南陽市第二人民醫(yī)院腫瘤生物免疫治療講座匯總

惡性腫瘤生物治療最新技術------

抗腫瘤免疫活性細胞療法

南陽市第二人民醫(yī)院生物治療中心

第一頁，共六十三頁。三大療法的局限性

手術 放療化療第二頁，共六十三頁。手術治療的局限性

機體發(fā)生腫瘤后，盡早手術切除仍是目前治療腫瘤的第一選擇，但是單純手術療法不能清除殘留在血液和淋巴系統(tǒng)中的腫瘤細胞，造成術后復發(fā)轉移率高（1年復發(fā)率達60%，死于復發(fā)和轉移的人超80%），5年存活率低。第三頁，共六十三頁。放化療的局限性

手術后或失去手術時機的患者，通常需要進行化療或放療。化療、放療能殺傷快速增殖的腫瘤細胞，但對殘留的腫瘤干細胞和其它處于非增殖期的腫瘤細胞無效。放化療在殺死癌細胞同時，正常細胞和機體免疫功能損傷作用是不可避的。這樣就導致一種局面，即使有一個癌細胞沒有被殺死，他們也會在沒有人體免疫系統(tǒng)防護狀況下，快速增殖、擴散轉移。研究表明，經(jīng)過傳統(tǒng)的三大療法，體內(nèi)還存在至少1012個腫瘤細胞，他們主要依靠機體的免疫功能來殺傷。第四頁，共六十三頁。生物治療--新希望

20世紀80年代以來，細胞生物學、分子生物學及生物工程技術的迅速發(fā)展，使人們重新認識傳統(tǒng)的腫瘤免疫治療的理論與實踐。腫瘤的生物治療是應用生物技術，通過調(diào)節(jié)和增強腫瘤患者機體的免疫防御機制殺傷腫瘤，不但對腫瘤細胞，而且腫瘤干細胞和其它處于非增殖期的腫瘤細胞均有明顯的殺傷作用，并能提高機體的免疫力，從而能有效清除體內(nèi)殘存的腫瘤細胞，防止腫瘤的轉移及復發(fā)。第五頁，共六十三頁。生物治療--腫瘤的第四大模式1985年，美國NIH就把腫瘤生物治療正式列入繼手術、放化療以外腫瘤綜合治療的第四大模式。并因其安全、有效、無毒副作用等特點，被認為是腫瘤綜合治療模式中最活躍、最有前途的手段。2000年“國際腫瘤生物治療及基因治療年會”會議總結報告曾指出：“生物治療是目前知道的唯一的一種有望完全消滅癌細胞的治療手段，21世紀是腫瘤生物治療的世紀?！钡诹摚擦?。腫瘤生物治療的內(nèi)容

1、免疫治療2、基因治療3、干細胞治療4、誘導腫瘤細胞分化及凋亡5、抑制腫瘤新升血管治療等其中主要是免疫治療

腫瘤生物免疫療法成為最令人矚目、最鼓舞人心的焦點，將成為21世紀人類攻克癌癥具有戰(zhàn)略意義的一個重要方面.

37-39屆美國臨床腫瘤學會（ASCO）第7屆中國抗癌協(xié)會臨床腫瘤學協(xié)作專業(yè)委員會（CSCO）第七頁，共六十三頁。

免疫系統(tǒng)是人體的防御系統(tǒng)，發(fā)揮著清除體內(nèi)發(fā)生突變的腫瘤細胞的作用。機體免疫系統(tǒng)和腫瘤細胞相互作用的結果,決定了腫瘤的最終演變。腫瘤與免疫第八頁，共六十三頁。

對于健康人來說，免疫系統(tǒng)強大，足以及時清除突變的腫瘤細胞；而對于腫瘤病人來說，其免疫功能低下、不能識別腫瘤抗原、或者不能遞呈腫瘤抗原信號，從而使機體的免疫系統(tǒng)不能對腫瘤細胞進行殺傷與清除，這是腫瘤發(fā)生的主要原因之一。腫瘤與免疫第九頁，共六十三頁。腫瘤免疫治療理論基礎演變

