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SiemensAdvia系列生化儀參數(shù)詳解本詳解主要針對的是市場上常見的四種西門子機型:ADVIA1200/1650/1800/2400。大致分為五個章節(jié):簡介、根本參數(shù)介紹、讀點前移、前帶監(jiān)測、參數(shù)設(shè)置。一、簡介:ADVIA1650是最早進(jìn)入中國的拜耳生化儀,雖然師出日本,也是日本電子制造,但還是能看出拜耳的設(shè)計理念在里面。后來拜耳被西門子收購,ADVIA生化也保存了下來。ADVIAISE作為標(biāo)配安裝,ADVIA1200800測試每小時,ISE400ADVIA1650和升級版1800的生化速度都是1200測試每小時,ADVIA24001800測試每小時。Advia系列的操作把握軟件都大同小異,幾乎沒有什么本質(zhì)上的變化,所以連續(xù)性較強。加上西門子特有的流水線兼容性,使ADVIA系列的生命力變得特別堅韌,在國內(nèi)流水線市場里占據(jù)相當(dāng)大的份額。在ADVIA老版本的程序中,是支持四種試劑的,也就是R1、R2、R3R4;但在后續(xù)版2種,只有R1和R2,這一點廠家并沒有說明為什么。全部的Advia系列,都是兩個試劑盤,兩個試劑針,反響盤是單盤,塑料反響杯,一根樣本針。除ADVIA1200外,都有一個稀釋盤和稀釋樣本針,稀釋樣本針將原始樣本參與到稀釋樣本盤中,依據(jù)最高可達(dá)1:75的比例進(jìn)展樣本稀釋,然后通過樣本針將稀釋后的樣本轉(zhuǎn)移到反響盤中。同樣,在反響盤上也可以進(jìn)展最高1:75的樣本稀釋,這樣二者相乘,樣本的1:5625。稀釋樣本盤也是塑料杯,有自己單獨的攪拌器、沖洗站。ADVIA的試劑也可以進(jìn)展稀釋,所以節(jié)約試劑。但由于設(shè)計理念的關(guān)系,其孵育介質(zhì)有孵育油,也就是油浴。3M生產(chǎn)的孵育油價格較貴,而且需要半年更換。除常規(guī)的清洗劑外,反響杯空白比色也需要單獨的活化劑ADVIA的耗材較多,而且總本錢也不少。全部的ADVIA系列都是R1+S+R2方式。反響時間可選擇:3分鐘、4分鐘、5分鐘、10分鐘、152131分鐘。ADVIA12004.513.5秒,R1+S后讀第一點,1042個,R219點前參與。23180-430ul,R1R25-300ul之間。反響時間可選擇:3分鐘〔14〕、4分鐘〔18〕、5分鐘〔21〕、10分鐘〔42〕、15分鐘〔63〕2131分鐘。ADVIA165018003秒,讀點時間是6秒,R1+S后讀第一點,10分鐘反響讀98個,R249點前參與。22180-300ul,R1R215-150ul之間。ADVIA2400214秒,R1+S后讀第一點,1041個,R222點前參與。34060-180ul,R1R210-100ul之間。二、根本參數(shù)介紹:M.DET.Pm/n也就是MainDetectpointm和nmn兩點是在啟動反響后的兩個點,m點的讀點必需設(shè)置,n可以不設(shè)置〔填0就是不設(shè)置〕,雙試劑中是指R2參與之后的一組時間點,據(jù)此計算吸光度速率或平均值用于濃度計算;S.DET.Pp/subsidiaryDetectpointp和r0<p<r,r白,在雙試劑中是指R2參與前的一組時間點。讀點:N,在終點法反響中,讀點不小于三個,假設(shè)小于三個,系統(tǒng)自動前移滿足三個。在速率法當(dāng)中,讀點不能少于六個,假設(shè)小于六個,系統(tǒng)自動前移滿足六個。依據(jù)反響方法,子讀點可以選擇也可以不選擇。u/dU/D旗標(biāo):Uu表示上限,Dd表示下限,當(dāng)超過小寫u/d范圍時,用大寫U/D顯示??瞻祝築lank〔u/dU/D〕,這里指的是試劑空白的上下限。就是以去離子水為樣本的檢測,u/dU/D擇是否進(jìn)展監(jiān)測的。Blanku/d的定義是,在下降速率當(dāng)中,Blanku2ABS,Blankd為主讀點50%;在上升速率當(dāng)中,Blanku150%,Blankd50%。1Blanku/U/d/D示意圖糜、黃疸、溶血等標(biāo)本〕或底物耗盡的監(jiān)測。E2都將監(jiān)測試劑空白以及樣本加E2=樣本+R1E2E2讀點前移至發(fā)生速率反響的區(qū)域。在使用讀點前移的技術(shù)時,需要增加一個主讀點M.DET.Pl,l<m<n。假設(shè)mnlm2讀點前移示意圖2mnllmlmmn6假設(shè)推斷底物耗盡,就要借助樣本吸光度限制這個概念。