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二〇一六年六月學(xué)生學(xué)號(hào):201310902008 院(系):生物與化學(xué)工程學(xué)院 .................................................................. 1 1 1 2 2 2 3 3 4 4............2材料與方法......................................................................................................................................... 4 5 7 7 8 8 8 8 8 8 93結(jié)果與分析...................................................................................................................................... 31文獻(xiàn)綜述sitosterol),3%的胡蘿卜素(carotene葉綠素(chlorophylls)、異槲皮素(isoquerceitrin、)黃體色素(Lutein)、新胡蘿卜素(neocarotene)和葉黃素(xanthophyll)等色素,蕓香甙(rutin),槲皮素(quercetin),紫云英素DNJ)等[1-3]。這些物質(zhì)具有降血壓,降血糖,降膽固醇,抗腫瘤,抗過(guò)敏,抗氧禿頭癥、動(dòng)脈硬化和減肥的藥用效力。陳福君等陳福君等[4]從桑葉中提取桑葉總多糖(TPM),給四氧嘧啶致糖尿病小鼠給藥,結(jié)果表明,TPM有非常顯著的降糖作用;TPM還可以提高糖尿病小鼠的耐糖量,增加肝糖元而降低葡萄糖,以及提高正常大鼠血漿中胰島素含量。Asano等[5]已從桑葉中分離出6種DNJ與糖結(jié)合的N糖化合物并確定了其結(jié)構(gòu)。并對(duì)其降糖效果和機(jī)理做了進(jìn)一步探討。佐藤修二[6]也對(duì)桑葉的甲醇提取物的降血糖作用出量,并減少心率。蘆丁使蟾蜍下肢及兔耳血管收縮、槲皮素可擴(kuò)張冠狀血管,改善心肌循環(huán)。蘆丁、槲皮素具有降血壓的作用。桑葉還有抑菌、抗炎、延緩衰老作用[7]。除此之外,桑葉中含有C3D+13.82°易溶于堿水。蘆丁經(jīng)過(guò)加工,生產(chǎn)出曲克蘆丁,可以這樣理解:曲克蘆丁是一羥3331.1拉丁文中文名1nanensis根2al葉34cerbalindl葉5cochinchiensis.6ima7lucrata花8Carthamustinctorius花9葉ocalyxBupleurumchinenseDC.Eucommiaulmoides.葉brifolia葉RehdL葉、冷堿水浸提法等,多存在1.1冷堿滲漉法采用冷堿滲漉提取-酸沉淀法從槐米中提取蘆丁,其收率1.2連續(xù)萃取法將槐米用碳酸氫鈉溶液和烷基酚環(huán)氧乙烷加成物處理后,再上籠蒸熟,然后用含有一定量硼砂的石灰水連續(xù)萃取,結(jié)果提取率提高到22%,1.3大孔吸附樹(shù)脂法用大孔吸附樹(shù)脂法成功地從蕎麥中分離出蘆丁,并洗脫,上柱液溫度為30~40℃,pH為3~4,提取率達(dá)85%,純度達(dá)95%以上。等從槐米中提取蘆丁,超聲提取40min,其提取率為22.53%,是目前生產(chǎn)力的311.7~2.0倍。經(jīng)對(duì)比試驗(yàn)可知,節(jié)約藥材30%~40%,具有較高的經(jīng)濟(jì)效益。林翠根據(jù)超聲波有使懸浮于氣體或液體中的微粒聚集成較大顆粒而沉淀的作用,對(duì)傳統(tǒng)工藝再提取過(guò)程中具有的產(chǎn)品易氧化劣變、有機(jī)溶劑殘留等弊端,將槐米經(jīng)預(yù)處理后,采用超臨界CO2作為溶劑,萃取槐米中的蘆丁,對(duì)傳統(tǒng)近年來(lái)對(duì)蘆丁的研究不論在新資源的發(fā)現(xiàn),提近年來(lái)對(duì)蘆丁的研究不論在新資源的發(fā)現(xiàn),提取工藝的改進(jìn),藥理研究的深效明顯增強(qiáng)。藥物在體內(nèi)的代謝屬于酶系統(tǒng)的催化反應(yīng),故藥物的活性與酶密切相關(guān),而生物體內(nèi)大多數(shù)酶的活性中心多是一種被配合的金屬離子,因而似乎絡(luò)合物作為藥物的活性就是這種外源性配合物與酶這種內(nèi)源性配合物之間相互作屬離子又是有機(jī)分子的導(dǎo)向,金屬元素有其特殊的生物學(xué)性質(zhì),并很大程度上取加強(qiáng)蘆丁金屬絡(luò)合物的研究,通過(guò)化學(xué)研究準(zhǔn)確地確定蘆丁金屬絡(luò)合物的分子結(jié)構(gòu)與空間構(gòu)型,有針對(duì)性地篩選金屬元素,并與藥理學(xué)研究等有機(jī)結(jié)合起來(lái),可作相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克3了固定相材料、檢測(cè)技術(shù)、數(shù)據(jù)處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展。。