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不同溫度對(duì)長(zhǎng)白豬精液品質(zhì)的影響摘要采集健康狀況良好飼養(yǎng)條件完全一致的長(zhǎng)白豬公豬精液,分別在20℃,25℃,30℃,35℃四個(gè)溫度條件下,以精子色澤、氣味、精子活力、精子活率、精子密度、畸形率、精子直線速率和鞭打頻率為重要指標(biāo)對(duì)精液品質(zhì)進(jìn)行測(cè)評(píng)研究。與標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)進(jìn)行類(lèi)比,以及不同溫度之間的差異性比較。實(shí)驗(yàn)得出不同溫度下對(duì)長(zhǎng)白豬公豬精液品質(zhì)的影響,從而分析出精液最適宜保存的溫度范圍。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:在四個(gè)溫度條件下,精液的色澤未出現(xiàn)不同的現(xiàn)象;隨著溫度的升高,精液氣味變的濃烈,有明顯腥味。在25℃時(shí)精液各指標(biāo)的品質(zhì)最好;當(dāng)溫度大于25℃后,精子活力和精子活率降低,畸形率增加,精子密度等品質(zhì)明顯降低;在20℃和25℃之間,不存在明顯差異;35℃溫度處理的精液與其他溫度之間都存在極顯著性差異。超過(guò)30℃后的精子活率大幅度下降,溫度越高對(duì)精液的影響越大。關(guān)鍵詞:精液品質(zhì);溫度;精子活力;畸形率

目錄TOC\o"1-3"\h\u18189引言 引言隨著國(guó)內(nèi)養(yǎng)豬業(yè)越來(lái)越現(xiàn)代工業(yè)化的發(fā)展,人工授精技術(shù)的普及率在大型養(yǎng)殖場(chǎng)中超過(guò)80%,豬精液已經(jīng)成為一個(gè)畜用商品流通[1],因此在生產(chǎn)實(shí)踐中對(duì)精液品質(zhì)的要求也更加重視起來(lái)。精液品質(zhì)反應(yīng)的是公豬的繁殖能力,公豬的繁殖能力的好壞直接關(guān)系到母豬的受胎率和產(chǎn)子數(shù)量。品質(zhì)優(yōu)秀的精液可以使母豬受胎率和產(chǎn)子數(shù)達(dá)到理想狀態(tài),提高豬群品質(zhì)[2],同時(shí)作為種公豬選種和品種改良的重要標(biāo)準(zhǔn)。俗話說(shuō):“母豬好好一窩,公豬好好一坡”,由此可看出精液品質(zhì)的好壞對(duì)豬場(chǎng)的生產(chǎn)成績(jī)和經(jīng)濟(jì)效益有著嚴(yán)重影響[3]。人工授精技術(shù)的普及以及對(duì)精液品質(zhì)的重視隨之帶來(lái)的是公豬精液的保存以及運(yùn)輸流通等多方面的問(wèn)題。精液的保存受許多因素影響,其中溫度是其中極為重要的因素。精子在體外保存的過(guò)程中受到外界低溫或高溫的打擊下,會(huì)出現(xiàn)冷休克或熱應(yīng)激的現(xiàn)象,造成精子細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞,內(nèi)容物流失,導(dǎo)致受精能力下降[4][5]。根據(jù)研究表明,精液在常溫條件下較為適宜保存,但是由于在常溫環(huán)境中也同樣適合絕大多數(shù)的微生物細(xì)菌迅速大量生長(zhǎng)繁殖,精液被污染幾率增加;在常溫環(huán)境中大量的微生物生長(zhǎng)繁殖會(huì)影響精液的品質(zhì)質(zhì)量,因此在采集流程和運(yùn)輸保存中,最大程度降低微生物對(duì)精液質(zhì)量的影響[6]。同時(shí)由于溫度會(huì)影響蛋白質(zhì)活性,某些微生物也具有分解蛋白質(zhì)的作用。