胃癌及癌前病變中PCNA和Caspase-3的表達(dá)及其與Hp感染的關(guān)系(全文)

精品文檔-下載后可編輯胃癌及癌前病變中PCNA和Caspase-3的表達(dá)及其與Hp感染的關(guān)系(全文)【摘要】目的探討PCNA和Caspase-3在胃癌及癌前病變中的表達(dá)及其與Hp感染的關(guān)系。方法應(yīng)用快速尿素酶試驗(yàn)與吉姆斯染色法將各種病變分為Hp感染陽性組和陰性組，應(yīng)用免疫組化法對各種病變胃組織PCNA和Caspase-3的表達(dá)進(jìn)行檢測。結(jié)果①胃癌及癌前病變組PCNA表達(dá)及Hp感染率明顯高于慢性淺表性胃炎組(P

【關(guān)鍵詞】胃癌；癌前病變；幽門螺桿菌(Hp)

胃癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多因素、多步驟的過程，涉及到細(xì)胞增值和凋亡平衡異常等多方面機(jī)制。進(jìn)年研究發(fā)現(xiàn)幽門螺桿菌（Hpylori）感染與胃癌的關(guān)系密切。本研究應(yīng)用免疫組化方法檢測增殖相關(guān)基因蛋白PCNA及凋亡蛋白酶系統(tǒng)中關(guān)鍵酶Caspase-3在胃癌發(fā)生過程中的表達(dá)變化，探討其在胃黏膜癌變過程中所起的作用及Hp感染致癌的可能機(jī)制。

1資料和方法

1．1一般資料選擇2022年6-10月來本院就診的患者110例，包括慢性淺表性胃炎組40例，癌前病變組（萎縮性胃炎、腸上皮化生及不典型增生病變）40例及胃癌組30例，其中Hp陽性者63例,Hp陰性者47例,所有患者均經(jīng)胃鏡檢查診斷并經(jīng)病理組織學(xué)檢查證實(shí)并未服用非幽體消炎藥、抗生素及抑酸藥。

1．2方法

1．2．1Hp感染檢測采用快速尿素酶試驗(yàn)及吉姆斯染色法,二者均陽性為Hp陽性，均陰性為Hp陰性，單一陰性退出試驗(yàn)。

1．2．2免疫組織化學(xué)兔抗人PCNA及Caspase-3多克隆抗體、SP染色試劑盒、DAB顯色試劑盒等均購自北京中杉生物技術(shù)公司。試驗(yàn)嚴(yán)格按照SP染色試劑盒操作步驟說明進(jìn)行，以PBS代替一抗為陰性對照,以已知陽性切片為陽性對照。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS12．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，相關(guān)因素的差異性比較采用χ2檢驗(yàn)及確切概率法。

2結(jié)果

2．1PCNA檢測結(jié)果以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)明顯的棕褐色顆粒者為陽性標(biāo)記，Caspase-3蛋白陽性表達(dá)定位于胃黏膜上皮及胃癌細(xì)胞質(zhì),胞核或胞質(zhì)顯示為淡黃至黃棕色者為陽性標(biāo)志，在組織切片中不顯色為陰性。PCNA在淺表性胃炎-癌前病變-胃癌的病變過程中陽性率分別為45%、75%、83．3%，表達(dá)逐漸增加,在胃癌組表達(dá)最高（P

2．2Hp在淺表性胃炎-癌前病變-胃癌組的感染率分別為30%、70%、76．67%，各組與慢性淺表性胃炎組比較HP陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

2．3在同一病變組Hp感染陽性組PCNA、Caspase-3的表達(dá)高于Hp陰性組，在所有試驗(yàn)對象中63例Hp陽性組各基因的表達(dá)與陰性組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

3討論

3．1胃黏膜癌變過程中PCNA及Caspase-3的表達(dá)PCNA是DNA聚合酶δ的輔助蛋白,是細(xì)胞增殖周期中DNA合成的必要蛋白，在G1期表達(dá)逐漸增加,S期達(dá)到高峰，G2/M期迅速降低,可作為S期的特異性標(biāo)記，其含量多少可以反映細(xì)胞增殖程度[2]。本研究顯示:PCNA表達(dá)從CSG到GC逐漸增加,提示GC演變過程中,胃黏膜細(xì)胞增殖程度逐漸增加,從而增加內(nèi)外源性DNA受損機(jī)會(huì),增加胃癌發(fā)生的危險(xiǎn)性。Caspase-3可看作是調(diào)控胃上皮細(xì)胞凋亡最重要的執(zhí)行者之一,它的激活能使許多細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞周期及DNA修復(fù)等相關(guān)蛋白或激酶失活,在細(xì)胞凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)啟動(dòng)途徑中起著關(guān)鍵性作用。本研究發(fā)現(xiàn)隨著胃黏膜的癌變進(jìn)展Caspase-3的表達(dá)下降，這與徐進(jìn)等[2]研究一致，表明Caspase-3介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡參與了胃黏膜的癌變過程。

3．2胃黏膜癌變過程中PCNA、Caspase-3的表達(dá)與Hp感染的相關(guān)性鑒于Hp與GC關(guān)系的大量研究,國際癌癥研究會(huì)已把Hp列為GC的Ⅰ類致癌原。本研究顯示Hp感染率隨著癌變的進(jìn)展而明顯升高,HP陽性組PCNA的表達(dá)高于HP陰性組，表明HP感染促進(jìn)細(xì)胞增殖,使黏膜處于高增殖狀態(tài),從而增加細(xì)胞DNA的損傷，這可能是HP感染引起胃癌的機(jī)制之一[1]。在同一病變中HP陽性組Caspase-3的表達(dá)高于HP陰性組,表明HP感染通過調(diào)控Caspase-3基因的表達(dá)而促進(jìn)細(xì)胞凋亡。Hp感染引起胃黏膜細(xì)胞凋亡、增殖的機(jī)制仍不明確，可能與Hp產(chǎn)生的毒素、細(xì)胞因子、氧自由基等有關(guān),還與bak、fas、p53等基因表達(dá)增強(qiáng)有關(guān)[4]。總之，Hp感染可能參與胃癌癌前病變乃至胃癌的發(fā)生,近來研究顯示Hp感染促進(jìn)胃黏膜細(xì)胞凋亡、增殖作用主要發(fā)生在胃癌癌前病變早期階段。因此胃癌癌前病變早期階段抗Hp治療可能能預(yù)防胃癌的發(fā)生。

參考文獻(xiàn)

［1］PrestonMS，PikeMC，RossRK，etal.Increasedcelldivisionasacauseofhumancancer.CancerRes，1990，50(23):7415.

［2］徐進(jìn),文繼航,鄭暉,等.Caspase-3蛋白在胃癌及非典型增殖中的