核酸適配體在治療腫瘤中的的作用

1、核酸適配體在治療腫瘤中的的作用 江西理工大學(xué) 鄒濤摘要：核酸適配體是一類能夠特異性地和靶物質(zhì)結(jié)合的寡核苷酸序列。它可作用于蛋白質(zhì)、金屬離子、小分子化合物、細(xì)胞膜表面受體等靶標(biāo)。該寡核苷酸序列可以是RNA也可以是DNA，較其他識別分子而言，適配體具有性質(zhì)穩(wěn)定、易合成、易標(biāo)記、分子量較小和目標(biāo)分子廣泛等優(yōu)勢。其結(jié)合能力可與抗體相當(dāng)甚至更強(qiáng), 并可結(jié)合各種藥物及載體構(gòu)建多元復(fù)合靶向給藥系統(tǒng)用于腫瘤靶向治療, 在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域引起了極大的關(guān)注.。關(guān)鍵詞：核酸適配體；腫瘤治療；量子點(diǎn)1990年，Ellington與Szostak及Tuerk與Gold篩選出了能與T4 DNA聚合酶高親和力和特異性結(jié)合的隨機(jī)

2、寡核苷酸，并命名為核酸適配體(aptamer,Apt)，該篩選方法被命名為指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)(SELEX)，原理是首先構(gòu)建容量巨大的隨機(jī)寡核苷酸序列庫，然后經(jīng)過多輪結(jié)合和洗脫，從中篩選得到能夠和靶標(biāo)物質(zhì)高親和力結(jié)合的寡核苷酸。核酸適配體是通過折疊形成特定空間結(jié)構(gòu)而與靶標(biāo)結(jié)合，其親和力可與抗體相當(dāng)，親和常數(shù)(Kd)可達(dá)納摩爾或皮摩爾水平。近年來，核酸適配體受到科學(xué)家的廣泛關(guān)注，由于其分子量較小、可化學(xué)合成、生物相容性好等優(yōu)點(diǎn)，其在基礎(chǔ)、臨床、藥物開發(fā)中的研究不斷增多，越來越多的針對生命活動中重要分子的適配體被篩選出來，各種基于核酸適配體的分析方法和技術(shù)也有報(bào)道，核酸適配體在生物醫(yī)學(xué)、疾病

3、診療領(lǐng)域已顯示出廣闊的應(yīng)用前景。靶向配體在抗腫瘤藥物靶向傳遞方面有很大的應(yīng)用潛能，其對靶分子結(jié)合的選擇性可賦予抗癌藥物靶向特異性，同時(shí)增加藥物在病變組織內(nèi)的富集。核酸適配體可體外合成且易于修飾，同時(shí)因其帶負(fù)電荷，在體循環(huán)中很少參加非特異性相互作用。它們對靶物質(zhì)可高親和力并特異性地結(jié)合，使其具有高的穿透性?？鼓[瘤藥物一般都是在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，提高藥物攝取量是其有效性的關(guān)鍵。 納米粒子能通過細(xì)胞內(nèi)吞途徑進(jìn)入細(xì)胞，如果將核酸適配體連接到納米粒子表面， 藥物靶向腫瘤細(xì)胞后，可介導(dǎo)內(nèi)吞發(fā)生，有利于提高藥物攝取量，這種給藥方式成為目前研究的熱點(diǎn)。以下綜述了核酸適配體在腫瘤靶向治療中的研究進(jìn)展。1 腫瘤標(biāo)志