因此在不同溫度下,精液的品質(zhì)所受的影響也是不同的,精子的保存時(shí)長(zhǎng)和存活率也存在差異。本研究的選取國(guó)外瘦肉型品種長(zhǎng)白豬為動(dòng)物模型,研究比較不同溫度下長(zhǎng)白豬精液質(zhì)量參數(shù),以探究長(zhǎng)白豬精液保存的最適溫度。從而為公豬精液的適宜保存溫度和運(yùn)輸流通條件提供可參考的數(shù)據(jù)。1材料與方法1.1試驗(yàn)材料1.1.1試驗(yàn)動(dòng)物從安徽省浩宇牧業(yè)有限公司選擇健康狀況良好飼養(yǎng)條件完全一致的2-3歲長(zhǎng)白公豬4頭,每頭公豬每隔三天采集精液一次,每頭豬采精3次,在12天內(nèi)連續(xù)完成采精。將采集好的精液經(jīng)過(guò)精液稀釋劑同比例稀釋后在保溫箱里送回實(shí)驗(yàn)室,稀釋好的公豬精液于17度恒溫箱中保存。1.1.2主要試驗(yàn)器材表1主要試驗(yàn)儀器設(shè)備儀器廠家型號(hào)水浴鍋顯微鏡上海一恒科學(xué)儀器有限公司OSE-PROIII計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)純水儀邁朗重慶艾科浦ML-117AJC-0501-P1.1.3主要試驗(yàn)試劑表2主要試驗(yàn)試劑試劑廠家貨號(hào)25.4*76.2mm全透明載玻片(帆船)24*24mm標(biāo)準(zhǔn)級(jí)蓋玻片(世泰)1xPBS緩沖液(PH=7.3+0.1)伊紅Y(水溶)milliporemilliporeSolarbioTherm(Fermentas)710110212424CP1020E80901.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1精液稀釋利用美國(guó)WIM長(zhǎng)效豬精液稀釋粉對(duì)豬精液進(jìn)行稀釋。方法是:將一包稀釋粉溶解于1000ml預(yù)熱雙蒸水中,攪拌25分鐘直至完全溶解。將稀釋液放入37度的水浴鍋中靜置預(yù)溫1小時(shí),使稀釋液的PH值達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。采集到的豬精液應(yīng)在20分鐘內(nèi)稀釋完。稀釋時(shí),精液與稀釋液溫度差應(yīng)不超過(guò)1度。根據(jù)精子濃度和質(zhì)量1:1的方法進(jìn)行稀釋?zhuān){(diào)整濃度大小在合適范圍。把稀釋好的精液應(yīng)儲(chǔ)存在17度恒溫箱中。儲(chǔ)存精子需要每12小時(shí)進(jìn)行一次混合,以防止精子沉淀和死亡。把稀釋好的精液立即用恒溫冰箱送至實(shí)驗(yàn)室備用。1.2.2設(shè)置溫度本實(shí)驗(yàn)設(shè)置20℃,25℃,30℃,35℃四個(gè)不同的溫度梯度,水溫穩(wěn)定后,將稀釋好的公豬精液利用移液槍取2ML至離心管中,放置于漂浮板上水浴中2個(gè)小時(shí)后,立即利用計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)進(jìn)行精液質(zhì)量指標(biāo)測(cè)定。1.2.3精液感官測(cè)定的方法正常的精液呈乳白色,無(wú)雜色,略帶腥味,無(wú)其他惡臭味;若出現(xiàn)血腥味,臭味,其他顏色則為異常精液。不正常的精液的色澤和氣味都會(huì)發(fā)生變化,其中一項(xiàng)發(fā)生變化另外一項(xiàng)也會(huì)隨之變化,因此色澤和氣味總是同時(shí)檢測(cè),利用檢測(cè)人員的視覺(jué)和嗅覺(jué)進(jìn)行直接觀察得出結(jié)果。1.2.4精液密度的測(cè)定方法合格的公豬精液密度在0.8億/ml以上,精液密度測(cè)定的方法有兩種:估測(cè)法:用400倍顯微景觀察再進(jìn)行估測(cè);計(jì)數(shù)法:用血紅球計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)得出。