天然藥物的質(zhì)量保障 天然藥物的鑒定（藥用植物學課件）

實訓5天然藥物粉末制片技術粉末制片步驟03目錄CONTENTS01目的與要求02儀器與材料粉末特征0401目的與要求產(chǎn)地

01目的與要求學習天然藥物顯微鑒定粉末制片法掌握所列天然藥物粉末顯微特征02儀器與材料02儀器與材料儀器、用品、試劑：顯微鏡、鑷子、解剖針、培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、吸水紙、膠頭滴管、酒精燈、水合氯醛溶液、稀甘油、蒸餾水材料：天然藥物粉末（粉末過四或五號篩）儀器照片03粉末制片步驟產(chǎn)地

采制加工

03粉末制片步驟擦拭玻片滴加適宜試液1-3滴攪勻蓋蓋玻片吸去多余水分顯微鏡下觀察挑取少許粉末置載玻片上必要時滴加水合氯醛試液后，在酒精燈上加熱透化，并滴加甘油乙醇試液或稀甘油04粉末特征04粉末特征04粉末特征

天然藥物鑒定的依據(jù)與程序以及鑒定技術天然藥物鑒定的依據(jù)01天然藥物鑒定的程序02目錄contents天然藥物鑒定的方法0301天然藥物鑒定的依據(jù)產(chǎn)地

01天然藥物鑒定的依據(jù)《中華人民共和國藥典》是國家藥品標準的核心國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品標準（局頒藥品標準）02天然藥物鑒定的程序02天然藥物鑒定的程序檢品登記取樣真實性鑒定純度檢定報告品質(zhì)優(yōu)良度檢定03天然藥物鑒定的方法產(chǎn)地

03天然藥物鑒定的方法核對文獻觀察植物形態(tài)核對標本來源鑒定產(chǎn)地

03天然藥物鑒定的方法大小形狀顏色性狀鑒定質(zhì)地表面特征斷面味氣水試火試產(chǎn)地

03天然藥物鑒定的方法顯微鑒定表面制片組織切片粉末制片解離組織片產(chǎn)地

03天然藥物鑒定的方法理化鑒定顯微化學反應：黃連粉末化學定性反應:山豆根外皮微量升華：大黃升華物為黃色菱狀結晶或羽毛狀熒光分析：秦皮水浸液顯碧藍色熒光+10%NaOH顯橙紅色+稀鹽酸針簇狀鹽酸小檗堿結晶產(chǎn)地

03天然藥物鑒定的方法理化鑒定色譜法物理常數(shù)測定分光光度法含量測定水分測定揮發(fā)油的測定灰分測定浸出物的測定有害物質(zhì)檢查農(nóng)藥殘留量黃曲霉毒素重金屬砷鹽

天然藥物性狀鑒定（總論）能說出性狀鑒定的含義是什么？會描述天然藥物性狀鑒定的十項基本內(nèi)容。能記住本次課中列舉的天然藥物及其鑒別特征。學習目標產(chǎn)地

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性狀鑒定：就是通過眼觀、手摸，鼻聞、口嘗、水試、火試等方法，考察藥材或飲片的形狀、大小，色澤，表面，質(zhì)地、斷面及氣味，等特征，來鑒定天然藥物真?zhèn)蝺?yōu)劣的方法。

產(chǎn)地

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黃連“以色黃，味苦者為佳”；薄荷“以香氣濃者為佳”產(chǎn)地

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1、形狀：指干燥藥材和飲片的外形。根莖類藥材常呈圓柱形、圓錐形或紡錘形，皮類藥材常呈卷筒狀、板片狀。經(jīng)驗鑒別術語形象易記，如海馬的外形為“馬頭、蛇尾、瓦楞身”“產(chǎn)地

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款冬花形如“火炬頭”。產(chǎn)地

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三七呈“猴頭狀”、味連呈“雞爪形“產(chǎn)地

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白術呈“拳形”、蘄蛇背部呈“劍脊狀”等。產(chǎn)地

