自身抗體的實驗室檢測和臨床意義演示文稿

自身抗體的實驗室檢測和臨床意義演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有50頁\編輯于星期日（優(yōu)選）自身抗體的實驗室檢測和臨床意義現(xiàn)在是2頁\一共有50頁\編輯于星期日主要內(nèi)容自身抗體的概念自身抗體的分類自身抗體的命名自身抗體的檢測方法常見的自身抗體現(xiàn)在是3頁\一共有50頁\編輯于星期日自身抗體的概念各種原因造成的機體B細胞產(chǎn)生的針對自身組織成分的抗體，稱為自身抗體（autoantibodies）。自身抗體可以是生理性的，如針對衰老或死亡的自體細胞，機體產(chǎn)生少量的自身抗體，以便被脾、肝及單核吞噬細胞系統(tǒng)的巨噬細胞吞噬，維持機體內(nèi)環(huán)境的生理穩(wěn)定；自身抗體也可以是病理性的，引起自身免疫病?，F(xiàn)在是4頁\一共有50頁\編輯于星期日自身抗體的分類按照自身抗原在體內(nèi)分布的不同可分為：器官/組織特異性自身抗體非器官/組織特異性自身抗體按照檢測自身抗體所用的基質不同可分為：細胞抗體（以游離的細胞為實驗基質）細胞非特異性自身抗體，如抗核抗體細胞特異性自身抗體，如ANCA、抗血小板抗體、抗紅細胞抗體組織抗體（以動物組織切片為實驗基質）現(xiàn)在是5頁\一共有50頁\編輯于星期日自身抗體的命名以首先被檢測到該抗體的患者名字的縮寫命名：如抗Sm、抗Ro、抗La抗體以相關疾病的名字的縮寫命名：如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗體以抗原的化學性質進行分類命名：如抗DNA、抗RNP抗體以抗原的部位進行命名：如抗板層素抗體、抗核膜抗體?，F(xiàn)在是6頁\一共有50頁\編輯于星期日自身抗體的檢測方法對流免疫電泳、免疫雙擴散免疫熒光檢測法免疫印記法酶聯(lián)免疫吸附檢測法（ELISA）放射性核素法酶免疫斑點技術免疫沉淀法現(xiàn)在是7頁\一共有50頁\編輯于星期日抗核抗體(ANA)

抗dsDNA抗體抗dsDNA抗體抗Sm抗體抗RNP抗體抗SSA抗體抗SSB抗體間接免疫熒光方法金標法免疫雙擴散法ANA(anti-nuclearantibodies)現(xiàn)在是8頁\一共有50頁\編輯于星期日抗Sm抗體抗RNP抗體抗SSA抗體抗SSB抗體抗Scl-70抗體抗Jo-1抗體抗核糖體抗體免疫印記法ENA(extractablenuclearantigen)現(xiàn)在是9頁\一共有50頁\編輯于星期日抗核抗體(ANA)抗平滑肌抗體(SMA)抗線粒體抗體(AMA)間接免疫熒光法

自身抗體現(xiàn)在是10頁\一共有50頁\編輯于星期日病人血清(一抗)玻片二抗熒光抗體熒光顯微鏡下閱片ANA－－Hep-2細胞dsDAN抗體－－短膜蟲SMA－－大鼠胃組織AMA－－大鼠腎組織間接免疫熒光法底物現(xiàn)在是11頁\一共有50頁\編輯于星期日病人血清金標記的抗體dsDNA抗原陰性陽性金標法現(xiàn)在是12頁\一共有50頁\編輯于星期日抗原1:41:161:321:64病人血清標準抗體免疫雙擴散瓊脂板現(xiàn)在是13頁\一共有50頁\