乳酸菌的篩選及應(yīng)用

關(guān)于乳酸菌的篩選及應(yīng)用第1頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二乳酸菌的分類(lèi)乳酸菌的篩選乳酸菌的應(yīng)用第2頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二第一部分、乳酸菌的分類(lèi)運(yùn)動(dòng)性：通常不運(yùn)動(dòng)，有的能夠運(yùn)動(dòng),具有周生鞭毛。營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型：化能異氧型需氧情況：微好氧性1、乳桿菌屬（Lactobacillus）形態(tài)：細(xì)胞呈長(zhǎng)或細(xì)長(zhǎng)桿狀、彎曲形短桿狀,一般成鏈狀排列第3頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二形態(tài)：細(xì)胞呈球形或卵圓形，成對(duì)或成鏈排列運(yùn)動(dòng)性：一般不遠(yuǎn)動(dòng)

營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型：化能異養(yǎng)型

需氧情況：兼性厭氧型2、鏈球菌屬（Streptococcus）第4頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二形態(tài)：細(xì)胞球形或豆?fàn)睿蓪?duì)或成鏈排列運(yùn)行性：不運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型：化能異養(yǎng)型需氧情況：兼性厭氧型3、明串珠菌屬（Leuconostoc）第5頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二形態(tài)：細(xì)胞呈多樣形態(tài)：Y字形、

V字形、彎曲狀、勺形，典形形態(tài)為分叉桿菌運(yùn)行性：不運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型：化能異養(yǎng)型需氧情況：專(zhuān)性厭氧4、雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）第6頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二形態(tài)：細(xì)胞球形，成對(duì)或四聯(lián)狀排列運(yùn)行性：不運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型：化能異養(yǎng)型需氧情況：兼性厭氧5、片球菌屬（Pediococcus）第7頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二第二部分、乳酸菌的篩選乳酸菌絕大多數(shù)都是厭氧菌或兼性厭氧的化能營(yíng)養(yǎng)菌。生長(zhǎng)繁殖于厭氧或微好氧、礦物質(zhì)和有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物豐富的環(huán)境中。具體如下：（1）與動(dòng)物相關(guān)分布：乳汁、消化道、糞便等；（2）與植物相關(guān)分布：花蜜、樹(shù)液、植物殘骸、果實(shí)損傷部位等；（3）發(fā)酵食品：泡菜、醬油、發(fā)酵肉制品等；（4）乳酸飲料：酸奶等。

一、乳酸菌的分布第8頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二

（一）溶鈣圈法

利用一些產(chǎn)酸類(lèi)細(xì)菌在含CaCO3的培養(yǎng)基上產(chǎn)生CaCO3溶解圈，從而篩選出這些產(chǎn)酸類(lèi)細(xì)菌，可用于乳酸菌的篩選。其中培養(yǎng)基中加入CaCO3的作用是：①鑒別能產(chǎn)生酸的細(xì)菌；②中和產(chǎn)生的酸，以維持培養(yǎng)基的PH。二、篩選方法第9頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二

1、乳酸菌篩選培養(yǎng)基（MRS培養(yǎng)基）

配方（1L）:

蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母提取物5.0g，K2HPO42.0g，檸檬酸三銨2.0g，乙酸鈉5.0g，葡萄糖20.0g，吐溫801.0mL，MgSO4·7H2O0.5g，MnSO4·4H2O0.25g配制：1.調(diào)PH至6.2～6.4；2.稱(chēng)取20gCaCO3加入到100mL蒸餾水中，制成CaCO3乳濁液；3.將MRS培養(yǎng)基和CaCO3乳濁液分開(kāi)滅菌；4.倒平板前，待培養(yǎng)基融化冷卻后，平板上加入一定量的CaCO3乳濁液，晾干了以后再接種。第10頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二

