生產(chǎn)上有何好處?
發(fā)酵工程的內(nèi)容2.培養(yǎng)基的配制發(fā)酵工程的內(nèi)容3.滅菌:滅菌的目的?雜菌指什么?什么東西需滅菌?滅菌方法?發(fā)酵工程的內(nèi)容3.滅菌:發(fā)酵工程的內(nèi)容4.擴(kuò)大培養(yǎng)和接種:為何要進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)?怎樣進(jìn)行?和發(fā)酵過(guò)程所需的條件是否一致?接種時(shí)應(yīng)注意什么?發(fā)酵工程的內(nèi)容4.擴(kuò)大培養(yǎng)和接種:發(fā)酵工程的內(nèi)容5.發(fā)酵過(guò)程:為什么說(shuō)發(fā)酵過(guò)程是發(fā)酵的中心環(huán)節(jié)?
需檢測(cè)哪些項(xiàng)目?需控制哪些發(fā)酵條件?控制的原因?這些條件為何會(huì)變化?怎樣控制?實(shí)際生產(chǎn)中為何常用連續(xù)培養(yǎng)的方法?發(fā)酵工程的內(nèi)容5.發(fā)酵過(guò)程:發(fā)酵工程的內(nèi)容谷氨酸發(fā)酵過(guò)程的條件控制?谷氨酸發(fā)酵過(guò)程的前期處理?發(fā)酵、發(fā)酵工程及發(fā)酵過(guò)程概念的差異?發(fā)酵工程的內(nèi)容谷氨酸發(fā)酵過(guò)程的條件控制?發(fā)酵工程的內(nèi)容6.分離提純:分離提純的方法?如何制成味精?(從發(fā)酵工程的兩大類產(chǎn)品聯(lián)系其應(yīng)用)
發(fā)酵工程的內(nèi)容6.分離提純:發(fā)酵工程的應(yīng)用
1.在醫(yī)藥方面:
(
1)發(fā)酵工程能生產(chǎn)人們所需的藥品。例如:通過(guò)青霉發(fā)酵能生產(chǎn)青霉素。
(
2)通過(guò)發(fā)酵工程能生產(chǎn)基因藥品。例如:將合成的人的胰島素基因轉(zhuǎn)移到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)構(gòu)建成“工程菌”,再通過(guò)培養(yǎng)“工程菌”即可獲得人的胰島素。
發(fā)酵工程的應(yīng)用
1.在醫(yī)藥方面:
(
1)發(fā)酵工程能生
2在食品工業(yè)方面:
(
1)發(fā)酵工程能為人們提供豐富優(yōu)質(zhì)的傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品。
如:生產(chǎn)呻酒,果酒等。
(
2)發(fā)酵工程能生產(chǎn)各種食品添加劑:
酸味劑:檸檬酸、乳酸等。
鮮味劑:谷氨酸等。
色
素:β-胡蘿卜素等。
甜味劑:高果糖漿等。
2在食品工業(yè)方面:
(
1)發(fā)酵工程能為人們提供豐富3.發(fā)酵工程能為解決人類糧食短缺問(wèn)題開辟新途徑。
例如:通過(guò)發(fā)酵可獲得大量的微生物菌體——單細(xì)胞蛋白。20世紀(jì)80年代中期全世界的單細(xì)胞蛋白年產(chǎn)量已達(dá)2.0x107t,廣泛用于食品加工和飼料中。生產(chǎn)一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如維生素、氨基酸等3.發(fā)酵工程能為解決人類糧食短缺問(wèn)題開辟新途徑。
例基因工程的概念基因工程的別名基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)/遺傳工程操作環(huán)境生物體外操作對(duì)象基因操作水平DNA分子水平基本過(guò)程剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)結(jié)果人類需要的基因產(chǎn)物基因工程的概念基因工程的別名基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)/遺
基因工程的基本步驟:
1.提取目的基因:
什么是目的基因?
獲取目的基因的方法有哪些?圖中所示的方法為?
基因工程的基本步驟:
1.提取目的基因:基因工程的基本步驟:2.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合:運(yùn)載體的作用?
運(yùn)載體必須具備的條件是什么?
運(yùn)載體的種類?
最常用的運(yùn)載體是什么?
