水稻霜霉病的病原鑒定

水稻霜霉病的病原鑒定

1890年首次在澳大利亞發(fā)現(xiàn)水稻霉菌，也被稱為黃化萎縮。此外，它還在日本、意大利、美國和印度以及中國東北部、臺灣、江蘇、廣東、山東和湖南等?。ㄊ校﹫蟾?。20世紀90年代以來,分別在貴州省湄潭縣、羅甸縣的不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)陸續(xù)發(fā)現(xiàn)該病。2009年6月下旬,疑似此病在貴州省獨山縣發(fā)現(xiàn),獨山縣植保植檢站統(tǒng)計,該縣基長鎮(zhèn)、本寨鄉(xiāng)、水巖鄉(xiāng)、上司鎮(zhèn)、下司鎮(zhèn)和麻尾鎮(zhèn)等6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有此病發(fā)生,發(fā)病面積達20hm2,一般發(fā)病田塊病叢率為2.3%,嚴重田塊病叢率達15%以上。水稻霜霉病為系統(tǒng)性侵染,一旦發(fā)生,發(fā)病率基本上等于損失率,對產(chǎn)量影響較大。如何科學、準確和及時鑒定水稻霜霉病,是控制該病發(fā)生、發(fā)展與流行的基礎(chǔ),對其減輕對水稻產(chǎn)量的損失具有重要意義。張廣民、江健、桑維鈞等對水稻霜霉病的發(fā)生進行了研究報道,但對于水稻霜霉病的鑒定方法并未做具體描述。為此,作者采用組織整體透明法和熒光染色法對感病植株進行觀察研究,以尋求水稻霜霉病科學、簡便的鑒定方法,為該病的防治提供技術(shù)支撐。1材料和方法1.1獨山縣5年供試水稻品種:陸兩優(yōu)106、冷水米(獨山縣本地品種)、川香優(yōu)6號、宜香10號、奇優(yōu)894、錫貢12、富優(yōu)1號和湘優(yōu)109,由貴州省獨山縣植保植檢站提供。1.2方法分別采用組織整體透明法和熒光染色法對以上8個水稻品種進行病原鑒定。1.2.1浮載劑的制備取感病水稻扭曲變形心葉的葉鞘,剪成5mm×5mm的葉段,放入冰醋酸∶95%乙醇混合液(1∶1,V∶V)中透明24h,然后轉(zhuǎn)入棉蘭乳酚液中染色12h后,取出用乳酚油做浮載劑制片觀察。1.2.2熒光顯微鏡lumpose觀察取感病水稻扭曲變形心葉的葉鞘,剪成5mm×5mm的葉段,放入甲醇∶氯仿(1∶2,V∶V)透明液中6h,轉(zhuǎn)入乳酚油∶95%乙醇(1∶2,V∶V)中煮沸1.5min,放置過夜,然后分別用50%乙醇、蒸餾水沖洗2次,再轉(zhuǎn)入0.5mol/L的NaOH溶液中漂白2次,每次15min,取出用蒸餾水迅速沖洗2～3次,轉(zhuǎn)入Tris-Hcl緩沖液(pH=8.5)中浸泡30min,取出用0.1%FluorescentBrightener28(溶于Tris-Hcl緩沖液)染色5min,迅速用蒸餾水沖洗4次后轉(zhuǎn)入25%的甘油中浸泡30min,取出制片,熒光顯微鏡(OLYMPUSBX51)觀察(u激發(fā))。2結(jié)果與分析2.1葉的表面形態(tài)感病水稻植株矮化,比健壯植株矮1/3～1/2左右,受害株葉片寬大、肥厚,心葉葉面皺縮粗糙,褪綠黃化,呈淡黃色或黃白色,且嚴重扭曲變形,葉鞘略有膨松,有的出現(xiàn)皺褶或扭曲。葉片、葉鞘在未枯死前表面無枯斑和霉狀物出現(xiàn)。重病株不能孕穗,一般病株不能抽穗,幼穗死于劍葉鞘內(nèi),輕病株即使抽穗也不正常(圖示Ⅰ)。2.2核電站的鑒定結(jié)果2.2.1藥物多配置為大進一步提高的藥物s普通光學顯微鏡400倍下觀察,可見病組織細胞變形,細胞壁成波浪狀,病組織內(nèi)含有大量檸檬形、有乳頭狀突起的孢子囊,大小為27.1～70.3μm×15.1～32.4μm,有柄,柄長為11.4～20.4μm(圖示Ⅱ)。根據(jù)孢子囊形態(tài)特征,可確定其是指疫霉屬(SclerophthoraThirumetal.)的大孢指疫霉[S.macrospora(Sacc)Thirumetal.],是引起水稻霜霉病的病原菌。2.2.2藍色藍色光催化染色熒光顯微鏡(OLYMPUSBX51)u激發(fā)下觀察,檸檬形、有乳頭狀突起的孢子囊被染成藍色,清晰可見,特征明顯(圖示Ⅲ)。根據(jù)孢子囊形態(tài)特征,可確定其是指疫霉屬(SclerophthoraThirumetal.)的大孢指疫霉[S.macrospora(Sacc)Thirumetal.],是引起水稻霜霉病的病原菌。2.38病原菌駁岸鑒定在試驗的8個水稻品種中,其葉片組織內(nèi)均鏡檢到大量孢子囊。根據(jù)病害癥狀特征,病原菌孢子囊特征可確定,試驗的8個水稻品種病害為霜霉病,引起此病的病原菌為鞭毛菌亞門指疫霉屬(SclerophthoraThirumetal.)的大孢指疫霉[S.macrospora(Sacc)Thirumetal.]。3對感病植株的觀察和防治1)水稻霜霉病與由病毒引起的水稻矮縮病在田間癥狀上極其相似,僅通過癥狀難以區(qū)分,而且病毒檢測鑒定手段復雜困難。本次試驗表明,組織整體透明法和熒光染色法是鑒定水稻霜霉病簡單有效的方法,同時也是與水稻矮縮病相區(qū)別的簡便方法。2)試驗過程中,在病組織內(nèi)觀察到大量孢子囊,尚未見到卵孢子,表明在當?shù)?月下旬是水稻霜霉病的發(fā)病初期。同時,試驗結(jié)果還表明:水稻霜霉病發(fā)病的初期,在感病植株葉鞘內(nèi)能觀察到大量孢子囊,與文獻報道的在田間很少見到孢子囊的結(jié)果不一致。3)對于此病的侵染來源,國外報道除病殘株外,還有Eragrostiscilian-ensis(大畫眉草)、E.pectinala和Panieumcapilare(毛線稷)3種雜草傳病;但據(jù)當?shù)刂脖Ｖ矙z站資料顯示,以前從未發(fā)生過此病。因此,不存在病殘株侵染,對于此次大面積的迅速爆發(fā),是傳病雜草引起的還是帶病種子引起的尚不清楚,亟待研究。4)水稻霜霉病的發(fā)生輕重與育秧階段的氣候條件、育秧方式、品種以及秧田管理有密切關(guān)系。對水稻霜霉病的防治,應采取農(nóng)業(yè)防治為主、藥劑保護為輔的綜合防治措施。首先,健全排灌系統(tǒng),做到能灌能排,開好平水缺,嚴防二葉期前深水淹苗,減少病菌侵染機會。其次,清除秧田四周和溝渠兩旁雜草,減少初次侵染來源,并提高播種質(zhì)量,及時檢查拔除病株。藥劑防治應在二葉期前,特別遇連續(xù)陰雨造成積水淹苗時,應及時選用有效農(nóng)藥噴霧保護。對