臨床病原學(xué)檢查022

臨床病原學(xué)檢查022第1頁/共30頁2病例分析

以性傳播性疾病為例

【病史摘要】

（一）入院病歷患者：陳某，男性，25歲，音響推銷員，未婚。1998年3月8日入院。住院號32334。主訴：龜頭部長“皰瘡”，反復(fù)不愈。第2頁/共30頁3

現(xiàn)病史：陰莖、包皮兩側(cè)、龜頭部出現(xiàn)小水皰，疼痛難忍。患者2年前曾與一酒店服務(wù)員熱戀，有過性接觸。此后約10天左右，龜頭部感到灼熱，不久即感疼痛，并出現(xiàn)幾個小水皰。很快破潰滲水。經(jīng)某醫(yī)院診治，按“性病”治療，注射“利福平”、“淋必治”等藥物，未見好轉(zhuǎn)，反而創(chuàng)面擴(kuò)大，水皰潰破相連成片，20余天后相繼消退。約1～2月后，外生殖器又出現(xiàn)小水皰，癥狀比前更為嚴(yán)重，故來院就診。既往史：身體健康，無其他系統(tǒng)疾患。個人家庭史：無不良生活史，父母健在。第3頁/共30頁4體格檢查：神志清，全身倦怠。體溫37.6℃，脈搏72次/分，呼吸21次/分，血壓110/70mmHg。心肺檢查無異常發(fā)現(xiàn)，腹，肝脾未及，無腎區(qū)叩擊痛。外生殖器皮膚見陰莖、龜頭部有豌豆、米粒、大頭針大小不一的小水皰，部分水皰融合，破潰，中央伴糜爛，微痛。腹股溝淋巴結(jié)稍腫大，壓痛明顯，排尿不適，下肢疼痛。輔助檢查：舊結(jié)核菌素試驗(yàn)弱陽性，腎B超檢查未見異常，尿液一般檢查WBC（++）、RBC（±），蛋白（-）皰疹分泌液涂片、革蘭染色、鏡檢，未見革蘭陰性雙球菌。第4頁/共30頁5

入院初步診斷：性傳播性疾病，（Sexuallytransmitteddiseases,STDs）可疑生殖器皰疹（再發(fā)型）。第5頁/共30頁6臨床病原體檢查目的:臨床病原體檢查目的:

是確定感染的發(fā)生和性質(zhì)，在疾病早期提供恰當(dāng)?shù)闹委煼桨?，并采取有效的預(yù)防措施，防止感染傳播造成的危害。第6頁/共30頁7各種不同病原體的實(shí)驗(yàn)診斷方法遵循以下基本原則：1.正確、規(guī)范采集和運(yùn)送標(biāo)本。2.直接顯微鏡查見病原體或檢出病原體抗原，借助分子生物學(xué)的方法檢測病原體核酸，結(jié)合病人的病史、癥狀或體征，快速作出初步診斷。第7頁/共30頁8各種不同病原體的實(shí)驗(yàn)診斷方法遵循以下基本原則：3.初步診斷同時(shí)，對病原體進(jìn)行分離與鑒定。4.檢測機(jī)體對病原體的免疫產(chǎn)物。5.參與臨床選擇抗菌藥物，指導(dǎo)和監(jiān)控微生物的治療方案，避免耐藥菌株的產(chǎn)生。第8頁/共30頁9姬姆薩染色衣原體包涵體HSV病毒被支原體感染的精子梅毒螺旋體第9頁/共30頁10檢測項(xiàng)目——顯微鏡檢查陰道、尿道分泌物下疳、濕疣、膿皰疹液皰疹基底組織刮片宮頸拭子或刮片第10頁/共30頁11檢測項(xiàng)目——分離、培養(yǎng)、鑒定標(biāo)本接種：選擇合適的培養(yǎng)基、觀察菌落性狀作生化鑒定病毒、立克次體、衣原體、接種細(xì)胞或易感動物觀察增殖指標(biāo)和血清學(xué)方法鑒定。第11頁/共30頁12檢測項(xiàng)目——分離、培養(yǎng)、鑒定A、在培養(yǎng)基上1/4的表面滾動棉拭接種B、裝淋球菌培養(yǎng)皿的合適罐子第12頁/共30頁13檢測項(xiàng)目——分離、培養(yǎng)、鑒定C、巧克力瓊脂上淋病奈瑟菌菌落D、幾種奈瑟菌的快碳水化合物降解試驗(yàn)第13頁/共30頁14檢測項(xiàng)目——抗體檢測

梅毒血清學(xué)試驗(yàn)

非密螺旋體抗原試驗(yàn)：

（venerealdiseasereearchlaboratory，VDRL）不加熱血清反應(yīng)素玻片試驗(yàn)（USR）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（RPR）自動反應(yīng)素試驗(yàn)（ART）

