2019年鮮凍肉的檢驗(yàn)程序

1、、使用標(biāo)準(zhǔn)GB 16869-2005GB 2707-2005GB 4789.1-2010GB 4789.2-2010GB 4789.3-2010GB 4789.17-2003GB/T 5009.17-2003GB/T 5009.44-2003鮮凍肉的檢驗(yàn)程序編號:、檢驗(yàn)產(chǎn)品鮮凍豬肉、牛肉、兔肉、鵝肉、鴨肉、雞肉鮮、凍禽產(chǎn)品鮮（凍）畜肉衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 總則食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)肉與肉制品檢驗(yàn)食品中總汞的測定方法肉與肉制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法二、檢驗(yàn)流程四、樣品的米取1、現(xiàn)場采樣用品1.1、米樣箱。1.2、帶蓋搪瓷盤,1.3 、溫度計(jì)

2、。1.4 、編號牌或蠟筆、紙。2、生肉及臟器檢樣：如系屠宰場宰后的畜肉， 可于開腔后，用無菌刀采取兩腿內(nèi)側(cè)肌肉 150克（或 劈半后采取兩側(cè)背最長肌各 150 克） ；如系冷藏或售賣之生肉，可用無菌刀取腿 肉或其他部位之肌肉 250 克。檢樣采取后，放入滅菌容器內(nèi)，立即送檢；如條件 不許可時(shí)，最好不超過 3 小時(shí)，送檢樣時(shí)應(yīng)注意冷藏，不得加人任何防腐劑。檢 樣送往化檢驗(yàn)室應(yīng)立即檢驗(yàn)或放置冰箱暫存。3. 禽類（包括家禽和野禽） ：鮮、凍家禽采取整只， 放滅菌容器內(nèi)。 帶毛野禽可放清潔容器內(nèi)， 立即送檢。 以下處理同 2。五、菌落總數(shù)測定： GB/T 4789.2-20101、原理： 食品檢樣經(jīng)過

3、處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間等）培 養(yǎng)后，所得每g （mL檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。2. 設(shè)備和材料 除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：2.1、 恒溫培養(yǎng)箱：36 °C± 1 °C, 30 °C± 1 °C。2.2、冰箱：2 C 5 C。2.3、恒溫水浴箱： 46 C±1 C。2.4 、天平：感量為 0.1 g 。2.5、均質(zhì)器。2.6、 無菌吸管：1 mL （具0.01 mL刻度）、10 mL （具0.1 mL刻度）或微量移 液器及吸頭。2.7、無菌錐形瓶：容量 250 mL、

4、500 mL。2.8、無菌培養(yǎng)皿：直徑 90 mm。2.9、PH計(jì)或pH比色管或精密pH試紙。2.10、放大鏡或 /和菌落計(jì)數(shù)器。3、培養(yǎng)基和試劑3.1 、平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基：3.1.1 、成分：胰蛋白胨5.0g ;酵母浸膏2.5g ;葡萄糖1.0g ;瓊脂15.0g ;蒸餾水1000 mL; pH 7.0±0.2。3.1.2 制法：將上述成分加于蒸餾水中，煮沸溶解，調(diào)節(jié) pH,分裝試管或錐形瓶，121 C 高壓滅菌 15min。3.2 、磷酸鹽緩沖液3.2.1 、成分：磷酸二氫鉀（KHPQ） 34.0g ;蒸餾水 500mL pH 7.2。3.2.3 、制法：貯存液：稱取34.0g

5、的磷酸二氫鉀溶于500m蒸餾水中，用大約175 mL的 1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH,用蒸餾水稀釋至1000m后貯存于冰箱。稀釋液：取貯存液1.25mL,用蒸餾水稀釋至1000mL分裝于適宜容器中，121C 高壓滅菌 15min。3.3、無菌生理鹽水331、成分：氯化鈉8.5g ;蒸餾水1000mL3.3.2、制法“稱取8.5 g氯化鈉溶于1000m蒸餾水中，121C高壓滅菌15 min4、檢驗(yàn)程序：商落總救的檢驗(yàn)程序見I¥l n醫(yī)1歯宦總數(shù)眈栓撿程序5、操作步驟5.1、樣品的稀釋5.1.1、稱取25g樣品置盛有225m磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min1