4、物 腫瘤標(biāo)志物(Tumor Marker)是反映腫瘤存在的化學(xué)類物質(zhì)。它們或不存在于正常成人組織而僅見于胚胎組織，或在腫瘤組織中的含量大大超過在正常組織里的含量，它們的存在或量變可以提示腫瘤的性質(zhì)，借以了解腫瘤的組織發(fā)生、細(xì)胞分化、細(xì)胞功能，以幫助腫瘤的診斷、分類、預(yù)后判斷以及治療指導(dǎo)。利用它的這一特性，可以篩選出某一腫瘤標(biāo)志物的特異性適配體，從而靶向腫瘤細(xì)胞，達(dá)到診斷和治療的目的。1.1甲胎蛋白 甲胎蛋白（AFP）是肝細(xì)胞癌定性診斷中最重要的血清腫瘤標(biāo)志物。利用SELEX技術(shù)篩選出了-AFP特異性的RNA適配體，并發(fā)現(xiàn)其適配體能下調(diào)AFP誘導(dǎo)的細(xì)胞中原癌基因的表達(dá)。在AFP相關(guān)的肝

5、癌中，這特異性的適配體能夠作為有效的診斷或者治療藥物。AFP的異質(zhì)體AFP-L3是肝細(xì)胞癌特異性蛋白，對早期肝癌的診斷、發(fā)生預(yù)警、療效及預(yù)后判斷均優(yōu)于AFP。 1.2 前列腺特異性抗原和前列腺特異性膜抗原 前列腺特異性抗原（PSA）在正常生理?xiàng)l件下，主要局限于前列腺組織內(nèi)，在血清中濃度很低；當(dāng)前列腺病變時(shí)，血清中PSA濃度升高。血清PSA已經(jīng)被廣泛用于前列腺癌的診斷、分期及治療后監(jiān)測，是前列腺癌早期篩查的重要指標(biāo)。Savory等篩選得到了較于RNA適配體穩(wěn)定性更高的DNA適配體，其中適配體PSap4#5對PSA的結(jié)合力最高。Chen等構(gòu)建了適配體PSap4#5與金納米復(fù)合物，被DNA適配體修飾

6、的金納米不能聚集。而存在PSA時(shí)，適配體與PSA結(jié)合，使金納米聚集成較大的粒子，共振光強(qiáng)度增加，利用共振光散射光譜分析來檢測血液樣本中的PSA。 前列腺特異性膜抗原（PSMA）是一種較前列腺特異性抗原更加敏感和特異的前列腺癌腫瘤標(biāo)志物，其在前列腺癌和多種實(shí)體瘤新形成的血管中會過度表達(dá)，而在正常新生血管中無表達(dá)。2002年，PSMA的特異性適配體A10第一次報(bào)道出來，這些適配體能像抑制劑一樣用于臨床，也可修飾后靶向到前列腺癌細(xì)胞，用于診斷和治療。Cheng等用聚乳酸-羥基乙酸共聚物包裹紫杉醇，再與適配體A10結(jié)合，利用A10對PSMA的特異親和性，將藥物運(yùn)送到前列腺癌細(xì)胞，達(dá)到治療的目的。Min

7、等設(shè)了一種通過鏈霉親和素相連的雙適配體復(fù)合物，即能特異性結(jié)合PSMA（）前列腺癌細(xì)胞的DUP-1多肽適配體。將阿霉素（DOX）加載到A10 RNA適配體的莖干區(qū)域，使阿霉素能被運(yùn)輸?shù)絇SMA細(xì)胞，而且能誘導(dǎo)各種類型前列腺癌細(xì)胞的凋亡。 1.3 黏蛋白1 黏蛋白1（MUC1）是一種型跨膜蛋白，在多種腫瘤中，MUC1異常表達(dá)。Tan等人以MUC1的DNA適配體（Apt）作為載體，構(gòu)建了DOX-Apt復(fù)合物，將DOX靶向到MUC1（+）乳腺癌細(xì)胞系MCF-7。DOX-Apt復(fù)合物經(jīng)PEG修飾后，既增加了對MCF -7細(xì)胞的特異性殺傷作用又增加了正常細(xì)胞的存活率，無顯著的細(xì)胞毒性影響。另有文獻(xiàn)報(bào)道將紫