免疫監(jiān)視學說（1964）

機體免疫系統(tǒng)能夠識別并清除惡性細胞,阻止腫瘤發(fā)生

免疫編輯學說（2002）

免疫系統(tǒng)抑制腫瘤生長的同時腫瘤的惡性程度逐漸強化

第十頁，共六十三頁。腫瘤免疫治療理論-免疫監(jiān)視學說機體免疫系統(tǒng)能夠識別并清除惡性細胞,阻止腫瘤發(fā)生第十一頁，共六十三頁。第十二頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機制機體自身免疫因素：腫瘤病人大多數(shù)伴有免疫功能低下腫瘤細胞因素第十三頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機制樹突狀細胞（殺傷性T細胞）殺傷性T細胞第十四頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機制-自身免疫因素腫瘤患者的抗原提呈缺陷：腫瘤抗原性減弱1.做為抗原遞呈細胞的樹突狀細胞（DC）細胞數(shù)量不足。2.DC抗原提呈能力下降：（1）腫瘤細胞分泌大量的抑制因子如（TGF-β）等抑制免疫反應。（2）缺乏危險信號，DC細胞不能完全成熟。（3）腫瘤細胞形成生理屏障阻礙DC攝取抗原。腫瘤患者的淋巴細胞因素1.抗腫瘤T細胞數(shù)量不足2.抗腫瘤T細胞功能下降：T細胞的腫瘤細胞親和性不足；T細胞耐受性T細胞傳導信號下調(diào)；T細胞與腫瘤細胞接觸時發(fā)生凋亡；T細胞不能進入腫瘤基質(zhì)；Treg細胞的抑制。第十五頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機制-腫瘤細胞因素腫瘤抗原表達不足腫瘤產(chǎn)生局部免疫抑制因子缺乏凋亡和破壞途徑腫瘤相關免疫抑制細胞的免疫抑制作用造成機體免疫細胞（主要為淋巴細胞）對腫瘤細胞識別和殺傷功能下降甚至消失第十六頁，共六十三頁。腫瘤免疫逃逸機制自身免疫因素腫瘤細胞因素臨床可見腫瘤第十七頁，共六十三頁。腫瘤的免疫治療腫瘤的免疫治療就是借助免疫學理論和技術，提高腫瘤抗原的免疫原性，激發(fā)和增強機體抗腫瘤的免疫應答，提高腫瘤對機體免疫效應的敏感性，在體內(nèi)外誘導大量的腫瘤特異性免疫活性細胞，以最終清除腫瘤。DC及CIK細胞是抗腫瘤免疫活性細胞治療中功能最強、最有潛力的腫瘤治療手段第十八頁，共六十三頁。概念：是機體內(nèi)最有效、功能最強的專職抗原提呈細胞（APC）它能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原未成熟DC具有較強的捕獲抗原及遷移能力成熟DC能有效激活初始型T細胞處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié)

DC，樹突狀細胞免疫療法第十九頁，共六十三頁。DC免疫療法的理論依據(jù)1.做為抗原遞呈細胞的DC細胞數(shù)量不足；2.DC抗原提呈能力下降；3.腫瘤抗原表達不足

腫瘤患者的抗原提呈缺陷→腫瘤抗原性減弱要避開這些因素的影響，體外誘導激活DC是最高效的一種方法！第二十頁，共六十三頁。DC的制備流程負載腫瘤抗原的成熟DC細胞細胞回輸誘導DC細胞腫瘤抗原臨床療效監(jiān)測

DC細胞成熟抗原負載細胞分選21第二十一頁，共六十三頁。樹突狀細胞與T細胞的作用

第二十二頁，共六十三頁。樹突狀細胞疫苗(DC免疫療法流程)

