2023-2024學(xué)年福建龍海市第二中學(xué)生物高三上期末檢測試題含解析

2023-2024學(xué)年福建龍海市第二中學(xué)生物高三上期末檢測試題考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．用PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因植株是否成功導(dǎo)入目的基因時，得到以下電泳圖譜，其中1號為DNA標(biāo)準(zhǔn)樣液（Marker），10號為蒸餾水。PCR時加入的模板DNA如圖所示。據(jù)此做出分析不合理的是A．PCR產(chǎn)物的分子大小在250至500bp之間B．3號樣品為不含目的基因的載體DNAC．9號樣品對應(yīng)植株不是所需的轉(zhuǎn)基因植株D．10號的電泳結(jié)果能確定反應(yīng)體系等對實驗結(jié)果沒有干擾2．miRNA是一類廣泛存在于真核動植物細胞中的小分子非編碼RNA，其可通過與靶基因mRNA的UTR或者CDS序列配對，促進mRNA的降解，從而抑制靶基因的表達。人類有約1/3的基因表達受到miRNA的調(diào)控。下列敘述錯誤的是（）A．miRNA、mRNA、tRNA都由DNA轉(zhuǎn)錄而來B．miRNA對靶基因的調(diào)控發(fā)生在轉(zhuǎn)錄后的階段C．miRNA的堿基序列與靶基因相應(yīng)的mRNA的相同D．細胞核中的RNA可通過核孔進入細胞質(zhì)中3．已知控制玉米某兩對相對性狀的基因在同一染色體上。但偶然發(fā)現(xiàn)這兩對基因均雜合的某玉米植株，自交后代的性狀分離比為9:3:3:1。出現(xiàn)此現(xiàn)象的原因可能是，該染色體上其中一對基因所在的染色體片段（）A．發(fā)生180°顛倒 B．重復(fù)出現(xiàn)C．移至非同源染色體上 D．發(fā)生丟失4．關(guān)于細胞學(xué)說的建立，下列說法正確的是（）A．英國科學(xué)家虎克最終建立了細胞學(xué)說B．德國科學(xué)家施萊登和施旺是細胞的發(fā)現(xiàn)者和命名者C．德國科學(xué)家魏爾肖的名言是“所有的細胞都來源于先前存在的細胞”D．細胞學(xué)說揭示了生物的統(tǒng)一性和多樣性5．消毒和滅菌是微生物培養(yǎng)中常用的操作方法。下列說法正確的是（）A．微生物接種技術(shù)的方法各不相同，但核心都是要防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度B．在100℃煮沸5-6分鐘屬于滅菌方法，可殺死微生物細胞和一部分芽孢C．在滅菌后倒平板前，加入一定量的緩沖液以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值D．高壓蒸汽滅菌，只有當(dāng)壓力表的壓力降到一個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓時，才能打開蓋子6．下列敘述中，不能說明“核基因和染色體行為存在平行關(guān)系”的是A．基因發(fā)生突變而染色體沒有發(fā)生變化B．非等位基因隨非同源染色體的自由組合而組合C．二倍體生物形成配子時基因和染色體數(shù)目均減半D．Aa雜合體發(fā)生染色體缺失后，可表現(xiàn)出a基因控制的性狀二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）閱讀如下有關(guān)鈣的資料：資料甲體內(nèi)鈣代謝雖然受多種激素的影響，但甲狀旁腺素（甲狀旁腺分沁）和降鈣素（甲狀腺C細胞分泌）是調(diào)節(jié)細胞外液中Ca2+濃度的兩種主要激素。甲狀旁腺素使血鈣增加，降鈣素使血鈣降低。資料乙神經(jīng)肌肉之間興奮的傳遞依靠乙酰膽堿（ACh）。降低細胞外液中Ca2+的濃度能抑制ACh的釋放；相反，在一定范圍內(nèi)，ACh的釋放量隨著Ca2+濃度的提高而增加。據(jù)認為，當(dāng)沖動到達突觸前終末時，Ca2+通道開放，大量Ca2+順著濃度梯度內(nèi)流。Ca2+是促使囊泡壁和突觸前膜的特異分子結(jié)構(gòu)發(fā)生反應(yīng)的必要因素，其結(jié)果是導(dǎo)致兩層膜暫時相互融合并破裂，囊泡內(nèi)的ACh全部釋出。回答下列問題：（1）人體分泌的甲狀旁腺素與降鈣素彌散到_______中，隨血液流到全身，傳遞著相關(guān)的信息。由于激素一經(jīng)靶細胞接受并起作用后就被滅活了，因此，體內(nèi)需要源源不斷地產(chǎn)生這兩種激素，以維持這兩種激素含量的____________。調(diào)節(jié)細胞外液中Ca2+濃度時，這兩種激素所起的作用表現(xiàn)為______________。（2）突觸前膜以____方式釋放ACh。神經(jīng)末梢與肌細胞的接觸部位類似于突觸，則可判斷出肌細胞產(chǎn)生的興奮不能傳向神經(jīng)末梢的原因是：_______________________。（3）根據(jù)資料乙，若突然降低突觸前膜對組織液中Ca2+的通透性，將會______神經(jīng)沖動的傳遞。8．