1.2.5精子活率的測(cè)定方法:精子活率的高低作為精液品質(zhì)評(píng)定的重要指標(biāo)之一,精子活率與精子的受精成功率密切相關(guān)[7]。精子活率指呈直線運(yùn)動(dòng)前進(jìn)的精子數(shù)量占總的精子數(shù)量的百分比,精子活率是反應(yīng)精子正常存活的精子數(shù)量。通過(guò)計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)(CASA)進(jìn)行測(cè)定。1.2.6精子活力的測(cè)定方法精子活力指精子的運(yùn)動(dòng)能力,是鑒定精液品質(zhì)的指標(biāo)之一,按照《種豬常溫精液》(GB23238-2009)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)精子活力得要求,正常精子活力≥60%[8]。同樣通過(guò)使用計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定。1.2.7精子的直線速率和鞭打頻率的測(cè)定方法精子正常的運(yùn)動(dòng)特征為直線運(yùn)動(dòng),保持持續(xù)的直線運(yùn)動(dòng)以及直線運(yùn)動(dòng)時(shí)的速率對(duì)母豬的受胎率和妊娠率有很大的影響[9-10]精子直線速率是反應(yīng)精子活力的指標(biāo)之一,指精子在觀察的單位時(shí)間內(nèi)從運(yùn)動(dòng)起始點(diǎn)到終點(diǎn)的直線運(yùn)動(dòng)距離。鞭打頻率同樣作為反應(yīng)精子活力的一個(gè)指標(biāo),展現(xiàn)的是精子運(yùn)動(dòng)能力的強(qiáng)弱。兩個(gè)指標(biāo)同樣利用計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定。1.2.8精子畸形率的測(cè)定方法畸形率指的是精液中異常精子數(shù)占精子總數(shù)的百分比,它間接反映了精子的受精能力。正常情況下,精子畸形率不超過(guò)18%,畸形率過(guò)大會(huì)降低受胎率。實(shí)驗(yàn)中利用伊紅溶液進(jìn)行染色鏡檢法進(jìn)行測(cè)定。具體步驟如下:用移液槍取10ul精液均勻的涂抹在玻片,待自然晾干。用移液槍取配置好的50%的甲醇溶液適量,固定5min,待自然晾干。用移液槍取適量0.5%伊紅染液染色5min。用1xPBS緩慢沖洗載玻片,等風(fēng)干后,立即放顯微鏡下觀察。鏡檢隨機(jī)讀取3-5個(gè)視野內(nèi)的精子畸形率后求平均數(shù)。2結(jié)果與分析2.1不同溫度下長(zhǎng)白豬精液品質(zhì)的差異分析2.1.1氣味精液氣味在20℃和25℃的氣味是較濃的清新腥味,無(wú)其他異味;當(dāng)溫度達(dá)到30℃時(shí)精液腥味開(kāi)始變淡;達(dá)到35℃時(shí),精液腥味已經(jīng)難以嗅到。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著溫度的增大精液氣味的濃度開(kāi)始降低,由于高溫能使蛋白質(zhì)變性的原理,加熱溫度升高破壞了精液中的蛋白質(zhì),從而使得精液氣味變淡。精液氣味濃度與精液品質(zhì)的好壞有關(guān),腥味越濃,品質(zhì)越好。在20℃和25℃條件處理下的精液氣味最濃,此時(shí)品質(zhì)最好。2.1.2色澤四個(gè)溫度下精液的色澤均為乳白色,沒(méi)有肉眼可觀察到的顏色變化。精液的色澤在短期的加熱條件下沒(méi)有受到影響,有實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明短時(shí)間內(nèi)精液的色澤不能反應(yīng)精液品質(zhì)的變化。