成熟抗原知敏的DC回輸給病人采集病人外周血單個核細胞加入相關抗原致敏體外細胞因子刺激發(fā)揮抗腫瘤作用利用負載腫瘤抗原的樹突狀細胞，能夠激發(fā)機體產(chǎn)生腫瘤特異性的細胞毒性T淋巴細胞，從而能有效地殺傷腫瘤細胞，并且能夠建立起持久的抗腫瘤的特異性免疫應答。第二十三頁，共六十三頁。DC細胞疫苗的優(yōu)勢整個治療過程病人簡單易行，非常輕松，無痛苦和不適。培養(yǎng)所需的淋巴細胞數(shù)量少，不需要采集大量的外周血。誘導并激活病人自身的特異性抗腫瘤免疫反應。誘導產(chǎn)生免疫記憶，使機體獲得持久的抗腫瘤免疫力?？芍委煹哪[瘤種類廣，幾乎對各種腫瘤都有一定的療效。與CIK細胞治療可以協(xié)同進行，達到互補的效果。24第二十四頁，共六十三頁。DC應用目前，DC療法，在我國已被批準用于腫瘤患者的臨床治療，已上全國及遼寧省醫(yī)療服務價格項目規(guī)范，也是目前國內(nèi)唯一被批準應用于臨床的腫瘤疫苗類治療方法，已經(jīng)大量應用于腫瘤的臨床免疫治療第二十五頁，共六十三頁。DC疫苗的臨床應用惡性黑色素瘤、前列腺癌、惡性淋巴瘤、白血病、其他實體瘤（結直腸癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、肝癌、胰腺癌、肝胰管壺腹癌、胃癌、食管癌、轉移性腎癌等、兒童青少年好發(fā)的間葉組織來源的肉瘤）的免疫治療。第二十六頁，共六十三頁。CIK，細胞因子誘導的殺傷細胞免疫療法CIK細胞是一種用外周血單個核細胞（PBMC），在體外經(jīng)過多種細胞因子培養(yǎng)激活后，獲得的對腫瘤細胞具有高效溶解毒性的一群異質(zhì)細胞。又稱為NK細胞樣T淋巴細胞：CD3+CD56+雙陽性細胞.特點：兼具有T淋巴細胞強大的抗腫瘤活性、NK細胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點。應用CIK細胞被認為是新一代抗腫瘤過繼細胞免疫治療的首選方案。CIK細胞在殺傷腫瘤細胞的同時，不損傷任何正常組織細胞。是目前國際上廣泛應用的腫瘤免疫治療手段第二十七頁，共六十三頁。28INF-γ、CD3McAb、IL-2第二十八頁，共六十三頁。

CIK增殖細胞團第二十九頁，共六十三頁。CIK細胞的特點增殖速度快殺瘤活性高，兼具有T淋巴細胞強大的抗腫瘤活性殺傷活性可達84.7%殺瘤譜廣，兼具有NK細胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點細胞來源豐富：正常或患者的骨髓或外周血單個核細胞均可誘導獲得CIK細胞對多重耐藥腫瘤細胞同樣敏感殺瘤活性不受CsA、FK506等免疫抑制劑的影響對正常骨髓造血前體細胞無毒性能抵抗腫瘤細胞引發(fā)的效應細胞Fas-FasL凋亡第三十頁，共六十三頁。CIK細胞的作用機制CIK細胞第三十一頁，共六十三頁。CIK細胞殺傷腫瘤作用特點1.能夠迅速執(zhí)行殺傷腫瘤細胞的功能，其抗瘤作用可持續(xù)2周到1個月；2.通過整個免疫網(wǎng)絡的激活，調(diào)整宿主的防御機制，達到控制腫瘤生長乃至使其消退的目的；3.一部分記憶細胞在體外也得到了擴增，一旦遇到新的腫瘤細胞出現(xiàn)，能夠迅速在體內(nèi)活化，殺傷靶細胞。

第三十二頁，共六十三頁。CIK治療流程分數(shù)次靜脈回輸體內(nèi)采集病人外周血單個核細胞PBMC加入多種細胞因子培養(yǎng)擴增、活化、誘導成為CIK細胞發(fā)揮抗腫瘤作用到達病變部位直接清除殘存腫瘤細胞調(diào)節(jié)和增強全身免疫機能防止腫瘤復發(fā)及轉移第三十三頁，共六十三頁。CIK治療的適應癥手術后患者，可防止腫瘤轉移復發(fā)；腫瘤綜合治療的組成部分，如在化療治療的間隙期或在腫瘤局部放療過程中同時聯(lián)合自體免疫細胞治療。無法進行手術、放療、化療的中晚期患者；放療、化療失敗的患者；癌性胸、腹腔積液患者。第三十四頁，共六十三頁。CIK治療的禁忌癥1、細胞因子過敏。2、T細胞淋巴瘤病人應禁用。3、不可控制的嚴重感染患者4、晚期腫瘤造成的惡病質(zhì)、外周血象過低患者第三十五頁，共六十三頁。CIK細胞治療的優(yōu)勢整個治療過程簡單易行，不良反應小，個別患者輸入CIK細胞后有一過性發(fā)熱反應。培養(yǎng)所需的淋巴細胞數(shù)量少，不需要采集大量的外周血。消滅微小殘留病灶用于治療某些化療不敏感的腫瘤；用于不宜手術且對化療和放療禁忌的腫瘤患者。顯效時間短，病人可以馬上感到食欲和精神狀態(tài)的好轉以及疼痛減輕，使病人對繼續(xù)接受治療充滿信心。361012109106第三十六頁，共六十三頁。