樣本吸光度限制:Sampleu/d。SampleudSampledSampleuR2值。R2參與之前的監(jiān)測點就是我們前面說的E2,R2參與之后的監(jiān)測點是主讀點區(qū)的最終兩個點,叫做選擇點。E2Sampleu/d=選擇點的吸光度-〔E2*K〕E2K=〔R1+S〕/〔R1+S+R2〕是體積系數(shù)。E27LIHSampled耗盡;在上升速率反響中,當(dāng)Sampleu3底物耗盡示意圖mnlmADVIA簡潔的計算方式,目的只有一個,躲避東芝的彈性速率法。ADVIAm盡區(qū)域的可能。讀點前移不在這里做具體介紹,后面有單獨的章節(jié)。RRA、2PA、CRAIMA;一點終點法時,子讀點pr0;兩點終點法時,子讀點prR2自動前移補足。4EPAm和nR2prE2光度計算。但在參數(shù)設(shè)置,可以選擇是否選擇E2corre,也就是是否選擇E2DONotDoR2IMA0。M.DET.P.l。5RRA主讀點間的兩個點的線性監(jiān)測。其余與速率法完全一樣。62PA可承受。當(dāng)子讀點被承受時,p=r≠0,或p≠0,r=0為終點法,承受最大時間吸光度和空白吸光度進(jìn)展計算。也沒覺察實例。7CRPIMAR1E2一系列的計算和判別上的困難,IMAE2E2R2CheckD.P.I,用于R1S此法對渾濁樣本的處理很有成效,所以用在免疫比濁工程上。8IMA9IMAR1+S法或終點法。定標(biāo)方法:因數(shù)定標(biāo)、線性定標(biāo)和非線性定標(biāo);ABSSTD/MSTDADVIAadivaFormula,也就是公式才是選擇定標(biāo)方法的地方。CalcmthdABS,那就意味著你要承受因數(shù)定標(biāo),那么Linear,因數(shù)定標(biāo)只能用于線性定標(biāo)。K,KBK定標(biāo)曲線的繪制,然后依據(jù)這個曲線進(jìn)展?jié)舛扔嬎?。在AdviaKStandardssettingFVAdvia中零濃度點在試Advia5667不進(jìn)展試劑空白檢查的工程,默認(rèn)試劑空白也就是零濃度點的值是通過原點的。性定標(biāo)。10沒有做試劑空白的線性定標(biāo)線計算,而紅色的我自己畫上去的示意線條才是真正的計算直線。以以下圖是做過試劑空白的線性定標(biāo)圖例11做過試劑空白的線性定標(biāo)示意圖FV值只有一個,就是標(biāo)準(zhǔn)點的值。12AdviaAdvia〔二〕次直線方程。對此有三種方法,由于很少使用,所以僅僅圖示,不做解釋。13無變換一元三次直線方程定標(biāo)14對數(shù)線性變換的一元三次線性方程定標(biāo)15對數(shù)變換的一元三次線性方程定標(biāo)AdviaLogit-Log1、Logit-Log2、Logit-Log3SplineIinegraph16Logit-Log117Logit-Log218Logit-Log319Iinegraph20Spline項,原理是依據(jù)前后試劑空白修正整條定標(biāo)曲線。21Simplifiedcalibration11Calc.mthdABS〔因數(shù)法〕、1-Point〔1〕Multi-Point(多點定標(biāo))三個選項;NoConv.〔不變換〕、Log.-Linear〔對數(shù)線性〕Log.-Log.〔對數(shù)〕三種選擇;在MultipointFormula〔多點公式〕中,有Linear〔線性定標(biāo)〕、quadratic〔一元二次直線方程定標(biāo)〕、Cubic〔一元三次直線方程定標(biāo)〕、Spline〔樣條〕、Logit-Log1、Logit-Log2Logit-Log38方式;calStds22多點非線性定標(biāo)示意圖線,是否需要改為對數(shù)曲線還需要觀看。23原廠試劑多點非線性定標(biāo)示意圖IgM樣條曲線。三、讀點前移:Blanku/d個監(jiān)測。Sampleu/d24間接或相反反響超過Sampled25直接反響超過Sampleu2527checkD.P.I很簡潔的推斷試劑性能。以以下圖是極端狀況下的試劑空白限制的圖例26試劑空白圖例通過試劑空白計算出來的Blanku/dU/D靠。R26、7、8監(jiān)測底物耗盡的,假設(shè)用E2LIH2、3、4、5方。