開題報告乳酸菌的分離及應(yīng)用

乳酸菌的分離及應(yīng)用開題報告黃淮學(xué)院生物工程系實驗興趣小組匯報人：劉剛

成員：田曉楠薛玉潔

指導(dǎo)老師：魯珍匯報內(nèi)容一、研究背景與意義二、國內(nèi)外研究進展三、研究方案及內(nèi)容四、時間安排一、研究背景與意義指發(fā)酵糖類主要產(chǎn)物為乳酸的一類無芽孢、革蘭氏染色陽性細菌的總稱。這是一群相當(dāng)龐雜的細菌，目前至少可分為18個屬，共有200多種。除極少數(shù)外，其中絕大部分都是人體內(nèi)必不可少的且具有重要生理功能的菌群，其廣泛存在于人體的腸道中。目前已被國內(nèi)外生物學(xué)家所證實，腸內(nèi)乳酸菌與健康長壽有著非常密切的直接關(guān)系。乳酸菌乳酸菌是廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥和飼料等行業(yè)的一類重要工業(yè)微生物。

常用于制造酸奶、乳酪、德國酸菜、啤酒、葡萄酒、陳醋、泡菜、腌漬食品和其他發(fā)酵食品。

產(chǎn)生維生素B族等大量有益物質(zhì)；增加腸道有益菌群；抑制腐敗菌的繁殖，消解腐敗菌產(chǎn)生的毒素；抑制膽固醇吸收等。通過發(fā)酵處理的飼料不僅具有改善飼料營養(yǎng)吸收水平，降解飼料原料中可能存在的毒素，還能大大減少抗生素等藥物類添加劑的使用，改善了動物健康水平，從而提高動物產(chǎn)品的食品安全性。從實際的食品工藝學(xué)的觀點，有12個菌屬被認為是主要的乳酸菌：包括腸球菌屬、乳球菌數(shù)、乳桿菌屬、明串珠菌屬、酒球菌屬、片球菌屬等。

市場上使用最多的乳酸菌種類雙歧桿菌保加利亞乳桿菌嗜熱鏈球菌嗜酸乳桿菌干酪乳桿菌TPY培養(yǎng)基上的雙歧桿菌MRS培養(yǎng)基上的保加利亞乳桿菌嗜熱鏈球菌嗜酸乳桿菌干酪乳桿菌酸奶是一種傳統(tǒng)發(fā)酵乳制品，具有豐富的營養(yǎng)價值和良好的保健功能。在我國隨著冰箱的普及和冷鏈系統(tǒng)的推廣、人民消費水平和文明素質(zhì)的提高、健康理念的流行，酸奶產(chǎn)量以年均25%的速度增長，已經(jīng)成為我國第一大發(fā)酵乳制品，是最具盈利和發(fā)展?jié)摿Φ漠a(chǎn)業(yè)。

酸奶中的特征菌為保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌。

保加利亞乳桿菌屬于革蘭氏陽性，厭氧性菌，單個體呈桿狀或成鏈，兩端鈍園，不具運動性，也不會產(chǎn)生孢子。在牛奶上培養(yǎng)，菌落為無色到淡白色，通常呈不光滑棉花狀。保加利亞乳桿菌屬于化能異養(yǎng)型微生物，營養(yǎng)要求苛刻。

MRS培養(yǎng)基上生長的乳酸菌

嗜熱鏈球菌為原核生物中的鏈球菌屬，可以把乳糖發(fā)酵產(chǎn)生乳酸的兼性厭氧的革蘭氏陽性細菌，單菌形態(tài)為圓形或橢圓形，呈對或鏈狀排列，無芽孢和鞭毛，無運動性。在不同培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)環(huán)境下嗜熱鏈球菌形態(tài)有較大區(qū)別，45℃的原乳中形成鏈狀。顯微鏡下的乳酸菌二、國內(nèi)外進展酸奶發(fā)酵劑（乳酸菌）在酸奶工業(yè)化生產(chǎn)中占據(jù)著不可替代的重要位置，其發(fā)酵特性直接影響發(fā)酵酸奶的風(fēng)味及品質(zhì)。由于西方乳業(yè)科學(xué)家早在19世紀末20世紀初就開始研制濃縮發(fā)酵劑，所以西方發(fā)達國家對酸奶發(fā)酵劑的研究和應(yīng)用還處于領(lǐng)先地位，同時也擁有先進的規(guī)?；a(chǎn)能力。僅丹麥的Hansen公司，就向全世界提供近50%的乳品發(fā)酵劑。此外，還有一批知名發(fā)酵劑制造商（如美國的Marshall公司、法國的Rodia公司、英國的MauriFoods公司等）和研究所（如澳大利亞的Csiro研究所、荷蘭的Nizo研究所、瑞士的Liebefekl研究所等），向世界各地提供不同的發(fā)酵劑產(chǎn)品。與國外相比，國內(nèi)對凍干發(fā)酵劑的研究起步較晚，僅在20世紀90年代才開始進行，使得我國凍干發(fā)酵劑菌種資源不足，發(fā)酵劑制備技術(shù)不完善，工業(yè)化生產(chǎn)能力不高，進一步造成現(xiàn)階段我國所使用的酸奶發(fā)酵劑大多為進口的國外發(fā)酵劑，導(dǎo)致酸奶生產(chǎn)成本過高和國內(nèi)酸奶制造商的核心競爭力不強。酸奶發(fā)酵劑(按照物理形態(tài))液體酸奶發(fā)酵劑冷凍酸奶發(fā)酵劑直投式酸奶發(fā)酵劑由于液體發(fā)酵劑的制作要求較為簡單，因此在實驗室中我們將主要以液體發(fā)酵劑為研究對象，在此基礎(chǔ)上進行冷凍發(fā)酵劑的探索！三、研究方案市售酸奶梯度稀釋接種培養(yǎng)分離篩選菌株鑒定傳代培養(yǎng)選擇性能良好的菌種鮮奶接種發(fā)酵主要研究內(nèi)容:1、從市場上選擇市售酸奶做實驗材料；2、準備實驗試劑與實驗儀器；3、配制BCG培養(yǎng)基，滅菌及倒平板；4、在無菌接種箱中將市售酸奶梯度稀釋并接種；5、在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；6、菌種鑒定；7、進行傳代培養(yǎng)，選擇性能優(yōu)良的菌種保存，作為發(fā)酵劑；8、在鮮奶上接種保存的菌種，于適宜環(huán)境培養(yǎng)以檢驗菌種性能；9、感官評定。實驗器材及預(yù)算試劑：蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、檸檬酸氫二銨、葡萄糖、吐溫80、乙酸鈉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、硫酸錳、瓊脂、Hcl、NaOH；生理鹽水、95%乙醇、草酸銨結(jié)晶紫、盧戈氏碘液、復(fù)紅、香柏油。市售酸奶，脫脂乳粉、蔗糖。儀器：電子天平、電爐、高壓蒸汽滅菌鍋、超凈工作臺、生化培養(yǎng)箱、冰箱、移液管、移液槍等。預(yù)算：市售酸奶、脫脂乳粉、鮮奶、帶蓋密封酸奶杯：200元左右乳酸菌為異養(yǎng)厭氧型微生物，用普通的接種方法不易培養(yǎng)：在實驗中我們選擇在倒平板之前先把菌種涂抹到培養(yǎng)基底部再倒培養(yǎng)基。現(xiàn)階段遇到的問題及解決方案主要是為乳酸菌生長營造一個無氧的生存環(huán)