南陽市第二人民醫(yī)院腫瘤生物免疫治療講座匯總

惡性腫瘤生物治療最新技術(shù)------

抗腫瘤免疫活性細(xì)胞療法

南陽市第二人民醫(yī)院生物治療中心

第一頁，共六十三頁。三大療法的局限性

手術(shù) 放療化療第二頁，共六十三頁。手術(shù)治療的局限性

機(jī)體發(fā)生腫瘤后，盡早手術(shù)切除仍是目前治療腫瘤的第一選擇，但是單純手術(shù)療法不能清除殘留在血液和淋巴系統(tǒng)中的腫瘤細(xì)胞，造成術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率高（1年復(fù)發(fā)率達(dá)60%，死于復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的人超80%），5年存活率低。第三頁，共六十三頁。放化療的局限性

手術(shù)后或失去手術(shù)時(shí)機(jī)的患者，通常需要進(jìn)行化療或放療?；?、放療能殺傷快速增殖的腫瘤細(xì)胞，但對(duì)殘留的腫瘤干細(xì)胞和其它處于非增殖期的腫瘤細(xì)胞無效。放化療在殺死癌細(xì)胞同時(shí)，正常細(xì)胞和機(jī)體免疫功能損傷作用是不可避的。這樣就導(dǎo)致一種局面，即使有一個(gè)癌細(xì)胞沒有被殺死，他們也會(huì)在沒有人體免疫系統(tǒng)防護(hù)狀況下，快速增殖、擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。研究表明，經(jīng)過傳統(tǒng)的三大療法，體內(nèi)還存在至少1012個(gè)腫瘤細(xì)胞，他們主要依靠機(jī)體的免疫功能來殺傷。第四頁，共六十三頁。生物治療--新希望

20世紀(jì)80年代以來，細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)及生物工程技術(shù)的迅速發(fā)展，使人們重新認(rèn)識(shí)傳統(tǒng)的腫瘤免疫治療的理論與實(shí)踐。腫瘤的生物治療是應(yīng)用生物技術(shù)，通過調(diào)節(jié)和增強(qiáng)腫瘤患者機(jī)體的免疫防御機(jī)制殺傷腫瘤，不但對(duì)腫瘤細(xì)胞，而且腫瘤干細(xì)胞和其它處于非增殖期的腫瘤細(xì)胞均有明顯的殺傷作用，并能提高機(jī)體的免疫力，從而能有效清除體內(nèi)殘存的腫瘤細(xì)胞，防止腫瘤的轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)。第五頁，共六十三頁。生物治療--腫瘤的第四大模式1985年，美國(guó)NIH就把腫瘤生物治療正式列入繼手術(shù)、放化療以外腫瘤綜合治療的第四大模式。并因其安全、有效、無毒副作用等特點(diǎn)，被認(rèn)為是腫瘤綜合治療模式中最活躍、最有前途的手段。2000年“國(guó)際腫瘤生物治療及基因治療年會(huì)”會(huì)議總結(jié)報(bào)告曾指出：“生物治療是目前知道的唯一的一種有望完全消滅癌細(xì)胞的治療手段，21世紀(jì)是腫瘤生物治療的世紀(jì)。”第六頁，共六十三頁。腫瘤生物治療的內(nèi)容

1、免疫治療2、基因治療3、干細(xì)胞治療4、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化及凋亡5、抑制腫瘤新升血管治療等其中主要是免疫治療

腫瘤生物免疫療法成為最令人矚目、最鼓舞人心的焦點(diǎn)，將成為21世紀(jì)人類攻克癌癥具有戰(zhàn)略意義的一個(gè)重要方面.