8、杉醇（PTX）與MUC1適配體共價(jià)結(jié)合到PLGA納米材料表面，構(gòu)建了適配體-納米粒子-紫杉醇復(fù)合物。與沒有適配體的紫杉醇-納米粒子復(fù)合物相比，前者增加了對MCF-7細(xì)胞的藥物運(yùn)輸作用和細(xì)胞毒性。 將MUC1適配體的cDNA、適配體及QDs組裝到金電極表面，構(gòu)建成一種新型的競爭電化學(xué)細(xì)胞傳感器來識別和檢測腫瘤細(xì)胞。當(dāng)靶細(xì)胞存在的時(shí)候，細(xì)胞表面過表達(dá)的MUC1能與cDNA競爭性結(jié)合配體，導(dǎo)致cDNA和適配體組成的雙鏈DNA變性，從電極上釋放出Apt-QDs復(fù)合物。用電化學(xué)溶出法測量QDs離開電極后的Cd離子濃度，以此來檢測靶細(xì)胞的存在。通過QDs上的熒光還可以清楚的觀察到適配體對靶細(xì)胞的識別。 1

9、.4 肌腱蛋白C 肌腱蛋白C是一種細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白，在心臟和動脈損傷、腫瘤血管生成和轉(zhuǎn)移、調(diào)節(jié)干細(xì)胞的行為中有重要作用，在多數(shù)實(shí)體瘤中高效表達(dá)。Hicke等篩選出了肌腱蛋白C的RNA適配體TTA1。TTA1能被腫瘤快速攝取，而在血液和其他非靶向組織中快速清除，用放射性核素標(biāo)記后，能用于腫瘤成像。Daniels等篩選出了肌腱蛋白C的DNA適配體GBI-10。Chen等將GBI-10共價(jià)結(jié)合到量子點(diǎn)（QDs）表面，構(gòu)建成新的熒光QD-Apt探針，能識別膠質(zhì)瘤細(xì)胞表面的肌腱蛋白C，從而能方便的在體外對膠質(zhì)瘤進(jìn)行診斷分析。 1.5 癌胚抗原癌胚抗原（CEA）是從結(jié)腸腺和胎兒腸中提取出來的腫瘤標(biāo)志物，逐

10、漸在其他胃腸道腫瘤、肺癌、乳腺癌以及胰腺癌等腫瘤中檢測到，已經(jīng)廣泛用于臨床研究。Wang等篩選出了能特異性結(jié)合人癌胚抗原的DNA適配體，為腫瘤的診斷與成像提供了新思路。 2 適配體與藥物結(jié)合 2.1 非共價(jià)結(jié)合 將化療藥物嵌入核酸適配體是一種簡單而有效的靶向遞藥方式。這種嵌入條件通常是溫和的，且不需要對藥物或配體進(jìn)行任何化學(xué)修飾，藥物和核酸適配體都能保持生物活性且能達(dá)到高的載藥量，這種結(jié)合方式中的核酸適配體既是靶向配體又是藥物載體。阿霉素(Dox)是一種細(xì)胞毒類藥物，因其具有平面的四環(huán)結(jié)構(gòu)， 從而可以嵌入DNA相鄰堿基對之間，研究者利用它的特性，將其嵌入核酸適配體， 進(jìn)而運(yùn)送到腫瘤部位。Bag

11、alkot等人將Dox嵌入到核酸適配體A10二級結(jié)構(gòu)形成的雙鏈中，以此來介導(dǎo)Dox靶向腫瘤部位，由于這種結(jié)合是物理的相互作用， Dox 和A10的化學(xué)結(jié)構(gòu)都沒有發(fā)生改變，因此不會降低藥效。Shieh等人通過簡單嵌入光敏劑TMPyP4到AS1411核酸適配體中，用于靶向乳腺癌MCF-7細(xì)胞，AS1411 是一個(gè)富含鳥苷酸的含有26個(gè)堿基的DNA寡核苷酸，它可形成G-四鏈體結(jié)構(gòu)。 研究結(jié)果表明,，AS1411- TMPyP4復(fù)合物對MCF-7細(xì)胞的光毒性約是TMPyP4的2 倍，且對正常上皮細(xì)胞(M10)的光毒性只有TMPyP4 的1/2。2.2 共價(jià)結(jié)合 藥物可經(jīng)化學(xué)修飾形成穩(wěn)定的酯、胺和二硫鍵

