第2章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)

1、第2章 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)一、名詞解釋1 兩性離子（dipolarion） 2 必需氨基酸（essential amino acid）3 等電點(diǎn)(isoelectric point,pI) 4 稀有氨基酸(rare amino acid)5 非蛋白質(zhì)氨基酸(nonprotein amino acid) 6 構(gòu)型(configuration)7 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)(protein primary structure) 8 構(gòu)象(conformation)9 蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)(protein secondary structure) 10結(jié)構(gòu)域(domain)11蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)(protein terti

2、ary structure) 12氫鍵(hydrogen bond) 13蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)(protein quaternary structure) 14離子鍵(ionic bond)15超二級(jí)結(jié)構(gòu)(super-secondary structure) 16疏水鍵(hydrophobic bond) 17范德華力( van der Waals force) 18鹽析(salting out)19鹽溶(salting in) 20蛋白質(zhì)的變性(denaturation)21蛋白質(zhì)的復(fù)性(renaturation) 22蛋白質(zhì)的沉淀作用(precipitation)23凝膠電泳（gel elec

3、trophoresis） 24層析（chromatography）25標(biāo)準(zhǔn)折疊單位26模體二、填 空1蛋白質(zhì)多肽鏈中的肽鍵是通過(guò)一個(gè)氨基酸的_基和另一氨基酸的_基連接而形成的。2大多數(shù)蛋白質(zhì)中氮的含量較恒定，平均為_(kāi)%，如測(cè)得1克樣品含氮量為10mg,則蛋白質(zhì)含量為_(kāi)%。3在20種氨基酸中，酸性氨基酸有_和_2種，具有羥基的氨基酸是_和_，能形成二硫鍵的氨基酸是_.4蛋白質(zhì)中的_、_和_3種氨基酸具有紫外吸收特性，因而使蛋白質(zhì)在280nm處有最大吸收值。5精氨酸的pI值為10.76,將其溶于pH7的緩沖液中，并置于電場(chǎng)中，則精氨酸應(yīng)向電場(chǎng)的_方向移動(dòng)。6組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸中，含有咪唑環(huán)的

4、氨基酸是_，含硫的氨基酸有_和_。7蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)最基本的有兩種類(lèi)型，它們是_和_。8-螺旋結(jié)構(gòu)是由同一肽鏈的_和  _間的_鍵維持的，螺距為_(kāi),每圈螺旋含_個(gè)氨基酸殘基，每個(gè)氨基酸殘基沿軸上升高度為_(kāi)。天然蛋白質(zhì)分子中的-螺旋大都屬于_手螺旋。9在蛋白質(zhì)的-螺旋結(jié)構(gòu)中，在環(huán)狀氨基酸_存在處局部螺旋結(jié)構(gòu)中斷。10球狀蛋白質(zhì)中有_側(cè)鏈的氨基酸殘基常位于分子表面而與水結(jié)合，而有_側(cè)鏈的氨基酸位于分子的內(nèi)部。11氨基酸與茚三酮發(fā)生氧化脫羧脫氨反應(yīng)生成_色化合物，而_與茚三酮反應(yīng)生成黃色化合物。12維持蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵有_和_；維持二級(jí)結(jié)構(gòu)靠_鍵；維持三級(jí)結(jié)構(gòu)和四級(jí)結(jié)構(gòu)靠_鍵，其中

5、包括_、_、_和_.13穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體的因素是_和_。14GSH的中文名稱(chēng)是_，它的活性基團(tuán)是_，它的生化功能是_。15加入低濃度的中性鹽可使蛋白質(zhì)溶解度_，這種現(xiàn)象稱(chēng)為_(kāi)，而加入高濃度的中性鹽，當(dāng)達(dá)到一定的鹽飽和度時(shí)，可使蛋白質(zhì)的溶解度_并_,這種現(xiàn)象稱(chēng)為_(kāi),蛋白質(zhì)的這種性質(zhì)常用于_。16用電泳方法分離蛋白質(zhì)的原理，是在一定的pH條件下，不同蛋白質(zhì)的_、_和_不同，因而在電場(chǎng)中移動(dòng)的_和_不同，從而使蛋白質(zhì)得到分離。17氨基酸處于等電狀態(tài)時(shí)，主要是以_形式存在，此時(shí)它的溶解度最小。18鑒定蛋白質(zhì)多肽鏈氨基末端常用的方法有_和_。19測(cè)定蛋白質(zhì)分子量的方法有_、_和_。20今有甲、乙、丙三種蛋

6、白質(zhì)，它們的等電點(diǎn)分別為8.0、4.5和10.0,當(dāng)在pH8.0緩沖液中，它們?cè)陔妶?chǎng)中電泳的情況為：甲_，乙_，丙_。21當(dāng)氨基酸溶液的pH=pI時(shí)，氨基酸以_離子形式存在，當(dāng)pH>pI時(shí)，氨基酸以_離子形式存在。22谷氨酸的pK1(-COOH)2.19,  pK2 (-NH+3 ) = 9.67,  pKR(R基)= 4.25,谷氨酸的等電點(diǎn)為_(kāi)。23天然蛋白質(zhì)中的螺旋結(jié)構(gòu)，其主鏈上所有的羰基氧與亞氨基氫都參與了鏈內(nèi)_鍵的形成，因此構(gòu)象相當(dāng)穩(wěn)定。24將分子量分別為a（90 000）、b（45 000）、c（110 000）的三種蛋白質(zhì)混合溶液進(jìn)行凝膠過(guò)濾層析，它們被