則次實(shí)驗(yàn)中色澤不能作為評(píng)定精液品質(zhì)指標(biāo)。2.1.3精液的密度根據(jù)P>0.05代表差異不顯著,0.05>P>0.01代表差異顯著,P<0.01代表差異極顯著。由表2-1可知,20℃分別與25℃和30℃之間的精子密度存在差異顯著(0.05>P>0.01);20℃與35℃之間的精子密度存在差異極顯著(P<0.01);25℃分別與30℃和35℃之間的精子密度存在差異極顯著(P<0.01);30℃與35℃之間的精子密度存在差異顯著(0.05>P>0.01)由圖2-1可知從20℃到25℃的精子密度加大(0.05>P>0.01);當(dāng)溫度超過(guò)25℃后精子密度開(kāi)始極速下降,精子密度越來(lái)越稀。結(jié)果表明隨著溫度的增加,每個(gè)溫度之間都存在不同顯著性的差異,從而得知溫度對(duì)精子密度存在影響,且在這四個(gè)溫度條件下,25℃時(shí)精子密度最大。表2-1不同溫度下精子密度的差異性(P)溫度/℃20253035200.0450.019<0.001250.045<0.001<0.001300.019<0.0010.02335<0.001<0.0010.023*平均值差值的顯著性水平為0.05。注:根據(jù)P>0.05代表差異不顯著,0.05>P>0.01代表差異顯著,P<0.01代表差異極顯著,以下表2-2~7同。同列大、小寫(xiě)字母分別表示在1%、5%水平上的差異顯著性,字母相同則不顯著,不同則顯著。圖2-1不同溫度下精子密度柱狀圖由表2-2可知,在25℃下精子密度為中;20℃時(shí)精子密度中偏稀;當(dāng)溫度達(dá)到30℃和35℃時(shí)精子密度為稀。當(dāng)溫度超過(guò)25℃后,隨著溫度是升高精子密度降低;由于溫度升高,導(dǎo)致精子的某些蛋白質(zhì)變性精子活力激烈而死亡[2]。20℃到25℃時(shí),精子密度增加;由于適當(dāng)?shù)臏囟仍黾哟龠M(jìn)了精子活力。表2-2不同溫度下精子密度溫度/℃密度20中偏稀25中30稀35稀2.1.4精子的活力由表2-3可知,20℃分別與25℃和30℃之間的精子活力差異不顯著(P>0.05);20℃與35℃之間的精子活力存在差異極顯著(P<0.01);25℃分別與30℃和35℃之間的精子活力存在差異極顯著(P<0.01);30℃與35℃之間的精子活力存在差異極顯著(P<0.01)。由圖2-2可知,在25℃的精子活力水平高于20℃(P>0.05),在25℃時(shí)的精子活力表達(dá)水平高于30℃和35℃(P<0.01)。即當(dāng)溫度超過(guò)25℃時(shí),精子活力呈下降趨勢(shì),逐漸下降。從而可知在25℃溫度下的精子活力是最好的狀態(tài)。但20℃與25℃存在顯著性不差異,表明在20℃下的精子活力與25℃時(shí)的品質(zhì)相差不大。結(jié)果表明溫度對(duì)精子活力存在影響,在25℃和20℃時(shí)之間溫度的影響較小,超過(guò)25℃后溫度影響愈加強(qiáng)烈。表2-3不同溫度下精子活力的差異性(P)溫度/℃20253035200.0670.150<0.001250.0670.004<0.001300.1500.004<0.00135<0.001<0.001<0.001*平均值差值的顯著性水平為0.05。同列大、小寫(xiě)字母分別表示在1%、5%水平上的差異顯著性,字母相同則不顯著,不同則顯著。圖2-2不同溫度下精子活力曲線圖2.1.5精子的活率由表2-4可知,在20℃與25℃之間的精子活率存在差異不顯著(P>0.05);20℃與30℃之間的活率存在差異不顯著(P>0.05);20℃和35℃之間精子活率存在差異極顯著(P<0.01);25℃和30℃之間的精子活率存在差異顯著(0.05>P>0.01);25℃與35℃間的精子活率存在差異極顯著(P<0.01);30℃與35℃之間的精子活率存在差異極顯著(P<0.01)。