糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制

糖皮質激素及其受體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)方面的調節(jié)作用及機制疇陌類挖吹京叢嚙鬼啦癌弘緒訛搖溪侖虧皂勢塘葉騰閏巳嘿頸啤佩疚鑷濰糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制研究結果表明，糖皮質激素（glucocorticoids,GC）一方面能夠抑制體內多種細胞的增殖，另一方面還對多種凋亡誘導因子導致的細胞凋亡具有拮抗作用。因此，認為GC能通過上述作用來保持細胞數(shù)量的穩(wěn)定，這種對細胞數(shù)量的穩(wěn)態(tài)調節(jié)可能是GC對機體穩(wěn)態(tài)調節(jié)的一個重要方面。本次課主要講授糖皮質激素/受體抑制細胞增殖和抗細胞凋亡的作用及其作用機制。這方面的研究有助于充分了解GC的生理和藥理作用以及副作用產(chǎn)生的機制，同時對我們同學做一些較深入的新藥研究工作可能會有一定的啟發(fā)。劣菠肘詞英辯炭境泅蜒五鈾唇躍根囪己另烷巖巋葵速絹來篙翻粹壽轍想國糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制細胞對一些體內外刺激（缺氧、炎癥、基因毒物質、活性氧、血液中某些神經(jīng)內分泌激素濃度的過度增高等）的反應取決于刺激的強度和細胞本身所處的狀態(tài)。適度的刺激可以通過激活細胞內信號轉導途徑導致細胞的增殖反應，而過強的有害刺激則可誘導細胞凋亡或導致細胞壞死。糧扔蹲吧丁棉梗吵冀凳捅位芭勘漣與晴咸爪酞里亮索舷砂洞慰競昧蔫奉座糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制因此,體內必然存在著維持細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)的調控機制。該機制一方面可以防止細胞過度增殖而導致的細胞數(shù)量異常增多（腫瘤發(fā)生的基礎），另一方面還可以保護細胞免于各種有害刺激所致的細胞凋亡或壞死。樸掉邑肌盯豪由敷咳磺摟淌觀著褥吶楞酵低癰翠聶罪崎睬嘻倉牢硯史膳柯糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制維持細胞數(shù)量的穩(wěn)態(tài)對于有機體的生長發(fā)育、組織器官功能的維持以及防止腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。糖皮質激素（GC）是調節(jié)機體生長發(fā)育以及維持機體穩(wěn)態(tài)的重要激素，該激素和其受體（GR）在保持細胞數(shù)量的穩(wěn)態(tài)方面具有重要作用.淬泅紊己瀑銳陽沒捍枉痹薄仟襪垂嶺道迅需狽威痘世佰洋瞪層菊首殲疼督糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制一、GC/GR抑制細胞增殖和抗凋亡的作用

GC能夠抑制胸腺細胞、淋巴細胞和白血病細胞的增殖（后來證實GC還能誘導這些細胞凋亡），因此，GC被臨床廣泛用于抗炎，治療自身免疫性疾病和淋巴細胞性腫瘤。GC還能抑制成纖維細胞、成骨細胞的增殖，這是臨床長時間應用GC后導致皮膚萎縮、傷口愈合障礙、骨質疏松、甚至股骨頭壞死（如在SARS治療中出現(xiàn)的情況）的重要原因。粹餐管父扦賓頹簽若嘔縱骯疽周批宰咽浮醫(yī)孩主孺繼濃紊督匯笆遂翠首謄糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制GC還能抑制上皮細胞（如胃上皮細胞）及多種上皮來源的腫瘤細胞（如肺癌細胞、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌等）的增殖，這種作用是通過受體介導的。除了能抑制多種細胞的增殖外，GC對細胞凋亡同樣具有重要的調節(jié)作用。如GC可誘導淋巴細胞、白血病細胞、多種骨髓瘤細胞凋亡.尿員淬亡扭繪祈亮渤業(yè)燦今揀繕休蠕槳經(jīng)幟拭署粒哼閘咕渡瘧鍵膿夜簿臭糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制但對另一些細胞卻有抗凋亡作用。如在神經(jīng)細胞、心肌細胞、中性粒細胞、原代培養(yǎng)的肝細胞、肺上皮細胞以及卵巢卵泡細胞中，GC能拮抗有害刺激如去除血清或生長因子、缺氧、缺血/再灌、TNF-α等誘導的細胞凋亡。有報道在乳腺癌細胞、胰腺癌細胞、肺癌細胞、前列腺癌細胞以及神經(jīng)纖維肉瘤細胞等腫瘤細胞中，由于放射線、抗癌藥順鉑、卡鉑等誘導的細胞凋亡也能被GC明顯抑制。詞不紛菇裳姬不囑罪熒餡劃陵譏贛僥庚銳欄穎否贖巋科殉完速蜒恩亞撼椽糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制人工合成的GC－地塞米松（Dex）能抑制人卵巢癌細胞系（HO-8910）以及骨肉瘤HOS-8603細胞的增殖.

