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選修一第一部分微生物的利用第1課時(shí)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1.判斷正誤(1)大腸桿菌是革蘭氏陰性菌,對(duì)人無(wú)害。(×)(2)擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌常用LB液體培養(yǎng)基。(√)(3)利用涂布分離法分離細(xì)菌時(shí),需要先將培養(yǎng)的菌液進(jìn)行梯度稀釋。(√)(4)在“大腸桿菌的培養(yǎng)和分離”所用棉花為脫脂棉。(×)2.有關(guān)劃線分離操作正確的是()A.使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿,操作過(guò)程中不再滅菌B.打開(kāi)含菌種的試管需通過(guò)火焰滅菌,取出菌種后需馬上塞上棉塞C.將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線即可D.最后將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)解析考查劃線分離操作。平板劃線操作時(shí)要時(shí)刻注意兩個(gè)問(wèn)題:一是防止雜菌污染;二是要盡可能地將菌種分離。答案D3.固體培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽滅菌后,待培養(yǎng)基冷卻到60℃(1)如何確定制備的培養(yǎng)基滅菌是否合格?___________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在固體培養(yǎng)基凝固前擱置斜面的目的是什么?____________________________________________________________。(3)平板冷凝后,為什么要將平板倒置?___________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一定時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌產(chǎn)生。(2)增大接種面積(3)平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。4.下表是用于分離純化大腸桿菌的LB固體培養(yǎng)基的配方。請(qǐng)回答:試劑用量蛋白胨0.5g酵母提取物0.25g氯化鈉0.5g水50mL瓊脂1g(1)上述培養(yǎng)基配方中充當(dāng)?shù)吹某煞种饕莀_______。培養(yǎng)基配制完成以后,一般還要調(diào)節(jié)pH并對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行________處理。(2)分離純化微生物最常使用的接種方法是________和________兩種。在接種過(guò)程中,接種環(huán)或玻璃刮刀的滅菌方法是_________________________________________________________________。(3)假設(shè)某同學(xué)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上細(xì)菌數(shù)目過(guò)多地連成一片,可能的原因是什么?_________________________________________________________________。答案(1)蛋白胨滅菌(2)劃線分離法涂布分離法明火灼燒(3)菌液濃度過(guò)高;培養(yǎng)過(guò)程中被雜菌污染;利用接種環(huán)劃線時(shí),劃下一個(gè)區(qū)域前沒(méi)有對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌處理5.為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問(wèn)題:(1)該小組采用涂布分離法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是_____________________;然后,將1mL水樣稀釋100倍,在3個(gè)平板上用涂布分離法分別接入mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_______。(2)該小組采用劃線分離法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí),接種環(huán)通過(guò)________滅菌,在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是________________________。(3)示意圖A和B中,________表示的是用涂布分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量,同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高_(dá)_______的利用率。解析(1)為了檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格,可在涂布接種前,隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。mL稀釋液中平均有(39+38+37)/3=38個(gè)活菌,則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/=380,則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×100=×104,則每升水樣中活菌數(shù)目為×104×1000=×107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃料層灼燒,以達(dá)到迅速?gòu)氐诇缇哪康摹T诘诙渭耙院蟮膭澗€時(shí),總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線,其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出:A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性,是用劃線分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果;B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布,是用涂布分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量,還可
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