實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血技術(shù)給藥技術(shù)一

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血技術(shù)給藥技術(shù)一第一頁，共六十四頁，2022年，8月28日一、大、小鼠的抓取固定第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定第二頁，共六十四頁，2022年，8月28日小鼠固定盒固定第三頁，共六十四頁，2022年，8月28日大鼠固定盒固定第四頁，共六十四頁，2022年，8月28日二、豚鼠的抓取固定法第五頁，共六十四頁，2022年，8月28日三、家兔的抓取固定法第六頁，共六十四頁，2022年，8月28日第七頁，共六十四頁，2022年，8月28日一、大、小鼠的性別鑒定第二節(jié)

性別鑒定第八頁，共六十四頁，2022年，8月28日Female

Male

二、兔的性別鑒定第九頁，共六十四頁，2022年，8月28日一、大、小鼠

1.根據(jù)形態(tài)鑒定日齡（大、小情況基本一樣）第三節(jié)年齡的大致判斷日齡/d外觀形態(tài)特征1仔鼠裸體鮮紅3耳殼露出表皮4臍帶瘢痕脫落5能翻身8能爬行第十頁，共六十四頁，2022年，8月28日日齡/d外觀形態(tài)特征10能聽到聲音9～11全身被白毛，門齒長出13～15眼皮張開，能跳躍，能抓取東西18以后能自行采食，獨(dú)立生活第十一頁，共六十四頁，2022年，8月28日第十二頁，共六十四頁，2022年，8月28日第十三頁，共六十四頁，2022年，8月28日第十四頁，共六十四頁，2022年，8月28日第十五頁，共六十四頁，2022年，8月28日第十六頁，共六十四頁，2022年，8月28日第十七頁，共六十四頁，2022年，8月28日2.根據(jù)體重鑒定日齡⑴小鼠日齡與體重的對應(yīng)日齡/d初生51015202530體重/g1.84.06.011.015.021.021.0第十八頁，共六十四頁，2022年，8月28日⑵大鼠日齡與體重的對應(yīng)日齡/d初生10203040體重/g6～717～2535～5055～90100～150日齡/d50607080體重/g150～210170～240210～270240～320第十九頁，共六十四頁，2022年，8月28日常規(guī)采血方法

一、大、小鼠的采血方法

1．頸靜脈或頸動(dòng)脈采血

2．股靜脈或股動(dòng)脈采血

3．心臟采血

4．尾部采血

5．眼眶采血

6．?dāng)囝^取血第二十頁，共六十四頁，2022年，8月28日頸靜脈或頸動(dòng)脈采血尾部采血第二十一頁，共六十四頁，2022年，8月28日心臟采血第二十二頁，共六十四頁，2022年，8月28日二、豚鼠的采血方法

1．耳緣剪口采血

2．心臟采血方法同大、小鼠。

3．股動(dòng)脈采血方法同大、小鼠。

4．后肢背中足靜脈采血第二十三頁，共六十四頁，2022年，8月28日三、家兔的采血方法

1．心臟采血

2．耳中央動(dòng)脈采血

3．耳靜脈采血第二十四頁，共六十四頁，2022年，8月28日

四、狗、貓的采血方法

1．后肢外側(cè)跗外靜脈、內(nèi)側(cè)隱靜脈、前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈采血

2．股動(dòng)脈采血

3.心臟采血同大、小鼠心臟采血

4．耳緣靜脈采血同兔耳緣靜脈采血第二十五頁，共六十四頁，2022年，8月28日

采血方法的選擇，決定于實(shí)驗(yàn)?zāi)康乃柩恳约皠?dòng)物種類。凡用血量較少的檢驗(yàn)如紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白的測定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破組織取毛細(xì)血管的血。當(dāng)需血量較多時(shí)可作靜脈采血。靜脈采血時(shí)，若需反復(fù)多次，應(yīng)自遠(yuǎn)離心臟端開始，以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈。研究毒物對肺功能的影響、血液酸堿平衡、水鹽代謝紊亂，需要比較動(dòng)、靜脈血氧分壓、二氧化碳分壓和血液pH值以及K+、Na+、Cl-離子濃度，必須采取動(dòng)脈血液。第二十六頁，共六十四頁，2022年，8月28日采血場所有充足的光線；室溫夏季最好保持在25～28℃，冬季，15～20℃為宜；采血用具有采用部位一般需要進(jìn)行消毒；采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑。采血時(shí)要注意第二十七頁，共六十四頁，2022年，8月28日