6、0000r/min均質(zhì)1min2min,或放入盛有225mL稀釋液的無菌均質(zhì) 袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1mi n2mi n,制成1:10的樣品勻液。5.1.2、用1m無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL沿管壁緩慢注于盛 有9m稀釋液的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成1:100的樣品勻液。5.1.3 、按5.1.2操作程序，制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換 用1次1mL無菌吸管或吸頭。5.1.4、根據(jù)對樣品污染狀況的估計(jì)，選擇2個(gè)3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液（液 體樣品可包括原液），在進(jìn)行10倍遞增稀釋時(shí)，

7、吸取1mL羊品勻液于無菌平皿內(nèi)， 每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取 1m空白稀釋液加入兩個(gè)無菌平皿內(nèi)作 空白對照。5.1.5、及時(shí)將15mL-20mL冷卻至46C的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于 46C ± 1C恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。5.2、培養(yǎng)5.2.1、待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36C± 1C培養(yǎng)48 h± 2 h。水產(chǎn)品30C± 1C 培養(yǎng) 72 h ± 3 h。5.2.2、如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時(shí)，可在凝固后 的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約 4 mL，凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按5.2

8、.1條件 進(jìn)行培養(yǎng)。5.3、菌落計(jì)數(shù)：可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落 數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位（colony-forming units，CFU表示。5.3.1、選取菌落數(shù)在30CFU-300CFU之間、無蔓延菌落生長的平板計(jì)數(shù)菌落總 數(shù)。低于30CFU的平板記錄具體菌落數(shù)，大于300 CFU的可記錄為多不可計(jì)。每 個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。5.3.2、其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以 2,代表一個(gè)平板

9、菌落數(shù)。5.3.3、當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè) 菌落計(jì)數(shù)&結(jié)果與報(bào)告6.1、菌落總數(shù)的計(jì)算方法。6.1.1、若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌 落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每 g （mL樣品中菌落總數(shù) 結(jié)果。6.1.2、 若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，按公式（1）計(jì)式中：N樣品中菌落數(shù)；工C平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和;n1第一稀釋度（低稀釋倍數(shù)）平板個(gè)數(shù)；n2第二稀釋度（高稀釋倍數(shù)）平板個(gè)數(shù)；d稀釋因子（第一稀釋度）。1:100 （第一毬稀廈）1:1000第二鵬秣度亍Tl

10、 fl33. 35232 + 244 + 33 + 35"(2 + (0 Jx2)xl0-*=丄匚=247270 022上述數(shù)撫按?2二盤字輕紋疔.衣示為®煩或工"IL=6.1.3、若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于 300CFU則對稀釋度最高的平板進(jìn) 行計(jì)數(shù)，其他平板可記錄為多不可計(jì)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。6.1.4、若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30CFU則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落 數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。6.1.5、 若所有稀釋度（包括液體樣品原液）平板均無菌落生長，則以小于1乘 以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。6.1.6、若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在 30

11、CFU-300CFU之間，其中一部分小 于30 CFU或大于300CF時(shí)，則以最接近30CFU或300CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋 倍數(shù)計(jì)算。6.2菌落總數(shù)的報(bào)告6.2.1、菌落數(shù)小于100CF時(shí)，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報(bào)告。6.2.2、菌落數(shù)大于或等于100CFU時(shí)，第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后， 取前2位數(shù)字，后面用0代替位數(shù)；也可用10的指數(shù)形式來表示，按“四舍五入” 原則修約后，采用兩位有效數(shù)字。6.2.3、若所有平板上為蔓延菌落而無法計(jì)數(shù)，則報(bào)告菌落蔓延。6.2.4、若空白對照上有菌落生長，則此次檢測結(jié)果無效。6.2.5、稱重取樣以CFU/g為單位報(bào)告，體積取樣以CFU