7、洗脫下來(lái)的先后順序是_。25肌紅蛋白的含鐵量為0.34%，其最小分子量是_.血紅蛋白的含鐵量也是0.34%，但每分子含有4個(gè)鐵原子，血紅蛋白的分子量是_.26一個(gè)-螺旋片段含有180個(gè)氨基酸殘基，該片段中有_圈螺旋，該-螺旋片段的軸長(zhǎng)為_(kāi).27蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點(diǎn)是 、 、 。28蛋白質(zhì)折疊機(jī)制首先成核理論的主要內(nèi)容包括 、 、 。三、 選擇題1在生理pH條件下，下列哪種氨基酸帶正電荷？A丙氨酸          B酪氨酸       

8、;   C賴(lài)氨酸    D蛋氨酸          E異亮氨酸2下列氨基酸中哪一種是非必需氨基酸？A亮氨酸          B酪氨酸           C賴(lài)氨酸D蛋氨酸        &

9、#160; E蘇氨酸3蛋白質(zhì)的組成成分中，在280nm處有最大吸收值的最主要成分是：A酪氨酸的酚環(huán)              B半胱氨酸的硫原子C肽鍵                      D苯丙氨酸4下列4種氨基酸中哪個(gè)有堿性側(cè)鏈？A脯氨酸 &

10、#160;   B苯丙氨酸    C異亮氨酸    D賴(lài)氨酸5下列哪種氨基酸屬于亞氨基酸？A絲氨酸      B脯氨酸     C亮氨酸     D組氨酸6下列哪一項(xiàng)不是蛋白質(zhì)-螺旋結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)？A天然蛋白質(zhì)多為右手螺旋B肽鏈平面充分伸展C每隔3.6個(gè)氨基酸螺旋上升一圈。D每個(gè)氨基酸殘基上升高度為0.15nm.7下列哪一項(xiàng)不是蛋白質(zhì)的性質(zhì)之一？A處于等電狀態(tài)時(shí)溶解度最小 

11、0;  B加入少量中性鹽溶解度增加C變性蛋白質(zhì)的溶解度增加      D有紫外吸收特性8下列氨基酸中哪一種不具有旋光性？ALeu      BAla      CGly      DSer      EVal9在下列檢測(cè)蛋白質(zhì)的方法中，哪一種取決于完整的肽鏈？A凱氏定氮法    B雙縮尿反應(yīng) 

12、60;  C紫外吸收法    D茚三酮法10下列哪種酶作用于由堿性氨基酸的羧基形成的肽鍵？A糜蛋白酶     B羧肽酶     C氨肽酶      D胰蛋白酶11下列有關(guān)蛋白質(zhì)的敘述哪項(xiàng)是正確的？A蛋白質(zhì)分子的凈電荷為零時(shí)的pH值是它的等電點(diǎn)B大多數(shù)蛋白質(zhì)在含有中性鹽的溶液中會(huì)沉淀析出C由于蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最大，所以沉淀蛋白質(zhì)時(shí)應(yīng)遠(yuǎn)離等電點(diǎn)D以上各項(xiàng)均不正確12下列關(guān)于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的敘述，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的？A氨基酸的疏水側(cè)鏈

13、很少埋在分子的中心部位B電荷的氨基酸側(cè)鏈常在分子的外側(cè)，面向水相C白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)在決定高級(jí)結(jié)構(gòu)方面是重要因素之一D白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)主要靠次級(jí)鍵維持13列哪些因素妨礙蛋白質(zhì)形成-螺旋結(jié)構(gòu)？A脯氨酸的存在                B氨基酸殘基的大的支鏈C性氨基酸的相鄰存在          D性氨基酸的相鄰存在E以上各項(xiàng)都是14于-折疊片的敘述，下列哪項(xiàng)是錯(cuò)

14、誤的？A-折疊片的肽鏈處于曲折的伸展?fàn)顟B(tài)B的結(jié)構(gòu)是借助于鏈內(nèi)氫鍵穩(wěn)定的C有的-折疊片結(jié)構(gòu)都是通過(guò)幾段肽鏈平行排列而形成的D基酸之間的軸距為0.35nm15持蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要作用力是：A鹽鍵       B疏水鍵       C氫鍵       D二硫鍵16維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的因素是：A肽鍵    B二硫鍵    C離子鍵  &

15、#160; D氫鍵    E次級(jí)鍵17凝膠過(guò)濾法分離蛋白質(zhì)時(shí)，從層析柱上先被洗脫下來(lái)的是：A分子量大的             B分子量小的C電荷多的               D帶電荷少的18. 下列哪項(xiàng)與蛋白質(zhì)的變性無(wú)關(guān)？A. 肽鍵斷裂     

16、0;         B氫鍵被破壞C離子鍵被破壞           D疏水鍵被破壞19蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的特征主要取決于下列哪一項(xiàng)？A多肽鏈中氨基酸的排列順序        B次級(jí)鍵C鏈內(nèi)及鏈間的二硫鍵            