部位

動(dòng)物種類ａ．尾靜脈大鼠、小鼠ｂ．耳靜脈兔、狗、貓、豬、山羊、綿羊ｃ．眼底靜脈叢兔、大鼠、小鼠d．舌下靜脈兔e．腹壁靜脈青蛙、蟾蜍f．冠、腳蹼皮下靜脈雞、鴨、鵝１．取少量血第二十八頁，共六十四頁，2022年，8月28日

部位

動(dòng)物種類ａ．后肢外側(cè)皮下小隱靜脈狗、猴、貓ｂ．前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈狗、猴、貓ｃ．耳中央動(dòng)脈兔ｄ．頸靜脈狗、貓、兔ｅ．心臟豚鼠、大鼠、小鼠ｆ．?dāng)囝^大鼠、小鼠ｇ．翼下靜脈雞、鴨、鴿、鵝ｈ．頸動(dòng)脈雞、鴨、鴿、鵝２．取中量血第二十九頁，共六十四頁，2022年，8月28日

部位

動(dòng)物種類ａ．股動(dòng)脈、頸動(dòng)脈狗、猴、貓、兔ｂ．心臟狗、猴、貓、兔ｃ．頸靜脈馬、牛、山羊、綿羊ｄ．摘眼球大鼠、小鼠３．取大量血第三十頁，共六十四頁，2022年，8月28日動(dòng)物種類最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500獵狗50200猴15604.最大安全采血量與最小致死采血量第三十一頁，共六十四頁，2022年，8月28日給藥途徑與方法

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?dòng)物種類、藥物類型來決定動(dòng)物的給藥途徑與方法。動(dòng)物的給藥方法主要分為注射法和投入法兩種，不同方法按給藥途徑又分為很多具體類型。注射法分為：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、腦膜下注射、腦內(nèi)注射、胸腔內(nèi)注射、腰椎內(nèi)注射、靜脈注射、關(guān)節(jié)腔注射和心內(nèi)注射。投入法可分為：鼻腔內(nèi)投入、胃腔內(nèi)投入、腸管內(nèi)投入、氣管內(nèi)投入和經(jīng)口腔投入。以下將各種動(dòng)物的主要給藥途徑和方法做一介紹。第三十二頁，共六十四頁，2022年，8月28日

（一）皮下注射皮下注射部位一般狗、貓多在大腿外側(cè)，豚鼠在后腿的內(nèi)側(cè)或小腹部；大白鼠可在側(cè)下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。（二）皮內(nèi)注射皮內(nèi)注射時(shí)需將注射的局部脫去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮膚并使之繃緊，在兩指之間，用注射器連4(1/2)細(xì)針頭，緊貼皮膚表層刺入皮內(nèi)，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射藥液，此時(shí)可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。第三十三頁，共六十四頁，2022年，8月28日（三）肌肉注射

肌肉內(nèi)血管豐富，注射后吸收較快，僅次于靜脈注射；又因感覺神經(jīng)較皮下少，故引起疼痛較輕，臨床上應(yīng)用較多。1、部位凡是肌肉豐富的部位，均可進(jìn)行肌肉注射。犬貓?jiān)诩怪鶅蓚?cè)的腰部肌肉或股部肌肉。2、方法局部消毒，將針頭迅速刺入肌肉內(nèi)，抽拔活塞無回血后緩慢注入藥液。注射時(shí)，不要將針頭全刺入肌肉內(nèi)，以免折斷時(shí)不易取出。第三十四頁，共六十四頁，2022年，8月28日

（四）腹腔注射用大、小白鼠做實(shí)驗(yàn)時(shí)，以左手抓住動(dòng)物，使腹部向上，右手將注射針頭于左（或右）下腹部刺入皮下，使針頭向前推

0.5～1.0cm，再以45度角穿過腹肌，固定針頭，緩緩注入藥液，為避免傷及內(nèi)臟，可使動(dòng)物處于頭低位，使內(nèi)臟移向上腹。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為家兔，進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開1cm處。第三十五頁，共六十四頁，2022年，8月28日

