壓力蒸汽消毒鍋的滅菌驗證

壓力蒸汽消毒鍋的滅菌驗證第一頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五消毒用物理或化學方法殺滅物體上大部分或所有病原微生物(芽胞除外)的過程。是指殺滅細菌的繁殖體,使活體細菌的絕大部分或全部被殺滅而不致引起感染或致病,但不能殺滅細菌芽胞。在外界環(huán)境適宜時,芽胞會引起細菌的繁殖，因而消毒潛伏著再致病或感染的因素。

第二頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五不同微生物對消毒因子的敏感性最強朊病毒（感染性蛋白質）細菌芽孢分支桿菌親水病毒（非脂類病毒）：甲肝V

真菌細菌繁殖體親脂病毒：流感V、HBV、HIV最弱第三頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五滅菌

用物理或化學的方法清除殺滅所有形式的微生物。使物品無任何類型的存活微生物存在的過程。即使其達到無菌。第四頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五驗證

按照規(guī)定的程序，評價滅菌周期所采用的滅菌工藝參數是否達到滅菌要求的過程和方法。第五頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五滅菌的方法目前常用的滅菌方法有高溫濕熱滅菌、高溫干熱滅菌、氣體滅菌、輻射滅菌、等離子體協(xié)同滅菌、過濾除菌等。第六頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五如何確保滅菌效果

適當的:清潔，洗滌準備，包裝滅菌鍋裝載及排列正確的滅菌方法滅菌鍋操作滅菌監(jiān)測:化學,,生物和物理物品儲存滅菌記錄

第七頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五為什么要監(jiān)控滅菌過程?

是否無菌無法看到

滅菌過程監(jiān)控物理監(jiān)測化學監(jiān)測生物監(jiān)測第八頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五滅菌過程的物理監(jiān)控

即滅菌器的機械指示指滅菌器本身的狀態(tài)，如:壓力,溫度,時間等直接表明滅菌狀態(tài)是否已達到,以及滅菌器是否正常工作，不能保證在滅菌器內的被滅菌物是否已處在要求的滅菌過程和滅菌條件下第九頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五滅菌過程的化學監(jiān)測

生產時用，如EO滅菌時捆在產品外的指示紙帶，壓力蒸氣消毒鍋一般不用第十頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五滅菌過程的生物監(jiān)測

將最難殺滅的微生物，放在滅菌器內最難殺滅部位和標準測試包內，是滅菌質量最可靠的保證。滅菌過程的生物監(jiān)測不同于無菌試驗第十一頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五生物監(jiān)測常用兩種菌嗜熱脂肪桿菌芽胞：壓力蒸汽滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞：EO和干熱滅菌第十二頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五滅菌生物監(jiān)測的目的：達到：無菌保證水平(SAL)

10-6

在滅菌試驗中，為便于給結果做出評價，除有特殊規(guī)定外，將試驗菌芽孢（菌量≥106cfu/片）滅菌指數達到106，也就是說，滅菌后1000000（一百萬）件滅菌物中，只允許有一件以下有活的微生物存在，或自然微生物全部殺滅者為滅菌合格≥99.9999%。第十三頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五壓力蒸氣滅菌原理

組成菌體的蛋白質分子的功能取決于它的特殊結構，在一定高溫條件下受熱時，沾染在被滅菌物品上的菌體蛋白質和核酸間分子內氫鍵發(fā)生斷裂,影響了分子空間構型的重排,尤其是其中的酶失活，從而導致微生物的死亡。高溫高濕的環(huán)境能使一切微生物的蛋白質發(fā)生凝固和變性第十四頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五試驗表明,飽和蒸汽的穿透性比干熱空氣及過熱蒸汽穿透強得多,蒸汽冷凝時放出的潛熱傳給待滅菌品,使之升溫并使待滅菌品所帶的微生物尤其是表面的微生物發(fā)生水合作用,從而加速了它們的死亡。第十五頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五?

飽和蒸汽

干燥度在0.85與1.0之間的蒸汽(即液體水含量不超過15%((m/m))溫度與汽化壓力相對應。飽和蒸汽的壓力和溫度存在以下關系溫度T（℃）=106+143*壓力（MPa）表壓（MPa）0.070.110.140.21蒸汽溫度（℃）115121126134如有水分或冷空氣，一定壓力下相應溫度要低一些-----排冷凝水和冷空氣第十六頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五濕熱滅菌的對數規(guī)則滅菌時微生物的死亡遵循對數規(guī)則,滅菌過程可以用阿倫烏絲的一級反應式來描述。根據質量作用定律，在恒定溫度及保持其它條件不變的情況下，單位時間內被殺滅的微生物數正比于t0時的原有的數目第十七頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五

D值--對數單位滅菌時間D值,用以定量地描寫一定溫度下某種微生物在滅菌過程中的熱忍耐性參數，系指一定溫度下將微生物殺滅90%或使之下降一個對數單位所需的時間（min）。第十八頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五第十九頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五Z值--滅菌溫度系數

Z值系指使某一種微生物的D值下降一個對數單位，滅菌溫度應升高的度數。不同的微生物孢子，在不同的溶液中有各不相同的Z值。

Z值越大，微生物對溫度變化的“敏感性”就越弱，Z值被用于定量地描述微生物對滅菌溫度變化的“敏感性”。此時，企圖通過升高滅菌溫度的方式來加速殺滅微生物收效就不明顯。第二十頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五