第14頁/共30頁15檢測項(xiàng)目——抗原檢測1、單純皰疹病毒抗原檢測2、HIV抗原檢測3、衣原體抗原檢測HIV抗原檢測實(shí)驗(yàn)原理示意圖第15頁/共30頁16檢測項(xiàng)目——核酸檢測1、HIV核酸檢測2、梅毒螺旋體PCR檢測3、衣原體核酸探針4、支原體核酸檢測第16頁/共30頁17細(xì)菌感染檢查檢驗(yàn)特點(diǎn)通過對標(biāo)本直接顯微鏡檢，病原菌的分離培養(yǎng)鑒定，病原菌的抗原檢測，核酸檢測和細(xì)菌感染后機(jī)體免疫應(yīng)答產(chǎn)物的測定及藥物的測定及藥物敏感性試驗(yàn)，對細(xì)菌感染性疾病可作出及時(shí)、準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷。第17頁/共30頁18

檢測程序第18頁/共30頁19Diagnosisofbacterialinfections

Theidentificationanddifferentiationofbacteriaprincipallyrelies:-onmicrobialmorphologyandgrowthvariablesonculturingtheorganismsonnon-selectiveandselectivemedia.Cultureremainsthestandardfordiagnosisofbacterialinfectionbecauseitisthesimplest,themostreliableandthemostcostefficientmethod.Anotheradvantageisthefactthatparalleltestingofthesensitivitytowardsantibioticsispossible.第19頁/共30頁20nmolecular-biologicaltechnicsthatproviderapididentificationofinfectiousagents,bothfromcultureisolatesanddirectlywithinclinicalspecimens.-onthedetectionoftheantibodyresponsetothepathogen.Theconcentrationofinfection-sepcificantibodiesisdeterminedintitersoractivityunits.第20頁/共30頁21Inprinciple,thepathogenshouldbeidentifiedbycultureinanyacuteinfectionthatrequirestreatment.This,however,isonlypossibleifthepathogenisstilldetectableinexcretions,secretions,bloodortissueatthetimewhentheclinicalsymptomsoccur,e.g.salmonellaeinfecesinthecaseofdiarrheaorgonococcifromendocervicalcanalingenitaltractinfection.第21頁/共30頁22病毒感染檢查檢驗(yàn)特點(diǎn)標(biāo)本處理：必須經(jīng)濾過除菌，標(biāo)本需迅速冷藏、運(yùn)送。病毒分離培養(yǎng)后，根據(jù)細(xì)胞病變特征確定病毒的種，對已分離的病毒用已知參考血清作中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)。新的早期診斷技術(shù)：核酸雜交技術(shù)、PCR技術(shù)。第22頁/共30頁23病實(shí)毒驗(yàn)感室染診性斷疾病的

第23頁/共30頁24DiagnosisofviralinfectionsTheprimarydiagnostictechniqueformostviralinfectionsistheisolationofthevirusincellculture.Serologictechniquesmayalsobeuseful,especiallyiftheviruswasisolatedfromanonsterilesite.Insomeinstances,serologicdiagnosesistheonlypracticalapproachinaclinicallaboratory.Directdetectionofantigeninbodyfluidsortissueshasalsobeeneffectiveforsomeviruses.Thelistofagentsforwhichdirectdetectionofantigenisusefulwillundoubtedlycontinuetoexpand.第24頁/共30頁25

Thecompareoftheadvantagesanddisadvantagesofeachoftheseapproaches:Culture:

Time:Daystoweeks

Advantages:Specificityandsensitivitymaximum;isolateavailableforcharacterization

Disadvantages:Cellculturefacilitiesneeded;timefordiagnosismaybelong第25頁/共30頁26Directdetection:

Time:Hoursto1day

Advantages:Speedofdiagnosis;usedforvirusesdifficulttoculture

Disadvantages:False-positivesand–negatives;hardtobatchtestsSerology:

Time:Weeks

Advantages:Assessmentofimmunityorresponsetovirusisolatedfromnonsterilesite;usedforvirusesdifficulttoculture

Disadvantages:Potentialcross-reaction;needforacuteandconvalescentspecimens第26頁/共30頁27真菌感染檢查檢驗(yàn)特點(diǎn)形態(tài)學(xué)檢查為檢測真菌的重要手段抗原檢測適合血清和腦脊液中隱球菌、念珠菌、夾膜組織胞漿菌。血清學(xué)診斷適用于深部真菌感染。第27頁/共30頁28DirectExaminationItishighlyrecommendedthatadirectmicroscopicexaminationbemadeonmostthisprovideanimmediatepresumptivediagnosisforthephysician,butitmayalsoaidintheselectionofanappropriateculturemedium.Aphase-contrastmicroscopeisavaluab