（10分）某哺乳動物的基因型為AABbEe，下圖1～4是其體內(nèi)某一個細胞增殖過程中的部分分裂圖像，圖5、圖6為描述該動物體內(nèi)細胞增殖過程中相關(guān)數(shù)量變化的柱形圖,圖7為該過程中細胞內(nèi)染色體數(shù)目的變化曲線。請回答相關(guān)問題：（假設(shè)該動物體細胞染色體數(shù)目為2n）（1）圖1～4細胞分裂的先后順序是____________，圖1細胞的名稱是____________，由圖1和圖4所標(biāo)注基因可推知，在該細胞增殖過程中發(fā)生的變異類型是____________。（2）若圖5中的b代表核DNA含量，則c最可能代表____________含量。圖1～4中，與圖5表示數(shù)量變化相符的是____________。（3）該動物體內(nèi)的細胞在增殖過程中，當(dāng)發(fā)生著絲點分裂后，細胞將處于圖6中的____________組。（4）圖7中CD段，細胞內(nèi)含有____________個染色體組。圖1～4中，與圖7中HI段相對應(yīng)的是____________。9．（10分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細胞死亡。（1）將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細胞，這樣打靶載體和與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行__________保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細胞”或“生殖細胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。10．（10分）皮膚作為人體最大的器官擁有達1.8m2的表面積，其主要功能是作為物理屏障，保護機體免受外來生物或有毒物質(zhì)的侵害。同時，皮膚也是人體與外界環(huán)境接觸的部位，因此常駐有各類微生物，包括細菌、真菌等，可通過微生物培養(yǎng)技術(shù)了解我們的皮膚表面的微生物分布情況?；卮鹣铝袉栴}：（1）微生物培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、無機鹽、碳源、___________。由于不同種類的微生物的菌落特征表現(xiàn)不同，因此可以利用____________________培養(yǎng)基來培養(yǎng)、觀察菌落特征，對微生物進行初步的鑒定和分類。（2）有同學(xué)通過制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基來培養(yǎng)附著在皮膚表面的細菌。制備該培養(yǎng)基的操作步驟是計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時需要在酒精燈火焰旁操作，待平板冷卻凝固后，還需要將平板_________。為了確定培養(yǎng)基滅菌效果是否達到要求，可隨機取若干_______________，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，觀察該培養(yǎng)基是否出現(xiàn)了菌落，若沒有出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基的滅菌效果達到了要求。（3）采集并制備樣液，并將樣液接種到培養(yǎng)基的平板上培養(yǎng)。采用的接種方法有_________和______________，若采用前者，則操作中接種環(huán)在使用前要在酒精燈火焰上先灼燒，其目的是_________________，第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的末端開始，其目的是______________。11．（15分）回答下列有關(guān)血紅蛋白的提取和分離的問題：（1）血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：樣品處理、粗分離、________和純度鑒定。（2）實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液。①加入檸檬酸鈉的目的是__________________________________。②樣品處理包括____________、___________、分離血紅蛋白溶液和透析。（3）收集的血紅蛋白溶液在透析袋中進行透析，這就是樣品的粗分離。①透析的目的是：將樣品中分子量較小的雜質(zhì)蛋白除去。②透析的原理是_____________________________________________________。（4）通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，樣品純化的目的是______________________。（5）最后經(jīng)SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳進行_____________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

