四大基本組織的觀察

1、.,解剖與生理學(xué)實驗內(nèi)容及學(xué)時安排,.,考核方法,1、考勤（10%） 2、課前預(yù)習(xí)（10%） 3、課堂表現(xiàn)：規(guī)范操作+隨堂抽查（40%） 4、實驗報告：書寫工整、畫圖及文字說明清楚、分析準(zhǔn)確（30%） 5、實驗室清潔及實驗設(shè)施的維護(hù) （10%）,.,實驗一、四大基本組織的觀察,.,目的要求,聯(lián)系功能觀察了解四種基本組織的結(jié)構(gòu)特點及分布。 學(xué)習(xí)體腔膜或腸系膜平鋪片的制作方法。 學(xué)習(xí)疏松結(jié)締組織新鮮平鋪片的制作方法及活體染色方法。,.,材料與器械,蛙，小鼠，解剖器械一套（手術(shù)剪、解剖針、眼科鑷），注射器及針頭，滴管，蓋玻片，顯微鏡，1%硝酸銀水溶液，1%臺盼藍(lán)生理鹽水溶液，甘油，蒸餾水，組織切片,

2、.,實驗步驟,.,上皮組織,單層扁平上皮 1、蛙體腔膜或腸系膜平鋪片的制作和觀察： 將蛙雙毀髓處死，取體腔膜或腸系膜放于載玻片上，以解剖針 將其挑開展平，稍晾干； 加1%硝酸銀水溶液數(shù)滴于標(biāo)本上，將標(biāo)本浸蓋； 立即放在日光下曬35min（或在日光燈下1015min）； 至標(biāo)本變?yōu)闇\褐色時，傾去載玻片上的溶液，用蒸餾水洗凈，加上12滴甘油，蓋上蓋玻片，即可用于顯微鏡觀察。,.,2、單層扁平上皮組織切片（鍍銀染色）的觀察 表面觀：細(xì)胞呈多邊形，胞核扁圓形，位于細(xì)胞中央 垂直觀：細(xì)胞扁平，中央有核處較厚，其余部分胞質(zhì)很薄,圖1、單層扁平上皮 3.540 蟾蜍腸系膜涂片 鍍銀染色,.,單層立方上皮,取

3、甲狀腺切片（HE染色）觀察： 表面觀：細(xì)胞呈六角形 垂直觀：細(xì)胞立方形，核圓居于細(xì)胞中央,.,單層柱狀上皮,取小腸上皮切片觀察： 表面觀：細(xì)胞呈六角形 垂直觀：細(xì)胞呈柱狀，核長圓形，靠近基底部,.,假復(fù)層纖毛柱狀上皮,由柱狀細(xì)胞、梭形細(xì)胞、錐體形細(xì)胞和杯狀細(xì)胞構(gòu)成 游離面常見有纖毛 基細(xì)胞 一種腺細(xì)胞,.,復(fù)層扁平上皮,復(fù)層扁平上皮(stratified squamous epithelium) 由基底面向游離面依次是： 基底細(xì)胞 多邊形細(xì)胞 扁平細(xì)胞 皮膚的表皮 口腔、食管、陰道,圖5 復(fù)層扁平上皮 H-E染色3.540 A 未角化型 人食管 表皮細(xì)胞 B 角化型 人手指表皮 真皮乳頭,.,

4、變移上皮,取膀胱切片（HE染色）觀察： 特點：上皮的層次和細(xì)胞形態(tài)隨所在器官的收縮或舒張而改變 由基底面向游離面依次是： 基底細(xì)胞 中間層細(xì)胞 表面細(xì)胞（蓋細(xì)胞）,.,結(jié)締組織,疏松結(jié)締組織 1、疏松結(jié)締組織活體染色標(biāo)本的制作與觀察： 取小鼠一只，皮下注射1%臺盼藍(lán)生理鹽水溶液少許，3060min后，頸椎脫臼法處死； 剪開皮膚，在注射處附近剪取一小塊皮下結(jié)締組織，置于載玻片上； 雙手各持一解剖針將組織平鋪于載玻片上； 待標(biāo)本稍干后，加12滴甘油，蓋上蓋玻片即可觀察。,.,2、疏松結(jié)締組織切片的觀察：,.,致密結(jié)締組織,取跟踺縱切片（HE染色）觀察：,.,脂肪組織,取小腸切片（HE染色）觀察：