12、結(jié)合至核酸適配體上或通過連接子共價(jià)結(jié)合。這些共價(jià)結(jié)合相對穩(wěn)定，使得藥物輸送到特定的靶點(diǎn)之前不會被釋放。Huang等人將Dox化學(xué)共價(jià)結(jié)合到DNA核酸適配體(sgc8c)上，sgc8c能特異性靶向人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)中的酪氨酸蛋白激酶7(PTK)，與Dox化學(xué)偶聯(lián)形成一個(gè)酸不穩(wěn)定腙鍵，在特異性地靶向CCRF-CEM細(xì)胞后，偶聯(lián)物被內(nèi)吞方式攝取到腫瘤細(xì)胞的內(nèi)涵體內(nèi)，腙鍵在低pH下斷裂從而釋放藥物，sgc8c-Dox 復(fù)合物CCRF-CEM細(xì)胞的毒性為非靶向細(xì)胞的6.7倍。Boyacioglu等人則篩選出了新的靶向PSMA的核酸適配體(SZTI01)，含有48個(gè)核苷酸，

13、他們將其連接成二聚體復(fù)合物(DACs)，復(fù)合物富含CpG位點(diǎn)，并通過可逆連接子共價(jià)連接Dox形成DAC-Dox復(fù)合物，靶向PSMA高表達(dá)的前列腺癌細(xì)胞(C4-2)產(chǎn)生細(xì)胞毒性，而對PSMA低表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)毒性很低。 2.3 適配體偶聯(lián)藥物載體 由于核酸適配體可經(jīng)化學(xué)合成，因此可在其末端修飾不同的化學(xué)基團(tuán)，使之與藥物載體連接，制備出不同功能的藥物傳遞系統(tǒng)。聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)是一種可降解的功能高分子有機(jī)化合物，具有無毒、良好的生物相容性和成囊、成膜性能，因其這些特性，成為與核酸適配體結(jié)合的重要載體。PLGA納米粒經(jīng)過聚乙二醇(PEG)修飾后可顯著降低其體內(nèi)清除率并

14、增強(qiáng)穿透性。PEG 末端經(jīng)羧基修飾，可以進(jìn)一步和核酸適配體結(jié)合。Farokhzad等人及Cheng等人利用具有羧基末端的PLGA-b-PEG-COOH聚合物包裹多西他賽(Dtxl)制備納米粒子，再與2-氟嘧啶修飾的A10通過酰胺鍵共價(jià)結(jié)合，用于靶向傳遞藥物。體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，其和LNCaP細(xì)胞孵育2h后，相比未修飾核酸適配體的納米粒子細(xì)胞毒性瘤內(nèi)注射也可以觀察到抗腫瘤作用和毒性降低。2008年, Dhar等人合成了PLGA-b-PEG包載順鉑Pt()的納米粒子，通過將納米粒表面PEG羧基末端偶聯(lián)A10靶向LNCaP細(xì)胞，該系統(tǒng)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定并可將順鉑以緩釋的方式釋放。納米粒對LNCaP細(xì)胞的半數(shù)抑制率濃