PCR過程中，可以通過設(shè)計特定的引物來擴增特定的DNA片段。4～9號是轉(zhuǎn)基因植株，理論上應(yīng)包含目的基因。9號PCR結(jié)果不包含250～500bp片段，所以不是所需轉(zhuǎn)基因植株?！驹斀狻緼、PCR過程中，可以通過設(shè)計特定的引物來擴增特定的DNA片段。4～9號是轉(zhuǎn)基因植株，理論上應(yīng)包含目的基因，結(jié)合2號野生型和10號蒸餾水組的結(jié)果，推測包含目的基因的片段大小應(yīng)為250～500bp，A正確；

B、3號PCR結(jié)果包含250～500bp片段，應(yīng)包含目的基因，B錯誤；

C、9號PCR結(jié)果不包含250～500bp片段，所以不是所需轉(zhuǎn)基因植株，C正確；

D、10號放入蒸餾水，可排除反應(yīng)體系等對結(jié)果的干擾，由圖可知，10號的電泳結(jié)果能確定反應(yīng)體系等對實驗結(jié)果沒有干擾，D正確。

故選B。2、C【解析】

基因控制蛋白質(zhì)的合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個步驟，其中轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板合成RNA，而翻譯是以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)。miRNA能夠綁定目標(biāo)mRNA上的互補序列，促進mRNA的降解，可見其通過阻斷翻譯過程來進行基因表達調(diào)控?！驹斀狻緼、miRNA、mRNA、tRNA都屬于RNA，都由DNA轉(zhuǎn)錄而來，A正確；B、根據(jù)miRNA的作用原理，其可通過與靶基因的mRNA特定的堿基序列配對，促進mRNA的降解，阻斷靶基因的表達，可見其通過阻斷翻譯過程來進行基因表達調(diào)控，B正確；C、根據(jù)miRNA的作用原理，其可通過與靶基因的mRNA特定的堿基序列配對，因此miRNA的堿基序列與靶基因相應(yīng)的mRNA的堿基序列互補，C錯誤；D、核孔是細胞中一些大分子物質(zhì)進出的通道，細胞核中的RNA可通過核孔進入細胞質(zhì)中，D正確。故選C。3、C【解析】

1.基因分離定律和基因自由組合定律的實質(zhì)：在減數(shù)第一次分裂的后期，由于同源染色體的分離，其上的等位基因分離；同時非同源染色體自由組合，導(dǎo)致非同源染色體上的非等位基因自由組合。2.染色體結(jié)構(gòu)的變異的類型：（1）缺失是指染色體中某一片段的缺失；（2）重復(fù)是指染色體中增加了某一片段；（3）倒位是指染色體中某一片段的位置顛倒了180°；（4）易位是指染色體中某一片段移接到另一條非同源染色體上。3.根據(jù)題意分析可知，控制玉米某兩對相對性狀的基因在同一染色體上，正常情況下符合基因的連鎖互換定律，假設(shè)這兩對基因用A、a和B、b表示，而偶然發(fā)現(xiàn)這兩對基因均雜合的某玉米植株（AaBb），自交后代的性狀分離比為9:3:3:1，說明符合自由組合定律F1自交的結(jié)果。【詳解】根據(jù)以上分析可知，兩對基因均雜合的某玉米植株，自交后代的性狀分離比為9:3:3:1，符合自由組合定律F1自交的結(jié)果，說明控制這兩對性狀的基因分布在了兩對同源染色體上，而根據(jù)題意可知，控制玉米某兩對相對性狀的基因在同一染色體上，那么說明在上述過程中發(fā)生了染色體易位的現(xiàn)象，且原來染色體上其中一對基因所在的染色體片段易位到了非同源染色體上，因此符合自由組合定律的結(jié)果。綜上所述，C正確，A、B、D錯誤。故選C。4、C【解析】