編輯于星期日不同分子量的抗原病人血清酶標抗體顯色劑判斷結果免疫印記法現(xiàn)在是14頁\一共有50頁\編輯于星期日抗Sm抗體13.5,28,29KD抗RNP抗體22,32,70KD抗SSA抗體52KD抗SSB抗體45,47KD抗Scl-70抗體68-70KD抗Jo-1抗體55KD抗核糖體抗體15,16.5,38KD現(xiàn)在是15頁\一共有50頁\編輯于星期日間接免疫熒光法細胞核陽性核仁陽性細胞漿陽性分裂期細胞陽性現(xiàn)在是16頁\一共有50頁\編輯于星期日細胞核陽性細胞核均質型（Homogeneous）：抗dsDNA、組蛋白抗體、核小體抗體細胞核周邊型（Membranous）：板層素抗體細胞核顆粒型（Speckled）：粗顆粒：抗Sm、RNP抗體細顆粒：抗SSA、SSB抗體現(xiàn)在是17頁\一共有50頁\編輯于星期日抗dsDNA抗體熒光模式：綠蠅短膜蟲：動基體均質的或邊緣亮度增強的熒光。Hep-2細胞：細胞核的均質型熒光?，F(xiàn)在是18頁\一共有50頁\編輯于星期日抗dsDNA抗體自身抗原：位于DNA脫氧核糖磷酸框架上。臨床意義：對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）特異性高。抗體滴度與疾病活動性存在相關性，因此抗體滴度的檢測可為監(jiān)控治療提供有用的依據(jù)?，F(xiàn)在是19頁\一共有50頁\編輯于星期日抗RNP/Sm抗體熒光模式：Hep-2片：細胞核粗顆粒，核仁陰性。肝組織切片：同上。熒光法不能區(qū)分抗RNP和抗體Sm?，F(xiàn)在是20頁\一共有50頁\編輯于星期日抗RNP/Sm抗體自身抗原：抗原RNP和Sm屬于一組小核糖核蛋白（snRNP），由低分子量的RNA和多種蛋白質組成，RNA中尿苷（U-RNA）含量較高。臨床意義：高滴度的抗RNP抗體為混合結締組織?。∕CTD）的特征，發(fā)生率為95~100%。也可出現(xiàn)于SLE，但總是與抗Sm抗體同時出現(xiàn)?？筍m抗體對SLE具有高度特異性，發(fā)生率為20~40%?，F(xiàn)在是21頁\一共有50頁\編輯于星期日抗SSA／SSB抗體熒光模式Hep-2片：細胞核呈細顆粒熒光，核仁不發(fā)光。肝組織片：細顆粒熒光?，F(xiàn)在是22頁\一共有50頁\編輯于星期日抗SSA／SSB抗體自身抗原：SSA抗原是一個小核糖核蛋白，由一個RNA分子和兩種不同的蛋白質組成。蛋白質的分子量為52KD和60KD?？贵w直接針對蛋白質的抗原決定簇。SSB抗原是分子量為48kD的磷酸化蛋白。臨床意義；最常見于干燥綜合征（SS）,也見于SLE、原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC），偶見于慢活肝。抗SSA抗體在新生兒紅斑狼瘡的發(fā)生率幾乎為100%?，F(xiàn)在是23頁\一共有50頁\編輯于星期日核仁陽性(Nucleolar)核仁熒光增強，核漿均質型---Scl-70抗體。核仁均質型---PM-Scl及其他抗原抗體。核仁細顆粒型---原纖維蛋白抗體。核仁粗顆粒型---RNA多聚酶-1抗體?