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文檔簡介
UV-2600型紫外分光光度計(jì)操作指導(dǎo)書1概況1.1儀器概況:UV-2600型紫外分光光度計(jì)是由日本島津(Shimadzu)生產(chǎn)制造,與功能強(qiáng)大的操作軟件UVProbe結(jié)合,操作簡單方便,且符合SH/T0181方法的測量精度要求。1.2主要技術(shù)參數(shù)波長范圍185nm~900nm(使用積分球附件ISR-2600Plus時220nm~1400nm)分辨率0.1nm波長準(zhǔn)確性±0.3nm譜帶范圍0.1、0.2、0.5、1、2、5nm測光方式雙光束方式雜散光0.005%以下檢測器光電倍增管R-928測光范圍-5~5Abs比色池1cm光源50W鹵素?zé)?、氘燈單色器切尼?特納單色器主電壓AC100V~240V主頻率50/60Hz1.3使用條件操作溫度:15~35操作濕度:30%~805%2儀器結(jié)構(gòu)儀器由UV-2600型紫外分光光度計(jì)和計(jì)算機(jī)組成。3操作步驟3.1開機(jī)在使用前先確認(rèn)儀器和計(jì)算機(jī)的工作電源,檢查儀器樣品室應(yīng)無遮擋光路的物品。確認(rèn)后先開啟計(jì)算機(jī),然后開啟儀器電源。待分光光度計(jì)外側(cè)的指示燈顯示綠色時,啟動電腦桌面上的UVPROBE程序。首先從下拉式菜單的儀器項(xiàng)上追加需要的儀器,操作完畢如下圖①所示,然后點(diǎn)擊上圖的連接鍵②,這樣儀器與計(jì)算機(jī)連接(當(dāng)然,中間的通訊電纜的連接、通訊口的指定等都是必須的,此處不再贅述)并開始下示的初始化面。①②①②⑧①⑧①⑨②⑨②⑩③⑩③⑾④⑾④⒀⑿⑥⑤⒀⑿⑥⑤⒁⑦⒁⑦初始化大約需要5分鐘左右,進(jìn)行一系列的檢查和初置,如一切順利通過就可以開始測定。3.2測定首先選擇測定的方式,在主菜單上能發(fā)現(xiàn)右圖所示的各鍵,自左至右分別為:①報(bào)告生成器:用于制作各種格式的報(bào)告。②動力學(xué)測定方式:一般測定吸收值隨時間的變化,通常用于酶反應(yīng)隨時間的變化。③光度測定(定量)方式:可進(jìn)行多波長、單波長、峰高或峰面積定量。校準(zhǔn)曲線可使用多點(diǎn)、單點(diǎn)、K因子等方法。由于具有自定義方程的功能,DNA/蛋白質(zhì)測定等以前需并選擇多點(diǎn)、單點(diǎn)或K因子法等。進(jìn)行定量測定也需要基線校正和自動調(diào)零,方法如前面所述。此后,樣品室內(nèi)逐個放入標(biāo)準(zhǔn),點(diǎn)擊上圖下方的讀數(shù)鍵即可。注意,無論是測定標(biāo)準(zhǔn)或未知樣品,必須輸入名稱才有效。標(biāo)準(zhǔn)測定完畢,工作曲線自動顯示。接下去就可測定未知樣品的濃度了。有時不測定濃度,只測定某些波長的讀數(shù),則在校準(zhǔn)方法中選擇“原始數(shù)據(jù)”,在登錄時選擇若干需要的波長,即可測定各波長的讀數(shù)。使用SH/T0181方法標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行光譜測定時,點(diǎn)擊③設(shè)置波長到287.5nm,再放入兩只均裝有光譜純異辛烷的比色皿,點(diǎn)擊①自動調(diào)零,最后,將外面一只比色皿中裝入需要測定的樣品,點(diǎn)擊④鍵讀數(shù),即可測得在該波長處的樣品的吸光度值。在工作曲線圖象上點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵,選擇屬性,可從該圖象上得到許多有用的信息,見下圖:只需在這些顯示的項(xiàng)目中做標(biāo)記,相應(yīng)的信息即出現(xiàn)在工作曲線圖象的左下方。