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2、大小指藥材和飲片的長短、粗細（直徑）和厚薄等。要得出正確的大小數(shù)值，應觀察并測量較多的供試品。可允許有少量高于或低于規(guī)定的數(shù)值。對細小的果實或種子類中藥，可將每10粒緊密排成一行，用毫米刻度尺測量其總長度，然后計算其平均值。產(chǎn)地

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3、色澤指在日光下觀察的藥材和飲片顏色及光澤度。藥材的色澤因品種而異，一般較為固定，為藥材質(zhì)量的重要標志。所描繪的藥材或飲片具有倆種不同的顏色時，一般將常見的或質(zhì)量好的顏色寫在前面，少見的或質(zhì)量差的顏色寫在后面，用“或”連接，產(chǎn)地

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如王不留行呈黑色（成熟果實）或棕紅色（未成熟果實）；若藥材的顏色變化在一定范圍之內(nèi)，可將兩種顏色用“至”連接，如天冬的表面呈黃棕色至紅棕色。產(chǎn)地

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4、表面特征指藥材表面是光滑還是粗糙，有無紋孔，皮孔，環(huán)節(jié)，毛茸，鱗葉或其他附屬物等。黨參具“獅子盤頭”；防風的根頭部具”帚把頭“和“蚯蚓頭”），中、下部有縱皺、橫長皮孔及突起的細根痕。產(chǎn)地

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蘄蛇吻端“翹鼻頭”，背部有“方勝紋”，腹部有“念珠斑”，尾端具“佛指甲”；產(chǎn)地

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5、質(zhì)地指用手折試藥材所感知到的特征。一般用堅韌、疏松、黏性、粉性、致密、油潤、綿性、角質(zhì)等術語加以描述。如黃芪質(zhì)堅韌，知母有黏性。產(chǎn)地

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又如南沙參質(zhì)疏松，甘草顯粉性等。在經(jīng)驗鑒別中用于形容藥材質(zhì)地的術語有很多，如“松泡”指質(zhì)輕而松，斷面多縫隙，如南沙參；產(chǎn)地

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“粉性”指含有一定量的淀粉，折斷時常有粉塵散落，如山藥；“油潤”指其質(zhì)地柔軟，含油而潤澤，如當歸；““角質(zhì)”指質(zhì)地堅實，斷面略呈半透明狀或有光澤（常因多含淀粉，蒸煮時致使其糊化而致），如郁金。產(chǎn)地

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6、斷面：包括折斷面和橫切面兩種。折斷面:主要觀察折斷的難易程度、有無響聲、有無粉塵飛揚、折斷面是否平坦，是否顯纖維性、顆粒性或裂片狀，是否可以層層剝離，斷面有無膠絲等。產(chǎn)地

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橫切面：是指用刀切出平滑的斷面，主要觀察皮部與木部的比例，維管束的排列方式，射線的分布，油點的有無等。比如大黃的星點；何首烏的云錦花紋（又稱“云紋”）；甘草的“菊花心”“等。產(chǎn)地

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又比如黃芪的“金井玉欄”；防己的“車輪紋”；商陸的”羅盤紋“；車輪紋；金井玉欄（又稱“金心玉欄”）產(chǎn)地

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7、氣指通過嗅聞藥材的氣識別藥材。8、味是指口嘗藥材后的味感。味感的強弱是衡量藥材質(zhì)量的重要指標，如烏梅以味酸，黃連以味苦，黨參以味甜為佳。產(chǎn)地

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9、水試是利用某些藥材在水中的溶解度不同及產(chǎn)生各種特殊的變化來鑒定藥材的方法。10、火試是指以火燒或煅藥材，根據(jù)所產(chǎn)生的氣味、顏色、煙霧、響聲、閃光、膨脹、融聚散等現(xiàn)象以鑒定藥材的方法。小結1、性狀鑒別是一種傳統(tǒng)的經(jīng)驗鑒別方法。具有簡單、易行、迅速的特點。2、性狀鑒別包含十個方面，要全面、仔細的進行觀察，對具體天然藥物要有取舍。3、要重視對氣、味的實踐和體會。作業(yè)1、什么是性狀鑒別？2、描述藥材質(zhì)地的術語有哪些？分別是什么意思？3、列舉水試法所列舉的例子？