37-39屆美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)（ASCO）第7屆中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)臨床腫瘤學(xué)協(xié)作專業(yè)委員會(huì)（CSCO）第七頁，共六十三頁。

免疫系統(tǒng)是人體的防御系統(tǒng)，發(fā)揮著清除體內(nèi)發(fā)生突變的腫瘤細(xì)胞的作用。機(jī)體免疫系統(tǒng)和腫瘤細(xì)胞相互作用的結(jié)果,決定了腫瘤的最終演變。腫瘤與免疫第八頁，共六十三頁。

對(duì)于健康人來說，免疫系統(tǒng)強(qiáng)大，足以及時(shí)清除突變的腫瘤細(xì)胞；而對(duì)于腫瘤病人來說，其免疫功能低下、不能識(shí)別腫瘤抗原、或者不能遞呈腫瘤抗原信號(hào)，從而使機(jī)體的免疫系統(tǒng)不能對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行殺傷與清除，這是腫瘤發(fā)生的主要原因之一。腫瘤與免疫第九頁，共六十三頁。腫瘤免疫治療理論基礎(chǔ)演變

免疫監(jiān)視學(xué)說（1964）

機(jī)體免疫系統(tǒng)能夠識(shí)別并清除惡性細(xì)胞,阻止腫瘤發(fā)生

免疫編輯學(xué)說（2002）

免疫系統(tǒng)抑制腫瘤生長(zhǎng)的同時(shí)腫瘤的惡性程度逐漸強(qiáng)化

第十頁，共六十三頁。腫瘤免疫治療理論-免疫監(jiān)視學(xué)說機(jī)體免疫系統(tǒng)能夠識(shí)別并清除惡性細(xì)胞,阻止腫瘤發(fā)生第十一頁，共六十三頁。第十二頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機(jī)制機(jī)體自身免疫因素：腫瘤病人大多數(shù)伴有免疫功能低下腫瘤細(xì)胞因素第十三頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機(jī)制樹突狀細(xì)胞（殺傷性T細(xì)胞）殺傷性T細(xì)胞第十四頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機(jī)制-自身免疫因素腫瘤患者的抗原提呈缺陷：腫瘤抗原性減弱1.做為抗原遞呈細(xì)胞的樹突狀細(xì)胞（DC）細(xì)胞數(shù)量不足。2.DC抗原提呈能力下降：（1）腫瘤細(xì)胞分泌大量的抑制因子如（TGF-β）等抑制免疫反應(yīng)。（2）缺乏危險(xiǎn)信號(hào)，DC細(xì)胞不能完全成熟。（3）腫瘤細(xì)胞形成生理屏障阻礙DC攝取抗原。腫瘤患者的淋巴細(xì)胞因素1.抗腫瘤T細(xì)胞數(shù)量不足2.抗腫瘤T細(xì)胞功能下降：T細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞親和性不足；T細(xì)胞耐受性T細(xì)胞傳導(dǎo)信號(hào)下調(diào)；T細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞接觸時(shí)發(fā)生凋亡；T細(xì)胞不能進(jìn)入腫瘤基質(zhì)；Treg細(xì)胞的抑制。第十五頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機(jī)制-腫瘤細(xì)胞因素腫瘤抗原表達(dá)不足腫瘤產(chǎn)生局部免疫抑制因子缺乏凋亡和破壞途徑腫瘤相關(guān)免疫抑制細(xì)胞的免疫抑制作用造成機(jī)體免疫細(xì)胞（主要為淋巴細(xì)胞）對(duì)腫瘤細(xì)胞識(shí)別和殺傷功能下降甚至消失第十六頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機(jī)制自身免疫因素腫瘤細(xì)胞因素臨床可見腫瘤第十七頁，共六十三頁。腫瘤的免疫治療腫瘤的免疫治療就是借助免疫學(xué)理論和技術(shù)，提高腫瘤抗原的免疫原性，激發(fā)和增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤的免疫應(yīng)答，提高腫瘤對(duì)機(jī)體免疫效應(yīng)的敏感性，在體內(nèi)外誘導(dǎo)大量的腫瘤特異性免疫活性細(xì)胞，以最終清除腫瘤。DC及CIK細(xì)胞是抗腫瘤免疫活性細(xì)胞治療中功能最強(qiáng)、最有潛力的腫瘤治療手段第十八頁，共六十三頁。概念：是機(jī)體內(nèi)最有效、功能最強(qiáng)的專職抗原提呈細(xì)胞（APC）它能高效地?cái)z取、加工處理和遞呈抗原未成熟DC具有較強(qiáng)的捕獲抗原及遷移能力成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)