由圖2-3可知,25℃時(shí)的精子活率水平稍微高于20℃的(P>0.05);當(dāng)溫度大于25℃,精子活率開(kāi)始逐漸下降,且溫度越高下降越快(P<0.01),溫度越高精子活率越小。在20℃升高到25℃過(guò)程中,精子活率在不斷增大,精子活率品質(zhì)在此溫度時(shí)最好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明適當(dāng)?shù)脑黾訙囟瓤梢允沟镁踊顒?dòng)增強(qiáng),從而使得精子的活率有一定程度的增大;當(dāng)溫度升高超過(guò)一定的限額會(huì)嚴(yán)重影響精子的活率,過(guò)高的溫度可能使精子的某些蛋白質(zhì)變性從而使得精子死亡,降低了精子活率。溫度對(duì)精子活率存在影響,,溫度越高越明顯。表2-4不同溫度下精子活率的差異性(P)溫度/℃20253035200.5020.079<0.001250.5020.023<0.001300.0790.0230.00335<0.001<0.0010.003*平均值差值的顯著性水平為0.05。同列大、小寫(xiě)字母分別表示在1%、5%水平上的差異顯著性,字母相同則不顯著,不同則顯著。圖2-3不同溫度下精子活率的曲線圖2.1.6精子的直線速率由表2-5可知在20℃和25℃之間的精子直線速率存在差異顯著(0.05>P>0.01);在20℃與30℃之間的精子直線速率存在差異不顯著(P>0.05);20℃與35℃之間的直線速率存在差異極顯著(P<0.01);在25℃和30℃之間的直線速率存在差異極顯著(P<0.01);在25℃和35℃之間的精子直線速率存在差異極顯著(P<0.01);在30℃和35℃之間的精子直線速率存在差異顯著(0.05>P>0.01)。在圖2-4中,25℃的精子直線速率比20℃的直線速度高(0.05>P>0.01)呈現(xiàn)直線速率加快的現(xiàn)象;30℃的直線速率低于25℃的直線速率(P<0.01),35℃的直線速率低于30℃(0.05>P>0.01),由此可得出當(dāng)溫度超過(guò)25℃時(shí),精子直線速率成遞減趨勢(shì),溫度越高精子運(yùn)動(dòng)的直線速率越低。試驗(yàn)結(jié)果表明,溫度對(duì)精子的直線速率存在一定的影響,當(dāng)溫度變動(dòng)時(shí),精子的直線速率也隨之發(fā)生變動(dòng),在20℃升高至25℃的過(guò)程中,精子的直線速率在不斷增大,在25℃時(shí)達(dá)到最快,可知適當(dāng)?shù)脑黾訙囟瓤梢源碳ぞ踊顒?dòng)增強(qiáng),致使精子直線速率變快;溫度超過(guò)25℃后,精子直線速率降低,意味著當(dāng)溫度超過(guò)適宜的限度時(shí),使得精子某些蛋白變性、裂解,導(dǎo)致精子失去運(yùn)動(dòng)能力或死亡的現(xiàn)象,精子直線速率因此下降。表2-5不同溫度下精子直線速率的差異性(P)溫度/℃20253035200.030.0630.001250.030.001<0.001300.0630.0010.048350.001<0.0010.048*平均值差值的顯著性水平為0.05。同列大、小寫(xiě)字母分別表示在1%、5%水平上的差異顯著性,字母相同則不顯著,不同則顯著。圖2-4不同溫度下精子直線速率曲線圖2.1.7精子的鞭打頻率由表2-6可知,在20℃和25℃之間的精子的鞭打頻率差異極顯著(P<0.01);20℃和30℃之間的精子鞭打頻率差異極顯著(P<0.01);20℃和35℃之間的精子鞭打頻率差異極顯著(P<0.01);25℃和30℃之間的精子鞭打頻率差異極顯著(P<0.01);25℃和35℃之間的精子鞭打頻率差異極顯著(P<0.01);30℃和35℃之間的精子鞭打頻率差異極顯著(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明溫度對(duì)精子鞭打效率影響較大,隨溫度的變化精子的鞭打效率也發(fā)生較大的變化。