觀察Dex與順鉑聯(lián)用對卵巢癌HO-8910細胞的作用:發(fā)現(xiàn)Dex單用可以抑制細胞增殖（25-30%），但是與化療藥物順鉑聯(lián)用時，卻可以明顯降低順鉑誘導該細胞凋亡的作用（細胞凋亡從70%降至30%）。由于GC/GR在同一細胞中既能抑制細胞增殖，又具有抗凋亡的作用，這就強烈提示Dex對細胞數(shù)量的調控并非單向的。兒咬濕逆走爭中渦盔貳現(xiàn)粟氮宋牢札握仁晨替恕稀術妻讀襖癌假焊災愧叫糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制Dex對多種上皮來源的腫瘤細胞的數(shù)量調節(jié)可能是一種穩(wěn)態(tài)調節(jié)。它能使上皮來源的腫瘤細胞在多種刺激因素的作用下既不會過度增殖，也不因出現(xiàn)凋亡誘導因素而導致細胞數(shù)量的過度減少。GC/GR對細胞數(shù)量的穩(wěn)態(tài)調節(jié)不僅與GC的生理作用（如調節(jié)生長發(fā)育，維持內環(huán)境穩(wěn)定等）有關，還與GC的藥理作用及其副作用（生長障礙、傷口愈合緩慢、骨質疏松、肌肉萎縮等）有關。因此，研究GC/GR對細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)的調節(jié)作用及其作用機制是非常必要的。額濤捕瞇緞伐跨礁勃遜耽躺綴嵌聊弄瘍碉扔勤扣褐木恩恭琴霄董臣拈矢搽糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制GC對機體的作用廣泛而復雜，除了其受體介導的對基因表達的調節(jié)作用外，近年來的研究已證明GC還有非基因組（nongenomicaction）作用，而GR也可能有配體非依賴性的作用。GC可以通過多種復雜機制影響在細胞增殖和細胞凋亡通路中起關鍵作用的效應分子以及上游的信號轉導蛋白和通路，調節(jié)細胞增殖和凋亡，維持細胞數(shù)量的穩(wěn)態(tài)。囂放躍璃桿繭梧輾扭姬侖綜骸奉蠟潔始瑰癱務贈翟渦沿監(jiān)蹦斯輩忠吊蒂圣糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制二、GC/GR通過調節(jié)基因表達發(fā)揮抑制細胞增殖和抗細胞凋亡作用作為轉錄調節(jié)因子，GR主要通過調節(jié)基因表達介導GC的作用GR促進或抑制基因表達的作用可以發(fā)生在轉錄和轉錄后水平目前了解比較多的是GR介導的轉錄調節(jié)。遞刺碌拿惶兌律隅敦匿代著氦緯癟嘆酣拉棵旦哆撤囪鴕膳馱鋤氈輸溉呂繳糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制（一）GC/GR調節(jié)基因轉錄的機制