基因工程的基本步驟:2.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合:基因工程的基本步驟:為何要使用同一種限制酶來(lái)分別切割目的基因和質(zhì)粒?(作用特點(diǎn)?這體現(xiàn)了酶的?專一性)也決定了限制酶具有?(多樣性)結(jié)果?為什么要使用DNA連接酶?基因工程的基本步驟:為何要使用同一種限制酶來(lái)分別切割目的基因基因工程的基本步驟:要想將某個(gè)特定基因與質(zhì)粒相連,需要用幾種DNA限制性內(nèi)切酶和幾種DNA連接酶處理?
為什么細(xì)菌中限制酶不剪切細(xì)菌本身的DNA?基因工程的基本步驟:要想將某個(gè)特定基因與質(zhì)粒相連,需要用幾種基因工程的基本步驟:3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的途徑?將含目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌受體細(xì)胞的過(guò)程中常用到哪種化學(xué)試劑?其作用是什么?常用的受體細(xì)胞有哪些?基因工程的基本步驟:3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:基因工程的基本步驟:4.目的基因的檢測(cè)和表達(dá):在目的基因的檢測(cè)過(guò)程中,檢測(cè)的對(duì)象是什么?為何要進(jìn)行檢測(cè)?舉例說(shuō)明如何檢測(cè)?轉(zhuǎn)基因生物形成的標(biāo)志?基因工程的基本步驟:4.目的基因的檢測(cè)和表達(dá):生物工程各分支領(lǐng)域之間的關(guān)系
人們通常將基因工程和細(xì)胞工程看做生物工程的上游處理技術(shù),將發(fā)酵工程和酶工程看做生物工程的下游處理技術(shù)。基因工程和細(xì)胞工程可以為發(fā)酵工程和酶工程提供菌種。無(wú)論從微生物得到酶或用遺傳工程菌獲得產(chǎn)品,都必須依賴發(fā)酵工程技術(shù)。生物工程各分支領(lǐng)域之間的關(guān)系人們通常將基因工程和細(xì)胞工程看生物工程各分支領(lǐng)域之間的關(guān)系酶工程可以為基因工程、細(xì)胞工程和發(fā)酵工程提供所需的工具酶。酶工程中酶的生產(chǎn)一般要通過(guò)發(fā)酵工程來(lái)進(jìn)行。細(xì)胞工程最主要和基礎(chǔ)的技術(shù)是動(dòng)植物細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù),而基因工程中受體細(xì)胞的培養(yǎng)和篩選,胚胎工程中動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)都需要細(xì)胞培養(yǎng)的技術(shù)。
生物工程各分支領(lǐng)域之間的關(guān)系酶工程可以為基因工程、細(xì)胞工程和現(xiàn)代生物技術(shù)內(nèi)容與生命的物質(zhì)基礎(chǔ)和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)
組成細(xì)胞的元素和化合物――植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、基因工程和發(fā)酵工程中微生物的培養(yǎng)都需要提供一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):培養(yǎng)基比較(植物組織培養(yǎng)的,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的,發(fā)酵工程的,基因工程的)且都需要滅菌(或消毒)和無(wú)菌操作
現(xiàn)代生物技術(shù)內(nèi)容與生命的物質(zhì)基礎(chǔ)和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)組成細(xì)胞的元素和
細(xì)胞的顯微結(jié)構(gòu)與亞顯微結(jié)構(gòu)――細(xì)胞工程中就要在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上按照人們的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品:植物體細(xì)胞雜交要去除細(xì)胞壁,要誘導(dǎo)融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁;細(xì)胞融合證明細(xì)胞膜具有流動(dòng)性;細(xì)胞器移植;核移植等基因工程中的質(zhì)粒;發(fā)酵工程中更是離不開微生物細(xì)胞
細(xì)胞的顯微結(jié)構(gòu)與亞顯微結(jié)構(gòu)――細(xì)胞的增殖——基因工程,發(fā)酵工程中微生物的培養(yǎng)要涉及微生物的分裂植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都要發(fā)生真核細(xì)胞的有絲分裂;細(xì)胞的增殖——
細(xì)胞的分化與細(xì)胞的全能性――植物組織培養(yǎng),植物體細(xì)胞雜交,胚胎分割,克隆動(dòng)物,試管嬰兒
細(xì)胞的癌變――單克隆抗體的制備,“生物導(dǎo)彈”,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中的細(xì)胞系細(xì)胞的衰老――動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中的取材,細(xì)胞代數(shù)問(wèn)題,細(xì)胞株、細(xì)胞系等
細(xì)胞的分化與細(xì)胞的全能性――現(xiàn)代生物技術(shù)與生物的新陳代謝
1.酶與現(xiàn)代生物技術(shù):(1)生物工程本身需要酶:如基因工程中需限制酶、DNA連接酶等;細(xì)胞工程中需纖維素酶、果膠酶,胰蛋白酶等;發(fā)酵工程酶工程更是離不開酶(2)生物工程生產(chǎn)酶:基因工程為一些特定酶的生產(chǎn)提供菌種,通過(guò)發(fā)酵工程可以獲得特定的酶現(xiàn)代生物技術(shù)與生物的新陳代謝1.酶與現(xiàn)代生物技術(shù):