由圖2-5可知,25℃的鞭打頻率高于20℃階段(P<0.01),精子的鞭打頻率加快;30℃與35℃的精子的鞭打頻率分別低于20℃(P<0.01)、25℃(P<0.01);35℃的鞭打頻率低于30℃(P<0.01)。試驗(yàn)結(jié)果表明,在20℃到25℃時(shí)精子的鞭打頻率加快,可知適宜的范圍內(nèi)增加溫度可促進(jìn)精子的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度從而增大精子鞭打頻率;當(dāng)溫度超過(guò)25℃時(shí),精子的鞭打頻率下降,溫度越高精子的鞭打頻率越低。由此推測(cè)精子鞭打速率最快的溫度是25℃,溫度超過(guò)精子運(yùn)動(dòng)的適宜溫度范圍,高溫導(dǎo)致精子的蛋白質(zhì)變性、裂解,造成精子活動(dòng)異常甚至死亡,導(dǎo)致精子鞭打頻率降低。表2-6不同溫度下精子鞭打頻率的差異性(P)溫度/℃20253035200.009<0.001<0.001250.009<0.001<0.00130<0.001<0.001<0.00135<0.001<0.0010.001*平均值差值的顯著性水平為0.05。同列大、小寫(xiě)字母分別表示在1%、5%水平上的差異顯著性,字母相同則不顯著,不同則顯著。圖2-5不同溫度下精子鞭打頻率的曲線圖2.1.8精子的畸形率由表2-7可知在20℃與25℃之間的精子畸形率存在差異不顯著(P>0.05);20℃與30℃之間的精子畸形率存在差異顯著(0.05>P>0.01);20℃與35℃存在差異極顯著(P<0.01);25℃與30℃之間的精子畸形率存在差異極顯著(P<0.01);25℃與35℃之間的精子畸形率存在差異極顯著(P<0.01);30℃與35℃之間的精子畸形率存在差異極顯著(P<0.01)。結(jié)果表明在精液在常溫范圍內(nèi)的溫度變化對(duì)精子的畸形率影響效果不明顯,當(dāng)溫度超出常溫范圍后,不同溫度之間得精子畸形率差異性顯著,可知溫度對(duì)精子畸形率存在嚴(yán)重影響。由圖2-6可知,25℃的精子畸形率低于20℃的畸形率(P>0.05);當(dāng)溫度大于25℃后精子的畸形率快速升高,30℃的畸形率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于25℃(P<0.01);35℃的畸形率高于30℃(P<0.01)。結(jié)果表明,在25℃時(shí)精子的畸形率較低,且20℃和25℃兩溫度之間存在差異不顯著,表明在適宜溫度范圍內(nèi)精子畸形率差異不大,當(dāng)溫度超過(guò)25℃后,精子畸形率逐漸增大,溫度越高畸形率越大。常溫條件下適宜精子存活維持正常形態(tài)結(jié)構(gòu),當(dāng)溫度超過(guò)適宜溫度的限度時(shí),隨著溫度的不斷升高畸形率也在持續(xù)的增加?;温实脑黾邮沟霉i精液品質(zhì)下降,導(dǎo)致母豬受精情況不理想,增大空懷率,造成經(jīng)濟(jì)損失。表2-7不同溫度下精子畸形率的差異性(P)溫度/℃20253035200.2230.030<0.001250.2230.003<0.001300.0300.0030.00435<0.001<0.0010.004*平均值差值的顯著性水平為0.05。同列大、小寫(xiě)字母分別表示在1%、5%水平上的差異顯著性,字母相同則不顯著,不同則顯著。圖2-6不同溫度下精子畸形率的曲線圖3討論3.1精液品質(zhì)檢測(cè)目的精液檢測(cè)的目的是為了能準(zhǔn)確的確定公豬精液中精子的活力,活率,密度和畸形率等指標(biāo),從而確保精子的有效數(shù)量和質(zhì)量,提高工作效率,保證輸精質(zhì)量,及時(shí)淘汰不合格精液,減少了因精液質(zhì)量差而引起的空懷[11],從而提高受胎率。