15、度(IC50)值顯著低于對PC-3細(xì)胞的IC50值，未結(jié)合適配體的納米粒子對LNCaP細(xì)胞的IC50為適配體修飾納米粒子的4.3倍， 說明結(jié)合適配體能提高療效。后來的體內(nèi)研究表明，其在血液中的滯留時(shí)間延長， 并且腎臟鉑堆積降低。A10 功能化的PLGA-PEG納米粒子順鉑用量只有普通順鉑治療組的0.3倍，表明其在治療前列腺腫瘤中有顯著效果。Kurosaki 等人將質(zhì)粒DNA (pDNA)和聚乙烯亞胺(PEI)形成復(fù)合物，然后再和MUC1適配體偶聯(lián)用于靶向人肺癌(A549)細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)其比非靶向的納米粒子細(xì)胞攝取作用更顯著。Kim 等人發(fā)現(xiàn)，支鏈聚乙烯亞胺(PEI)經(jīng)PEG修飾可作為抗Bcl-xL

16、基因的小發(fā)夾RNA(shRNA)的載體，進(jìn)一步修飾能靶向PSMA的RNA核酸適配體，同時(shí)將Dox插入到適配體形成(shRNA/PEI-PEG- Apt/Dox)共遞送復(fù)合物，其IC50值低于(shRNA/脂質(zhì)體+Dox)的簡單混合物約17倍，表明核酸適配體介導(dǎo)的共遞送抗癌藥物和shRNA 能提高對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。該類遞藥系統(tǒng)合成簡單，可生物降解，細(xì)胞毒性低，可攜帶藥物種類多，是目前藥物載體主要的研究方向。 3 適配體與量子點(diǎn)結(jié)合 量子點(diǎn)(QD)是一種半導(dǎo)體納米晶體，它有著獨(dú)特的光學(xué)性質(zhì)，在窄發(fā)光譜上有寬吸收、高量子產(chǎn)率、熒光不易漂白、耐化學(xué)降解作用等特點(diǎn)，在藥物傳遞系統(tǒng)中， QD 則是一

17、種新型的納米給藥系統(tǒng)，功能化的量子點(diǎn)能被抗體、小分子、多肽、適配體等生物分子所修飾，在診斷和治療方面運(yùn)用廣泛。Savla等人合成了QD和DNA適配體復(fù)合物來靶向MUC1過度表達(dá)的細(xì)胞，該復(fù)合物是由pH敏感腙鍵鍵合的方法連接Dox與QD，在中性和堿性條件下穩(wěn)定，在腫瘤細(xì)胞內(nèi)酸性環(huán)境快速水解釋放藥物，從而達(dá)到治療卵巢癌的作用。這種復(fù)合物在體內(nèi)血液循環(huán)比游離Dox有更好的穩(wěn)定性, 且對多藥耐藥(MDR)細(xì)胞有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性。這項(xiàng)研究也為QD在藥物傳遞系統(tǒng)中的利用提供了新的領(lǐng)域。在人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞膜表面含有細(xì)胞外基質(zhì)蛋白-腱生蛋白C，GBI-10能夠與其特異性結(jié)合.。Li 等人使用了樹枝狀聚合物對量

18、子點(diǎn)進(jìn)行改性修飾，提高其在水溶液中的溶解度。樹枝狀聚合物修飾的量子點(diǎn)共價(jià)結(jié)合DNA適配體，可特異性地靶向人腦膠質(zhì)瘤(U251)細(xì)胞。湯進(jìn)錄等利用作為腫瘤細(xì)胞識別分子的核酸適配體的高特異性和高親和力以及作為信號報(bào)告單元的近紅外量子點(diǎn)（QDs）的高熒光發(fā)射強(qiáng)度和低生物背景干擾特性構(gòu)建了一種基于核酸適配體功能化近紅外QDs的新型納米熒光探針，并進(jìn)一步結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)在單細(xì)胞熒光分析方面的高通量 、 簡便和快速等優(yōu)勢，建立了一種檢測白血病細(xì)胞的新方法。以基 于Cell-SELEX技術(shù)針對CCRF-CEM人急性白血病細(xì)胞篩選的特異性Aptamer sgc8c為模型 ， 構(gòu)建 了sgc8c-QDs探針，其僅

