微生物的培養(yǎng)基滅菌

1、掌握不同器皿滅菌前的包扎方法及操作掌握不同器皿滅菌前的包扎方法及操作掌握培養(yǎng)基滅菌方法及操作掌握培養(yǎng)基滅菌方法及操作一、實驗一、實驗目的要求目的要求培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)基滅菌二、實驗原理二、實驗原理濕熱滅菌原理濕熱滅菌原理：高壓蒸汽滅菌是利用：高壓蒸汽滅菌是利用高壓蒸汽產(chǎn)生的高溫，高壓蒸汽產(chǎn)生的高溫，以及熱蒸汽的穿透能力使蛋白質變性或凝固。以及熱蒸汽的穿透能力使蛋白質變性或凝固。干熱滅菌原理干熱滅菌原理：加熱可破壞蛋白質和核酸中的加熱可破壞蛋白質和核酸中的氫鍵，故導氫鍵，故導致核酸破壞，蛋白質變性或凝固，酶失去活性致核酸破壞，蛋白質變性或凝固，酶失去活性，微生物因，微生物因而死亡。而死亡。加水于滅菌

2、器內(nèi)到規(guī)定的水位 ；把待滅菌的物品放入滅菌鍋；加蓋（關閉滅菌鍋蓋）密封（旋緊螺栓，切勿漏氣）排氣（打開放氣閥，加熱，熱蒸汽上升，以排除鍋內(nèi)冷空氣，排氣約5 l0min，關閉放氣閥）滅菌2030min降壓（待壓力自然降至0 ）開蓋取物（放氣閥不能打開過早，否則突然降壓致使培養(yǎng)基沖騰，使棉塞、硅膠泡沫塞沾污，甚至沖出容器以外。）濕熱滅菌步驟濕熱滅菌步驟三、實驗步驟三、實驗步驟干熱滅菌步驟干熱滅菌步驟1)、把要滅菌的物品放在箱內(nèi),堆積時要留有空隙,勿使接觸器壁,鐵殼,關閉箱門.2)、接通電源,把位于箱頂?shù)耐饪走m當打開,使箱內(nèi)濕空氣能逸出,至箱內(nèi)溫度達到100時關閉.3)、調(diào)節(jié)溫度控制器旋鈕,直至箱

3、內(nèi)溫度達到所需要溫度位置,觀察溫度是否恒定.若不穩(wěn)定,再行調(diào)節(jié),穩(wěn)定后不可再撥動調(diào)節(jié)旋鈕和通氣孔,保持140 160,23h.4)、滅菌結束后切斷電源,待箱內(nèi)溫度降至60時,才能打開箱門取出滅菌物品.同時,應將溫度調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)到零點,并打開通氣孔. 三、實驗步驟三、實驗步驟滅菌后，倒平板，標記培養(yǎng)基名稱，編號和實驗日期。制備試管斜面培養(yǎng)基，試管上標記培養(yǎng)基名稱，編號和實驗日期。注意，4人1組，每1組制備1瓶無菌水，實驗結束后，每個實驗室需要安排人打掃衛(wèi)生實驗無菌器皿的準備實驗無菌器皿的準備無菌水：在試管或三角瓶內(nèi)量取實驗所需的自來水，無菌水：在試管或三角瓶內(nèi)量取實驗所需的自來水， 經(jīng)經(jīng) 121 20min121 20min滅菌。滅菌。無菌無菌移液吸管移液吸管、培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿：報紙包扎后，經(jīng)：報紙包扎后，經(jīng)121121，20min20min滅菌。滅菌。干熱滅菌和濕熱滅菌時間長短為什么有較大差距？濕