(3)
酶的專一性與多樣性在生物工程中有體現(xiàn)――如限制酶的作用特點(diǎn)及種類,DNA連接酶的特定作用,去除植物細(xì)胞壁的酶解法,動(dòng)物細(xì)胞工程中胰蛋白酶的運(yùn)用,微生物代謝旺盛和其體內(nèi)酶的種類繁多密切相關(guān)(4)
酶的催化作用需要適宜的條件――植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、基因工程和發(fā)酵工程的微生物培養(yǎng)中都需要提供合適的溫度和酸堿度
2.細(xì)胞的代謝產(chǎn)物:細(xì)胞的代謝廢物――
有害代謝廢物的積累是細(xì)胞培養(yǎng)、發(fā)酵工程中需要注意的問(wèn)題微生物(包括轉(zhuǎn)基因菌種)、植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞的一些特定的代謝產(chǎn)物――是現(xiàn)代生物技術(shù)的產(chǎn)品
2.細(xì)胞的代謝產(chǎn)物:3.新陳代謝的類型:(1)
植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中有蔗糖,且培養(yǎng)的一段時(shí)間內(nèi)要求無(wú)光――異養(yǎng);(2)
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)――說(shuō)明其代謝類型?(3)
發(fā)酵工程中培養(yǎng)的微生物多為異養(yǎng)需氧型,也有異養(yǎng)厭氧型,要根據(jù)所培養(yǎng)的微生物的不同代謝類型提供培養(yǎng)條件3.新陳代謝的類型:現(xiàn)代生物技術(shù)與生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)
1植物的激素調(diào)節(jié)――植物組織培養(yǎng)中要用到生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素2.動(dòng)物的激素調(diào)節(jié)――動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基中要含有動(dòng)物血清3.微生物代謝的調(diào)節(jié)――運(yùn)用于微生物菌種的選育(如誘變選育出不能合成高絲氨酸脫氫酶的黃色短桿菌用于生產(chǎn)賴氨酸;通過(guò)一定的手段使谷氨酸棒狀桿菌的細(xì)胞膜通透性增大利于谷氨酸的生產(chǎn));發(fā)酵過(guò)程中溫度和酸堿度的人工調(diào)控現(xiàn)代生物技術(shù)與生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)1植物的激素調(diào)節(jié)――植物組織培生物工程與生殖
(1)核移植、體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)等技術(shù)對(duì)動(dòng)物的生殖提供了幫助,動(dòng)物胚胎移植能夠提高動(dòng)物的繁殖率:(可屬于細(xì)胞工程?)如試管嬰兒、試管牛―――有性生殖;克隆羊―――無(wú)性生殖
(2)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于快速繁殖試管苗,培養(yǎng)無(wú)病毒植株,制人工種子等,植物組織培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)能夠提高自然繁殖率比較低的名貴花卉、瀕危物種等的無(wú)性繁殖率。一般情況是無(wú)性生殖,但外植體是花藥對(duì)話,即進(jìn)行的是花藥離體培養(yǎng)就屬于有性生殖生物工程與生殖(1)核移植、體外受精、胚胎移植、胚胎分割、(3)基因工程和細(xì)胞融合能夠克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,實(shí)現(xiàn)親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的種間雜交。細(xì)胞工程不僅可以在植物與植物之間、動(dòng)物與動(dòng)物之間、微生物與微生物之間進(jìn)行雜交,甚至可以在動(dòng)物與植物與微生物之間進(jìn)行融合,形成前所未有的雜交物種。(3)基因工程和細(xì)胞融合能夠克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,實(shí)現(xiàn)親緣(4)
微生物的生殖:一般利用其無(wú)性生殖及繁殖速度快:發(fā)酵工程中的擴(kuò)大培養(yǎng)及發(fā)酵過(guò)程中的微生物(包括工程菌)繁殖:發(fā)酵工程正是利用了微生物繁殖速度快這一特點(diǎn),通過(guò)人工培養(yǎng)在短時(shí)間內(nèi)快速繁殖產(chǎn)生大量后代,從而獲得大量的代謝產(chǎn)物或單細(xì)胞菌體本身。如培養(yǎng)酵母菌時(shí)根據(jù)不同需要控制條件使它進(jìn)行不同的生殖方式。基因工程中利用微生物本身的快速繁殖在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的目的基因。
(4)
微生物的生殖:(5)病毒增殖―――借用病毒增殖過(guò)程中的侵染細(xì)胞的途徑可以將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;利用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合;而在發(fā)酵工程中及細(xì)胞工程中要防止病毒的增殖,所以需要滅菌或消毒,及取用不含病毒等外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng)來(lái)獲取無(wú)病毒植株(5)病毒增殖―――現(xiàn)代生物技術(shù)與遺傳和變異
1.
遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ):基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段,生物的體細(xì)胞中含有全套的遺傳信息,基因通過(guò)一定的路徑表達(dá)來(lái)體現(xiàn)生物的性狀,細(xì)胞中含有一定的基因就有可能表現(xiàn)一定的性狀,所有的生物共用一套遺傳密碼子,所以某種真核生物的基因不僅可以在其他真核生物細(xì)胞中表達(dá),也可以在原核生物細(xì)胞中表達(dá)――細(xì)胞的全能性;基因工程,細(xì)胞融合有價(jià)值的基礎(chǔ);
現(xiàn)代生物技術(shù)與遺傳和變異1.
遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ):原核生物的基因與真核生物的基因結(jié)構(gòu)上有差異
,真核生物的基因含有不表達(dá)的DNA片段,不能直接用于基因的擴(kuò)增和表達(dá),因此在獲取真核細(xì)胞中的目的基因時(shí)一般不用人工合成基因的方法。
原核生物的基因與真核生物的基因結(jié)構(gòu)上有差異,真核生物的基因可遺傳的變異的來(lái)源與現(xiàn)代生物技術(shù)中的育種問(wèn)題
(1)生物工程與育種的關(guān)系:增加育種方式,可以做到定向育種,培育出傳統(tǒng)的育種方式不可能培育出的品種,大大提高育種速度。生物工程本身需通過(guò)育種獲得菌種可遺傳的變異的來(lái)源與現(xiàn)代生物技術(shù)中的育種問(wèn)題(1)生物工程(2)基因突變――誘變育種的原理,可獲取發(fā)酵工程中所需的菌種,另外基因工程中也需要一些特定的菌種基因重組―――基因工程,細(xì)胞工程中進(jìn)行了人工的基因重組,可以造就定向的變異,可以根據(jù)人們的意愿改造生物的遺傳特性,甚至創(chuàng)造新的生命類型。能夠克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,不受物種生殖隔離的限制,可以使人、動(dòng)物、植物、微生物的基因進(jìn)行人為地相互轉(zhuǎn)移。(2)基因突變――誘變育種的原理,可獲取發(fā)酵工程中所需的菌種染色體數(shù)目的變異―――單倍體育種:先進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株,再利用秋水仙素使其染色體加倍獲得純合體。大大縮短育種年限。使育種質(zhì)量與進(jìn)程大大提高。(3)植物組織培養(yǎng):可以獲得無(wú)病毒品種染色體數(shù)目的變異―――單倍體育種:先進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)獲得單倍現(xiàn)代生物技術(shù)與生態(tài)問(wèn)題
1.生態(tài)因素:非生物因素―――光、溫度、氧和水等是細(xì)胞工程、發(fā)酵工程中需考慮的和調(diào)控的。生物因素―――種間關(guān)系中的競(jìng)爭(zhēng)、寄生關(guān)系是細(xì)胞工程、發(fā)酵工程中消毒和滅菌的原因;種內(nèi)關(guān)系中的種內(nèi)斗爭(zhēng)是影響到發(fā)酵過(guò)程中微生物數(shù)量變化的因素之一現(xiàn)代生物技術(shù)與生態(tài)問(wèn)題1.生態(tài)因素:2.種群數(shù)量的變化
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