19、需與細(xì)胞樣品培育30m i n即可實(shí)現(xiàn)對緩沖液和血清中靶細(xì)胞的簡單、快速和高特異性檢測。運(yùn)用的檢測原理是，以對靶細(xì)胞具有特異性結(jié)合功能的生物素化Aptamer為識別單元，以具有近紅外熒光發(fā)射的鏈霉親和素化QDs為信號單元，通過”生物素-親和素”特異性相互作用構(gòu)建了Apt-QDs探針。該探針表面的Aptamer可與靶細(xì)胞表面的特定受體分子發(fā)生選擇性結(jié)合，將具有高熒光發(fā)射強(qiáng)度的QDs帶到靶細(xì)胞表面，采用流式細(xì)胞儀對單個(gè)細(xì)胞熒光信號進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，即可實(shí)現(xiàn)靶細(xì)胞的有效檢測。段諾等將核酸適配體識別技術(shù)與高靈敏熒光分析方法結(jié)合，建立了檢測 O T A 的新方法，基于微孔板上固定的核酸適配子與目標(biāo)物質(zhì)OTA

20、結(jié)合時(shí)構(gòu)象發(fā)生變化,導(dǎo)致預(yù)先與其互補(bǔ)雜交的 FA M標(biāo)記短鏈 DN A 解 離，引起熒光信號發(fā)生變化，據(jù)此可實(shí)現(xiàn)對OTA的 定量檢測。 4 核酸適配體的熒光信號檢測由于核酸適配體體外合成能夠根據(jù)實(shí)際需要對其進(jìn)行化學(xué)修飾，故可設(shè)計(jì)在核酸適配體不同部位修飾熒光物質(zhì)，經(jīng)修飾的核酸適配體與靶物質(zhì)結(jié)合后熒光物質(zhì)發(fā)出的熒光信號會發(fā)生變化，實(shí)現(xiàn)靶物質(zhì)的檢測。如在適配體中部適當(dāng)?shù)奈恢眯揎棢晒馕镔|(zhì)( 如F C M，熒光胺 )，靶物質(zhì)的結(jié)合引起熒光基團(tuán)周圍環(huán)境的改變，導(dǎo)致發(fā)射光的強(qiáng)度發(fā)生改變，產(chǎn)生響應(yīng)信號，實(shí)現(xiàn)靶物質(zhì)分子的檢測。末端修飾熒光基團(tuán)的核酸適配體，與靶物質(zhì)結(jié)合后分子質(zhì)量增大，熒光基團(tuán)的旋轉(zhuǎn)速度急劇變慢，

21、導(dǎo)致熒光的各向異性發(fā)生改變。利用這種方法可以設(shè)計(jì)核酸適配體 熒光探針，實(shí)現(xiàn)均相中對適配體與目標(biāo)分子的相互作用進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測，并且能夠高靈敏、高選擇地定量檢測目標(biāo)物質(zhì)。就以凝血酶的檢測為例，目前，應(yīng)用核酸適配體熒光檢測蛋白主要是基于適配體與目標(biāo)蛋白作用后產(chǎn)生的熒光偏振度或熒光強(qiáng)度的改變來檢測蛋白.，核酸適配體熒光檢測凝血酶也主要采用這兩種方式，由于適配體與核酸作用結(jié)合后其分子量發(fā)生變化，從而引起偏振角度變化，用其檢測蛋白，其信號變化范圍較小，線性范圍較窄，并且熒光偏振對非均相溶液的測定存在一定的局限性。也有人設(shè)計(jì)分子信標(biāo)或分子開關(guān)與核酸適配體作用，其熒光強(qiáng)度在核酸適配體與目標(biāo)蛋白結(jié)合前后產(chǎn)生變化（

