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動物細胞融合1方法:誘導方式物理法化學法生物法:滅活的病毒仙臺病毒喪失感染性(不感染細胞)保留融合活性紫外線(誘導細胞融合)2.方法:滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面細胞膜被病毒顆粒穿通細胞膜連接細胞融合,形成雜種細胞(細胞膜具有一定的流動性)總結(jié):比較植物體細胞雜交和動物細胞融合比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理融合前處理誘導方法用途細胞膜的流動性、植物細胞的全能性細胞膜的流動性用纖維素酶、果膠酶去壁用胰蛋白酶使細胞分散物理、化學方法物理、化學、生物方法獲得部分或完整植株主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體1.抗體由何種細胞產(chǎn)生?2.抗體主要分布在哪里?3.如何得到抗體?提問?②特點:產(chǎn)量低、特異性差、純度低、反應(yīng)不夠靈敏常規(guī)抗體制備一個B淋巴細胞:只分泌一種特異性抗體單克隆抗體雜交瘤細胞小鼠骨髓瘤細胞:能無限增殖融合單克隆抗體培養(yǎng)①向動物體內(nèi)反復(fù)注射抗原,使動物產(chǎn)生抗體,然后從血清中分離所需抗體。雜交細胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無限增殖的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體BBBB瘤瘤瘤瘤細胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞?篩選雜種細胞已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。B淋巴細胞中有這兩條DNA合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑,但能不斷分裂增殖。單克隆抗體的應(yīng)用:⑴在疾病診斷、治療和預(yù)防方面,具有特異性強、純度高、靈敏度高、產(chǎn)量大、容易標準化生產(chǎn)等優(yōu)點。⑵單克隆抗體可以作為載體,運載抗癌藥物,形成“生物導彈”,治療惡性腫瘤。1.動物細胞融合的目的中最重要的是----------------()A.克服遠緣雜交不親和B.制備單克隆抗體C.培育新品種D.生產(chǎn)雜種細胞2.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中,正確的是()誘導融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成雜種細胞BD3.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是------()A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合B.由小鼠一個B淋巴細胞誘導融合而成C.由小鼠一個B淋巴細胞與肌瘤細胞誘導融合而成D.由小鼠一個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導融合而成D(06江蘇)下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。(1)_______________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。(2)根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類,圖中HAT培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。(3)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是________________。(4)動物細胞融合除了采用植物細胞原生質(zhì)體融合常用的誘導劑外,還可以采用________________。(5)選出的雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞的_______________特點,又具備淋巴細胞的_______________特點。(6)淋巴細胞是由動物體_________中的______________細胞分化、發(fā)育而來。(7)雜交瘤細胞從培養(yǎng)基中吸收
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