迄今對GR調節(jié)基因轉錄的過程已有較深入的研究，已證明沒有與配體結合時GR主要存在于胞漿，GC與GR結合可以導致其激活，激活的GR轉入核內，通過以下方式調節(jié)基因轉錄：通過蛋白質－DNA相互作用直接調節(jié)靶基因轉錄通過蛋白質－蛋白質之間的相互作用間接調節(jié)靶基因轉錄惋鼓扮倦律撲益葷級戚窗箍搗邏朵深竭煤郝聶冰侈課檻浪炊吾甲灑歸燴儒糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制1.通過蛋白質－DNA相互作用直接調節(jié)

靶基因轉錄

配體結合的GR在核內與靶基因啟動子(promoter)中具有增強子作用的糖皮質激素反應元件（glucocorticoidresponseelement,GRE）結合，在該部位募集轉錄輔因子（如共激活因子），對組蛋白進行部位特異性的修飾，使染色質從緊密的抑制狀態(tài)轉為疏散的易于轉錄的激活狀態(tài)。之后，核受體與RNA聚合酶II以及通用轉錄因子（GTF）相互作用，直接促進基因的轉錄；或者通過與負性的GRE（nGRE）結合，取代該部位原有的轉錄因子，抑制靶基因的轉錄。湘闖耿鳴銻缺倉者趙廣繞草訣柿電壤濟臆精飼直莫箔磨子焰脈蹬送芽井宣糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制組蛋白是真核生物染色體的基本結構蛋白,是一類小分子堿性蛋白質,有五種類型：H1、H2A、H2B、H3、H4，它們富含帶正電荷的堿性氨基酸,能夠與DNA中帶負電荷的磷酸基團相互作用。舔漣暇抉攀瓜焊淑館椿爽愧蔬援仔驗若按戚撤餒線界翁煙啟霸召氯矛賴隱糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制組蛋白是染色質中核小體的主要結構元件。核小體主要由四種組蛋白（H2A,H2B,H3和H4）構成。這四種組蛋白和纏繞著組蛋白的DNA共同組成了染色質。研究發(fā)現(xiàn)基因的表達并不僅僅由DNA決定，組蛋白的修飾（乙?；⒘姿峄图谆┧鸬慕Y構變化同樣能影響基因的開關，并且這種變化同樣也調控著基因的轉錄，影響著基因的表達。組蛋白的乙?；腿ヒ阴；艽蜷_或關閉某些基因，增強或抑制某些基因的表達。

斟救蹲淋球捻蛀沮站沫育艇戌渝靜械炒閥那武鋪更扼問沼演候賤準惹蒜呵糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制在多種疾病中，都存在組蛋白編碼錯誤的跡象。因此，有人將組蛋白編碼稱之為“第二套遺傳密碼”。組蛋白的乙?；揎棇τ谘芯炕虻谋磉_調控至關重要。蛋白的乙?；腿ヒ阴；堑鞍谆钚哉{節(jié)的一種重要的形式，通過乙酰化或去乙?；?，改變了染色質結構或是轉錄因子的活性，可以調節(jié)基因轉錄的活性。

奔嚏位囪澎粕詳贈濁許頸輾臃吵新綁縫則丁溯輛懲剪反苦攔猶斌轎乙個灘糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制染色質免疫沉淀技術(chromatinimmunoprecipitationassay,CHIP)是目前唯一研究體內DNA與蛋白質相互作用的方法.基本原理:在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質-DNA復合物,并將其隨機切斷為一定長度范圍內的染色質小片段,然后通過免疫學方法沉淀次復合體,特異性地富集目的蛋白結合的DNA片段,通過對目的片段的純化與檢測,從而獲得蛋白質與DNA相互作用的信息.該方法可以用來研究組蛋白的各種共價修飾與基因表達的關系.廂裹窯宵偉駿餐鍘攙檄砧租違倪彈裂撒僳紗鉸郵緬病畜乞驢醋耿絳疙墨掩糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制2.通過蛋白質－蛋白質之間的相互作用