中藥材的鑒別方法產(chǎn)地

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4.1鑒定的依據(jù)、程序和中藥拉丁名4.1.1藥典和其它國家標準（1）《中華人民共和國藥典》簡稱《中國藥典》1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、2005除第一版，均分為一、二部，第一部收載中藥材和成方制劑（2）《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準》簡稱《部頒標準》1963；1992部頒標準中藥材第一冊《部頒進口藥材標準》（未公開發(fā)行）附于寧夏標準1993（3）地方藥品標準（已取消，僅供參考）省、自治區(qū)、直轄市藥品標準產(chǎn)地

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4.1.2鑒定的程序（1）取樣：①核對標簽：品名、產(chǎn)地、批號、規(guī)格、等級、包裝或標志是否相符。②檢查樣品完整性，清潔程度、水跡、霉變、污染狀況。

產(chǎn)地

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③取樣注意代表性，大批藥材，不但各包件可能有差異，同一包件中不同部位也可能有差異，選擇不同包件，包件的不同部位取樣，貴重藥材逐件取樣。④取樣量=鑒定用量+留樣量（復核、重復分析）個大～1kg個小種子類5～10g（2）鑒定（3）檢驗報告產(chǎn)地

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4.1.3中藥拉丁名中藥有了拉丁名，可進一步統(tǒng)一中藥名稱，防止混亂，有利于對外貿(mào)易和國際學術交流。藥用部位（第一格）+藥品（第二格）RhizomaCoptidis黃連FoliumEriobotryae枇杷葉FlosCarthami紅花SemenStrychni馬錢子CalculusBovis牛黃（BosTaurusdomesticus）產(chǎn)地

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（1）一屬中只有一個品種入藥，或一屬中有多品種作一種藥，一般用屬名。（2）一屬中不同品種作不同藥材時，除一種外，均需加種名RadixAngehicaeSinensis當歸RadixAngelicaePubescentis獨活HerbaAsari細辛HerbaAsariForbesii馬蹄細辛（杜衡）（3）藥用不同部位入藥或不同屬植物入藥加et（和）seu（或）RadixetRhizomaRhei大黃HerbaErodiiseuGeranii老鸛草產(chǎn)地

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4）拉丁名中的形容詞位于最后SemenArmeniacaeAmarum（苦杏仁）SemenSojaePreparatum（淡豆豉）（5）習慣用法Poria（茯苓）、Moschus（麝香）、Aloe（蘆薈）、Catechu（兒茶）、Mel（蜂蜜）、Scorpio（全蝎）PericarpiumGranati（石榴皮、用種名）；Polyporus（豬苓）產(chǎn)地

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4.2鑒定方法四大鑒別，各種方法有其特點和適用對象，如全草、根、粉末；有時需幾種方法配合運用。4.2.1來源鑒定觀察植物形態(tài)：觀察特征，采集有花果標本。單純靠營養(yǎng)器官是不夠的，有時易得出錯誤結論。重點采集完整繁殖器官。核對植物學文獻：植物志、圖鑒、植物分類學報、補編，必要時查對原始文獻核對標本最好到植物所注意同種植物在不同生長期的形態(tài)差異，必要時請專家協(xié)助鑒定。產(chǎn)地

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4.2.2性狀鑒定宏觀觀察方法，觀察的深度與分析水平，思想框架有關。形狀：形狀一般較固定，注意經(jīng)驗鑒別術語，“蚯蚓頭”“棗核艼”大小：種子果實變化幅度較小，沙苑子2.5mm，草沙苑3mm。顏色：海金砂棕紅色、摻砂呈淡棕色表面：（光滑程度），有無毛茸（葉、果、種子），皺紋、鱗毛（金毛狗脊）產(chǎn)地

