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1、豬繁殖與呼吸綜合征病毒 豬繁殖與呼吸綜合征病毒豬繁殖與呼吸綜合征病毒 (Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV) 豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)能引起豬 的一種高度傳染性疾病,又稱(chēng)“豬藍(lán)耳病”。 癥狀: l 妊娠母豬的繁殖障礙(流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎)。 各種年齡豬特別是仔豬的呼吸道疾病 。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 一一、PRRSV的形態(tài)特征的形態(tài)特征 l 1、套式病毒目 動(dòng)脈炎病毒科 動(dòng)脈炎病毒屬 l 2、基本形態(tài)及核酸 病毒粒子呈卵圓形,直 徑5065nm。 核衣殼直徑3035nm, 呈二十面體對(duì)稱(chēng)。 有囊膜。
2、 單分子線狀單股正鏈RNA 病毒。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 l3、病毒蛋白有核衣殼蛋白(N, 分子質(zhì)量120000u)和兩種主要囊 膜蛋白(M和GP5)。 M是非糖基化的嵌膜蛋白,分子質(zhì) 量160000u 。 GP5為糖蛋白,分子質(zhì)量約25 000u。 GP5與M通過(guò)二硫鍵形成二聚體, 對(duì)病毒的感染力及中和作用至關(guān) 重要。 l此外,還有4種次要囊膜蛋白 (GP2、GP3、GP4及E)及兩種 大分子非結(jié)構(gòu)蛋白(NSP)。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 l4、基因組大小為1300015000nt。 5端帽,約75%為RNA聚合酶基團(tuán)。 3端聚A尾,有編碼病毒結(jié)構(gòu)蛋白的基因。 有感染性。 l5、表面有約5
3、nm大小的突起,無(wú)血凝活性,不凝集哺乳動(dòng)物 或禽類(lèi)紅細(xì)胞。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 二、二、PRRSV的增殖與變異的增殖與變異 1、病毒的增殖、病毒的增殖 病毒增殖的細(xì)胞:病毒增殖的細(xì)胞: 豬的單核細(xì)胞- 巨噬細(xì)胞系統(tǒng)內(nèi)增殖 豬肺泡 巨噬細(xì)胞 外周 單核細(xì)胞 肺間質(zhì) 巨噬細(xì)胞 最為敏感 在宿主細(xì)胞漿的空泡膜及 滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小池膜上“出 芽”,成熟的病毒粒子多 蓄積在空泡腔內(nèi)。 病毒增殖數(shù)量與其適應(yīng)宿主細(xì)胞程度有密切關(guān)系。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 病毒增殖的過(guò)程:病毒增殖的過(guò)程: 鼻黏膜或 上呼吸道系統(tǒng) (巨噬細(xì)胞) 血液循環(huán) 初級(jí)復(fù)制部位 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 病毒增殖的特點(diǎn):病毒增殖的特點(diǎn):
4、 增殖的特點(diǎn) 有嚴(yán)格的宿主專(zhuān)一性 對(duì)巨噬細(xì)胞有專(zhuān)嗜性。 抗體依賴(lài)性 增強(qiáng)作用 即在亞中和抗體 水平存在的情況 下,在細(xì)胞上的 復(fù)制能力反而得 到增強(qiáng)。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 2、病毒的變異、病毒的變異 PRRSV分為兩個(gè)型: (1)以Lelystad virus(LV株)為代表的歐洲型(簡(jiǎn)稱(chēng)A亞群)。 (2)以ATCC VR-2332毒株為代表的美洲型(簡(jiǎn)稱(chēng)B亞群)。 l 兩者在抗原上有顯著差異, 只有很少的交叉反應(yīng)。 A亞群:廣泛的基因組變異。 B亞群:呈較為保守性。 l 不同毒株之間在毒力和致病力上有明顯的差異。 l 我國(guó)的PRRSV均屬美洲型,迄今還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)歐洲型株,同 時(shí)我國(guó)的分離毒
5、株也存在變異現(xiàn)象,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有缺失變異毒 株的存在。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 三三、PRRSV的致病機(jī)理的致病機(jī)理 畜體 病毒巨噬細(xì)胞 廣泛性的血管炎 其他組織的破壞 脾廣泛壞死 淋巴結(jié)的嚴(yán)重破壞 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 四、四、PRRSV的抵抗力的抵抗力 1、病毒的穩(wěn)定性受pH和溫度的影響比較大。 在pH5或 pH7的條件下,其感染力降低95%以 上。 病毒在-70可保存18個(gè)月,4保存1個(gè)月, 37 48h,56 45min完全失去感染力。 2、干燥可很快使病毒失活。 3、對(duì)有機(jī)溶劑十分敏感,經(jīng)氯仿處理后,其感染性 可下降99.99。 4、對(duì)常用的化學(xué)消毒劑的抵抗力不強(qiáng)。 豬繁殖與呼吸綜合征