22、主要是由于分子間距離變化產(chǎn)生的熒光猝滅或是分子開關(guān)微環(huán)境變化產(chǎn)生的自猝滅作用），通過熒光強(qiáng)度的改變量來測定蛋白。徒永華等將一條5'端帶氨基修飾核酸適配體通過酰胺化反應(yīng)固定于磁性納米顆粒上，利用核酸適配體與凝血酶的強(qiáng)結(jié)合作用捕捉凝血酶分子，通過磁性分離技術(shù)去除雜蛋白干擾。另一條帶熒光標(biāo)記的核酸適配體結(jié)合凝血酶的另一位點(diǎn)，用以測定凝血酶的量。其設(shè)計(jì)的類似三明治結(jié)構(gòu)的傳感器，以凝血酶的兩條核酸適配體為目標(biāo)分子識別元件，利用磁性納米顆粒的磁性分離作用消除了共存蛋白的非特異性吸附影響，在提高測定選擇性和專一性的同時(shí)，降低了熒光背景，提高了測定的靈敏度，采集到的熒光信號穩(wěn)定，滿足了微量分析的要求。

23、 5 前景與展望隨著核酸適配體在腫瘤靶向治療中的不斷研究，基于細(xì)胞的SELEX技術(shù)是以后的主要發(fā)展方向，構(gòu)建雙靶向或多靶向的遞藥系統(tǒng)，能提高抗腫瘤效果。將核酸適配體形成聚合物或多個(gè)核酸適配體構(gòu)建成納米器件再嵌入化療藥物，是比較新的遞藥思路。根據(jù)腫瘤的類型、藥物的性質(zhì)可以選擇合適的劑型。如何對核酸適配體進(jìn)行修飾以增加其穩(wěn)定性，如何篩選具有更高親和力和新型廣譜腫瘤靶向性的核酸適配體，如何提高核酸適配體和藥物載體的跨膜性能，探討核酸適配體的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制及生物學(xué)效應(yīng)，研究其動物體內(nèi)的代謝動力學(xué)、體內(nèi)穩(wěn)定性、腫瘤靶向性等將是今后適配體在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究重點(diǎn)和熱點(diǎn)。目前大多數(shù)研究還處于基礎(chǔ)研究階段，要

24、把核酸適配體變成藥物用于臨床還需要進(jìn)一步確定其有效性和安全性。核酸適配體介導(dǎo)的靶向給藥系統(tǒng)雖然不夠完善，但隨著研究的更加深入和技術(shù)的不斷完善，核酸適配體將會在疾病的治療中發(fā)揮重要的作用且具有廣闊的發(fā)展空間。參考文獻(xiàn)1. 徒永華；程圭芳；林莉；鄭靜；吳自榮；何品剛；方禹之 基于核酸適配體的新型熒光納米生物傳感器用于凝血酶的測定 2006（12）2. 李瑜；王源升；于斌；張靜秋；董瑞 核酸適配體在光生化檢測中的應(yīng)用 2012（14）3. 段諾；吳世嘉；王周平 核酸適配體識別-熒光法檢測赭曲霉素A 2011(39)4. 湯進(jìn)錄；石慧；何曉曉；王柯敏；李朵；顏律安；雷艷麗；劉劍波 核酸適配體功能化近紅

25、外量子點(diǎn)結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)快速檢測白血病細(xì)胞 20145. 劉珍寶；石依倩；陳長仁；段林花；王薪茹 核酸適配體在腫瘤靶向治療中應(yīng)用的研究進(jìn)展 2014（14）6. 李曉佩；楊良嶸；黃昆；李文松；孫西同；劉會洲 核酸適配體在生化分離及檢測領(lǐng)域中的進(jìn)展 20137. 謝海燕；陳薛釵；鄧玉林 核酸適配體及其在化學(xué)領(lǐng)域的相關(guān)應(yīng)用 2007（6）8. 呂彬 Cell-SELEX技術(shù)在腫瘤診治中的應(yīng)用進(jìn)展 20139. 趙娟；顧月清 核酸適配體在腫瘤診斷與治療中的研究進(jìn)展 2013（2）The role of Aptamer in the treatment of tumors Jiangxi university of science and technology zoutao