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質(zhì)地：指軟硬、堅韌、疏松、致密、粘性、粉性等程度。南沙參質(zhì)輕松，斷面裂隙——“松泡”；山藥，含淀粉粒多，折斷淀粉容易飛揚——“粉性”；當歸，柔軟，含油而潤澤——“油潤”；郁金，經(jīng)蒸煮加工，質(zhì)硬，斷面透明有光澤——“角質(zhì)”斷面：與結構有關淀粉粒多——平坦；纖維多——纖維性；石細胞多——顆粒性；紋理：形成層環(huán)、單子葉結構、雙子葉結構、菊花心、筋脈點、車輪紋、羅盤紋產(chǎn)地

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氣味：強烈刺激性和毒性藥材，口嘗要小心，嘗后吐出，嗽口和洗手。麻舌的藥材：南星、半夏、烏頭、一支蒿水試：西紅花——黃色秦皮——碧藍色熒光葶藶子、車前子、光明子加水體積膨脹、種子粘滑

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火試：海金砂——燃燒有爆鳴聲，且有閃光青黛——燃燒有紫色煙霧產(chǎn)地

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4.2.3顯微鑒定⑴制片方法：橫切片、縱切片（徒手、滑走、石蠟切片）粉末片、表面片、組織解離制片、礦物磨片產(chǎn)地

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⑵封藏試劑：水、稀甘油、斯氏液：觀察淀粉粒、油潤、菌絲水合氯醛：觀察組織、晶體；溶解淀粉粒、蛋白質(zhì)、葉綠體、樹脂、揮發(fā)油，使收縮膨脹。5%KOH切片清潔液：溶解淀粉粒、蛋白質(zhì)，使之膨脹，增加透明度。處理后應立即洗去堿液，封藏，以免長時間破壞組織。產(chǎn)地

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等量乙醚乙醇液：脫脂劑，除去種子中脂肪油、揮發(fā)油及樹脂等，觀察糊粉粒；氯化堿液漂白劑甲：100gNa2CO3→250ml+乙：100gCa-Cl-ClO→750ml，對顏色渾暗的切片可漂白，除去葉綠素等產(chǎn)地

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⑶細胞壁和細胞內(nèi)含物的檢查：木化濃鹽酸+間苯三酚紅色纖維素氯化鋅碘液蘭或紫色淀粉粒I2蘭色糊粉粒Hg(NO3)2磚紅色油滴蘇丹Ⅲ紅色草酸鈣50%H2SO4針狀結晶（硫酸鈣）碳酸鈣HCl溶解+CO2↑+CaCl2硅質(zhì)塊HF溶解CaF2粘液質(zhì)、樹膠釕紅試液染成紅色。產(chǎn)地

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⑷掃描電鏡超微分析立體感、真實感強，豐富顯微鑒定內(nèi)容花粉粒、種子表面具有分析價值產(chǎn)地

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傘形科植物珊瑚菜4.2.4理化鑒定1、物理常數(shù)測定（比重、黏稠度、硬度等）比重蜂蜜1.349以上，薄荷油0.89~0.91;竹黃粉末（過4號篩）10g體積不得少于35ml（輕泡）2、膨脹度S=V/W每1g藥材在溶劑中的體積ml數(shù)北葶藶子（12）＞南葶藶子（3）it

產(chǎn)地

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3、色度：檢查白術走油情況精密稱取最粗粉2g，置具塞燒瓶中，加55%乙醇50ml，用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH2-3，振搖1小時，離心（每分鐘4000轉(zhuǎn)）15分鐘，吸取上清液10ml，置比色管中，與同量的對照液（此比色用FeCl3液5ml，COCl2液3ml，CuSO4液0.6ml，用水稀釋成10ml制成），同置白紙上，自上面透視，顯色不得較深。產(chǎn)地

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4、（泡沫指數(shù)）溶血指數(shù)：用標準皂素比較溶血指數(shù)應說明溫度和動物血，以能產(chǎn)生溶血的最低濃度說明之。產(chǎn)地

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5、微量升華：大黃素、丹皮酚、安息香酸屬于顯微化學反應，迅速提取出來，進行有選擇的反應6、熒光反應：黃連木部金黃色熒光秦皮日光天藍色熒光銀柴胡醇溶液籃色熒光蘆薈水溶液硼紗綠色熒光產(chǎn)地