6、病毒 五、五、PRRSV的流行病學(xué)的流行病學(xué) 1、易感動(dòng)物 PRRSV只感染豬。 各種品種、不同年齡和用途的豬均可感染, 但以妊娠母豬和1月齡以?xún)?nèi)的仔豬最易感。 2、傳染源 患病豬和帶毒豬是本病的重要傳染源。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 4、傳播途徑 lPRRSV主要傳播途徑是接觸感染、空氣傳播,也可通過(guò) 胎盤(pán)垂直傳播。 l易感豬可經(jīng)以下幾種途徑而感染病毒: 經(jīng)口、鼻腔、肌肉、腹腔、靜脈及子宮內(nèi)接種。 與帶毒豬直接接觸。 與污染有PRRSV的運(yùn)輸工具、器械接觸。 l感染豬的流動(dòng)也是本病的重要傳播方式。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 4、流行病學(xué)特點(diǎn) l高度接觸性傳染病,呈地方流行性。 l持續(xù)性感染是PR
7、RSV流行病學(xué)的重要特征 。 PRRSV可在感染豬體內(nèi)存在很長(zhǎng)時(shí)間。 豬感染病毒后214周均可通過(guò)接觸將病毒 傳播給其它易感豬。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 六、六、PRRSV的實(shí)驗(yàn)室診斷的實(shí)驗(yàn)室診斷 該病毒確切診斷需依賴(lài)實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù),包括病毒 分離鑒定、血清學(xué)診斷和分子生物學(xué)診斷技術(shù)。 (一)病毒分離鑒定 病毒分離鑒定是診斷PRRSV最確切的方法 1、病料 l首選材料:肺、扁桃體、脾、淋巴結(jié)和血清。 l適宜的檢驗(yàn)材料:死產(chǎn)和流產(chǎn)胎兒的脾肺血清和胸水。 l檢出率最高:弱胎豬和有呼吸道癥狀的急性感染豬。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 2、分離病毒的細(xì)胞 原代細(xì)胞:PAM。 傳代細(xì)胞:CL2621、MAl
8、04、 Marcl45等細(xì)胞系。 但就臨診分離率而言,PAM的敏感性要高于傳代細(xì)胞。 注意: (1)一般來(lái)說(shuō)日齡小的豬對(duì)病毒的敏感性更高些。 (2)首次傳代有時(shí)可能無(wú)CPE,需盲傳23代。 (3) 不同的毒株可能適應(yīng)不同的細(xì)胞系。 有些毒株僅能在PAM或僅能在CL2621細(xì)胞中生長(zhǎng)。 歐洲株在PAM上的復(fù)制速度更快、效率更高。 北美毒株在CL2621上更有利于分離。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 3、病毒鑒定的技術(shù) (1)單克隆抗體或多克隆抗體免疫熒光抗體技術(shù) (2)單層過(guò)氧化物酶試驗(yàn) (3)RT-PCR技術(shù) (4)電鏡技術(shù) (二)血清學(xué)診斷 l采用血清學(xué)抗體檢測(cè)技術(shù)是應(yīng)用最為廣泛的實(shí)驗(yàn)室診 斷方法
9、。 l目前有4種不同的方法用于檢測(cè)血清中的 PRRSV抗體, 包括: 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn) 間接免疫熒光抗 體試驗(yàn) (IFA) 特異性高 早期診斷 抗原變異會(huì)影響結(jié)果 結(jié)果主觀判定 免疫過(guò)氧化物酶 單層試驗(yàn)(IPMA) 特異性高 敏感性高 早期診斷 結(jié)果主觀判定 高背景 抗原變異會(huì)影響結(jié)果 血清中和試驗(yàn) ( SN ) 可檢測(cè)期長(zhǎng) 敏感性低 耗時(shí) 抗原變異會(huì)影響結(jié)果 酶聯(lián)免疫吸附試 驗(yàn) ( ELISA ) 自動(dòng)化操作 高品質(zhì) 控制 高背景 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 (三)分子生物學(xué)診斷技術(shù) 1、RT-PCR 2、巢式PCR 3、原位PCR 4、RT-PCR-RFLP 5、核酸探針技術(shù) 直接檢測(cè)病料組織中的病毒。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 七、七、PRRSV的防治的防治 (1)堅(jiān)持自繁自養(yǎng)的原則,建立穩(wěn)定的種豬群,不輕 易引種。 (2)規(guī)?;i場(chǎng)應(yīng)徹底實(shí)現(xiàn)全進(jìn)全出,至少要做到產(chǎn) 房和保育兩個(gè)階段的全進(jìn)全出。 (3)建立健全規(guī)?;i場(chǎng)的生物安全體系,定期對(duì)豬 舍和環(huán)境進(jìn)行消毒,保持豬舍、飼養(yǎng)管理用具及環(huán) 境的清潔衛(wèi)生。 (4)適當(dāng)使用藥物控制豬群的細(xì)菌性繼發(fā)感染。 (5)定期對(duì)豬群中PRRSV的感染狀況進(jìn)行監(jiān)測(cè),以了 解該病在豬場(chǎng)的活動(dòng)狀況。 豬繁
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