同種孢子的Z值在不同的溶液中亦有差異。下表列舉了嗜熱脂肪桿菌在不同溶液中的Z值。第二十一頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五Ft值--T℃滅菌值指一個給定Z值下，滅菌程序在溫度T℃下的等效滅菌時間。可以把FT

理解為“T℃滅菌值”即“滅菌程序所賦予待滅菌品在T℃下的滅菌時間”。

第二十二頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五由于D值隨溫度的變化而變化，所以不同溫度下達到相同滅菌效果時,FT值將隨D值的變化而變化。滅菌溫度高時，所需的“T℃滅菌時間”就短；滅菌溫度較低時，則所需的“T℃滅菌時間”就長。第二十三頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五F0值--標準滅菌值

F0系T=121℃及Z=10℃下的FT值。如果把121℃理解為“標準狀態(tài)”,那么F0可理解為“標準滅菌值”。蒸汽滅菌的F0值─以分鐘表示的滅菌值。系指對具有Z值為10℃的微生物而言,滅菌過程賦予產品的標準滅菌時間。第二十四頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五滅菌率L─Fo和FT的比值

下表列舉了Z=10℃時不同溫度下的滅菌率值，表1Z=10℃時，不同溫度下的滅菌率和所相當的T℃滅菌時間第二十五頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五比較110℃和121℃的滅菌率，可以得出結論：

---110℃滅菌12.6min和121℃滅菌1min等效。

---滅菌時間相同，110℃滅菌效果只有121℃滅菌效果的7.9%。第二十六頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五微生物從所施加的一定程度的滅菌中存活的概率取決于：微生物的種類和數量滅菌前和滅菌中微生物所處的環(huán)境被滅菌產品中任何單個產品的無菌程度只能用總體中存在非無菌產品的概率來表示

第二十七頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五一定的F0值下，滅菌的效果除了與藥液中待殺滅的微生物的D值有關外，還與產品的帶菌量有關；產品滅菌前的含菌量越高，無菌保證的可信度就越小。第二十八頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五藥典規(guī)定：濕熱滅菌條件通常采用121℃15min，121℃30min或116℃40min的程序，也可以采用其它溫度和時間參數，但必須保證物品滅菌后的SAL≤10-6第二十九頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五對熱穩(wěn)定的物品，可采用過度殺滅法，其SAL≤10-12。熱穩(wěn)定性較差的產品的的標準滅菌時間F0【指滅菌溫度為121.1℃，生物指示菌的耐熱參數D值為1分，滅菌溫度系數Z值為10.0℃時的標準滅菌時間】一般不低于8分鐘。第三十頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五如產品的熱穩(wěn)定性很差可允許F0低于8，此情況下，應在生產全過程中，對產品中污染的微生物嚴加監(jiān)控，并采取各種措施降低微生物污染水平，確保被滅菌產品達到無菌保證要求。第三十一頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五如何進行滅菌效果的驗證1.溫度均勻性實驗（熱分布試驗）2.滅菌效果的生物驗證（熱穿透試驗）第三十二頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五壓力蒸汽消毒鍋滅菌驗證原則目的要求第三十三頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五原則驗證是GMP的重要組成部分，應按預定的方案進行，總結驗證的結果應記錄在案備查。生產工藝和程序應建立在驗證的基礎上，并進行定期的再驗證，以確保它們能達到預期的結果。第三十四頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五目的滅菌器及滅菌程序驗證的目的是:調查確定滅菌過程中冷點的位置,設定滅菌程序有關參數,用試驗來證實運行的可靠性及滅菌程序的重現(xiàn)性,以確保產品滅菌后達到低于百萬分之一的微生物污染率。第三十五頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五基本要求第三十六頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五運行確認

運行確認包括設備的檢查及通過試運行對滅菌性能的調查檢查,及設定滅菌程序的重復性試驗。運行確認中應保證:①在設定的蒸汽壓力和溫度范圍內,蒸汽、水、壓縮空氣和液體無滲漏;②門的聯(lián)鎖系統(tǒng)安全可靠;

第三十七頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五熱分布試驗該試驗分兩步進行:一是作空載的熱分布試驗,二是裝載的熱分布試驗。試驗要點如下:

將溫度探頭(或留點溫度計)編好號,固定在滅菌器腔室的不同位置，溫度探頭的放置應包括可能的高溫點及低溫點。應有一個探頭放在滅菌器溫度控制探頭處，一個放在靠近溫度記錄控制探頭附近，其余均勻分布于滅菌器腔室內，以使溫度的監(jiān)測具有好的代表性。在裝載熱分布試驗中，裝載應盡可能使用待滅菌產品或類似物，

第三十八頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五─按設定的滅菌程序如121℃30min或115℃40min進行滅菌，試驗中采用的參數及裝載方式與正常生產所采用的相同;─每種裝載方式進行3次重復試驗,確定空載的冷點位置;─試驗前后溫度探頭都要進行校正。通過試驗證明:最冷點和腔室平均溫度間差值應≤±2.0℃。第三十九頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期五熱穿透試驗

在滅菌器負載狀態(tài)下(一般為最大負載),將5支經過校正的標準熱電阻（留點溫度計）和生物指示劑插入到滅菌物品中按正常滅菌程序進行滅菌結束后，待滅菌鍋自然冷卻后打