，F(xiàn)在是24頁\一共有50頁\編輯于星期日抗Scl-70抗體熒光模式：Hep-2片：細胞核幾乎均質的熒光，核仁熒光加強而且也為均質型，胞漿無熒光。肝組織片；細胞核顆?；蚓|型熒光，常見到細胞核熒光?，F(xiàn)在是25頁\一共有50頁\編輯于星期日抗Scl-70抗體自身抗原：為DNA拓撲異構酶1，分子量為100KD。在DNA雙鏈的復制和轉錄中起作用。臨床意義：25~70%的系統(tǒng)性硬化癥（PSS）彌漫型患者陽性，局限型硬皮病患者陰性?，F(xiàn)在是26頁\一共有50頁\編輯于星期日細胞漿陽性胞漿均質型---抗核糖體抗體細顆粒---抗Jo-1抗體

胞漿顆粒型粗顆粒---AMA抗體滴狀點狀---溶酶體抗體核周顆粒--高爾基體抗體胞漿纖維型細纖維---波形蛋白抗體環(huán)狀纖維---原肌球蛋白抗體針狀纖維---肌動蛋白抗體現(xiàn)在是27頁\一共有50頁\編輯于星期日抗核糖體抗體熒光模式：Hep-2：胞漿細顆粒到均質狀、非常致密的熒光。肝組織片：島狀熒光。臨床意義：SLE的特異性抗體，與精神癥狀有關?，F(xiàn)在是28頁\一共有50頁\編輯于星期日抗Jo-1抗體熒光模式：Hep-2：胞漿顆粒到細塊狀熒光。肝組織片：胞漿中弱熒光。自身抗原：組氨酰tRNA合成酶。臨床意義：見于PM，發(fā)生率25~35%?，F(xiàn)在是29頁\一共有50頁\編輯于星期日抗線粒體抗體熒光模式：Hep-2：胞漿內(nèi)粗的顆粒型熒光。大鼠腎組織切片：腎小管明顯熒光，腎小球熒光較弱?，F(xiàn)在是30頁\一共有50頁\編輯于星期日抗線粒體抗體自身抗原：位于真核細胞線粒體膜的內(nèi)面。線粒體自身抗原為2-氧酸脫氫酶復合體的亞單位，為一組自身抗原，其中與PBC有關的包括：（1）丙酮酸脫氫酶復合體（PDC）（2）支鏈2-氧酸脫氫酶復合體（BCOADC）（3）a-酮戊二酸脫氫酶復合體（OGDC）現(xiàn)在是31頁\一共有50頁\編輯于星期日抗線粒體抗體臨床意義：AMA-M2對PBC具有診斷意義。AMA亞型與疾病的相關性：AMA-1：梅毒、干燥綜合征AMA-2：PBCAMA-3：藥物性紅斑狼瘡AMA-4：PBC與AIH重疊AMA-5：SLE、自身免疫性溶血性貧血AMA-6：異煙肼引起的藥物性肝炎AMA-7：AIHAMA-8：AIH、閉塞性血栓性血管炎AMA-9：藥物性肝炎AMA-10：SLE現(xiàn)在是32頁\一共有50頁\編輯于星期日分裂期細胞陽性染色體陽性---染色體相關抗體，相關疾?。考忓N體纖維陽性---紡錘體纖維抗體，如燕麥細胞型支氣管肺癌中間體陽性---中間體抗體，相關疾?。考毎麅蓸O陽性---中心?？贵w，相關疾??？著絲點陽性---抗著絲點抗體現(xiàn)在是33頁\一共有50頁\編輯于星期日抗著絲點抗體(ACA)熒光模式：Hep-2：細胞核細的、相同大小的顆粒熒光，分裂期顆粒熒光帶狀位于細胞中間。肝組織片：分布于細胞核的10~20個顆粒，熒光弱，易被忽略。現(xiàn)在是34頁\一共有50頁\編輯于星期日抗著絲點抗體自身抗原：著絲粒中的三種不同的蛋白質：著絲點蛋白A、B、C，主要抗原為著絲點蛋白B。臨床意義：對進行性系統(tǒng)性硬化癥亞型（CREST綜合征）有診斷意義。陽性率80~95%。還可見于PBC、SS等?