（五）靜脈注射

1．兔：兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動(dòng)脈，耳外緣為靜脈。內(nèi)緣靜脈深不易固定，故不用。外緣靜脈表淺易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指彈動(dòng)或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端，無名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入，移動(dòng)拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液注入，然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。第三十六頁，共六十四頁，2022年，8月28日2．小白鼠和大白鼠一般采用尾靜脈注射，操作時(shí)先將動(dòng)物固定在鼠筒內(nèi)或扣在燒杯中，使尾巴露出，尾部用45～50℃的溫水浸潤半分鐘或用酒精擦拭使血管擴(kuò)張，并可使表皮角質(zhì)軟化，以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè)，使靜脈充盈，用中指從下面托起尾巴，以無名指和小指夾住尾巴的末梢，右手持注射器連4(1/2)號細(xì)針頭，使針頭與靜脈平行（小于30℃），從尾下四分之一處（約距尾尖2～3厘米）處進(jìn)針，此處皮薄易于刺入，先緩注少量藥液，如無阻力，表示針頭已進(jìn)入靜脈，可繼續(xù)注入。注射完畢后把尾部向注射側(cè)彎曲以止血。如需反復(fù)注射，應(yīng)盡可能從末端開始，以后向尾根部方向移動(dòng)注射。第三十七頁，共六十四頁，2022年，8月28日3．狗狗靜脈注射多選前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈或后肢小隱靜脈注射。注射前由助手將動(dòng)物側(cè)臥，剪去注射部位的被毛，用膠皮帶扎緊（或用手抓緊）靜脈近端，使血管充盈，從靜脈的遠(yuǎn)端將注射針頭平行刺入血管，待有回血后，松開綁帶（或兩手），緩緩注入藥液。第三十八頁，共六十四頁，2022年，8月28日（一）部位犬貓均可在頸靜脈溝上1/3與中1/3交界處進(jìn)行靜脈注射。犬還可在腕關(guān)節(jié)以上的前內(nèi)側(cè)或腕關(guān)節(jié)以下掌中部前內(nèi)側(cè)的靜脈，或跗關(guān)節(jié)外側(cè)上方的靜脈、股內(nèi)側(cè)的靜脈等注射。第三十九頁，共六十四頁，2022年，8月28日注射途徑小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.2～1.01～32～55～105～15肌肉0.1～0.20.2～0.50.2～0.50.5～12～5靜脈0.2～0.51～21～53～105～15皮下0.1～0.50.5～10.5～21～33～10幾種動(dòng)物不同給藥途徑的常用注射量（毫升）第四十頁，共六十四頁，2022年，8月28日

（六）經(jīng)口給藥多用灌胃法，此法劑量準(zhǔn)確，適用于小白鼠、大白鼠、家兔等動(dòng)物。

1．小鼠、大鼠（或豚鼠）灌胃時(shí)將灌胃針按在注射器上，吸入藥液。左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動(dòng)物固定，右手持注射器，將灌胃針插入動(dòng)物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。動(dòng)物應(yīng)固定成垂直體位，針插入時(shí)應(yīng)無阻力。若感到阻力或動(dòng)物掙扎時(shí)，應(yīng)立即停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬?，以兔損傷或穿破食道以及誤入氣管。一般當(dāng)灌胃針插入小鼠3～4cm，大鼠或豚鼠4～6cm后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為0.2～

1ml，大鼠1～4ml，豚鼠為1～5ml。第四十一頁，共六十四頁，2022年，8月28日2．狗、兔、貓、猴

灌胃時(shí)，先將動(dòng)物固定，再將特制的開口器放入動(dòng)物口中，開口器之寬度可視動(dòng)物口腔大小而定，

灌胃時(shí)將開口器放于上述動(dòng)物上下門牙之后，并用繩將它固定于嘴部，將帶有彈性的橡皮導(dǎo)管（如導(dǎo)尿管），經(jīng)開口器上的小圓孔插入，沿咽后壁而進(jìn)入食道，此時(shí)應(yīng)檢查導(dǎo)管是否正確插入食道，可將導(dǎo)管外口置于一盛水的燒杯中，如不發(fā)生氣泡，即認(rèn)為此導(dǎo)管是在食道中，未誤入氣管，即可將藥液灌入。第四十二頁，共六十四頁，2022年，8月28日

給狗、兔灌胃時(shí)，也可不用開口器：狗灌胃時(shí)，用12號灌胃管，左手抓住狗嘴，右手中指由右嘴角插入，摸到最后一對臼齒后的天然空隙，胃管由此空隙順食管方向不斷插入約20cm，可達(dá)胃內(nèi)，將胃管另一端插入水中，如不出氣泡，表示確已進(jìn)入胃，而沒誤入氣管內(nèi)，即可灌入。第四十三頁，共六十四頁，2022年，8月28日