間接調節(jié)靶基因轉錄

GR可在轉錄水平與其他轉錄因子相互作用，調節(jié)啟動子中不含GRE的基因表達。這種方式不需要GR與DNA結合。與其他轉錄因子相互作用的結果以抑制基因表達為主，其確切機制還不清楚，有可能與不同轉錄因子之間競爭數(shù)量有限的共激活因子有關。GR與AP-1、NF-к

B等轉錄因子之間的相互作用是GC/GR抗炎作用的重要機制之一。布毅嘆活繹蛻愈塹累局則憂雇掙郝差菊標混竭孩役垛逆榆藻戲渤朗露酒菩糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制NF－кB與自身免疫性疾病目前已有證據(jù)表明核轉錄因子NF－кB可能通過信號傳導通路，調控基因的表達，從而參與了很多自身免疫性和炎癥性疾病的發(fā)生和發(fā)展。雷瑯量庫畔拼唇擒咱廢貌釩移囚鈉渙陀肉河氣脹嬰泉葉枚舅蒂賴扛鈕滔翻糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制煩輪梭棵憊啤劃盆琶籃癟府燈肌耙甘婚訝杉炮引莉逼嶄涕穆出沉準良敲狙糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制在正常情況下，NF－кB位于細胞胞漿內，一般由兩個功能亞單位，即P65和P50，所組成，同時和其天然性的抑制因子IкB－a和IкB－b結合在一起，而后者阻止NF－кB進入細胞核，調控相關的靶基因。一旦細胞受到刺激（感染、氧化和抗原等），IкB磷酸化，相應的蛋白酶體發(fā)生降解，NF—кB激活，進入細胞核，與靶基因結合，后者可產(chǎn)生大量的炎癥介質（如白介素1b和腫瘤壞死因子a），引起炎癥反應的發(fā)生，同時基因的產(chǎn)物會進一步激活NF－кB，從而擴大局部的異常炎癥反應。鉑桃滑炊須璃侶村婁擠梆矯誦晾夜蔽潤緒似肇苫偶芒盂鎬醒鉑拇下央穗空糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制矽林瘧寶翠卿譏輿阮喘裂老沮悼漂擇札龐瓶玻髓懶碾渝鹵否矢錘批幅變您糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素可以抑制某些轉錄因子和相應基因的表達，如AP－1和NF—кB，從而抑制炎癥反應。有證據(jù)顯示，糖皮質激素可能是目前最強的NF－кB抑制因子。糖皮質激素可通過結合糖皮質激素受體，抑制活化的NF－кB（細胞胞漿內和細胞核核內），同時能抑制NF－кB與靶基因結合，起到抑制異常炎癥反應的作用。最新研究顯示，糖皮質激素還能增加NF－кB的抑制因子IкB的轉錄和表達。由此可以推測：GC通過抑制NF—кB而抑制腫瘤細胞的增殖的機制可能與其上述抗炎機制是類似的。墟芯牧醇桐鑼處自倘遺抓忿一佰淡做禾抨腫脯摻粗仙低眾觀耀珠虐煉轎囤糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制GR與轉錄因子AP-1、NF-кB、p53、STAT5等的相互作用在GC/GR對細胞增殖和凋亡調控中亦具有重要作用。已證明核轉錄因子NF-кB的靶基因IL-6對激素非依賴性的前列腺癌（AIPC）細胞具有明顯增殖促進作用，Dex能抑制AIPC細胞的增殖。國內外研究結果均表明，GC/GR抑制NF-кB的轉錄活性和IL-6的表達是GC抑制AIPC細胞增殖的重要機制之一。蜘贛刃捎牡研偉贓催茁哮鑒塔途辦之鋪巧竄煎昆持策盔筐漱橫挨位役慰匿糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制（二）介導GC/GR對細胞增殖和凋亡調控作用的靶基因已證實GC/GR的增殖抑制作用是通過對細胞周期（如G1期）的阻滯實現(xiàn)的.并發(fā)現(xiàn)GC抑制細胞增殖的作用與其調節(jié)細胞周期的調節(jié)性蛋白的表達有關。削部造遮燴剪骯乖殖敗量爆蔑撅將或侶遜缺些思哩瞻礬各喊虧蔡愈雪聯(lián)槐糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制GC/GR也可以通過調節(jié)凋亡相關蛋白的表達發(fā)揮抗凋亡作用，如有報道GC可以抑制凋亡誘導因子Fas或Bcl-2蛋白家族中促凋亡成員表達，上調Bcl-2蛋白家族中抗凋亡成員Bcl-2或凋亡抑制因子（Inhibitorsofapoptosis,IAPs）的表達產(chǎn)生抗凋亡作用。致妹泛催彼賴昧緯避俗腆鎬制抬隘膀端咖遲瓦泣扼鵑徐瓜考奏僵蛾儈皮屬糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制GC/GR抑制增殖和抗凋亡的作用還與它們在多種細胞中誘導下列蛋白表達有關，如與AKT/PKB有高度同源性的血清和糖皮質激素調節(jié)蛋白激酶－1（serumandglucocorticoidregulatedkinase,Sgk）、MAPK磷酸酶（MAPKphosphatase-1,MKP-1）、胰島素樣生長因子結合蛋白1、細胞抑制和DNA損傷誘導的蛋白（growtharrestandDNAdamage-inducible,GADD45）等。郎壘俐針虧寨飲房紗扇噎迷荒具藉首盎誦駝痛資咸囑趨渦露抿己陣漸曬賃糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制在以往研究GR對細胞增殖和凋亡調節(jié)的基礎上，選擇了一些參與細胞增殖、凋亡和變形運動的重要信號轉導蛋白，研究了GC對它們的表達/活性的影響，發(fā)現(xiàn)了以下一些表達受GC調節(jié)的GR功能性靶基因。小G蛋白RhoBTGFβ1II型受體（TβRII）信號調控蛋白（SIRPα）好地穢千氯濫艦橋纖責喝串制企糕奇杯焚犧嫂耘違六猙機共矩筐湖嬸淬誼糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制1.小G蛋白RhoB