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7、顯微化學反應：柴胡橫切片無水乙醇—硫酸黃綠—綠色—籃色（柴胡皂甙）（次生韌皮部以外）黃連粉末95%乙醇+30%HNO3小檗堿針簇狀結晶產(chǎn)地

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8、一般測定：灰分測定：生理灰分：將中藥粉碎高溫熾灼，其細胞組織及其內(nèi)含物形成的灰分?？偦曳郑核幉纳砘曳?所附無機殘渣酸不溶灰分：藥材灰化后，用10%HCl洗滌，所得灰分。

產(chǎn)地

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生理灰分中CaSO4含量多且差異大，用HCl除去，生理灰分中的鈣鹽，總灰分中泥沙、雜質(zhì)等硅酸鹽保留，以評定質(zhì)量。水分測定：9%~11%~13%~15%浸出物測定：黨參45%乙醇→55.0%揮發(fā)油、總黃酮、總皂甙、總鞣質(zhì)測定產(chǎn)地

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9、指紋定性分析TCl、UV、IR、GC、HPLC10、含量測定薄層掃描、HPLC、GC、UV產(chǎn)地

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11、有害物檢查有機氯農(nóng)藥[DDT、BHC（六六六）]；有機磷農(nóng)藥、黃曲霉素溶于CHCl3、MeOH不溶于乙烷、乙醚、石油醚有強熒光12、微量元素分析游離態(tài)→有機絡合體產(chǎn)地

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4.3中藥鑒定的難點和空白同一藥材同屬不同品種的鑒別，其性狀、結構相似。如黨參屬、沙參屬、鉤藤屬、石斛屬、黃精屬的藥材同種藥材不同地區(qū)產(chǎn)品的鑒別產(chǎn)地

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薄層色譜鑒別和含量測定只一小部分動物藥提取物的鑒別如阿膠、龜板、蛇膽未知藥材鑒別及檢索已知形狀、結構、粉末、它的藥名或范圍

中藥鑒定新技術、新方法產(chǎn)地

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4.4中藥鑒定新技術、新方法色譜法色譜法是在20世紀初產(chǎn)生,于60年代開始用于中藥分析,經(jīng)逐步完善最后列入1977年版中國藥典,且在以后各版藥典的中藥和成方制劑中的應用比例迅速上升,成為中藥鑒別最主要的方法之一.色譜法包括:薄層色譜法(TLC)、薄層掃描法(TLCS)、高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、氣質(zhì)聯(lián)用法(GC-MS).產(chǎn)地

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光譜法鑒別中藥的原理:選擇某一波段波長,以此通過中藥的粉末或提取液,測定中藥對這一波段波長的吸收并記錄其吸收光譜.光譜法包括:紫外光譜法(UV)、導數(shù)光譜法(DS)、紅外光譜法(IR)、熒光光譜法(FP)、核磁共振波譜法(NMR)、質(zhì)譜法(MS).產(chǎn)地

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X射線衍射法當對某物質(zhì)(晶體或非晶體)進行衍射分析時,該物質(zhì)被X射線照射產(chǎn)生不同程度的衍射現(xiàn)象,物質(zhì)組成、晶型、分子內(nèi)成鍵方式、分子的構型、構象等決定該物質(zhì)產(chǎn)生特有的衍射圖譜.X衍射圖譜分析可以給出待測中藥材全體成分的衍射圖形及衍射峰值,將衍射信息進行傅里葉變換,可獲得每一中藥的較為簡單且又能反映藥材整體結構特征的圖譜.該方法適用于結晶度較強的礦物類藥和部分動植物類藥的鑒別.產(chǎn)地

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近紅外漫反射光譜技術近紅外光譜包含了大多數(shù)類型有機化合物的組成和分子結構的信息.借助于化學計量學中的多元統(tǒng)計、曲線擬合、聚類分析、多元校準等方法定標,將其所含的定性、定量信息提取出來.能夠用于中藥材的鑒別.產(chǎn)地