在直接反響中,也就是單試劑工程里:checkD.P.IBlanku的值時,結(jié)果用u標(biāo)示;checkD.P.IBlankd的值時,結(jié)果用D標(biāo)示;在間接反響中,也就是雙試劑工程里:checkD.P.IBlanku的值時,結(jié)果用U標(biāo)示;checkD.P.IBlankd的值時,結(jié)果用d標(biāo)示;U/u/D/d”這四種旗標(biāo)的來歷。下面舉例說明讀點前移技術(shù)的使用:271曲線。圖中有兩天豎線,一個E2,一個是checkD.P.I,那么依據(jù)圖示可以得到以下數(shù)據(jù):E2吸光度值 試劑空白修正E2〔E2-試劑空白〕試劑空白0.10-正常樣本0.500.40特別樣本0.60 0.50那么經(jīng)過體積修正過的 E2是要計算修正系數(shù)的,而修正系數(shù) =〔R1+S〕/〔R1+S+R2〕。R180,S16,R216,0.875。E20.343,E20.429。CheckD.P.IR20.551.00。那么體積修正過的CheckD.P.I-E2的值是:正常樣本是0.207,特別樣本是0.571。依據(jù)試劑空白的原則,Blanku0.40,Blankd0.05。E2Blanku0.40u0.40,0.571Blanku0.40,U。282282,藍(lán)色為特別標(biāo)本1。很明12R2之前就過高了。E2E2〔E2-試劑空白〕試劑空白-0.0041 -正常樣本2.61192.6160特別樣本1.71541.719512.24221.474;CheckD.P.I12.4665,21.4670;0.224,2-0.007;Blanku0.20,Blankd0.01。Blankd0.01,又是間接反響,所以結(jié)果報d。CheckD.P.I150%50%低計算公式計算的,但即便是這樣,例子中還是推斷為底物耗盡?!?.9999,這也就意味著不進(jìn)展底物D.P.IM.DET.P.l意義了。Blanku/d可以同時,也可以單獨使用,監(jiān)測底物耗盡照舊有確定的作用。29樣本吸光度限制Sampleu/d圖29的上圖是選擇點吸光度值大于Sampleu,以以下圖是選擇點吸光度值小于Sampled,所以都被推斷為底物耗盡。下面舉例說明計算方法:30Sampleu/d圖中紅色為試劑空白,藍(lán)色為特別樣本。試劑空白的E2-0.004,樣本的E20.6127;Sample u/d=1.25-[0.6127-〔-0.004〕]*{[16(S)+80(R1)]/[16(S)+80(R1)+16(R2)]}=0.7215;是選擇點的吸光度值只有0.250,遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于Sampled的0.7215〔圖中放寬到〔SampleSample推斷底物耗盡后,就需要讀點前移。而承受讀點前移,還需要一個M.DET.P.l讀點。31讀點前移的各種可能圖示M.DET.P.m和M.DET.P.n移就是讀取M.DET.P.l和M.DET.P.mM.DET.P.mM.DET.P.m也毫無意義。術(shù)不僅可以推斷試劑問題,也可以推斷反響過程中的問題,還是很有幫助的。我們要糊涂的知道,利用讀點前移技術(shù),必需進(jìn)展試劑空白檢測,并且計算出和CheckD.P.I的設(shè)置和前移點M.DET.P.l四、前帶監(jiān)測:AdviaIMA數(shù)界面的一個區(qū)域里。32前帶監(jiān)測界面示意圖不同?!灿糜诮K點法工程〕,也可以選擇速率公式〔用于速率法工程〕。無論選擇什么公式,ProzoneLimit帶反響。ProzoneLimit值,來推斷前帶現(xiàn)象。假設(shè)選擇速率公式,那么必需輸入judgelimit吸光度值,將不進(jìn)展前帶檢查。數(shù)里的不同,也就是參數(shù)設(shè)置里的Calculationsmethodsetting里的M.DET.P.m/nS.DET.P.p/r下面舉例如何使用前帶監(jiān)測:33前帶監(jiān)測舉例圖中的實線是正常樣本,虛線是前帶樣本。實線AM.DET.P.m88–n90=0.750ProzoneLimit虛線BM.DET.P.m88–n900.726p51r53=0.6670.049。,0.0490.350,所以發(fā)生前帶現(xiàn)象,因此p0Advia1650R24934前帶監(jiān)測的設(shè)置舉例-Advia1650而在速率法中,前帶的現(xiàn)象也會導(dǎo)致結(jié)果偏低。351理,所以不會存在前帶反響,而樣本則不然,幾乎無法避開。362上圖可以看出,主讀點區(qū)內(nèi)的速率相差很大,高濃度校準(zhǔn)品速率為0.050,高濃0.031,由此計算出來的濃度值或活性值將會相差很大。