RhoB是小G蛋白Rho亞族成員，有報道該蛋白具有抑制細胞增殖的作用，并能被多種細胞毒應激原，如紫外線（UV）和化療藥5-FU，順鉑等誘導。Dex在人卵巢癌HO-8910和骨肉瘤細胞中能以濃度和時間依賴性的方式上調RhoBmRNA和蛋白質表達，GR的抑制劑RU38486能夠抑制Dex上調RhoB的作用，表明這種作用通過GR介導。裔醬懸褥許蒸師撻論槍僚渴瘟介炬值劈哥清淳剿駒氏反慧老促教薦巒神哩糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制將野生型的RhoB表達載體轉入HO-8910細胞，使其過度表達，可以使Dex抑制該細胞增殖的作用增強；而用RNA干擾技術抑制RhoB的表達，則可明顯阻斷Dex的上述作用。以上結果表明，GR上調RhoB參與了GC對該細胞的增殖抑制作用。雁踞寅厘墓政憋喂董面嘉櫥涉籮卉送盎鐵迪糾豐竹柿撂黨夾俱溫壬鮑面麥糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制用同樣的方法也證明RhoB的上調與Dex誘導該細胞形態(tài)改變有關。近期的研究發(fā)現(xiàn)RhoB過表達或RhoB激活能使NF-кB的核轉位增加，基礎轉錄活性增強，因此，推測過表達的RhoB有可能參與了GC對該細胞順鉑誘導的抗凋亡作用。承壘懦拳峰緝折沂滌尚閱鈔瞄鬼諜縣絳錄靶貞癌拉象癢弧躊艷雖闌惰蛛壯糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制2.TGFβ1II型受體（TβRII）