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掃描電鏡技術是一種超微鑒定方法.掃描電子顯微鏡的分辨率較光學顯微鏡高數(shù)萬倍,能夠觀察藥材表面的細微特征,而且立體感強,樣品制作簡單.目前主要應用于藥材花粉粒、葉表面、種皮表面的鑒定研究.產(chǎn)地

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熱分析法是研究樣品及參比物在相同環(huán)境下等速加溫時,兩者的溫度與時間或與加熱溫度的變化關系的方法.分析的結果用熱譜圖表示,比較兩者熱圖譜的差異,以達鑒別中藥的目的.按分析內(nèi)容分為:熱重量法(熱量法TG)、差示熱量分析法(差熱分析法DTA)差示掃描量熱法(差動法DSC)在中藥的鑒別分析中,差熱分析法最為常用.產(chǎn)地

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電分析法示波極譜法:中藥提取液中所含的化學成分,有的是電活性物質(zhì),利用示波極譜滴定儀可測得其dE/dt-E曲線,不同藥材其曲線上出現(xiàn)切口和示波圖形是不同的,可達到鑒別目的.等電點法:通過測量氨基酸的等電點來鑒別蛋白質(zhì)類中藥.產(chǎn)地

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電泳技術中藥中的一些帶電荷的成分如有機酸、蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、生物堿和酶等在一定強度的電場中,在相同的時間內(nèi),由于各成分的電荷性質(zhì)、電荷量和分子量不同,造成泳動方向(向正極或負極)、速度和距離等不同,結合譜帶條數(shù)和染色結果達鑒別的目的.電泳的種類:醋酸纖維素薄膜電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)瓊脂糖凝膠電泳十二烷基硫酸鈉－聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS)等電聚焦電泳(IFE)高效毛細管電泳(HPCE)產(chǎn)地

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分子生物學技術聚合酶鏈式反應(PCR):是1985年發(fā)明的一種模擬自然DNA復制過程的快速體外DNA片段擴增技術,又稱無細胞分子克隆技術,獲得1993年諾貝爾化學獎.該技術的問世,為中藥鑒別提供了一條新途徑.PCR能將藥材中提取的痕量的DNA擴增到足以供檢測和分析的數(shù)量.產(chǎn)地

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在PCR的基礎上延伸出的鑒定方法有很多種,如RFLP、RAPD、AP-PCR、AFLP、SSR、DNA測序等.其中,隨機擴增多態(tài)性DNA(randomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD)最為普通,它無需專門設計擴增反應引物,也無須預先知道被研究生物基因組的核苷酸序列,尤其是在目前絕大多數(shù)動植物中藥沒有基因組DNA資料的情況下,RAPD技術有很強的通用性,它最適于種下居群(品種)間的差異,也適用于種間和個體間.產(chǎn)地

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基因芯片(genechip)又稱DNA微陣列(DNAmicroarray),是一種新型分子生物技術.于20世紀80年代提出,90年代初期迅速發(fā)展.近幾年用于中藥的品種鑒定.應用這一技術的前提是應用分子生物學技術找出待鑒定中藥的特定寡核苷酸序列．并將其集成在芯片上,然后提取樣本DNA進行擴增,熒光標記后與芯片雜交.若樣本中存在與之互補的序列即可檢測出來,從而達到鑒定的目的產(chǎn)地

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基因芯片技術的優(yōu)點是可以在一塊芯片上同時點上成千上萬個探針,進行大規(guī)模的藥材鑒定,大大節(jié)約時間和精力,堿少隨機誤差,提高鑒定效率.以遺傳物質(zhì)為基礎的分子生物學方法彌補傳統(tǒng)鑒定方法的不足,成功地鑒定中藥的物種,但不鑒定優(yōu)劣,因而不能取代中藥化學成分指紋圖譜等的鑒定.產(chǎn)地

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免疫技術不同的動植物藥材含有不同的特異蛋白,利用該特異蛋白為抗原制備的特異抗體與檢品中的特異抗原結合產(chǎn)生沉淀反應來鑒別藥材的真?zhèn)螢槊庖哞b別.尤其適合親緣關系比較近的動物藥的基源鑒別.免疫鑒別還有酶標法和單克隆抗體法.產(chǎn)地

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