37速率法前帶監(jiān)測的計算圖示上圖中,高濃度校準(zhǔn)品主讀點的中間值是M.DET.P.m90–n95=0.044,p51–r56=0.046,速率比值mn/pr=0.96,ProzoneLimitS.DET.P.p51–r56=0.177,速率比值mn/pr=0.12。,0.120.96,所以發(fā)生前帶現(xiàn)象,因此結(jié)p假設(shè)是低濃度標(biāo)本,會不會導(dǎo)致誤判呢?下面舉例說明:38低濃度樣本速率法前帶監(jiān)測圖示曲線A還是高濃度校準(zhǔn)品,曲線C為低濃度樣本,圖中看出沒有前帶現(xiàn)象。S.DET.P.p51–r56=0.016,速率比值mn/pr=0.44。Prozonejudge,ProzoneLimit0.96,0.440.96,p為了解決這個誤報,在速率法進(jìn)展前帶監(jiān)測時,要承受JudgeLimit低于子讀點的吸光度中間值時,將不進(jìn)展前帶檢查。以以下圖就是參數(shù)設(shè)置畫面:39低濃度樣本前帶監(jiān)測設(shè)置圖示釋樣本重測的緣由。Limit與計算讀點并不沖突。同時前帶監(jiān)測與底物耗盡監(jiān)測也不沖突。點終點法來說,效果并不是很明顯,濃度或活性差異并不大。五、參數(shù)設(shè)置:Adiva全部的標(biāo)題和字段位置有些換位,僅此而已。下面是我手頭上有的幾個型號版本的參數(shù)界面圖:40Advia120041Advia120042Advia1650老版本參數(shù)界面43Advia1650Advia240044Advia1800Advia2400〔41〕為例,這也是Advia1800將盡可能具體的解釋一下參數(shù)設(shè)置的留意要點。Analyticalcondition分析條件界面:45analyticalcondition定反響時間和攪拌方式。R1/R2volume是試劑參與量,每個型號的設(shè)備不同,對此的要求也不同。以Advia2400為例,R1和R2的參與量不能超過100ul,這包括稀釋試劑的稀釋液不過這關(guān)系不大,設(shè)置多了儀器會報警的。全部機型的最低試劑參與量是15ul,但無論怎么樣,都要滿足不同型號儀器的最低最高反響量。vol,0-100150ul劑來說很有用,但對于國產(chǎn)試劑來說,稀釋毫無必要。不稀釋的話,輸入0,。R1/R2diluentvolvolume20ul,R1/R2diluentvol80ul,那1:5Advia240060ul量就夠了,所以輸入?yún)?shù)之前,要算好比例。Serumreac.s.vol是樣本參與量,也就是稀釋后參與反響杯的量;StandardSpecialNone不選擇三種方式。稀釋比例會在濃度或活性計算的時候自動乘入。Serumdil.s.volSerumdil.volume參與的稀釋液的量。30ul,120ul,1:51:75,但無論怎么設(shè)置,都要知道在稀釋盤里,死腔量是35ul,35ul100ul,那么就必需保證稀釋盤里的樣本和稀釋液135ul。而稀釋盤上的稀釋杯最大容量不能超過300ul,所以還要算好整個稀釋比例。35ul,30ul也幾乎不行能被樣本針轉(zhuǎn)移到反響盤。Serumreac.s.vol始樣本盤轉(zhuǎn)移到稀釋樣本盤,再轉(zhuǎn)移到反響盤,這是不行能完成的任務(wù)。0。1-61UrineSet清標(biāo)本一樣,數(shù)值有些不同罷了。Reactiontime,3,4,5,10,15,211010Reagent1/2stirStrongWeak19881984R2R2〔特別是兩點終點法Weak的狀況下,簡潔將反響液溢出。Sub-analyticalconditions子分析條件46Sub-analyticalconditions子分析條件NameM.wave.L.S.wave.L.付波長EPARRA2PACRAIMA三種方法。NotdoDoDo,QualitySet。這個功能是指定超過正常范圍的樣本不顯示具體的數(shù)值,而是用定性方式來顯定性類型和樣本類型,以及判定范圍。formula公式,對定標(biāo)偏差的工程進(jìn)展實時校正。這一項很少使用,但確實有用。Reanalysisconditions自動重測條件設(shè)定47Reanalysisconditions自動重測條件設(shè)定這是承受自動重測模式的設(shè)置,

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