17、60; D溫度及pH20下列哪個(gè)性質(zhì)是氨基酸和蛋白質(zhì)所共有的？A膠體性質(zhì)               B兩性性質(zhì)C沉淀反應(yīng)               D變性性質(zhì)E雙縮脲反應(yīng)21氨基酸在等電點(diǎn)時(shí)具有的特點(diǎn)是：A不帶正電荷        &#

18、160;    B不帶負(fù)電荷CA和B                 D溶解度最大E在電場(chǎng)中不泳動(dòng)22蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指：A蛋白質(zhì)氨基酸的種類(lèi)和數(shù)目        B蛋白質(zhì)中氨基酸的排列順序C蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的折疊和盤(pán)繞  D包括A,B和C四、是非判斷題(  ) 1氨基酸與茚三酮反應(yīng)都產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物。( 

19、; ) 2因?yàn)轸然己蛠啺被g的部分雙鍵性質(zhì)，所以肽鍵不能自由旋轉(zhuǎn)。(  ) 3所有的蛋白質(zhì)都有酶活性。(  ) 4-碳和羧基碳之間的鍵不能自由旋轉(zhuǎn)。(  ) 5多數(shù)氨基酸有D-和L-兩種不同構(gòu)型，而構(gòu)型的改變涉及共價(jià)鍵的破裂。(  ) 6所有氨基酸都具有旋光性。(  ) 7構(gòu)成蛋白質(zhì)的20種氨基酸都是必需氨基酸。(  ) 8蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序在很大程度上決定了它的構(gòu)象。(  ) 9一氨基一羧基氨基酸的pI為中性，因?yàn)?COOH和-NH2 的解離度相同。(  ) 10蛋白質(zhì)的變性是蛋白質(zhì)立體結(jié)構(gòu)的破

20、壞，因此涉及肽鍵的斷裂。(  ) 11蛋白質(zhì)是生物大分子，但并不都具有四級(jí)結(jié)構(gòu)。(  ) 12血紅蛋白和肌紅蛋白都是氧的載體，前者是一個(gè)典型的變構(gòu)蛋白，在與氧結(jié)合過(guò)程中呈現(xiàn)變構(gòu)效應(yīng)，而后者卻不是。(  ) 13.用FDNB法和Edman降解法測(cè)定蛋白質(zhì)多肽鏈N-端氨基酸的原理是相同的。(  ) 14并非所有構(gòu)成蛋白質(zhì)的20種氨基酸的-碳原子上都有一個(gè)自由羧基和一個(gè)自由氨基。(  ) 15蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，它的酸堿性質(zhì)主要取決于肽鏈上可解離的R基團(tuán)。(  ) 16在具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)分子中，每個(gè)具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈?zhǔn)且粋€(gè)亞基。(&#

21、160; ) 17所有的肽和蛋白質(zhì)都能和硫酸銅的堿性溶液發(fā)生雙縮尿反應(yīng)。(  ) 18一個(gè)蛋白質(zhì)分子中有兩個(gè)半胱氨酸存在時(shí)，它們之間可以形成兩個(gè)二硫鍵。(  ) 19鹽析法可使蛋白質(zhì)沉淀，但不引起變性，所以鹽析法常用于蛋白質(zhì)的分離制備。(  ) 20蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)就是它的三級(jí)結(jié)構(gòu)。(  ) 21維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)最重要的作用力是氫鍵。(  )22具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，它的每個(gè)亞基單獨(dú)存在時(shí)仍能保存蛋白質(zhì)原有的生物活性。(  )23變性蛋白質(zhì)的溶解度降低，是由于中和了蛋白質(zhì)分子表面的電荷及破 壞了外層的水膜所引起的。(  )

22、24蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是靠鏈內(nèi)氫鍵維持的，肽鏈上每個(gè)肽鍵都參與氫鍵的形成。 五、問(wèn)答題1什么是蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)？為什么說(shuō)蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定其空間結(jié)構(gòu)？2什么是蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)？蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)與其生物功能有何關(guān)系？3蛋白質(zhì)的螺旋結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)？4蛋白質(zhì)的折疊結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)？5舉例說(shuō)明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與其功能之間的關(guān)系。6什么是蛋白質(zhì)的變性作用和復(fù)性作用？蛋白質(zhì)變性后哪些性質(zhì)會(huì)發(fā)生改變？7簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)變性作用的機(jī)制。8蛋白質(zhì)有哪些重要功能9下列試劑和酶常用于蛋白質(zhì)化學(xué)的研究中：CNBr、異硫氰酸苯酯、丹黃酰氯、脲、6mol/L HCl、-巰基乙醇、水合茚三酮、過(guò)甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶

23、。其中哪一個(gè)最適合完成以下各項(xiàng)任務(wù)？（1）測(cè)定小肽的氨基酸序列。（2）鑒定肽的氨基末端殘基。（3）不含二硫鍵的蛋白質(zhì)的可逆變性；如有二硫鍵存在時(shí)還需加什么試劑？（4）在芳香族氨基酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。（4）在蛋氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。（5）在賴(lài)氨酸和精氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。10根據(jù)蛋白質(zhì)一級(jí)氨基酸序列可以預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)。假設(shè)有下列氨基酸序列（如圖）： 1            5        &#

24、160;      10                15 Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln-       20          &#