，F(xiàn)在是35頁\一共有50頁\編輯于星期日器官/組織特異性自身抗體抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）抗平滑肌抗體抗角蛋白抗體抗肝腎微粒體抗體抗肝細胞膜抗原抗體抗可溶性肝抗原抗體抗肝特異性蛋白抗體現(xiàn)在是36頁\一共有50頁\編輯于星期日抗中性粒細胞胞漿抗體（胞漿型）cANCA熒光模式：猴肝：肝血竇區(qū)粒細胞強熒光，而肝細胞陰性。甲醛固定的中性粒細胞：胞漿內(nèi)粗大到細的熒光顆?！，F(xiàn)在是37頁\一共有50頁\編輯于星期日抗中性粒細胞胞漿抗體（胞漿型）自身抗原：為絲氨酸蛋白酶-蛋白酶3（PR3）。該靶抗原為可溶性蛋白，存在于正常中性粒細胞的嗜苯胺藍顆粒中。臨床意義：cANCA可見于多種系統(tǒng)性血管炎。主要見于Wengener’s肉芽腫，約占ANCA陽性率的80~95%。cANCA被認為是活動性Wengener’s肉芽腫和微多動脈炎的特異和敏感的標志性抗體。還見于Churg-Strauss綜合征。現(xiàn)在是38頁\一共有50頁\編輯于星期日抗中性粒細胞胞漿抗體（核周型）pANCA熒光模式：乙醇固定的中性粒細胞：細胞核周圍平滑的帶狀熒光，細胞核陰性。猴肝：肝血竇區(qū)粒細胞強熒光，而肝細胞陰性?，F(xiàn)在是39頁\一共有50頁\編輯于星期日抗中性粒細胞胞漿抗體（核周型）自身抗原：主要抗原為髓過氧化物酶（MPO），其他抗原還有白細胞彈性蛋白酶，組織蛋白酶G、溶菌酶及乳鐵蛋白等。臨床意義：見于多種系統(tǒng)性血管炎。可見于Wengener’s肉芽腫、微多動脈炎、Churg-Strauss綜合征、炎性腸病、自免肝、系統(tǒng)性風濕?。≧A、SLE、SS、PM/DM）?，F(xiàn)在是40頁\一共有50頁\編輯于星期日抗平滑肌抗體（SMA）熒光模式：大鼠胃組織，呈現(xiàn)肌膜、黏膜肌層和肌膜腺體間收縮纖維的明顯細胞漿熒光。大鼠腎組織，腎小管細胞內(nèi)原纖維、腎小球膜細胞及血管肌層的熒光?，F(xiàn)在是41頁\一共有50頁\編輯于星期日抗平滑肌抗體（SMA）自身抗原：主要的靶抗原為肌動蛋白，肌動蛋白可以單體（G-肌動蛋白）或聚合體（F-肌動蛋白）形式存在于微絲中，F(xiàn)-肌動蛋白自身抗原與自免肝關系密切，而G-肌動蛋白自身抗原則與酒精性肝硬化有關。臨床意義：見于自身免疫性肝炎、PBC、酒精性肝硬化?，F(xiàn)在是42頁\一共有50頁\編輯于星期日抗角蛋白抗體（AKA）熒光模式：大鼠食管，僅限于上皮角質層的較強的線性分層的均質熒光。現(xiàn)在是43頁\一共有50頁\編輯于星期日抗角蛋白抗體（AKA）自身抗原：絲聚蛋白（filaggrin）為AKA的靶抗原。臨床意義：見于RA，陽性率36~59%，特異性95~99%。還是一個潛在的預后標志，高抗體滴度可能預示著較嚴重的RA類型。現(xiàn)在是44頁\一共有50頁\編輯于星期日抗肝腎微粒體抗體（LKM）有三種熒光模式：LKM-1：肝細胞胞漿明顯熒光，呈細顆粒到均質狀，腎臟近近端腎小管有熒光。LKM-2：門靜脈周圍的肝組織熒光比其他部位強，腎臟近近端腎小管有熒光。LKM-3：肝和腎均為陰性，靈長類睪丸間質細胞熒光明顯?，F(xiàn)在是45頁\一