3.2影響精液品質(zhì)的因素在自然條件下,影響精液質(zhì)量的因素有很多,分為自身因素和外界因素。自身因素包括:公豬品種,個(gè)體和年齡,公豬的健康狀況;環(huán)境因素包括:飼料的營(yíng)養(yǎng)水平的高低,采精技術(shù),采精頻率,季節(jié)和溫度。在外界因素中溫度對(duì)公豬精液品質(zhì)的影響較為明顯。精液品質(zhì)對(duì)溫度的變化敏感,溫度升高產(chǎn)生的熱應(yīng)激使大量精子外膜受到損害,造成蛋白質(zhì)變性,引發(fā)精子大量死亡;故隨溫度升高,精液的活力、精子密度、存活率均明顯降低[12],精子的直線速率和鞭打頻率也會(huì)降低,同時(shí)精子的畸形率升高。當(dāng)精子的精液品質(zhì)下降到一定程度時(shí)會(huì)嚴(yán)重影響到人工授精的成功率,出現(xiàn)空懷的現(xiàn)象降低受胎率。造成養(yǎng)殖場(chǎng)的無(wú)效工作流程,降低了經(jīng)濟(jì)效益,不利于養(yǎng)殖場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展。由此可知在日常生產(chǎn)實(shí)踐中,無(wú)論是畜禽在養(yǎng)殖場(chǎng)生產(chǎn)過(guò)程中的環(huán)境溫度還是精液采集、儲(chǔ)存、流通以及輸精時(shí)的溫度都應(yīng)該被十分重視[13],保持在精子存放最適宜的溫度條件下。從而確保精液的品質(zhì)在適宜授精的狀態(tài),保證良好的受胎率。在本次實(shí)驗(yàn)設(shè)置的四個(gè)溫度條件中,25℃時(shí)的精液各方面品質(zhì)最為良好;20℃時(shí)與25℃處理下的精液品質(zhì)差異性較小,此兩個(gè)溫度都在精子適宜的溫度范圍中,由此說(shuō)明在適宜溫度范圍內(nèi)精子的精液品質(zhì)較為良好;超過(guò)25℃后,精液各方面品質(zhì)開(kāi)始變差,達(dá)到不適合授精狀態(tài)。3.3不同溫度下對(duì)長(zhǎng)白豬精液品質(zhì)的影響溫度的變化對(duì)長(zhǎng)白豬精液品質(zhì)有明顯的影響效果,在不同溫度下精液品質(zhì)會(huì)產(chǎn)生差異性,本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果中表明:在四個(gè)不同溫度的條件作用下,精液的色澤均為乳白色,沒(méi)有肉眼可觀察到的顏色變化;溫度在20℃和25℃時(shí),精液氣味是較為濃烈的腥味兒,無(wú)其他異味存在,當(dāng)溫度超過(guò)25℃時(shí)后,精液的腥味開(kāi)始變得越來(lái)越淡,隨著溫度的升高,精液氣味的濃度開(kāi)始降低。當(dāng)溫度在20℃和25℃時(shí),各個(gè)精液品質(zhì)指標(biāo)之間的差異相差不大,當(dāng)溫度超過(guò)25℃后,精子活力和精子活率降低,畸形率增加,精子密度,直線速率等精液品質(zhì)指標(biāo)明顯下降。在25℃、30℃、35℃三個(gè)溫度條件下的精子活力,畸形率,精子密度和精子活率等指標(biāo)都存在變化差異均極顯著(P<0.01),在這三個(gè)不同溫度的影響下的精液品質(zhì),隨著溫度升高,精液的各項(xiàng)指標(biāo)表現(xiàn)得越來(lái)越差,在20℃和25℃兩個(gè)溫度作用下時(shí),絕大部分的精液品質(zhì)指標(biāo)之間存在差異性變化不顯著,說(shuō)明在常溫范圍內(nèi)的溫度下對(duì)精液品質(zhì)的影響作用較小,且在25℃時(shí)長(zhǎng)白豬精液質(zhì)量指標(biāo)最好。最終總結(jié)得出,在25℃的長(zhǎng)白豬精液質(zhì)量整體表現(xiàn)最好。