兔灌胃時(shí)，將兔固定在木制固定盒內(nèi)左手虎口卡住并固定好兔嘴，右手取14號細(xì)導(dǎo)管，由右側(cè)唇裂避開門齒，將導(dǎo)管慢慢插入，如插管順利，動(dòng)物不掙扎，插入約15cm時(shí)，即表示插入胃內(nèi)，將藥液注入。各種動(dòng)物一次灌胃能耐受的最大容積小鼠為0.5～1.0ml，大鼠4～7ml，豚鼠為4～7ml，家兔為80～150ml，狗為200～500ml。第四十四頁，共六十四頁，2022年，8月28日

麻醉方法

麻醉(anesthesia)的基本任務(wù)是消除實(shí)驗(yàn)過程中所至的疼痛和不適感覺，保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安全，使動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)中服從操作，確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。一、常用的麻醉劑動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的麻醉劑分為三類，即揮發(fā)性麻醉劑、非揮發(fā)性麻醉劑和中藥麻醉劑。

第四十五頁，共六十四頁，2022年，8月28日

1．揮發(fā)性麻醉劑包括乙醚、氯仿等，乙醚吸入麻醉適用于各種動(dòng)物，其麻醉量和致死量差距大，所以安全度亦大，動(dòng)物麻醉深度容易掌握，而且麻后蘇醒較快。其缺點(diǎn)是對局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多，再通過神經(jīng)反射可影響呼吸、血壓和心跳活動(dòng)，并且容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醉時(shí)必需有人照看，以防麻醉過深而出現(xiàn)以上情況。

第四十六頁，共六十四頁，2022年，8月28日2．非揮發(fā)性麻醉劑

這類麻醉劑種類較多，包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉等巴比妥類的衍生物，氨基甲酸乙脂和水合氯醛。這些麻醉劑使用方便，一次給藥可維持較長的麻醉時(shí)間，麻醉過程較平衡，動(dòng)物無明顯掙扎現(xiàn)象。但缺點(diǎn)是蘇醒較慢。

3．中藥麻醉劑

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)有時(shí)也用到象洋金花和氫溴酸東莨菪堿等中藥麻醉劑，但由于其作用不夠穩(wěn)定，而且常需加佐劑麻醉效果才能理想，故在使用過程中不能得到普及，因而，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室不選用這類麻醉劑進(jìn)行麻醉。第四十七頁，共六十四頁，2022年，8月28日

二、動(dòng)物的麻醉方法

1．全身麻醉（1）吸入法用一塊圓玻璃板和一個(gè)鐘罩或一個(gè)密閉的玻璃箱作為揮發(fā)性麻醉劑的容器，多選用乙醚作麻藥。麻醉時(shí)用幾個(gè)棉球，將乙醚倒入其中，迅速轉(zhuǎn)入鐘罩或箱內(nèi)，讓其揮發(fā)，然后把待麻醉動(dòng)物投入，約隔4～6分鐘即可麻醉，麻醉后應(yīng)立即取出，并準(zhǔn)備一個(gè)蘸有乙醚的棉球小燒杯，在動(dòng)物麻醚變淺時(shí)給套在鼻上使其補(bǔ)吸麻藥。本法最適于大、小鼠的短期操作性實(shí)驗(yàn)的麻醉，也可用于較大的動(dòng)物。由于乙醚燃點(diǎn)很低，遇火極易燃燒，所以在使用時(shí)，一定要遠(yuǎn)離火源。第四十八頁，共六十四頁，2022年，8月28日

（2）腹腔和靜脈給藥麻醉法非揮發(fā)性和中藥麻醉劑均可用作腹腔和靜脈注射麻醉，操作簡便，是實(shí)驗(yàn)室最常采用的方法之一。腹腔給藥麻醉多用于大小鼠和豚鼠，較大的動(dòng)物如兔、狗等則多用靜脈給藥進(jìn)行麻醉。由于各麻醉劑的作用長短以及毒性的差別。所以在腹腔和靜脈麻醉時(shí)，一定要控制藥物的濃度和注射量。第四十九頁，共六十四頁，2022年，8月28日2．局部麻醉⑴貓的局部麻醉一般應(yīng)用0.5～1.0%鹽酸普魯卡因注射。粘膜表面麻醉宜用2%鹽酸可卡因。

⑵兔在眼球手術(shù)時(shí)，可于結(jié)膜囊滴入0.02%鹽酸可卡因溶液，數(shù)秒鐘即可出現(xiàn)麻醉。⑶狗的局部麻醉用0.5～1%鹽酸普魯卡因注射。眼鼻、咽喉表面麻醉可用2%鹽酸可卡因。第五十頁，共六十四頁，2022年，8月28日4．麻醉注意事項(xiàng)⑴靜脈注射必須緩慢，同時(shí)觀察肌肉緊張性、角膜反射和對皮膚夾捏的反應(yīng)，當(dāng)這些活動(dòng)明顯減弱或消失時(shí)，立即停止注射。配制的藥液濃度要適中，不可過高，以兔麻醉過急；但也不能過低，以減少注入溶液的體積。