樣品預(yù)處理→梯度稀釋至10-6→選擇合適的稀釋度涂布→37℃培養(yǎng)48h→挑選產(chǎn)生溶鈣圈的菌落反復(fù)在MRS培養(yǎng)基上劃線→挑起單菌落染色，經(jīng)鏡檢確認(rèn)為純種→挑選革蘭氏陽(yáng)性單菌落→試管穿刺4℃冰箱保存。2、篩選過(guò)程第11頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二（二）溴甲酚綠指示劑法1、培養(yǎng)基：MRS培養(yǎng)基（含溴甲酚綠酒精溶液）2、篩選過(guò)程：同上，不同之處是稀釋涂布后長(zhǎng)出菌落，挑取使溴甲酚綠變色的菌落。第12頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二（三）幾種乳酸菌篩選舉例

樣品來(lái)源：市售酸奶培養(yǎng)基：M17改良培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度：42℃

需氧情況：兼性厭氧

篩選方法：常規(guī)的稀釋涂布和劃線分離1、嗜熱鏈球菌第13頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二2、保加利亞乳桿菌

樣品來(lái)源：市售酸奶培養(yǎng)基：牛肉浸膏1.5％，酵母浸膏0.5％，葡萄糖3.0％，檸檬酸三銨0.2％，七水硫酸鎂0.02％，瓊脂1.5％，pH5.1。培養(yǎng)溫度：42℃

需氧情況：兼性厭氧篩選方法：常規(guī)的稀釋涂布和劃線分離法第14頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二樣品來(lái)源：嬰兒新鮮糞便培養(yǎng)基：MRS培養(yǎng)基、NPNL培養(yǎng)基、TYP培養(yǎng)基、

PTYG培養(yǎng)基

培養(yǎng)溫度：37℃

需氧情況：嚴(yán)格厭氧篩選方法：常規(guī)的稀釋涂布和劃線分離法3、雙歧桿菌第15頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二第三部分、乳酸菌的應(yīng)用1、乳酸菌在食品、飲料中的應(yīng)用

（1）酸奶；（2）乳酸飲料；（3）釀造調(diào)味品中的應(yīng)用；（4）功能性食品的開(kāi)發(fā)；（5）防腐、保鮮；（6）肉制品加工；（7）腌漬物等。第16頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二2、乳酸菌在醫(yī)藥中的應(yīng)用（1）乳酸菌素；（2）γ-氨基丁酸(GABA)第17頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二3、開(kāi)發(fā)可降解的聚乳酸塑料第18頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二

（1）聚乳酸（PLA）簡(jiǎn)介

聚乳酸是以微生物發(fā)酵產(chǎn)物乳酸為單體用化學(xué)合成方法聚合而成的一種高分子材料，它無(wú)毒、無(wú)刺激性。聚乳酸制品廢棄后在土壤或水中，30天內(nèi)會(huì)在微生物、水、酸和堿的作用下徹底分解成CO2和H2O，不會(huì)對(duì)環(huán)境產(chǎn)生污染，因而是一種完全可生物降解的材料。第19頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二目前聚乳酸的生產(chǎn)和制備主要有：

（2）聚乳酸的生產(chǎn)過(guò)程①直接聚合法；②間接法；③聚合法。第20頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二（3）聚乳酸的應(yīng)用①醫(yī)用領(lǐng)域：如生產(chǎn)一次性輸液用具、免拆型手術(shù)縫合線、骨科用固定件及手術(shù)器件、醫(yī)用支架、生物導(dǎo)管等；②包裝材料：目前，各種包裝材料是聚乳酸最大、最有潛力的應(yīng)用市場(chǎng)。適合于加工一次性飯盒以及其他食品、飲料等外包裝材料等；③纖維：聚乳酸纖維是由聚乳酸經(jīng)常規(guī)紡絲工藝制得的生物合成纖維，可制成復(fù)絲、單絲、短纖維、針織物、非織造布等，還可用作建筑材料、農(nóng)業(yè)用材等。第21頁(yè)，共23頁(yè)，2023年，2月20日，星期二

PLA作為一個(gè)新型的醫(yī)用、生物可降解塑料在我國(guó)有廣闊的市場(chǎng)發(fā)展前景。生物降解塑料大多數(shù)是天然高分子與常用塑料復(fù)合體系，或基于天然高分子(主要是淀粉、纖維素)的改性。

PLA合成直