3.4生產(chǎn)實(shí)踐中保證精液品質(zhì)日常生產(chǎn)活動(dòng)包括公豬精液的采集,儲(chǔ)存;精液的運(yùn)輸流通;輸精等。為了保證精液的品質(zhì),提高受胎率,我們應(yīng)該注重精液的保存方式。常溫保存作為短期保存中對(duì)精液品質(zhì)影響較小且設(shè)備簡(jiǎn)單的一種方式,由于常溫條件也有利于微生物的生長(zhǎng)繁殖并且為了較長(zhǎng)時(shí)間的在體外進(jìn)行儲(chǔ)存精液需要在合適的范圍內(nèi)降低精子的代謝活性,因此在常溫保存的方法中常常伴隨著使用稀釋劑[14-15],作為抑制微生物生長(zhǎng)繁殖,提供精子所需營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)的物質(zhì),同時(shí)也隔絕了氧氣的進(jìn)入。使得在體外的精子也能保持在一個(gè)可逆的靜止?fàn)顟B(tài),同時(shí)具有良好的受精能力。采精和輸精過(guò)程中要確保實(shí)用工具完備且無(wú)菌干凈,精子達(dá)到最好的復(fù)蘇狀態(tài);在進(jìn)行常溫儲(chǔ)存時(shí),稀釋后進(jìn)行分裝,分裝后的精液不能疊放,在外放置一個(gè)小個(gè)小時(shí)左右在放進(jìn)常溫的恒溫箱內(nèi)進(jìn)行儲(chǔ)存。精液在運(yùn)輸過(guò)程中使用車(chē)載恒溫箱,溫度控制在15℃-25℃之間,轉(zhuǎn)接過(guò)程中注意溫度的控制以保證精液的你良好品質(zhì)。本次研究的目的是為了給公豬精液常溫保存條件和流通運(yùn)輸環(huán)節(jié)中提供有益的可參考的數(shù)據(jù),為了保證公豬精液在流通運(yùn)輸環(huán)節(jié)中保留良好的精液品質(zhì),減少環(huán)境溫度變化對(duì)精液品質(zhì)的影響,防止降低受胎率。可采用下面的措施:第一:對(duì)采集好的精液用規(guī)定的稀釋液進(jìn)行稀釋并科學(xué)妥當(dāng)?shù)拇娣?;第二:在打包精液時(shí),要放置防潮、防震蕩的護(hù)墊,最大程度的避免運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生猛烈的震動(dòng)和碰撞,包裝工具要保證干凈,進(jìn)行消毒。第三:使用車(chē)載恒溫箱將溫度控制在15℃-25℃之間,避免溫度低于或者超過(guò)精液適宜存放的常溫溫度范圍,從而影響精液的品質(zhì),降低受胎率。第四:在高溫酷熱天氣環(huán)境下,采用干冰等物品對(duì)車(chē)廂溫度進(jìn)行降溫,減少由于溫度的升高對(duì)精液品質(zhì)的影響。第四:需要把控運(yùn)輸時(shí)長(zhǎng),運(yùn)輸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)對(duì)母豬受胎率造成影響。精液在進(jìn)行授精前被運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間不超過(guò)3天[16]。4結(jié)論在四個(gè)溫度條件下,精液的色澤沒(méi)有明顯變化;精液氣味隨著溫度的升高逐漸濃烈,可嗅到明顯腥味;在25℃時(shí)精液品質(zhì)的各指標(biāo)參數(shù)最好;溫度超過(guò)25℃,精子活力、精子活率、精子密度、直線速率和鞭打頻率的參數(shù)明顯降低,精液的畸形率大大升高。在20℃到25℃屬于精液適宜溫度范圍,超過(guò)適宜溫度范圍后對(duì)精液品質(zhì)有嚴(yán)重不良影響,且溫度越高對(duì)精液的影響越大。

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