第五十一頁，共六十四頁，2022年，8月28日⑵麻醉時(shí)需注意保溫。麻醉期間，動(dòng)物的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能往往受到抑制，出現(xiàn)體溫下降，可影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。此時(shí)常需采取保溫措施。保溫的方法有，實(shí)驗(yàn)桌內(nèi)裝燈，電褥，臺(tái)燈照射等。無論用哪種方法加溫都應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的肛門體溫而定。常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常體溫：貓為38.6℃±1.0℃，兔為38.4℃±1.0℃，大鼠為39.3℃±0.5℃。⑶作慢性實(shí)驗(yàn)時(shí)，在寒冷冬季，麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動(dòng)物體溫水平。第五十二頁，共六十四頁，2022年，8月28日

處死方法

當(dāng)實(shí)驗(yàn)中途停止或結(jié)束時(shí)，實(shí)驗(yàn)者應(yīng)站在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的立場上以人道的原則去處置動(dòng)物，原則上不給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安樂死。安樂死是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在沒有痛苦感覺的情況下死去。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂死方法的選擇取決于動(dòng)物的種類與研究的課題。第五十三頁，共六十四頁，2022年，8月28日

一、蛙類常用金屬探針插入枕骨大孔，破壞腦脊髓的方法處死。將蛙用濕布包住，露出頭部，左手執(zhí)蛙，并用食指按壓其頭部前端，拇指按壓背部，使頭前俯；右手持探針由凹陷處垂直刺入，刺破皮膚即入枕骨大孔。這時(shí)將探針尖端轉(zhuǎn)向頭方，向前深入顱腔，然后向各方攪動(dòng)，以搗毀腦組織。再把探針由枕骨大孔刺入并轉(zhuǎn)向尾方，刺入椎管，以破壞脊髓。腦和脊髓是否完全破壞，可檢查動(dòng)物四肢肌肉的緊張性是否完全消失。拔出探針后，用一小干棉球?qū)⑨樋锥伦。苑乐钩鲅?。操作過程中要防止毒腺分泌物射入實(shí)驗(yàn)者眼內(nèi)。如被射入時(shí)，則需立即用生理鹽水沖洗眼睛。第五十四頁，共六十四頁，2022年，8月28日

二、大鼠和小鼠

1.頸椎脫臼法：右手抓住鼠尾用力向后拉，同時(shí)左手拇指與食指用力向下按住鼠頭。將脊髓與腦髓拉斷，鼠便立即死亡。

2.斷頭法：用剪刀在鼠頸部將鼠頭剪掉，鼠立即死亡。

3.擊打法：右手抓住鼠尾提起，用力摔擊其頭部，鼠痙攣后立即死去?；蛴媚惧N用力擊打鼠頭部也可致死。

4.急性大出血法：可采用鼠眼眶動(dòng)脈和靜脈急性大量失血方法使鼠立即死亡。

5.藥物致死法：吸入一定量的一氧化碳、乙醚、氯仿等均可使動(dòng)物致死。第五十五頁，共六十四頁，2022年，8月28日

三、狗、兔、豚鼠

1.空氣栓塞法：向動(dòng)物靜脈內(nèi)注入一定量的空氣，使之發(fā)生栓塞而死。當(dāng)空氣注入靜脈后，可在右心隨著心臟的跳動(dòng)使空氣與血液成泡沫狀，隨血液循環(huán)到全身。如進(jìn)到肺動(dòng)脈，可阻塞其分支，進(jìn)入心臟冠狀動(dòng)脈，造成冠狀動(dòng)脈阻塞，發(fā)生嚴(yán)重的血液循環(huán)障礙，動(dòng)物很快致死。一般兔、貓等靜脈內(nèi)注入20～40ml空氣即可致死。每條狗由前肢或后肢皮下靜脈注入80～150ml空氣，可很快致死。第五十六頁，共六十四頁，2022年，8月28日2.急性失血法先使動(dòng)物輕度麻醉，如狗可按每公斤體重靜脈注射硫噴妥納20～30mg，動(dòng)物即很快入睡。暴露股三角區(qū)，用鋒利的殺狗刀在股三角區(qū)作一個(gè)