5、特點：HE染色標(biāo)本中，脂滴被溶解，細(xì)胞呈空泡狀，胞 核和胞質(zhì)被擠向細(xì)胞的一側(cè)（寶石戒指狀）,.,軟骨組織,蟾蜍胸骨劍實軟骨細(xì)胞標(biāo)本的制作與觀察： 將蟾蜍處死，剪取胸骨劍突最薄的部分一小塊，放入載玻片上的1/3000中性紅染液滴中，染色510min； 用吸管吸去染液，滴加Ringer液，蓋上蓋玻片進(jìn)行觀察； 在高倍鏡下，可見軟骨細(xì)胞為橢圓形，細(xì)胞核及核仁清楚易見，在細(xì)胞核的上方胞質(zhì)中，有許多被染成玫瑰紅色大小不一的泡狀體，這一特定區(qū)域叫“高爾基區(qū)”，即液泡系。,.,骨組織,取骨橫磨片觀察： 特點：由于骨組織內(nèi)的軟組織（神經(jīng)、血管、淋巴管、結(jié)締組織）及細(xì)胞都已腐爛，僅剩下空腔和管道。長骨骨干部的橫

6、斷面，在低鏡下可見34層外環(huán)骨板、12層內(nèi)環(huán)骨板、內(nèi)外環(huán)骨板之間的骨單位和間骨板。骨單位是由中央管和其周圍呈同心圓排列的多層骨板構(gòu)成。高倍鏡下觀察可見骨板內(nèi)或骨板間的卵圓形骨陷窩及骨陷窩向四周發(fā)出的骨小管。,.,血液,采血、涂片、染色制作血液涂片： 取末捎血一滴置于玻片的一端，左手持載玻片，右手以邊緣平滑的推片的一端從血滴前方后移接觸血滴，使推片與載片夾角保持3040度平穩(wěn)地向前移動，載片上保留下一薄層血膜。 手持玻片在空氣中揮動，使血膜迅速干燥，以免血細(xì)胞皺縮。 加瑞氏染液23滴，覆蓋整個血膜，固定0.51.0min，滴加等量或稍多的新鮮蒸餾水，與染料混勻染色510min。 用清水沖去染液，

7、待干燥后即可置于顯微鏡下進(jìn)行觀察。,.,鏡下觀察血涂片。低倍鏡下分辨白細(xì)胞和紅細(xì)胞，高倍鏡觀察、辨別各種血細(xì)胞和血小板。,圖11、人血液涂片 Wright染色 3.3100 1、紅細(xì)胞質(zhì) 2、中性粒細(xì)胞（桿狀核）3、中性粒細(xì)胞（分葉核）4、嗜酸性粒細(xì)胞 5、嗜堿性粒細(xì)胞 6、單核細(xì)胞 7、淋巴細(xì)胞,.,肌肉組織,骨骼肌 取骨骼肌縱、橫切片（HE染色）觀察：觀察肌纖維的形態(tài)、胞核的形狀，縱切片上還可見明顯的橫紋，比較縱切和橫切面上的細(xì)胞核的位置和結(jié)構(gòu)差異。,.,心肌,取心室肌縱、橫切片（HE染色）觀察：鏡下可見縱切片上，心肌纖維彼此分支吻合成網(wǎng)狀，卵圓形胞核位于中央?？s小顯微鏡虹彩光圈可見心肌纖維的橫紋，但不如骨骼肌纖維明顯。在肌纖維及其分支上可見深藍(lán)色的梯形閏盤。橫切片上，心肌纖維為不規(guī)則的圓形，有或無胞核，注意細(xì)胞核的形態(tài)和位置。,圖14，15 、人心肌纖維縱切片HE 染色3.340 閏盤 脂褐素,.,平滑肌,取小腸縱、橫切片（HE染色）觀察：觀察平滑肌纖維的形態(tài)、胞核的形狀，比較縱切和橫切面上的結(jié)構(gòu)差異。,圖15，16、平滑肌縱橫切片HE染色 3.340,.,神經(jīng)組織,取神經(jīng)細(xì)胞