液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對(duì)色譜法及分子排阻色常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁,粒度5~10μm。適用于分離分子量200~1000的組3化;液液色譜法按固定相和流動(dòng)相的極性不同可分為正相色譜法(NPC)和反相色正相色譜法采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動(dòng)相反相色譜法一般用非極性固定相(如C18、C8);流動(dòng)相為水或緩沖液,時(shí)間。適用于分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現(xiàn)代液相色譜中應(yīng)用最為HPLC的80%左右。pH。間除跟組分離子與樹(shù)脂上的離子交換基團(tuán)作用強(qiáng)弱有關(guān)外,它還受流動(dòng)相的pH3離子對(duì)色譜法常用ODS柱(即C18),流動(dòng)相為甲醇-水或乙腈-水,水中加入32材料與方法藥品名稱格無(wú)水乙醇AR成都市科龍化工試劑廠酸AR成都市科龍化工試劑廠蘆丁標(biāo)準(zhǔn)樣品AR天津大學(xué)科威公司序號(hào)儀器名稱儀器型號(hào)1FA2004成都安亭科學(xué)儀器廠2高效液相色譜儀t成都上虞市上興沙篩廠4超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)寧波新芝生物科技股份有限公司5上海恒平科學(xué)儀器有限公司6冰箱海爾7容量瓶成都市六一儀器廠8燒杯成都市六一儀器廠n3的33結(jié)果與分析3y4.494x+6.49960R0.99890gmL液作溶劑,用超聲波輔助提取,設(shè)計(jì)不同目數(shù)對(duì)蘆丁提取的影響,采用進(jìn)行分析,提取溫度為40℃;乙醇濃度為80%。參考桑葉蘆丁的標(biāo)準(zhǔn)含量再以此為標(biāo)準(zhǔn)含量。按上述色譜條件測(cè)定峰面積積分值,以峰面積積分值為縱坐標(biāo),對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量X(μg/mL)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程。標(biāo)準(zhǔn)曲線得出公式y(tǒng)=14.494x+6.4996=0.9989通過(guò)計(jì)算可以得出蘆丁含量與溫度的關(guān)系:3.3計(jì)算出提取蘆丁濃度與溫度之間的關(guān)系溫度/℃3035404550濃度/ug/ml3溫度/℃3035404550含丁蘆品樣86420樣樣品蘆丁含量溫度(℃)量最大(11.41%),溫度過(guò)低和過(guò)高都不利于提取,50℃時(shí)提取量最少??赡苁荓復(fù)進(jìn)樣3次,測(cè)量峰面積,relativestandarddeviation)為1.90%。3表3.5桑葉中蘆丁含量精密度測(cè)定記錄表(n=3)量/g提取蘆丁g/mL)樣品蘆丁1分別稱量4份1g的桑葉粉末,通過(guò)平行操作提取,制備試品溶液,分別在上述色譜條件下測(cè)定峰面積,每個(gè)樣品測(cè)定3次,記錄峰面積,并取其平均值丁含量的RSD為1.89%。表3.6桑葉中蘆丁含量測(cè)定結(jié)果(n=3)量/g平均值提取蘆丁g/mL)樣品蘆丁134討論本次實(shí)驗(yàn)我們采用的是80%的乙醇溶液提取桑葉粉末中的生物活性物質(zhì)蘆我們從攀枝花學(xué)院摘取桑葉,洗凈,打碎烘干后,用60目標(biāo)準(zhǔn)分樣篩篩選至50ml。定容時(shí)用酒精定容要比水定容效果更佳,不會(huì)影響蘆丁的析出,用酒溶液深藍(lán)色并且澄清,用水定容后的溶液渾濁。精確到小數(shù)的后兩位,避免實(shí)驗(yàn)誤差。3參考文獻(xiàn)[1]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(下冊(cè))[M].上海:上海人民出版社,1997.[2]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(附編)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1979.[4]陳福君,盧軍,張永煜.桑的藥理研究(1)-桑葉降血糖有效組份對(duì)糖尿病動(dòng)物糖代謝的影[6]左藤修二.關(guān)于成人病預(yù)防及生理機(jī)能評(píng)價(jià)—對(duì)循環(huán)系統(tǒng)影響的評(píng)價(jià):有關(guān)桑葉的降血R研究事業(yè)報(bào)告,1996:87-90[7]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(下冊(cè))[M].上海:上海人民出版社

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