12、/m為單位報(bào)告7、報(bào)告稀釋度1:1001:10001:10000CFU/g平均值第一個(gè)樣品第二個(gè)樣品六、大腸菌群 GB 4789.3-2010大腸菌群MPI計(jì)數(shù)法1、原理:在一定培養(yǎng)條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽 胞桿菌。最可能數(shù)，MP基于泊松分布的一種間接計(jì)數(shù)方法。2、設(shè)備和材料：除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：2.1、恒溫培養(yǎng)箱：36C± 1 C。2.2、冰箱：2°C 5°C。2.3、恒溫水浴箱：46C± 1C。2.4、天平：感量0.1g。2.5、均質(zhì)器。2.6、無菌吸管：1 mL （具0.01 mL

13、刻度）、10 mL （具0.1 mL刻度）或微量移 液器及吸頭。2.7 、無菌錐形瓶：容量 500 mL。2.8、pH計(jì)或pH比色管或精密pH試紙。3、培養(yǎng)基和試劑3.1 、月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯3.1.1 、成分胰蛋白胨或胰酪胨20.0g ；氯化鈉5.0g ；乳糖5.0g ；磷酸氫二鉀（K2HPO2.75 g；磷酸二氫鉀（K2HPO）2.75g ；月桂基硫酸鈉0.1g ；蒸餾水1000mL pH 6.8 ±0.2 ；3.1.2 、制法：將上述成分溶解于蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH,分裝到有玻璃小倒管的試管中，每管 10mL 121 °C 高壓滅菌 15mi n。3.2、煌綠乳糖膽

14、鹽肉湯“3.2.1 、成分：蛋白胨 10.0g ;乳糖 10.0g ;牛膽粉（oxgall 或oxbile ）溶液 200mL 0.1%煌 綠水溶液 13.3mL;蒸餾水 800mL pH 7.2 ± 0.1 ;3.2.2 、制法：將蛋白胨、乳糖溶于約500m蒸餾水中，加入牛膽粉溶液200mL（將20.0g脫 水牛膽粉溶于200ml蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH至7.07.5 ），用蒸餾水稀釋到975mL調(diào) 節(jié)pH,再加入0.1%煌綠水溶液13.3mL，用蒸餾水補(bǔ)足到1000mL用棉花過濾后， 分裝到有玻璃小倒管的試管中，每管10mL 121C高壓滅菌15mi n。3.3、磷酸鹽緩沖液：3.3.

15、1 、成分：磷酸二氫鉀 （K2HPO4）34.0g ;蒸餾水 500mL; pH 7.2 。3.3.2 、制法：貯存液：稱取34.0g的磷酸二氫鉀溶于500m蒸餾水中，用大約175m的 1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH,用蒸餾水稀釋至1000m后貯存于冰箱。稀釋液：取貯存液1.25mL，用蒸餾水稀釋至1000mL分裝于適宜容器中，121C 高壓滅菌 15min。3.4、無菌生理鹽水：稱取8.5 g氯化鈉溶于1 000 mL蒸餾水中，121 C高壓滅菌15 min。3.5、無菌1 mol/L NaOH：稱取40g氫氧化鈉溶于1000m蒸餾水中，121C高壓滅菌15mi n。3.6、無菌1 mo

16、l/L HCl ：移取濃鹽酸90mL用蒸餾水稀釋至1000mL 121C高壓滅菌15min。4、檢驗(yàn)程序：大酚商框MP、汁數(shù)旳噲臉程序見閨【°T1 大XI計(jì)範(fàn)法他塗程應(yīng)5、操作步驟5.1、樣品的稀釋5.1.1、稱取25g樣品,放入盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi),8000r/min10000r/min 均質(zhì)1min2min,或放入盛有225mL磷酸鹽緩沖液 或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min2min,制成1:10的樣品 勻液。5.1.2、樣品勻液的pH值應(yīng)在6.57.5之間，必要時(shí)分別用1mol/L NaO或1mol/L HC調(diào)節(jié)。5.1.3、 用