25、160;    25     27Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg （1）預(yù)測(cè)在該序列的哪一部位可能會(huì)出彎或-轉(zhuǎn)角。（2）何處可能形成鏈內(nèi)二硫鍵？（3）假設(shè)該序列只是大的球蛋白的一部分，下面氨基酸殘基中哪些可能分布在蛋白的外表面，哪些分布在內(nèi)部？天冬氨酸；異亮氨酸；蘇氨酸；纈氨酸；谷氨酰胺；賴(lài)氨酸參考答案一、名詞解釋1兩性離子：指在同一氨基酸分子上含有等量的正負(fù)兩種電荷，又稱(chēng)兼性離子或偶極離子。2必需氨基酸：指人體（和其它哺乳動(dòng)物）自身不能合成，機(jī)體又必需，需要從飲食中

26、獲得的氨基酸。3. 氨基酸的等電點(diǎn)：指氨基酸的正離子濃度和負(fù)離子濃度相等時(shí)的pH值，用符號(hào)pI表示。4稀有氨基酸：指存在于蛋白質(zhì)中的20種常見(jiàn)氨基酸以外的其它罕見(jiàn)氨基酸，它們是正常氨基酸的衍生物。5非蛋白質(zhì)氨基酸：指不存在于蛋白質(zhì)分子中而以游離狀態(tài)和結(jié)合狀態(tài)存在于生物體的各種組織和細(xì)胞的氨基酸。6構(gòu)型：指在立體異構(gòu)體中不對(duì)稱(chēng)碳原子上相連的各原子或取代基團(tuán)的空間排布。構(gòu)型的轉(zhuǎn)變伴隨著共價(jià)鍵的斷裂和重新形成。7蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)：指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序，以及二硫鍵的位置。8構(gòu)象：指有機(jī)分子中，不改變共價(jià)鍵結(jié)構(gòu)，僅單鍵周?chē)脑有D(zhuǎn)所產(chǎn)生的原子的空間排布。一種構(gòu)象改變?yōu)榱硪环N構(gòu)象時(shí)，不涉及共

27、價(jià)鍵的斷裂和重新形成。構(gòu)象改變不會(huì)改變分子的光學(xué)活性。  9蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)：指在蛋白質(zhì)分子中的局部區(qū)域內(nèi)，多肽鏈沿一定方向盤(pán)繞和折疊的方式。10結(jié)構(gòu)域：指蛋白質(zhì)多肽鏈在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步卷曲折疊成幾個(gè)相對(duì)獨(dú)立的近似球形的組裝體。11蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)：指蛋白質(zhì)在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上借助各種次級(jí)鍵卷曲折疊成特定的球狀分子結(jié)構(gòu)的構(gòu)象。12氫鍵：指負(fù)電性很強(qiáng)的氧原子或氮原子與N-H或O-H的氫原子間的相互吸引力。13蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)：指多亞基蛋白質(zhì)分子中各個(gè)具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈以適當(dāng)方式聚合所呈現(xiàn)的三維結(jié)構(gòu)。14離子鍵：帶相反電荷的基團(tuán)之間的靜電引力，也稱(chēng)為靜電鍵或鹽鍵。15超二級(jí)結(jié)構(gòu)：指

28、蛋白質(zhì)分子中相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)單位組合在一起所形成的有規(guī)則的、在空間上能辨認(rèn)的二級(jí)結(jié)構(gòu)組合體。16疏水鍵：非極性分子之間的一種弱的、非共價(jià)的相互作用。如蛋白質(zhì)分子中的疏水側(cè)鏈避開(kāi)水相而相互聚集而形成的作用力。17范德華力：中性原子之間通過(guò)瞬間靜電相互作用產(chǎn)生的一種弱的分子間的力。當(dāng)兩個(gè)原子之間的距離為它們的范德華半徑之和時(shí)，范德華力最強(qiáng)。18鹽析：在蛋白質(zhì)溶液中加入一定量的高濃度中性鹽（如硫酸氨），使蛋白質(zhì)溶解度降低并沉淀析出的現(xiàn)象稱(chēng)為鹽析。19鹽溶：在蛋白質(zhì)溶液中加入少量中性鹽使蛋白質(zhì)溶解度增加的現(xiàn)象。20蛋白質(zhì)的變性作用：蛋白質(zhì)分子的天然構(gòu)象遭到破壞導(dǎo)致其生物活性喪失的現(xiàn)象。蛋白質(zhì)在受到光照、

29、熱、有機(jī)溶劑以及一些變性劑的作用時(shí)，次級(jí)鍵遭到破壞導(dǎo)致天然構(gòu)象的破壞，但其一級(jí)結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變。21蛋白質(zhì)的復(fù)性：指在一定條件下，變性的蛋白質(zhì)分子恢復(fù)其原有的天然構(gòu)象并恢復(fù)生物活性的現(xiàn)象。22蛋白質(zhì)的沉淀作用：在外界因素影響下，蛋白質(zhì)分子失去水化膜或被中和其所帶電荷，導(dǎo)致溶解度降低從而使蛋白質(zhì)變得不穩(wěn)定而沉淀的現(xiàn)象稱(chēng)為蛋白質(zhì)的沉淀作用。23凝膠電泳：以凝膠為介質(zhì)，在電場(chǎng)作用下分離蛋白質(zhì)或核酸等分子的分離純化技術(shù)。24層析：按照在移動(dòng)相（可以是氣體或液體）和固定相（可以是液體或固體）之間的分配比例將混合成分分開(kāi)的技術(shù)。25標(biāo)準(zhǔn)折疊單位：蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元螺旋與折疊通過(guò)各種連接多肽可以組成特殊幾何排