DC，樹突狀細(xì)胞免疫療法第十九頁，共六十三頁。DC免疫療法的理論依據(jù)1.做為抗原遞呈細(xì)胞的DC細(xì)胞數(shù)量不足；2.DC抗原提呈能力下降；3.腫瘤抗原表達(dá)不足

腫瘤患者的抗原提呈缺陷→腫瘤抗原性減弱要避開這些因素的影響，體外誘導(dǎo)激活DC是最高效的一種方法！第二十頁，共六十三頁。DC的制備流程負(fù)載腫瘤抗原的成熟DC細(xì)胞細(xì)胞回輸誘導(dǎo)DC細(xì)胞腫瘤抗原臨床療效監(jiān)測(cè)

DC細(xì)胞成熟抗原負(fù)載細(xì)胞分選21第二十一頁，共六十三頁。樹突狀細(xì)胞與T細(xì)胞的作用

第二十二頁，共六十三頁。樹突狀細(xì)胞疫苗(DC免疫療法流程)

成熟抗原知敏的DC回輸給病人采集病人外周血單個(gè)核細(xì)胞加入相關(guān)抗原致敏體外細(xì)胞因子刺激發(fā)揮抗腫瘤作用利用負(fù)載腫瘤抗原的樹突狀細(xì)胞，能夠激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生腫瘤特異性的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，從而能有效地殺傷腫瘤細(xì)胞，并且能夠建立起持久的抗腫瘤的特異性免疫應(yīng)答。第二十三頁，共六十三頁。DC細(xì)胞疫苗的優(yōu)勢(shì)整個(gè)治療過程病人簡(jiǎn)單易行，非常輕松，無痛苦和不適。培養(yǎng)所需的淋巴細(xì)胞數(shù)量少，不需要采集大量的外周血。誘導(dǎo)并激活病人自身的特異性抗腫瘤免疫反應(yīng)。誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫記憶，使機(jī)體獲得持久的抗腫瘤免疫力?？芍委煹哪[瘤種類廣，幾乎對(duì)各種腫瘤都有一定的療效。與CIK細(xì)胞治療可以協(xié)同進(jìn)行，達(dá)到互補(bǔ)的效果。24第二十四頁，共六十三頁。DC應(yīng)用目前，DC療法，在我國(guó)已被批準(zhǔn)用于腫瘤患者的臨床治療，已上全國(guó)及遼寧省醫(yī)療服務(wù)價(jià)格項(xiàng)目規(guī)范，也是目前國(guó)內(nèi)唯一被批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床的腫瘤疫苗類治療方法，已經(jīng)大量應(yīng)用于腫瘤的臨床免疫治療第二十五頁，共六十三頁。DC疫苗的臨床應(yīng)用惡性黑色素瘤、前列腺癌、惡性淋巴瘤、白血病、其他實(shí)體瘤（結(jié)直腸癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、肝癌、胰腺癌、肝胰管壺腹癌、胃癌、食管癌、轉(zhuǎn)移性腎癌等、兒童青少年好發(fā)的間葉組織來源的肉瘤）的免疫治療。第二十六頁，共六十三頁。CIK，細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞免疫療法CIK細(xì)胞是一種用外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），在體外經(jīng)過多種細(xì)胞因子培養(yǎng)激活后，獲得的對(duì)腫瘤細(xì)胞具有高效溶解毒性的一群異質(zhì)細(xì)胞。又稱為NK細(xì)胞樣T淋巴細(xì)胞：CD3+CD56+雙陽性細(xì)胞.特點(diǎn)：兼具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗腫瘤活性、NK細(xì)胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用CIK細(xì)胞被認(rèn)為是新一代抗腫瘤過繼細(xì)胞免疫治療的首選方案。CIK細(xì)胞在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，不損傷任何正常組織細(xì)胞。是目前國(guó)際上廣泛應(yīng)用的腫瘤免疫治療手段第二十七頁，共六十三頁。28INF-γ、CD3McAb、IL-2第二十八頁，共六十三頁。