17、1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL沿管壁緩緩注入9 mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液 面），振搖試管或換用1支1ml無菌吸管反復(fù)吹打，使其混合均勻，制成1:100的 樣品勻液。5.1.4、根據(jù)對樣品污染狀況的估計(jì)，按上述操作，依次制成十倍遞增系列稀釋 樣品勻液。每遞增稀釋1次，換用1支1mL無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣 品接種完畢，全過程不得超過15mi n。5.2、初發(fā)酵試驗(yàn)：每個(gè)樣品，選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液）， 每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯，每管接種1mL(如接種 量超

18、過1mL則用雙料LST肉湯)，36C± 1C培養(yǎng)24h±2 h,觀察倒管內(nèi)是否有氣 泡產(chǎn)生，24h±2h產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，如未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至48h±2h,產(chǎn)氣 者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。5.3、復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于煌綠乳糖膽鹽肉湯 (BGLB管中，36C± 1C培養(yǎng)48h± 2h，觀察產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣者，計(jì)為大腸菌群 陽性管。5.4、大腸菌群最可能數(shù)(MPN的報(bào)告按5.3確證的大腸菌群LST陽性管數(shù)，檢索MP表，報(bào)告每g ( mL樣品中大腸 菌群的MP值。表艮大場菌率赧可

19、覽數(shù)m袪案麥MPN95%可咚建10性曽裁MPN0.100010.001上限0.10OjOI0 001TK上隔000<!0-5*01-454200L3心0159A2z1:s8,?4401G10051124.21587940116.112183G298.7940匕06.21.2122318.79401.J0$.43.62Sa0o對46941003.60.17l&30I288.7LI0t0L7213IS302M17ISO102:3.638SI04191801107.413203L75172001111 13.6掃3I2120i?41<J12O:ME423I1160曲42011tj

20、4 5423Mj0931842013016454232IISOi742020O9.214抽4|221043001143 6423Mh £3邸1,000氣02204542iA30240421,00021015a.7421314601.M02L1X4 J4234 J211004,1()01227S.794iA-i>1 10'： I420注 h3E(mLh (WlOWl咼牛嗚妊童接沖管.注力袁內(nèi)新列檢桂量站改用g CmLk O.lmLlOOLmL)時(shí).農(nóng)內(nèi)10 SnMOOlmL)« 0.001 g(niL)H< 0.4001則憲內(nèi)栽寧離相哉埔高1(J倍”毘余類

21、推.6. 報(bào)告稀釋度11:1001:10001:10000 :CFU/g平均值第一個(gè)樣品第二個(gè)樣品七、感官檢驗(yàn)GB/T 5009.44-20031、組織形態(tài)、色澤、氣味將抽取的微生物檢驗(yàn)試驗(yàn)后的全部樣品，置于自然光或相當(dāng)于自然光的感 官。評定時(shí)，用觸覺鑒別組織形態(tài)，視覺鑒別色澤，嗅覺鑒別氣味。2、煮沸后肉湯的檢查稱取20g絞碎的試樣，置于200mL燒杯中，加入100mL水,用表面皿蓋上加 熱50E 60C，開蓋檢查氣味，繼續(xù)加熱煮沸 20min30min,檢查肉湯的氣 味, 滋味和透明度，以及脂肪的氣味和滋味，并參見衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。3、肉眼可見異物：用視覺鑒別，與鑒別組織狀態(tài)、色澤、氣味同時(shí)進(jìn)行。4

22、、報(bào)告項(xiàng)目鮮產(chǎn)品凍產(chǎn)品組織狀態(tài)色澤氣味加熱后肉湯淤血以淤血面積（S）計(jì)/cm2硬桿毛（長度超過12mm勺羽毛，或 直徑超過2mm勺羽毛根）異物注：1.鮮凍禽肉需做淤血和硬桿毛的感官檢驗(yàn)2.淤血面積指單一整禽，或單一分割肉禽的一片淤血面積。八、揮發(fā)性鹽基氮（半微量定氮法）GB/T 5009.44-20031、原理:揮發(fā)性鹽基氮是指動物性食品由于酶和細(xì)菌的作用。 在腐敗過程中，使蛋白 質(zhì)分解而產(chǎn)生氮以及胺類等堿性含氮物質(zhì)。 此類物質(zhì)具有揮發(fā)性，在堿性溶液中 蒸出來后，用標(biāo)準(zhǔn)酸溶液滴定計(jì)算含量。2、試劑:2.1、氧化鎂混懸液（10g/L）:稱取1.0g氧化鎂，加100mL水，振搖成混懸液。2.2、硼