30、列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類(lèi)型通常稱(chēng)為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類(lèi)型，乃至他們的組合型來(lái)予以描述，因此又將其稱(chēng)為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。26模體：蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類(lèi)似的局部區(qū)域。二、填空題1 氨；羧基；  2 16 ；6.25    3 谷氨酸；天冬氨酸；絲氨酸；蘇氨酸4 苯丙氨酸；酪氨酸；色氨酸；紫外吸收        5 負(fù)極  6 組氨酸；半胱氨酸；蛋氨酸      

31、; 7 -螺旋結(jié)構(gòu)；-折疊結(jié)構(gòu)8 C=O；N=H；氫；0.54nm； 3.6；0.15nm；右9 脯氨酸；羥脯氨酸     10極性；疏水性     11藍(lán)紫色；脯氨酸12肽鍵；二硫鍵；氫鍵；次級(jí)鍵；氫鍵；離子鍵；疏水鍵；范德華力13表面的水化膜；同性電荷        14谷胱甘肽；巰基15增加；鹽溶；減??；沉淀析出；鹽析；蛋白質(zhì)分離16帶電荷量；分子大小；分子形狀；方向；速率 17兩性離子；最小 18FDNB法（2,4-二硝基氟苯法）；Edm

32、an降解法（苯異硫氫酸酯法）19沉降法；凝膠過(guò)濾法；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS-PAGE法）20不動(dòng)；向正極移動(dòng)；向負(fù)極移動(dòng)；   21兩性離子；負(fù)；223.2223氫鍵；24C；a；b     2516 672； 66 687；      2650圈；27nm27亞基對(duì)DNA的利用來(lái)說(shuō)是一種經(jīng)濟(jì)的方法 ；可以減少蛋白質(zhì)合成過(guò)程中隨機(jī)的錯(cuò)誤對(duì)蛋白質(zhì)活性的影響；活性能夠非常有效和迅速地被打開(kāi)和被關(guān)閉。28成核、結(jié)構(gòu)充實(shí)、最后重排三 選擇題1D：5種氨基酸中只有賴(lài)氨酸為堿性氨基酸

33、，其等電點(diǎn)為9.74,大于生理pH值，所以帶正電荷。2B：人（或哺乳動(dòng)物）的必需氨基酸包括賴(lài)氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸8種，酪氨酸不是必需氨基酸。3A：酪氨酸和苯丙氨酸在280nm處的克分子消光系數(shù)分別為540何120,所以酪氨酸比苯丙氨酸有較大吸收，而且大多數(shù)蛋白質(zhì)中都含有酪氨酸。肽鍵的最大吸收在215nm,半胱氨酸的硫原子在280nm和215nm均無(wú)明顯吸收。4D：在此4種氨基酸中，只有賴(lài)氨酸的R基團(tuán)可接受氫質(zhì)子，作為堿，而其它3種氨基酸均無(wú)可解離的R側(cè)鏈。5B：氨基酸的-碳上連接的是亞氨基而不是氨基，所以實(shí)際上屬于一種亞氨基酸，而其它氨基酸的-碳上

34、都連接有氨基，是氨基酸。6B：天然蛋白質(zhì)的-螺旋結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)是，肽鏈圍繞中心軸旋轉(zhuǎn)形成螺旋結(jié)構(gòu)，而不是充分伸展的結(jié)構(gòu)。另外在每個(gè)螺旋中含有3.6個(gè)氨基酸殘基，螺距為0.54nm,每個(gè)氨基酸殘基上升高度為0.15nm,所以B不是-螺旋結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)。7C：蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)時(shí)，凈電荷為零，失去蛋白質(zhì)分子表面的同性電荷互相排斥的穩(wěn)定因素，此時(shí)溶解度最??；加入少量中性鹽可增加蛋白質(zhì)的溶解度，即鹽溶現(xiàn)象；因?yàn)榈鞍踪|(zhì)中含有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸，所以具有紫外吸收特性；變性蛋白質(zhì)的溶解度減小而不是增加，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)變性后，近似于球狀的空間構(gòu)象被破壞，變成松散的結(jié)構(gòu)，原來(lái)處于分子內(nèi)部的疏水性氨基酸側(cè)鏈暴露于分子表面

35、，減小了與水分子的作用，從而使蛋白質(zhì)溶解度減小并沉淀。8C：甘氨酸的-碳原子連接的4個(gè)原子和基團(tuán)中有2個(gè)是氫原子，所以不是不對(duì)稱(chēng)碳原子，沒(méi)有立體異構(gòu)體，所以不具有旋光性。9B：雙縮脲反應(yīng)是指含有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物（肽及蛋白質(zhì)）與稀硫酸銅的堿性溶液反應(yīng)生成紫色（或青紫色）化合物的反應(yīng)，產(chǎn)生顏色的深淺與蛋白質(zhì)的含量成正比，所以可用于蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。茚三酮反應(yīng)是氨基酸的游離的-NH與茚三酮之間的反應(yīng)；凱氏定氮法是測(cè)定蛋白質(zhì)消化后產(chǎn)生的氨；紫外吸收法是通過(guò)測(cè)定蛋白質(zhì)的紫外消光值定量測(cè)定蛋白質(zhì)的方法，因?yàn)榇蠖鄶?shù)蛋白質(zhì)都含有酪氨酸，有些還含有色氨酸或苯丙氨酸，這三種氨基酸具有紫外吸收特性，所以紫