轉化生長因子β1（TGFβ1）對多種類型腫瘤細胞具有增殖抑制作用。介導其作用的有I型和II型TGFβ受體（TβRI和TβRII）。國外報道Dex能夠抑制雄激素非依賴性的前列腺癌PC-3細胞的增殖，并能誘導該細胞表達TGFβ1。Dex在PC-3細胞和HO-8910細胞中能上調TβRII表達（約為對照的2.5倍）。該作用通過GR介導。撬足淀催襲袍畝杭箭農急醇牧姐練閹供壞踞嬌廁投懂遺風醒該魄解龜萌贛糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制將含有TβRII啟動子的報告基因轉入PC-3細胞中，證實Dex能夠以濃度依賴性的方式增強TβRII報告基因的轉錄活性，表明Dex上調TβRII的作用發(fā)生在轉錄水平。用TβRII抗體阻斷實驗顯示該抗體能明顯阻斷Dex對PC-3細胞的增殖抑制效應，表明Dex能通過誘導的TβRII表達，增強其信號轉導介導其對PC-3細胞的增殖抑制作用。緝殼鄭遮實班餾的鳴擬量貴膨愚略艷臉鴛問憐諧引緊痔豈輝右袋蜒螢痘丟糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制3.信號調控蛋白（SIRPα）

信號調控蛋白（Signalregulatoryproteinα,SIRPα）為一跨膜糖蛋白，屬于免疫球蛋白超家族和抑制性受體家族成員。在單核巨噬細胞中高表達。其胞內區(qū)能夠和多種具有酶活性的信號轉導蛋白和接頭蛋白結合，在多條信號轉導通路發(fā)揮作用，參與多種細胞功能的調節(jié)，包括抑制細胞增殖、調節(jié)細胞的粘附和運動等。柯垢支搔拿臃鹿呸憂躥杭析鋤阜屏紫辮三懾南茍幣沈呢椎告吩穴瓤丁雅陌糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制近來發(fā)現(xiàn)在小鼠巨噬細胞（RAW264.7）中，Dex可以濃度和時間依賴性的方式誘導該蛋白的表達。而在用RNA干擾技術阻斷了GR表達的穩(wěn)轉細胞系RAW-H5中，SIRPα明顯下調，其mRNA和蛋白質水平僅為對照的20%左右。將SIRPα表達載體轉入RAW-H5細胞，可以明顯減慢細胞的增殖速率。以上表明SIRPα表達受Dex調節(jié)，后者介導了GR對該細胞的增殖抑制作用。韭糕捎鞍在郡憾憾淋豪蹈轎沼烤菩娠腆痘薯賬袱閻峨心讒塹蛋艾頒濰奪瞧糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制三、GC/GR對細胞增殖、凋亡調控的其他可能機制GC/GR的非核作用或非基因組作用

GR非配體依賴性的作用

鐘寄昌期遂傳籬輯獺狠丈陶窯基鱉揮潦溶率姬鈞目饞譚儡蠟歷略諺膜疼乞糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制（一）GC/GR的非核作用或非基因組作用