23、酸吸收液（20g/L ）。2.3、鹽酸c（HCI）=0.010mol/L 或硫酸c（1/2H2SO4） =0.010mol/L 的標(biāo)準(zhǔn)滴定 溶液。2.4、甲基紅-乙醇指示劑（2g/L ）2.5、次甲基藍(lán)指示劑（1g/L ）。臨用時(shí)將上述兩種指示液等量混合為指示液。3、儀器：3.1、半微量定氮器。3.2、微量滴定管：最小分度0.01mL。4、分析步驟：4.1、試樣處理：將試樣除去脂肪、骨及腱后，絞碎攪勻，稱取10.0g,置于錐 形 瓶中，加100mL水，不時(shí)振搖，浸漬30min后過濾，濾液置冰箱備用。4.2、蒸餾滴定：將盛有10mL吸收液及5滴6滴混合指示液的錐形瓶置于冷凝 管下端，并使其下端插

24、入吸收液的液面下， 準(zhǔn)確吸取5.0mL上述試樣濾液于蒸餾 器反應(yīng)室內(nèi)，加5mL氧化鎂混懸液（10g/L）,迅速蓋塞，并加水以防漏氣，通入 蒸汽，進(jìn)行蒸餾，蒸餾5min即停止，吸收液用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.010mol/L ）或 硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，終點(diǎn)至紫色。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。5、結(jié)果結(jié)算：試樣中揮發(fā)性鹽基氮的含量按式（2）進(jìn)行計(jì)算。（V1-V2）X cx 14X=X 100 （ 2）mx 5/100式中：X-試樣中揮發(fā)性鹽基氮的含量，單位為毫克每百克（mg/100g）;V1-滴定用樣液消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，單位為毫升（ Ml）;V2-試劑空白消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，單位為毫升（ M

25、l）;C-鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的實(shí)際濃度，單位為摩爾每升（mol/L ）;14-與1.00mL鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c（HCI）=0.010mol/L 或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶 液c（1/2H2SO4） =0.010mol/L 相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)量，單位為毫克（mg;m-試劑質(zhì)量，單位為克（g）。計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。6精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算數(shù)平均值的10%7、實(shí)驗(yàn)記錄：V1V2CX平均值第一個(gè)樣品第二個(gè)樣品九、總汞的測定 GB/T 5009.17-2003二硫腙法1、原理:樣品經(jīng)消化后，汞離子在酸性溶液中可與雙硫腙生成橙色絡(luò)合物，溶于三氯佐烷，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2、試

26、劑與儀器：2.1、硝酸。2.2、硫酸。2.3、氨水。2.4、三氯甲烷：不應(yīng)含有氧化物。2.5、硫酸（1+35）:量取5m硫酸、緩緩倒入l5Oml水中，冷卻后加水至180ml。2.6、硫酸（1+19）:量取5ml硫酸，緩緩倒入90ml水中，冷卻后加水至98ml。2.7、鹽酸羥胺溶液（200g/L）：吹清潔空氣，可使含有的微量汞揮發(fā)除去。2.8、溴麝香草酚藍(lán)-乙醇溶液指示液（1g/L ）。2.9、二硫腙-三氯甲烷溶液（0.5g/L ），保存冰箱中，必要時(shí)用下述方法純化。稱取Q. 5詢躺二觴鳥干50 mL三甲斛M不鋪何用齡過桂于250汕分液斛 禮用尅（1+99）提取三次侮次100 m打桃輛用脫過加至