CIK增殖細(xì)胞團(tuán)第二十九頁，共六十三頁。CIK細(xì)胞的特點(diǎn)增殖速度快殺瘤活性高，兼具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗腫瘤活性殺傷活性可達(dá)84.7%殺瘤譜廣，兼具有NK細(xì)胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點(diǎn)細(xì)胞來源豐富：正常或患者的骨髓或外周血單個(gè)核細(xì)胞均可誘導(dǎo)獲得CIK細(xì)胞對(duì)多重耐藥腫瘤細(xì)胞同樣敏感殺瘤活性不受CsA、FK506等免疫抑制劑的影響對(duì)正常骨髓造血前體細(xì)胞無毒性能抵抗腫瘤細(xì)胞引發(fā)的效應(yīng)細(xì)胞Fas-FasL凋亡第三十頁，共六十三頁。CIK細(xì)胞的作用機(jī)制CIK細(xì)胞第三十一頁，共六十三頁。CIK細(xì)胞殺傷腫瘤作用特點(diǎn)1.能夠迅速執(zhí)行殺傷腫瘤細(xì)胞的功能，其抗瘤作用可持續(xù)2周到1個(gè)月；2.通過整個(gè)免疫網(wǎng)絡(luò)的激活，調(diào)整宿主的防御機(jī)制，達(dá)到控制腫瘤生長(zhǎng)乃至使其消退的目的；3.一部分記憶細(xì)胞在體外也得到了擴(kuò)增，一旦遇到新的腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)，能夠迅速在體內(nèi)活化，殺傷靶細(xì)胞。

第三十二頁，共六十三頁。CIK治療流程分?jǐn)?shù)次靜脈回輸體內(nèi)采集病人外周血單個(gè)核細(xì)胞PBMC加入多種細(xì)胞因子培養(yǎng)擴(kuò)增、活化、誘導(dǎo)成為CIK細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用到達(dá)病變部位直接清除殘存腫瘤細(xì)胞調(diào)節(jié)和增強(qiáng)全身免疫機(jī)能防止腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移第三十三頁，共六十三頁。CIK治療的適應(yīng)癥手術(shù)后患者，可防止腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)；腫瘤綜合治療的組成部分，如在化療治療的間隙期或在腫瘤局部放療過程中同時(shí)聯(lián)合自體免疫細(xì)胞治療。無法進(jìn)行手術(shù)、放療、化療的中晚期患者；放療、化療失敗的患者；癌性胸、腹腔積液患者。第三十四頁，共六十三頁。CIK治療的禁忌癥1、細(xì)胞因子過敏。2、T細(xì)胞淋巴瘤病人應(yīng)禁用。3、不可控制的嚴(yán)重感染患者4、晚期腫瘤造成的惡病質(zhì)、外周血象過低患者第三十五頁，共六十三頁。CIK細(xì)胞治療的優(yōu)勢(shì)整個(gè)治療過程簡(jiǎn)單易行，不良反應(yīng)小，個(gè)別患者輸入CIK細(xì)胞后有一過性發(fā)熱反應(yīng)。培養(yǎng)所需的淋巴細(xì)胞數(shù)量少，不需要采集大量的外周血。消滅微小殘留病灶用于治療某些化療不敏感的腫瘤；用于不宜手術(shù)且對(duì)化療和放療禁忌的腫瘤患者。顯效時(shí)間短，病人可以馬上感到食欲和精神狀態(tài)的好轉(zhuǎn)以及疼痛減輕，使病人對(duì)繼續(xù)接受治療充滿信心。361012109106第三十六頁，共六十三頁。

DC/CIK細(xì)胞聯(lián)合治療DC識(shí)別病原,激活獲得性免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生腫瘤特異性的免疫反應(yīng)CIK通過發(fā)揮自身細(xì)胞毒性與分泌細(xì)胞因子殺傷腫瘤細(xì)胞二者聯(lián)合有協(xié)同作用，達(dá)到互補(bǔ)的效果（1+1﹥2），確保有效和諧的免疫反應(yīng)的完成。第三十七頁，共六十三頁。細(xì)胞制備及回輸方案治療途徑：全身治療是通過靜脈輸注進(jìn)行；