見下圖的劃圈部分:所謂K因子法實(shí)際上可稱為已知工作曲線法(而且不局限于直線),即工作曲線回歸方程的系數(shù)和次數(shù)已知,故而只要輸入這些系數(shù)以及工作曲線的次數(shù)。這一方法對工作曲線較為穩(wěn)定的日常分析非常有效。設(shè)置方法見下圖:3.5動力學(xué)分析在菜單欄中點(diǎn)擊方法鍵,得到如下圖象:此處的計(jì)時方式選擇的是“自動”,時間總量中需手動設(shè)置測定的時間。由于是自動計(jì)時方式,所以采樣步長(圖中為時間周期)和讀數(shù)次數(shù)將根據(jù)時間總量自動設(shè)置。此外可設(shè)置波長以及活度計(jì)算的開始和結(jié)束時間。設(shè)置大短的活度范圍會出現(xiàn)錯誤信息。相反,如果計(jì)時方式選擇的是手動的話,則可輸入時間周期和讀取次數(shù),而時間總量(測定時間)會根據(jù)輸入的時間周期和讀取次數(shù)自動計(jì)算得到?;疃确秶糜诿阜磻?yīng)隨時間的變化,如果單純進(jìn)行時間掃描的話,則可不考慮活度范圍。測定的波長欄內(nèi)可選擇單波長或雙波長(波長l-波長2或波長l/波長2)兩種方法。選擇后輸入相應(yīng)的波長。主菜單中有如右各鍵,自主到右分別是時間掃描圖象、數(shù)據(jù)處理面板、測定參數(shù)面板和酶活度圖象。點(diǎn)擊各鍵屏幕出現(xiàn)相應(yīng)的板塊。下圖中表示已經(jīng)測定得到數(shù)據(jù)的顯示情況。4定期維護(hù)檢查表檢查維護(hù)項(xiàng)目每天1年2年3年檢查樣品室○檢查外觀○確認(rèn)光源點(diǎn)燈時間○更換W1(鹵素)燈○更換D2(氘)燈○性能確認(rèn)○○○5常見故障及排除5.1初始化室的異常狀況(以下編號見前文初始化窗口中內(nèi)容)編號檢查位置處理措施⑧關(guān)閉(OFF)本產(chǎn)品的電源開關(guān)后再次打開(ON),進(jìn)新儀器初始化。⑨、⑩、⑿樣品室池架上是否有遮擋光線的物品?暫時關(guān)閉(OFF)本產(chǎn)品的電源開關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開(ON)電源。觀察光源室,W1是否漏光?如果沒有漏光將W1熄滅。暫時關(guān)閉(OFF)本產(chǎn)品的電源開關(guān)后再次打開(ON)。如果光源不亮,請更換W1燈。光源的使用時間是否超過使用壽命?在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”,顯示“配置”窗口后單擊“點(diǎn)燈時間”選項(xiàng)卡。如果各光源燈的點(diǎn)燈時間超過“燈壽命”,請更換光源。⑾、⒀樣品室池架上是否有遮擋光線的物品?暫時關(guān)閉(OFF)本產(chǎn)品電源開關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開(ON)電源,對儀器進(jìn)行初始化。樣品室蓋是否敞開?暫時關(guān)閉(OFF)本產(chǎn)品電源開關(guān)。關(guān)閉樣品室蓋后再次打開(ON)電源開關(guān),對儀器進(jìn)行初始化。光源的使用時間是否超過使用壽命?在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”,顯示“配置”窗口后單擊“點(diǎn)燈時間”選項(xiàng)卡。如果各光源燈的點(diǎn)燈時間超過“燈壽命”,請更換光源。5.2故障癥狀與處理方法故障(癥狀)主要原因處理方法打開電源開關(guān)后不通電。AC電源線插頭是否插好?正確連接AC電源線插頭。AC電源線是否被壓,或電源線彎曲?如果AC電源線損壞,更換相同型號的電源線。供電電源是否符合儀器的電源規(guī)格?使用與儀器的電源規(guī)格相符的電源。保險(xiǎn)絲是否燒斷?