36、外吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比。10D：靡蛋白酶即胰凝乳蛋白酶作用于酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸的羧基參與形成的肽鍵；羧肽酶是從肽鏈的羧基端開(kāi)始水解肽鍵的外肽酶；氨肽酶是從肽鏈的氨基端開(kāi)始水解肽鍵的外肽酶；胰蛋白酶可以專(zhuān)一地水解堿性氨基酸的羧基參與形成的肽鍵。11A：蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)是指蛋白質(zhì)分子內(nèi)的正電荷桌能總數(shù)與負(fù)電荷總數(shù)相等時(shí)的pH值。蛋白質(zhì)鹽析的條件是加入足量的中性鹽，如果加入少量中性鹽不但不會(huì)使蛋白質(zhì)沉淀析出反而會(huì)增加其溶解度，即鹽溶。在等電點(diǎn)時(shí)，蛋白質(zhì)的凈電荷為零，分子間的凈電斥力最小，所以溶解度最小，在溶液中易于沉淀，所以通常沉淀蛋白質(zhì)應(yīng)調(diào)pH至等電點(diǎn)。12A：在蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)中，通常是

37、疏水性氨基酸的側(cè)鏈存在于分子的內(nèi)部，因?yàn)槭杷曰鶊F(tuán)避開(kāi)水相而聚集在一起，而親水側(cè)鏈分布在分子的表面以充分地與水作用；蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是多肽鏈中氨基酸的排列順序，此順序即決定了肽鏈形成二級(jí)結(jié)構(gòu)的類(lèi)型以及更高層次的結(jié)構(gòu)；維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的作用力主要是次級(jí)鍵。13E：脯氨酸是亞氨基酸,參與形成肽鍵后不能再與C=O 氧形成氫鍵，因此不能形成-螺旋結(jié)構(gòu);氨基酸殘基的支鏈大時(shí)，空間位阻大，妨礙螺旋結(jié)構(gòu)的形成；連續(xù)出現(xiàn)多個(gè)酸性氨基酸或堿性氨基酸時(shí)，同性電荷會(huì)互相排斥，所以不能形成穩(wěn)定的螺旋結(jié)構(gòu)。14C：-折疊結(jié)構(gòu)是一種常見(jiàn)的蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的類(lèi)型，分為平行和反平行兩種排列方式，所以題中C項(xiàng)的說(shuō)法是錯(cuò)誤的。在

38、-折疊結(jié)構(gòu)中肽鏈處于曲折的伸展?fàn)顟B(tài)，氨基酸殘基之間的軸心距離為0.35nm, 相鄰肽鏈（或同一肽鏈中的幾個(gè)肽段）之間形成氫鍵而使結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。15C：蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的兩種主要類(lèi)型是-螺旋結(jié)構(gòu)和-折疊結(jié)構(gòu)。在-螺旋結(jié)構(gòu)中肽鏈上的所有氨基酸殘基均參與氫鍵的形成以維持螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。在-折疊結(jié)構(gòu)中，相鄰肽鏈或肽段之間形成氫鍵以維持結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，所以氫鍵是維持蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要作用力。離子鍵、疏水鍵和范德華力在維持蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)和四級(jí)結(jié)構(gòu)中起重要作用，而二硫鍵在穩(wěn)定蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)中起一定作用。16E：肽鍵是連接氨基酸的共價(jià)鍵，它是維持蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力；而硫鍵是2分子半胱氨酸的巰基脫氫氧化形成

39、的共價(jià)鍵，它可以存在于2條肽鏈之間也可以由存在于同一條肽鏈的2個(gè)不相鄰的半胱氨酸之間，它在維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)中起一定作用，但不是最主要的。離子鍵和氫鍵都是維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的因素之一，但此項(xiàng)選擇不全面，也不確切。次級(jí)鍵包括氫鍵、離子鍵、疏水鍵和范德華力，所以次項(xiàng)選擇最全面、確切。17A：用凝膠過(guò)濾柱層析分離蛋白質(zhì)是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同進(jìn)行分離的方法，與蛋白質(zhì)分子的帶電狀況無(wú)關(guān)。在進(jìn)行凝膠過(guò)濾柱層析過(guò)程中，比凝膠網(wǎng)眼大的分子不能進(jìn)入網(wǎng)眼內(nèi)，被排阻在凝膠顆粒之外。比凝膠網(wǎng)眼小的顆?？梢赃M(jìn)入網(wǎng)眼內(nèi)，分子越小進(jìn)入網(wǎng)眼的機(jī)會(huì)越多，因此不同大小的分子通過(guò)凝膠層析柱時(shí)所經(jīng)的路程距離不同，大分子物質(zhì)經(jīng)過(guò)