局部治療是通過介入方法或直接注入病灶部位。治療過程：第0天采集外周血單個(gè)核細(xì)胞，GMP實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)；第7-8天開始收獲DC細(xì)胞，分4次回輸；第12-16天開始收獲CIK細(xì)胞，分4次回輸,1個(gè)總療程：4DC+4CIK大約1個(gè)月。第三十八頁，共六十三頁。與常規(guī)治療方法比較

39第三十九頁，共六十三頁。腫瘤綜合治療40第四十頁，共六十三頁。腫瘤生物治療與常規(guī)治療的關(guān)系第四十一頁，共六十三頁。

DC疫苗和CIK治療的療效第四十二頁，共六十三頁。病例1

CT顯示：一例轉(zhuǎn)移性髓性甲狀腺癌DC疫苗前（左）和DC疫苗治療后13個(gè)月（右）。顯示肝轉(zhuǎn)移完全消退（上），肺損害明顯減少（下），箭頭所示疫苗之前的損傷部。

引自CancersEndocrine-RelatedCancer.2006.13;779-795第四十三頁，共六十三頁。病例2

1例多發(fā)肝轉(zhuǎn)移的病例，回輸自體免疫活性細(xì)胞后獲得完全緩解。治療前（左），治療后（右）引自ProcNatlAcadSciUSA.2004October5;101:14639第四十四頁，共六十三頁。上海第二軍醫(yī)大曹雪濤、萬濤教授等2008年完成了150例轉(zhuǎn)移性晚期大腸癌應(yīng)用腫瘤抗原負(fù)載DC細(xì)胞治療的臨床研究，研究結(jié)果CR+PR達(dá)到46.2%，顯著高于隨機(jī)對(duì)照化療組22.5%。2010年4月30日，美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）批準(zhǔn)了名為Provenge的治療晚期前列腺癌疫苗。臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，患者總體生存期比對(duì)照組延長(zhǎng)4.1個(gè)月。第四十五頁，共六十三頁。FDA批準(zhǔn)了第一個(gè)應(yīng)用自體免疫細(xì)胞治療前列腺癌(Dendreon,2010-04-29)

512cases

4.1-monthimprovementin

mediansurvival(25.8monthsinthesipuleucel-T

group

vs.21.7monthsintheplacebogroup).

The36-monthsurvivalprobabilitywas31.7%inthesipuleucel-Tgroup

versus23.0%intheplacebogroup.第四十六頁，共六十三頁。

11clinicaltrials.867patients,.426

patientsweretreated.

MosttrialsincludedpatientswithHCC,gastriccancer,

andHodgkin,non-Hodgkindisease.

In10of11studies,autologousCIK

cellswereused.第四十七頁，共六十三頁。The1-,3-and5-yearDFSinpatientsreceivingCIKcellswhencomparedtonoCIKcelltreatment(127patients)Conclusion:Adjuvantimmunotherapywithcytokineinduced

killercellsmaypreventrecurrenceandimprove

qualityoflifeandprogression-freesurvivalrates

in

patients

withcancer.第四十八頁，共六十三頁。256例各種中晚期腫瘤患者（乳腺癌、肺癌、腸癌、肝癌、胃癌、淋巴瘤等）1-4療程CIK治療部分緩解和輕度緩解為207例（80.86%）1年生存期為96.06%2年生存期為92.96%3年生存期為88.38%生存質(zhì)量卡氏評(píng)分提高率為88.28%無心、肝、腎不良反應(yīng)，僅數(shù)例有一過性發(fā)熱，24小時(shí)即正常國(guó)內(nèi)2003年報(bào)道第四十九頁，共六十三頁。CIK細(xì)胞治療癌性胸、腹水136例癌性胸水61例完全消失57例顯著減少有效率86.8%83例癌性腹水26例完全消失44例顯著減少有效率84.3%第五十頁，共六十三頁。腫瘤細(xì)胞免疫治療小結(jié)第五十一頁，共六十三頁。1.第四大腫瘤治療模式，是目前知道的唯一的一種有望完全消滅癌細(xì)胞的治療