細胞學(xué)說的主要內(nèi)容：（1）細胞是一個有機體，一切動植物都是由細胞發(fā)育而來，并由細胞和細胞產(chǎn)物所構(gòu)成。（2）細胞是一個相對獨立的單位，既有它自己的生命，又對與其他細胞共同組成的整體的生命起作用。揭示了細胞的統(tǒng)一性和生物體結(jié)構(gòu)的統(tǒng)一性。（3）新細胞可以從老細胞中產(chǎn)生。細胞的發(fā)現(xiàn)者和命名者是英國科學(xué)家羅伯特?胡克（RobertHooke），而細胞學(xué)說是由施萊登和施旺建立的，揭示了細胞和生物的統(tǒng)一性。提出“所有的細胞都來源于先前存在的細胞”是德國科學(xué)家魏爾肖。【詳解】A、英國科學(xué)家虎克是細胞的發(fā)現(xiàn)者，A錯誤；B、細胞的發(fā)現(xiàn)者和命名者是英國科學(xué)家羅伯特?胡克，B錯誤；C、德國科學(xué)家魏爾肖的提出“所有的細胞都來源于先前存在的細胞”，C正確；D、細胞學(xué)說只揭示了生物的統(tǒng)一性，未揭示生物的多樣性，D錯誤。故選C?！军c睛】熟知細胞的發(fā)現(xiàn)、細胞學(xué)說的建立、內(nèi)容和發(fā)展的基礎(chǔ)知識是解答問題的關(guān)鍵。5、A【解析】

消毒是能是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面和內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），滅菌是指用強烈的理化因素殺死物體表面和內(nèi)部的所有微生物，包括芽孢和孢子。常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目?！驹斀狻緼、微生物接種技術(shù)的方法各不相同，但核心都是要防止雜菌污染，保證獲得純凈的培養(yǎng)物，A正確；B、在100℃煮沸5-6分鐘屬于煮沸消毒法，可殺死微生物細胞和一部分芽孢，B錯誤；C、在滅菌前，加入一定量的緩沖液以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值，B錯誤；D、高壓蒸汽滅菌，只有當(dāng)壓力表的壓力降到零時，才能打開排氣閥，擰松螺栓，打開蓋子，D錯誤。故選A。6、A【解析】

基因與染色體的平行關(guān)系：基因在雜交過程中保持完整性和獨立性，染色體在配子形成和受精過程中，也有相對穩(wěn)定的形態(tài)結(jié)構(gòu)；在體細胞中基因和染色體均成對存在，配子中只含有成對的配子中的一個和成對的染色體中的一條；體細胞中成對的基因一個來自父方，一個來自母方；同源染色體也是如此；非等位基因在形成配子時自由組合，非同源染色體在減數(shù)第一次分裂的后期也是自由組合?！驹斀狻克^平行關(guān)系即兩者的行為要表現(xiàn)一致，基因突變是DNA上的某一基因發(fā)生變化（微觀變化），而染色體（宏觀）沒有變化，A項符合題意；非等位基因隨非同源染色體的自由組合而組合；二倍體生物形成配子時基因和染色體數(shù)目均減半；Aa雜合體發(fā)生染色體缺失后，可表現(xiàn)出a基因控制的性狀，即A也發(fā)生缺失，均表現(xiàn)出了染色體與基因的平行關(guān)系，B、C、D項不符合題意。故選A?！军c睛】基因與染色體是否存在平行關(guān)系，要看二者的行為變化如分離、組合、數(shù)目變化是否是同步的。二、綜合題：本大題共4小題7、體液動態(tài)平衡相互拮抗胞吐；神經(jīng)遞質(zhì)只能由突觸前膜釋放，然后作用于突觸后膜上減緩【解析】

要維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，動物體就必須能及時感知內(nèi)環(huán)境的變化，并及時做出反應(yīng)加以調(diào)整，這些活動都依靠神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的活動來完成。神經(jīng)系統(tǒng)的基本形式是反射，反射的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧，由感受器、傳入神經(jīng)元、反射中樞、傳出神經(jīng)元、效應(yīng)器組成。兩個神經(jīng)元之間或神經(jīng)元與肌肉之間形成的結(jié)構(gòu)稱為突觸。體液調(diào)節(jié)又稱為內(nèi)分泌調(diào)節(jié)，是內(nèi)分泌系統(tǒng)分泌激素，通過體液的傳送而發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的一種調(diào)節(jié)方式。【詳解】（1）內(nèi)分泌腺沒有導(dǎo)管，分泌的激素彌散到體液中，隨血液流到全身，傳遞著各種信息。激素一經(jīng)靶細胞接受并起作用后就被滅活了，因此，體內(nèi)需要源源不斷地產(chǎn)生激素，以維持激素含量的動態(tài)平衡。甲狀旁腺素使血鈣增加，降鈣素使血鈣降低，所以，調(diào)節(jié)細胞外液中Ca2+濃度時，這兩種激素所起的作用表現(xiàn)為相互拮抗。（2）突觸前膜以胞吐方式釋放ACh。由于神經(jīng)遞質(zhì)只存在于突觸前膜的突觸小泡中，只能由突觸前膜釋放，然后作用于突觸后膜上，因此神經(jīng)末梢與肌細胞之間興奮的傳遞只能是單向的。（3）根據(jù)資料乙，若突然降低突觸前膜對組織液中Ca2+的通透性，將會減緩神經(jīng)沖動的傳遞?！军c睛】神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)是人體兩類重要的調(diào)節(jié)方式，也是常見的考點，其中神經(jīng)元之間只能單向傳遞是常見的易錯點，平時學(xué)習(xí)時要注意在理解的基礎(chǔ)上加強記憶。8、圖2、圖3、圖1、圖4次級卵母細胞基因突變?nèi)旧珕误w圖3b、c4圖1和圖4【解析】

