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關(guān)于淋巴細(xì)胞結(jié)果的解讀第1頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三淋巴細(xì)胞分化圖第2頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三按T細(xì)胞所處的活化階段初始T細(xì)胞(naiveTcell)效應(yīng)T細(xì)胞(effectorTcell)記憶性T細(xì)胞(memoryTcell)按T細(xì)胞表面受體(TCR)分類
+
T細(xì)胞
+
T細(xì)胞按T細(xì)胞CD4和CD8分子表型
CD4+T細(xì)胞
CD8+T細(xì)胞按T細(xì)胞的功能分類
Th(輔助T細(xì)胞)
TS(抑制T細(xì)胞)
Tr(調(diào)節(jié)T細(xì)胞)T淋巴細(xì)胞的分類方法第3頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三外周血中各亞群占淋巴細(xì)胞總數(shù)的比例60-80%27-51%15-44%T淋巴細(xì)胞CD4T淋巴細(xì)胞CD8T淋巴細(xì)胞第4頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三淋巴細(xì)胞監(jiān)測(cè)注重?cái)?shù)量、比例、功能相結(jié)合血液分析常規(guī)檢測(cè)依據(jù)白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞比例及計(jì)數(shù)綁定機(jī)體免疫狀況,無法精確判斷。T淋巴細(xì)胞亞群比例檢測(cè)臨床常用,但較片面T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量觀察免疫細(xì)胞數(shù)值變化,評(píng)估免疫狀況,通常采用流式細(xì)胞儀法,特別針對(duì)CD4的檢測(cè),已成為“金標(biāo)準(zhǔn)”。功能、數(shù)量、比例結(jié)合更精確評(píng)估機(jī)體免疫狀態(tài)1234第5頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三目前臨床主要可以做以下項(xiàng)目的檢測(cè)
淋巴細(xì)胞亞群(T+B+NK)的比例和計(jì)數(shù)T細(xì)胞亞群(CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞、CD4+/CD8+比值)MHLA-DR(單核細(xì)胞HLA-DR)CD4CD25Treg(調(diào)節(jié)細(xì)胞)及Th17細(xì)胞(我們工作)目前國(guó)內(nèi)絕大多數(shù)醫(yī)院沒有開展淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)項(xiàng)目第6頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三項(xiàng)目百分含量(%淋巴細(xì)胞)TotalBlymphocyte(CD19+)5-18%NKcell(CD3-/CD16+56+)7-40%TotalTlymphocyte(CD3+)50-84%Thelper/inducercell(CD3+/CD4+)27-51%Tsupressor/cytotoxiccell(CD3+/CD8+)15-44%CD4/CD80.71-2.78(BD)健康中國(guó)人參考范圍項(xiàng)目百分含量(%T淋巴細(xì)胞)絕對(duì)含量(cells/L)TotalTlymphocyte(CD3+)770-2041Thelper/inducercell(CD3+/CD4+/CD8-)34-70%414-1123Tsupressor/cytotoxiccell(CD3+/CD4-/CD8+25-54%238-874CD3+CD4+CD8+cell0.5-4.0%6-56第7頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法一(FCM)取100μl全血,加三種不同熒光素標(biāo)記的鼠抗人CD3、CD4、CD8McAb,陰性對(duì)照。加紅細(xì)胞裂解液,溶血,離心,棄上清。用PBS洗1次,PBS重懸細(xì)胞,上機(jī)檢測(cè)。FCM分析電子計(jì)算機(jī)自動(dòng)計(jì)算出陽性細(xì)胞百分率及總細(xì)胞計(jì)數(shù)。簡(jiǎn)單、快速、相對(duì)精確第8頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三CD3+T細(xì)胞正常范圍為:50-84%CD4+T細(xì)胞正常范圍為:27-51%
CD8+T細(xì)胞正常范圍為:15-44%CD19+B細(xì)胞正常范圍為:5-18%與血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀聯(lián)用,得出各淋巴細(xì)胞百分比后乘以淋巴細(xì)胞數(shù)量,得出各淋巴細(xì)胞的絕對(duì)濃度。CD4T淋巴細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法二(推算)不精確、繁瑣省錢舉例如下第9頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三患者血常規(guī)中淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)為0.63×109/L,淋巴細(xì)胞比例測(cè)定結(jié)果CD3為64.9%,CD4為32.5%,CD8為31.1%CD3細(xì)胞計(jì)數(shù)為0.63×109/L×64.9%≈0.41×109/LCD4細(xì)胞計(jì)數(shù)為0.63×109/L×32.5%≈0.20×109/LCD8細(xì)胞計(jì)數(shù)為0.63×109/L×31.1%≈0.19×109/L推算第10頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三第11頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三單核細(xì)胞人類白細(xì)胞抗原DR(CD14/HLA-DR)CD14為L(zhǎng)PS復(fù)合物受體,主要分布在單核細(xì)胞,HLA-DR為活化標(biāo)志。