40、的距離短而先被洗出，小分子物質(zhì)經(jīng)過(guò)的距離長(zhǎng)，后被洗脫，從而使蛋白質(zhì)得到分離。18A：蛋白質(zhì)的變性是其空間結(jié)構(gòu)被破壞，從而引起理化性質(zhì)的改變以及生物活性的喪失，但其一級(jí)結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變，所以肽鍵沒(méi)有斷裂。蛋白質(zhì)變性的機(jī)理是維持其空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用力被破壞，氫鍵、離子鍵和疏水鍵都是維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的作用力，當(dāng)這些作用力被破壞時(shí)空間結(jié)構(gòu)就被破壞并引起變性，所以與變性有關(guān)。       19A：蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)即蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序決定蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象，因?yàn)橐患?jí)結(jié)構(gòu)中包含著形成空間結(jié)構(gòu)所需要的所有信息，氨基酸殘基的結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)決定

41、了所組成的蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)的類(lèi)型以及三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)的構(gòu)象；二硫鍵和次級(jí)鍵都是維持蛋白質(zhì)空間構(gòu)象穩(wěn)定的作用力，但不決定蛋白質(zhì)的構(gòu)象；溫度及pH影響蛋白質(zhì)的溶解度、解離狀態(tài)、生物活性等性質(zhì)，但不決定蛋白質(zhì)的構(gòu)象。20B：氨基酸即有羧基又有氨基，可以提供氫質(zhì)子也可以接受氫質(zhì)子，所以即是酸又是堿，是兩性電解質(zhì)。由氨基酸組成的蛋白質(zhì)分子上也有可解離基團(tuán)，如谷氨酸和天冬氨酸側(cè)鏈基團(tuán)的羧基以及賴(lài)氨酸的側(cè)鏈氨基，所以也是兩性電解質(zhì)，這是氨基酸和蛋白質(zhì)所共有的性質(zhì)；膠體性質(zhì)是蛋白質(zhì)所具有的性質(zhì)，沉淀反應(yīng)是蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)被破壞產(chǎn)生的現(xiàn)象；變性是蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)被破壞后性質(zhì)發(fā)生改變并喪失生物活性的現(xiàn)象，這三種現(xiàn)象

42、均與氨基酸無(wú)關(guān)。21E： 氨基酸分子上的正電荷數(shù)和負(fù)電荷數(shù)相等時(shí)的pH值是其等電點(diǎn)，即凈電荷為零，此時(shí)在電場(chǎng)中不泳動(dòng)。由于凈電荷為零，分子間的凈電斥力最小，所以溶解度最小。22B：蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序，蛋白質(zhì)中所含氨基酸的種類(lèi)和數(shù)目相同但排列順序不同時(shí)，其一級(jí)結(jié)構(gòu)以及在此基礎(chǔ)上形成的空間結(jié)構(gòu)均有很大不同。蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的折疊和盤(pán)繞是蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的內(nèi)容，所以B項(xiàng)是正確的。 四 是非判斷題1錯(cuò)：脯氨酸與茚三酮反應(yīng)產(chǎn)生黃色化合物，其它氨基酸與茚三酮反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色化合物。2對(duì)：在肽平面中，羧基碳和亞氨基氮之間的鍵長(zhǎng)為0.132nm，介于CN 單鍵和CN 雙鍵

43、之間，具有部分雙鍵的性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)。3錯(cuò)：蛋白質(zhì)具有重要的生物功能，有些蛋白質(zhì)是酶，可催化特定的生化反應(yīng)，有些蛋白質(zhì)則具有其它的生物功能而不具有催化活性，所以不是所有的蛋白質(zhì)都具有酶的活性。4錯(cuò)：-碳和羧基碳之間的鍵是CC單鍵，可以自由旋轉(zhuǎn)。5對(duì)：在20種氨基酸中，除甘氨酸外都具有不對(duì)稱(chēng)碳原子，所以具有L-型和D-型2種不同構(gòu)型，這兩種不同構(gòu)型的轉(zhuǎn)變涉及到共價(jià)鍵的斷裂和從新形成。6錯(cuò)：由于甘氨酸的-碳上連接有2個(gè)氫原子，所以不是不對(duì)稱(chēng)碳原子，沒(méi)有2種不同的立體異構(gòu)體，所以不具有旋光性。其它常見(jiàn)的氨基酸都具有不對(duì)稱(chēng)碳原子，因此具有旋光性。7錯(cuò)：必需氨基酸是指人（或哺乳動(dòng)物）自身不能合成機(jī)體又

44、必需的氨基酸，包括8種氨基酸。其它氨基酸人體自身可以合成，稱(chēng)為非必需氨基酸。8對(duì)：蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序，不同氨基酸的結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)不同，因而決定了多肽鏈形成二級(jí)結(jié)構(gòu)的類(lèi)型以及不同類(lèi)型之間的比例以及在此基礎(chǔ)上形成的更高層次的空間結(jié)構(gòu)。如在脯氨酸存在的地方-螺旋中斷，R側(cè)鏈具有大的支鏈的氨基酸聚集的地方妨礙螺旋結(jié)構(gòu)的形成，所以一級(jí)結(jié)構(gòu)在很大程度上決定了蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象。9錯(cuò)：一氨基一羧基氨基酸為中性氨基酸，其等電點(diǎn)為中性或接近中性，但氨基和羧基的解離度，即pK值不同。10錯(cuò)：蛋白質(zhì)的變性是蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的破壞，這是由于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定的作用力次級(jí)鍵被破壞所造成的，但變

