需求內(nèi)容-長非編碼RP11-426A5與轉(zhuǎn)錄元件相互作用的檢測與分析

需求內(nèi)容-長非編碼RP11-426A6.5與轉(zhuǎn)錄元件相互作用的檢測與分析一、功能用途主要用于檢測與分析長非編碼RP11-426A6.5與轉(zhuǎn)錄元件相互作用。二、技術(shù)參數(shù)1、實驗材料）細胞SAS/HSC32）構(gòu)建過表達RP11-426A6.5的過表達質(zhì)粒及其對照質(zhì)粒3）訂購RNAPULLDOWN檢測試劑盒（按12T訂購）4）訂購特異性結(jié)合RP11-426A6.5的生物素標記探針（正義探針，反義探針，陰性探針）。2、實驗內(nèi)容培養(yǎng)SAS細胞、HSC3細胞，按要求分為SAS細胞對照組：培養(yǎng)SAS細胞轉(zhuǎn)染對照質(zhì)粒SAS細胞過表達組：培養(yǎng)SAS細胞轉(zhuǎn)染過表達RP11-426A6.5的過表達質(zhì)粒HSC3細胞對照組：培養(yǎng)SAS細胞轉(zhuǎn)染對照質(zhì)粒HSC3細胞過表達組：培養(yǎng)SAS細胞轉(zhuǎn)染過表達RP11-426A6.5的過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染48h后，收細胞:1）取一部分細胞，提取RNA,qPCR檢測RP11—426A6.5,確定過表達2）剩余細胞，按試劑盒要求裂解，按試劑盒說明要求，采用生物素標記探針進行RNAPULLDOWN檢測，最后帕檢測EZH2的表達。項目技術(shù)參數(shù)細胞培養(yǎng)用二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)4瓶細胞，每瓶IO,數(shù)量細胞。細胞轉(zhuǎn)染Lipo2000轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染效率90%。RNApulldown實驗用RP11-426A6.5探針進行RNApulldow富集相互作用蛋白陰性探針、反義探針、正義探針3組。質(zhì)粒構(gòu)建分子克隆pcDNA3.1-NC和pcDNA3.1-RP11-426A6.5QPCR檢測采用QPCR檢測試劑盒使用伯樂IQ5儀器檢測三、配置清單:實驗內(nèi)容數(shù)量RP11-426A6.5的表達質(zhì)粒及其對照質(zhì)粒構(gòu)建1特異性結(jié)合RPH-426A6.5的生物素標記探針（正義探針，反義探針，陰性探針）1RP11-426A6.5引物設(shè)計以及驗證1EZH2抗體1細胞培養(yǎng)2細胞轉(zhuǎn)染4RNA提取4逆轉(zhuǎn)錄4qPCR8RNAPULLDOWN實驗4WB檢測2四、售后服務(wù).供應(yīng)商應(yīng)按照本采購項目特點提供長期良好的售后服務(wù)，并在響應(yīng)文件中提供詳細具體的售后服務(wù)承諾條款及保證，在質(zhì)保期內(nèi)售后服務(wù)所需費用列入報價。.要求供應(yīng)商必須擁有專業(yè)的售后維護服務(wù)團隊，能夠保證本項目正常運行。.投標的產(chǎn)品供應(yīng)商應(yīng)提供服務(wù)條款說明書，并提供相關(guān)服務(wù)機構(gòu)有關(guān)資格證明文件及公司（廠家）、地址、聯(lián)系人、聯(lián)系電話。.在質(zhì)保期內(nèi)，成交供應(yīng)商提供7*24小時服務(wù)。對于產(chǎn)品在使用過程中出現(xiàn)的問題，在1小時內(nèi)響應(yīng)。如遇與所供產(chǎn)品有關(guān)的問題無法遠程解決的，在事件確定后2小時內(nèi)趕到現(xiàn)場提供服務(wù)。2小