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實驗7.1植物(zhíwù)細胞有絲分裂的觀察第一頁,共17頁。一、實驗(shíyàn)原理有絲分裂是細胞均等增殖的過程(guòchéng),是體細胞分裂的主要方式。在有絲分裂(yǒusīfēnliè)過程中,細胞內(nèi)每條染色體都能復制一份,然后分配到子細胞中,因此兩個子細胞與母細胞所含的染色體在數(shù)目、形態(tài)和性質(zhì)均是相同的,在各種生長旺盛的植物組織中均存在著有絲分裂(yǒusīfēnliè)。第二頁,共17頁。因此,選取植物體生長旺盛的分生組織(如根尖、莖尖、幼葉等),經(jīng)固定、解離、染色及壓片等處理(chǔlǐ),將細胞分散在裝片中,顯微鏡下,即可看到大量處于有絲分裂各時期的細胞和染色體。第三頁,共17頁。二、材料(cáiliào)和用品洋蔥、大蒜的鱗莖;或玉米、黑麥、小麥(xiǎomài)、蠶豆的種子等。本實驗以洋蔥為實驗材料。材料(cáiliào):用具及藥品:顯微鏡、鑷子、刀片、解剖針、載玻片、蓋玻片、濾紙、培養(yǎng)皿、酒精燈、95%乙醇、濃鹽酸、改良苯酚品紅等。第四頁,共17頁。三、實驗(shíyàn)步驟1、取材:選取健壯(jiànzhuàng)的大蒜根尖,自尖端約1cm處,將其剪下備用2、固定處理:將根尖放入卡諾固定液中,室溫固定3-24h;如不立即使用,可轉(zhuǎn)入70%的乙醇中置于冰箱或陰暗處長期保存目的:殺死細胞,使其停留在某一個分裂(fēnliè)時期,便于觀察第五頁,共17頁。3、解離:將固定好的或者新取下的根尖,放入20%的鹽酸中解離8~10min.目的:使細胞分散,便于觀察4、漂洗:轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中的清水(qīnɡshuǐ)中,用鑷子夾住根漂洗30s.目的:洗凈解離液,便于染色第六頁,共17頁。5、染色:取漂洗好的根尖放在載玻片上,用刀片切去根冠,保留根尖白色部分(bùfen)約2~3mm。用鑷子將其壓扁,向根尖滴加一滴醋酸洋紅或龍膽紫染液,染色1~2min.目的:將染色體染成深色,便于觀察第七頁,共17頁。6、壓片:在蓋玻片上覆以吸水紙,用左手中指壓住蓋玻片一角,用鉛筆的橡皮頭垂直敲打(qiāodǎ)蓋玻片,使材料均勻散開目的:將細胞壓成一個薄層,便于觀察第八頁,共17頁。7、鏡檢:將壓好的片子先置于低倍鏡下(10X),找到分生區(qū)細胞(xìbāo)后,轉(zhuǎn)換高倍鏡(40X)觀察分別找出前期、中期、后期、末期等不同分裂(fēnliè)期的細胞第九頁,共17頁??偨Y(jié)(zǒngjié)取材(qǔcái)固定(gùdìng)解離漂洗染色壓片鏡檢
第十頁,共17頁。第十一頁,共17頁。間期兩次細胞分裂之間的時期,DNA復制分為三個時期:復制前期(G1期)復制期(S期)、復制后期(hòuqī)(G2期),該時期一般看不到細胞核中的染色體。第十二頁,共17頁。前期(qiánqī)染色體開始螺旋化,每個染色體由兩個相同的染色單體組成(zǔchénɡ),兩者緊密相連(光鏡下很難區(qū)別),細胞核呈線團狀。第十三頁,共17頁。中期(zhōngqī)核膜(hémó)解體,核仁消失,染色體排列在赤道板上,此時最有利于對染色體進行觀察和計數(shù)。第十四頁,共17頁。第十五頁,共17頁。后期(hòuqī)著絲點分裂,每兩個并列的染色單體分開,有紡錘絲牽引分別(fēnbié)移向兩極。第十六頁,共17頁。末期(mòqī)
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