45、性不引起多肽鏈的降解，即肽鏈不斷裂。11對(duì)：有些蛋白質(zhì)是由一條多肽鏈構(gòu)成的，只具有三級(jí)結(jié)構(gòu)，不具有四級(jí)結(jié)構(gòu)，如肌紅蛋白。12對(duì)：血紅蛋白是由4個(gè)亞基組成的具有4級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，當(dāng)血紅蛋白的一個(gè)亞基與氧結(jié)合后可加速其它亞基與氧的結(jié)合，所以具有變構(gòu)效應(yīng)。肌紅蛋白是僅有一條多肽鏈的蛋白質(zhì)，具有三級(jí)結(jié)構(gòu)，不具有四級(jí)結(jié)構(gòu)，所以在與氧的結(jié)合過(guò)程中不表現(xiàn)出變構(gòu)效應(yīng)。13錯(cuò)：Edman降解法是多肽鏈N端氨基酸殘基被苯異硫氫酸酯修飾，然后從多肽鏈上切下修飾的殘基，經(jīng)層析鑒定可知N端氨基酸的種類(lèi)，而余下的多肽鏈仍為一條完整的多肽鏈，被回收后可繼續(xù)進(jìn)行下一輪Edman反應(yīng)，測(cè)定N末端第二個(gè)氨基酸。反應(yīng)重復(fù)多次就可連

46、續(xù)測(cè)出多肽鏈的氨基酸順序。FDNB法（Sanger反應(yīng)）是多肽鏈N末端氨基酸與FDNB（2,4-二硝基氟苯）反應(yīng)生成二硝基苯衍生物（DNP-蛋白），然后將其進(jìn)行酸水解，打斷所有肽鍵，N末端氨基酸與二硝基苯基結(jié)合牢固，不易被酸水解。水解產(chǎn)物為黃色的N端DNP-氨基酸和各種游離氨基酸。將DNP-氨基酸抽提出來(lái)并進(jìn)行鑒定可知N端氨基酸的種類(lèi)，但不能測(cè)出其后氨基酸的序列。14對(duì)：大多數(shù)氨基酸的-碳原子上都有一個(gè)自由氨基和一個(gè)自由羧基，但脯氨酸和羥脯氨酸的-碳原子上連接的氨基氮與側(cè)鏈的末端碳共價(jià)結(jié)合形成環(huán)式結(jié)構(gòu)，所以不是自由氨基。15對(duì)：蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的大分子，有些氨基酸的R側(cè)鏈具有可解離基團(tuán)，如

47、羧基、氨基、咪唑基等等。這些基團(tuán)有的可釋放H+ ,有的可接受H+  ,所以使得蛋白質(zhì)分子即是酸又是堿，是兩性電解質(zhì)。蛋白質(zhì)分子中可解離R基團(tuán)的種類(lèi)和數(shù)量決定了蛋白質(zhì)提供和接受H+ 的能力，即決定了它的酸堿性質(zhì)。16對(duì)：在具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)分子中，每個(gè)具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈?zhǔn)且粋€(gè)亞基。17錯(cuò)：具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的物質(zhì)才具有類(lèi)似于雙縮脲的結(jié)構(gòu)，具有雙縮脲反應(yīng)，而二肽只具有一個(gè)肽鍵，所以不具有雙縮脲反應(yīng)。18錯(cuò)：二硫鍵是由兩個(gè)半胱氨酸的巰基脫氫氧化而形成的，所以?xún)蓚€(gè)半胱氨酸只能形成一個(gè)二硫鍵。19對(duì)：鹽析引起的蛋白質(zhì)沉淀是由于大量的中性鹽破壞了蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定因素（蛋白質(zhì)分子表面的水化

48、膜及所帶同性電荷互相排斥），從而使蛋白質(zhì)溶解度降低并沉淀，但并未破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，所以不引起變性。根據(jù)不同蛋白質(zhì)鹽析所需的鹽飽和度分段鹽析可將蛋白質(zhì)進(jìn)行分離和純化。20錯(cuò)：蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)包括二級(jí)結(jié)構(gòu)、三級(jí)結(jié)構(gòu)和四級(jí)結(jié)構(gòu)三個(gè)層次，三級(jí)結(jié)構(gòu)只是其中一個(gè)層次。21錯(cuò)：維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力有氫鍵、離子鍵、疏水鍵、范德華力以及二硫鍵，其中最重要的是疏水鍵。22錯(cuò)：具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，只有所有的亞基以特定的適當(dāng)方式組裝在一起時(shí)才具有生物活性，缺少一個(gè)亞基或單獨(dú)一個(gè)亞基存在時(shí)都不具有生物活性。23錯(cuò)：蛋白質(zhì)變性是由于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定的作用力（次級(jí)鍵和而硫鍵）被破壞從而使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)被破壞并山個(gè)喪失生物活性的現(xiàn)象。次級(jí)鍵被破壞以后，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)松散，原來(lái)聚集在分子內(nèi)部的疏水性氨基酸側(cè)鏈伸向外部，減弱了蛋白質(zhì)分子與水分子的相互作用，因而使溶解度將低。24錯(cuò)：蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是由鏈內(nèi)氫鍵維持的，如-螺旋結(jié)構(gòu)和-折疊結(jié)構(gòu)中的氫鍵均起到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的作用。但并非肽鏈中所有的肽鍵都參與氫鍵的形成，如脯氨酸與相鄰氨基酸形成的肽鍵，以及