需要確認(rèn)和更好保險(xiǎn)絲時請與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。無法與UVProbe通訊。是否確保正確連接USB纜線?請確切鏈接到PC和儀器上。是否正確設(shè)置PC的COM端口?在PC顯示器右下方確認(rèn)本產(chǎn)品COM端口號后,電極UVProbe“儀器”菜單的“配置”,設(shè)置連接端口。是否正確安裝USB驅(qū)動程序?按照UVProbe軟件的安裝窗口安裝USB驅(qū)動程序。測光值異常。光源是否熄滅?在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”,顯示“配置”窗口然后單擊“維護(hù)”選項(xiàng)卡?!肮庠礌顩r”的“W1”、“D2”復(fù)選框未被激活時,A處理:光源熄燈時,激活“W1”、“D2”的復(fù)選框。在UVProbe中單擊“斷開”,關(guān)閉(OFF)與UVProbe的通訊;關(guān)閉(OFF)儀器電源。稍后再打開電源;單擊“連接如果光源燈未亮,顯示錯誤時,再進(jìn)行“B處理”。光源燈點(diǎn)亮,隨后又熄滅時進(jìn)行“C處理”。B處理:光源未亮。請更換新燈。C處理:儀器檢出異常時強(qiáng)行將燈熄滅;檢測風(fēng)扇是否停止或基板上的溫度感應(yīng)器是否過熱;關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域內(nèi)的島津分公司聯(lián)系。波長等測定參數(shù)設(shè)置是否正確?請重新檢查輸入的參數(shù)。測光值異常。狹縫寬度是否合適?改變狹縫寬度,重新進(jìn)行測定。光源的使用時間收費(fèi)超過使用壽命?如果光源的使用時間超過使用壽命,請更換光源。測定的樣品是否正確?請檢查所取樣品是否正確。使用的吸收池是否合適?請使用符合測定目的的吸收池。使用玻璃池時無法測定紫外區(qū),請使用石英池。儀器附近是否使用手機(jī)?手機(jī)種類的信號強(qiáng)度可能光度值有影響。樣品室安裝的特殊附件和連接器的連接是否正確?請檢查特殊附件是否正確安裝到樣品室,或連接器是否正確連接?在儀器前方是否聽到發(fā)動機(jī)的異常聲響?扇形發(fā)動機(jī)可能運(yùn)行異常。請與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。異常警報(bào)發(fā)出蜂鳴聲,LED顯示紅色。排氣風(fēng)扇的排氣口是否堵塞?關(guān)閉電源開關(guān)。檢查排氣風(fēng)扇出口處10cm以內(nèi)是否存在阻礙物,如果有請清除。由于可能出現(xiàn)溫度異常,請稍后再重新打開電源開關(guān)。如果仍未解決,請與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。排氣風(fēng)扇是否停止?確認(rèn)空氣從左后方的排氣口排出。如果風(fēng)扇停止運(yùn)行,關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。光源是否熄滅?如果光源的使用時間超過使用壽命,請更換光源。兩側(cè)光源都未亮。排氣風(fēng)扇是否停止?確認(rèn)空氣從左后方的排氣口排出。如果風(fēng)扇停止運(yùn)行,關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。UVProbe啟動慢。儀器記錄文件的容量是否增加?由于加載存儲的儀器記錄需要時間,軟件的啟動可能會變慢。按照以下順序?qū)x器記錄刪除或進(jìn)行數(shù)據(jù)庫傳輸。單擊輸出窗口的“儀器記錄”選項(xiàng)卡;選擇儀器記錄
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