CD14/HLA-DR可反映人體細(xì)胞免疫功能,<30%提示免疫麻痹。也有人認(rèn)為HLA-DR濃度如果連續(xù)兩天低于8000AB/C可認(rèn)為存在免疫麻痹。廣泛應(yīng)用于臨床。第12頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三T淋巴細(xì)胞亞群研究研究逐年增多第13頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三淋巴細(xì)胞亞群變化的常見臨床意義CD4淋巴細(xì)胞減少:見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應(yīng)用免疫抑制劑的患者CD8淋巴細(xì)胞增多:見于自身免疫性疾病,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、艾滋病初期、慢性活動(dòng)性肝炎、腫瘤及病毒感染等CD4/CD8比值異常:
比值降低:一般被稱為“免疫抑制”狀態(tài),常見于免疫缺陷病、惡性腫瘤、再生障礙性貧血、白血病、某些病毒感染等比值增高:表明細(xì)胞免疫功能處于“過度活躍”狀態(tài),容易出現(xiàn)自體免疫反應(yīng)。此外還可用于監(jiān)測(cè)器官移植的排斥反應(yīng),若移植后CD4/CD8較移植前明顯增加,則可能發(fā)生排異反應(yīng)第14頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三15Theshiftfromapro-in-flammatorytoananti-inflammatoryimmuneresponsepredominantatthesystemiclevellikelyoccursbefore24hafterdiagnosisofshock.膿毒癥休克期存在免疫麻痹第15頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三存在免疫麻痹的Septic患者死亡率大大增加100名septic患者28天死亡無免疫麻痹免疫麻痹第16頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三膿毒癥休克患者T淋巴細(xì)胞凋亡、存在免疫紊亂第17頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三存活與死亡Septic中T淋巴細(xì)胞亞群的變化一項(xiàng)對(duì)院內(nèi)感染的老年膿毒癥患者的前瞻性對(duì)照研究第18頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三Injury,Int.J.CareInjured(2007)38,1346—1357嚴(yán)重多發(fā)傷患者免疫細(xì)胞的變化特點(diǎn)CD4/CD8降低MHLA-DR降低T細(xì)胞及單核細(xì)胞凋亡增加第19頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三燒傷患者早期外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化特點(diǎn)燒傷患者白細(xì)胞低于正常組早期CD3、CD4、CD8細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯下降。HLA-DR表達(dá)降低。CD4/CD8比值下降。第20頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三CD4T細(xì)胞亞群新分類:Th1、Th2、Treg、Th17我們的研究第21頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三抗炎細(xì)胞Treg及其分泌的抗炎介質(zhì)IL-10;促炎細(xì)胞Th17及分泌的促炎介質(zhì)IL-17、IL-6在人體的炎性免疫穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。第22頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三23中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志,2010,09(04):416-418.結(jié)論一:膿毒癥患者中Treg明顯升高,表明抗炎反應(yīng)的增強(qiáng)第23頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三24
結(jié)論二:在膿毒癥患者中Th17表達(dá)明顯升高吳鐵軍,亢翠翠,中華急診醫(yī)學(xué)雜志,2012,21(04):378-380.膿毒癥組對(duì)照組膿毒癥患者中Th17表達(dá)明顯升高,提示促炎反應(yīng)的增強(qiáng)。第24頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三25重癥膿毒癥患者淋巴細(xì)胞增殖能力低下、凋亡淋巴細(xì)胞Ag-NoR在健康組中的表達(dá)
淋巴細(xì)胞Ag-NoR在Sepsis組中的表達(dá)吳鐵軍,張麗娜中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志,2010,09(04):416-418.膿毒癥組對(duì)照組第25頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三重癥膿毒癥患者存在免疫麻痹中國(guó)急救醫(yī)學(xué)雜志,2011,31(9):836-838.CD14^+單核細(xì)胞人類白細(xì)胞抗原-DR(HLA-DR)表達(dá)情況對(duì)照組膿毒癥組第26頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三27第27頁,講稿共29頁,2023年5月2日,星期三T淋巴細(xì)胞亞群的研究越來越多某種T細(xì)胞亞群過高或過低,都提示存在免疫功能紊亂,主要用于了解惡性腫瘤
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