分析圖1：該細胞不含同源染色體，著絲點位于赤道板上，處于減數(shù)第二次分裂中期；分析圖2：該細胞中含有同源染色體，且著絲點分裂，處于有絲分裂后期；分析圖3：該細胞中同源染色體正在分離，處于減數(shù)第一次分裂后期；分析圖4：該細胞不含同源染色體，且著絲點分裂，處于減數(shù)第二次分裂后期；分析圖5：該細胞中染色體：染色單體：DNA=1：2：2，且染色體數(shù)目與體細胞相同，處于減數(shù)第一次分裂、有絲分裂前期和中期；分析圖6：a組細胞中染色體含量是體細胞的一半，是減數(shù)分裂形成的配子；b組細胞中的染色體含量與體細胞相同，處于有絲分裂前期和中期、減數(shù)第一次分裂、減數(shù)第二次分裂后期；c組細胞中染色體含量是體細胞的2倍，處于有絲分裂后期；分析圖7：AF段表示有絲分裂；FI表示減數(shù)分裂。【詳解】（1）原始生殖細胞先通過有絲分裂方式增殖，再通過減數(shù)分裂方式形成配子，因此圖1～4細胞分裂的先后順序是圖2、圖3、圖1、圖4；根據(jù)圖3細胞的不均等分裂可知該生物的性別為雌性，圖1細胞處于減數(shù)第二次分裂中期，再結(jié)合圖1和圖3中染色體顏色可知，其名稱是次級卵母細胞；由圖1和圖4所標(biāo)注基因可推知，在該細胞增殖過程中發(fā)生的變異類型是基因突變。該細胞最終形成的最重要的子細胞基因型為AbE或Abe。（2）若圖5中的b代表核DNA含量，則c最可能代表染色單體含量。圖5細胞中染色體：染色單體：DNA=1：2：2，且染色體數(shù)目與體細胞相同，處于減數(shù)第一次分裂、有絲分裂前期和中期，因此圖1～4中，與圖5表示數(shù)量變化相符的是圖3。（3）該動物體內(nèi)的細胞在增殖過程中，當(dāng)發(fā)生著絲粒分裂后，細胞處于減數(shù)第二次分裂后期或有絲分裂后期，分別將處于圖6中的b、c組。（4）圖7中CD段，細胞處于有絲分裂后期，此時細胞內(nèi)含有4個染色體組，8個核DNA分子。圖7中HI段表示減數(shù)第二次分裂，因此圖1～4中，與圖7中HI段相對應(yīng)的是圖1和圖4?！军c睛】本題結(jié)合圖解，考查細胞的有絲分裂和減數(shù)分裂，要求考生識記細胞有絲分裂和減數(shù)分裂不同時期的特點，掌握有絲分裂和減數(shù)分裂過程中染色體行為和數(shù)目變化規(guī)律，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。9、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細胞，這樣打靶載體與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細胞恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。【點睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)以及胚胎工程的有關(guān)知識，重點考查基因工程的操作步驟，要求考生識記基因表達載體的構(gòu)建過程，識記胚胎工程的操作過程，屬于考綱識記層次的考查。10、氮源固體倒置滅菌后的空白培養(yǎng)基平板劃線法稀釋涂布平板法殺滅接種環(huán)上的微生物使微生物數(shù)目能夠隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，以達到分離的效果【解析】

1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。2、微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，