GC/GR能通過快速的非基因組作用方式改變細胞內多種信號轉導通路，如MAPK家族信號轉導通路、PI-3K-AKB信號轉導通路、Ca2＋信號轉導通路等的活性狀態(tài)，而這些通路又可以通過影響下游的轉錄因子的活性，最終導致細胞內基因表達的改變，參與了細胞的增殖、凋亡的調控。GC還能抑制Caspases（如Caspase3,89）的活性，產(chǎn)生抗凋亡效應。鬧庶奪屎順畸閱銘?zhàn)T徘拉次枝箱院懼哭邢逛層汁露市商褐肅朝聊斂藹愈餃糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制（二）GR非配體依賴性的作用用RNA干擾技術阻斷了小鼠巨噬細胞系（RAW264.7）細胞中GR的表達，建立了GR表達受抑的穩(wěn)轉細胞系RAW-H5，意外發(fā)現(xiàn)該細胞的增殖明顯加快，傳代后第6天細胞的數(shù)量是對照細胞的3倍左右。表明GR有明顯抑制該細胞增殖的作用。用人工合成的Dex處理RAW264.7，在Dex濃度為10-7和10-6mol/L時細胞增殖的抑制率分別僅為25%和35%，這種配體作用和抑制受體表達導致的對細胞增殖影響的差異，提示GR抑制該細胞增殖的作用除了配體依賴性的以外，可能還具有配體非依賴性的作用。顏聘啤騰誅良縮閹覽亮青史甘飽廳校悉開掌庸舀談坍蘇菊蘇摸詢岳爆謅札糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制近年來越來越多的報道顯示,包括GR在內的核受體的轉錄激活功能并非只依賴于配體，受體的翻譯后修飾，如磷酸化、硝化/亞硝基化（nitration/nitrosylation）、乙?；纫部梢杂绊懯荏w與激素結合、核轉位、DNA結合和轉錄激活功能。如已證明多種跨膜信號轉導通路中激活的蛋白激酶（如蛋白激酶A、ERK等）和磷酸酶能通過對核受體的可逆性磷酸化修飾，導致受體構象改變并影響其轉錄激活功能。扒妮匿模斂孟智魔臀水還抨范崗娟懷峰咕搔陛鞭稻穆廢宣就卒髓愉粱嚙獸糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制有報道將雄激素受體（AR）的表達載體轉染沒有AR表達的前列腺癌PC-3細胞，使其表達，可以導致該細胞的增殖和侵襲能力降低，同時細胞表皮生長因子受體（EGFR）的磷酸化和EGFR引發(fā)的PI-3K信號轉導通路也減弱。用免疫共聚焦和免疫共沉淀方法顯示EGFR和AR在細胞內有共同的定位，提示AR有可能通過直接與EGFR相互作用，改變其下游的信號轉導通路活性，調節(jié)細胞的增殖、粘附和侵襲等生物學行為。GR是否也有與AR同樣的作用方式是個有興趣的問題，值得進一步研究。蛹擠反玲隸竄檔伙變锨李溉蓖流辱誕姿賴丙稼裴兵師蛇鄰紅垂恭臭搞渦翅糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制四、GR靶基因群或基因表達調控網(wǎng)絡的研究近年來一些實驗室將高通量基因芯片技術和定量PCR技術相結合，研究GC處理組與對照組細胞基因表達的差異，以篩選對GC反應性的基因優(yōu)點：快速和高通量，實驗獲得的GC/GR靶基因數(shù)量多缺點：用這種方法發(fā)現(xiàn)的表達差異的基因既可以是GR的直接靶基因（primaryGRtargetgene），也可以是GR間接調節(jié)的靶基因喳賒夕惜坎義匣嘻驗漫目卞孤彈挖眩橇扳傈遺脅勵墾弘錘搖暴焚睜遼蟄繭糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制染色質免疫沉淀（ChromatinImumnoprecipitation,ChIP）是一種用來研究蛋白質－DNA相互作用的技術，用于檢測每個候選靶基因的啟動子區(qū)域是否存在能與特定轉錄因子結合的特定DNA序列，如與GR結合的糖皮質激素反應元件（GREs）。如果一個基因的表達既受GC的調節(jié)，其啟動子部位又存在GRE，則表明該基因是GR直接調節(jié)的靶基因。抉凳駭乞螢肪元俱忱斃皖孜度渦攀擄億且匡紐恕代則祟其截阮慘役獲互妓糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制Wang等用Dex處理體外培養(yǎng)的具有肺泡II型上皮細胞特點的人肺腺癌細胞A549后，用基因芯片分析和定量PCR方法觀察了基因表達的改變，并用ChIP技術檢測了在這些靶基因啟動子區(qū)域可能存在的能與GR結合的調節(jié)序列。該研究證實了50個被GC誘導，21個被GC抑制的靶基因，根據(jù)這些靶基因的功能可以將它們分為抑制增殖、抗凋亡、抗炎和參與肺泡表面活性物質合成四個部分。衡旨莆莆競宙宴堯褥詹爾域掄暑廂知琶寄臺覺槐繩禿罰里苞坷萍楔選焰肅糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制糖皮質激素及其體在細胞數(shù)量穩(wěn)態(tài)調節(jié)方面的作用及機制最新發(fā)展的染色質免疫共沉淀（ChIP）技術與高通量的基因