DC/CIK細胞聯(lián)合治療DC識別病原,激活獲得性免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生腫瘤特異性的免疫反應CIK通過發(fā)揮自身細胞毒性與分泌細胞因子殺傷腫瘤細胞二者聯(lián)合有協(xié)同作用，達到互補的效果（1+1﹥2），確保有效和諧的免疫反應的完成。第三十七頁，共六十三頁。細胞制備及回輸方案治療途徑：全身治療是通過靜脈輸注進行；

局部治療是通過介入方法或直接注入病灶部位。治療過程：第0天采集外周血單個核細胞，GMP實驗室分離培養(yǎng)；第7-8天開始收獲DC細胞，分4次回輸；第12-16天開始收獲CIK細胞，分4次回輸,1個總療程：4DC+4CIK大約1個月。第三十八頁，共六十三頁。與常規(guī)治療方法比較

39第三十九頁，共六十三頁。腫瘤綜合治療40第四十頁，共六十三頁。腫瘤生物治療與常規(guī)治療的關系第四十一頁，共六十三頁。

DC疫苗和CIK治療的療效第四十二頁，共六十三頁。病例1

CT顯示：一例轉移性髓性甲狀腺癌DC疫苗前（左）和DC疫苗治療后13個月（右）。顯示肝轉移完全消退（上），肺損害明顯減少（下），箭頭所示疫苗之前的損傷部。

引自CancersEndocrine-RelatedCancer.2006.13;779-795第四十三頁，共六十三頁。病例2

1例多發(fā)肝轉移的病例，回輸自體免疫活性細胞后獲得完全緩解。治療前（左），治療后（右）引自ProcNatlAcadSciUSA.2004October5;101:14639第四十四頁，共六十三頁。上海第二軍醫(yī)大曹雪濤、萬濤教授等2008年完成了150例轉移性晚期大腸癌應用腫瘤抗原負載DC細胞治療的臨床研究，研究結果CR+PR達到46.2%，顯著高于隨機對照化療組22.5%。2010年4月30日，美國食品和藥物管理局（FDA）批準了名為Provenge的治療晚期前列腺癌疫苗。臨床實驗結果顯示，患者總體生存期比對照組延長4.1個月。第四十五頁，共六十三頁。FDA批準了第一個應用自體免疫細胞治療前列腺癌(Dendreon,2010-04-29)

512cases

4.1-monthimprovementin

mediansurvival(25.8monthsinthesipuleucel-T

group

vs.21.7monthsintheplacebogroup).

The36-monthsurvivalprobabilitywas31.7%inthesipuleucel-Tgroup

versus23.0%intheplacebogroup.第四十六頁，共六十三頁。

11clinicaltrials.867patients,.426

patientsweretreated.

MosttrialsincludedpatientswithHCC,gastriccancer,

andHodgkin,non-Hodgkindisease.

In10of11studies,autologousCIK

cellswereused.第四十七頁，共六十三頁。The1-,3-and5-yearDFSinpatientsreceivingCIKcellswhencomparedtonoCIKcelltreatment(127patients)Conclusion:Adjuvantimmunotherapywithcytokineinduced

killercellsmaypreventrecurrenceandimprove

qualityoflifeandprogression-freesurvivalrates

in

patients

withcancer.第四十八頁，共六十三頁。256例各種中晚期腫瘤患者（乳腺癌、肺癌、腸癌、肝癌、胃癌、淋巴瘤等）1-4療程CIK治療部分緩解和輕度緩解為207例（80.86%）1年生存期為96.06%2年生存期為92.96%3年生存期為88.38%生存質(zhì)量卡氏評分提高率為88.28%無心、肝、腎不良反應，僅數(shù)例有一過性發(fā)熱，24小時即正常國內(nèi)2003年報道第四十九頁，共六十三頁。CIK細胞治療癌性胸、腹水136例癌性胸水61例完全消失57例顯著減少有效率86.8%83例癌性腹水26例完全消失44例顯著減少有效率84.3%第五十頁，共六十三頁。腫瘤細胞免疫治療小結第五十一頁，共六十三頁。1.第四大腫瘤治療模式，是目前知道的唯一的一種有望完全消滅癌細胞的治療