27、500 mb分胭斗中褐鹽嚴(yán)（1丄1） 調(diào)至嚴(yán)也緬紗的二朋用三斛熾取2爐3 SL耿20汕冶并三斛烷鳳用等耿就 兩慎棄去贈粘在竝桶上魅三亂甲灶劇的二躺狀針刪4秫備用成紘淀 時(shí)二蠱腺用20030）00汕三斛勰取三次冶并三斛鷄為二鹹歸汎2.10、二硫腙使用液：吸取I.OmL二硫腙溶液，加三氯甲烷至10mL混勻，用1cm 比色杯，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長 510 nm處測吸光度（A）,用式（3）算出 配制1OOmL二硫腙使用液（70%透光率）所需二硫腙溶液的毫升數(shù)（V）。兇二塑嘰（3）A A2.11、汞標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取0.1354克經(jīng)干燥器干燥過的二氯化汞，加硫酸（1+35） 使其溶解后，移入100

28、ml容量瓶中，并稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于1ml汞。2.12、汞標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取1.0ml汞標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于100ml容量瓶中，加硫酸（1+35） 稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于l0ug汞。再吸取此液5.0ml于50ml容量瓶中， 加硫酸（1+35）硫酸稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于 1ug汞。2.13、消化裝置2.14、分光光度計(jì)3. 操作方法：3.1、樣品消化：稱取20克搗碎混勻樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù) 粒及45ml硝酸，15ml硫酸，裝上冷凝管后小火加熱，待開始發(fā)泡即停止加熱， 發(fā)泡停止后加熱回流2小時(shí)。如加熱過程中溶液變棕色，再加 5ml硝酸，繼續(xù)回 流2小時(shí)，放冷，用

29、適量水洗滌冷凝管，洗液并入消化液中，取下錐形瓶，加水 至總體積為150ml。取與消化樣品相同量的硝酸，硫酸按同一方法做試劑空白試 驗(yàn)。3.2、測定：3.2.1、取消化液（全量），加20ml水，在電爐上煮沸10分鐘，除去二氧化氮等， 放冷。3.2.2、于樣品消化液及試劑空白液中各加5%高錳酸鉀溶液至溶液呈紫色，然后 再加20%鹽酸羥胺溶液使紫色褪去，加2滴麝香草酚藍(lán)指示液，用氨水調(diào)節(jié) PH 使橙紅色變?yōu)辄S色（PHI 2）定量轉(zhuǎn)移至125m分液漏斗中。3.2.3、吸取 0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml 汞標(biāo)準(zhǔn)使用液（相當(dāng) 于0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、

30、4.0、5.0、6.0ug 汞），分別置于 125m分液漏斗 中，加IOmll5 %硫酸，再加水至40ml混勻。再各加lml20 %鹽酸羥胺溶液，放 置20分鐘并時(shí)時(shí)振搖。3.2.4、 于樣品消化液，試劑空白液及標(biāo)準(zhǔn)液振搖放冷后的分液漏斗中加5.0ml雙硫腙使用液，劇烈振搖2分鐘，靜置分層后，經(jīng)脫脂棉將三氯甲烷層濾人1cm比色杯中，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)。在波長 490nm處測光度，標(biāo)準(zhǔn)管吸光度減去零 管吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。4、結(jié)果計(jì)算：試樣中汞的含量按式（4）進(jìn)行計(jì)算,.1 （4）E * - -mXlOOfl式中：X-試樣中汞的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）;Ai -試樣消化液中汞的質(zhì)量

31、，單位為微克（卩g）： A-試樣空白液中汞的質(zhì)量，單位為微克（卩g）： M-試樣質(zhì)量，單位為克（g）。計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。5、精密度:在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過計(jì)算平均值的10%6、報(bào)告:MA1A2X平均值第一個(gè)樣品第二個(gè)樣品十、肉制品指標(biāo)1、感官指標(biāo)：項(xiàng)目鮮產(chǎn)品凍產(chǎn)品組織狀態(tài)肌肉富有彈性，指壓后 凹陷部位立即恢復(fù)原狀肌肉指壓后部位恢復(fù)較 慢，不易完全恢復(fù)原狀色澤表皮和肌肉切面有光澤，具有應(yīng)有的色澤氣味具有應(yīng)有的氣味，無異味加熱后肉湯透明澄清，脂肪團(tuán)聚于液面，具有應(yīng)有的滋味淤血以淤血面積（S）計(jì)/cm 2S> 10.5 v S< 1S< 0.5不得檢出片數(shù)不得超過抽樣量的 2%忽略不計(jì)硬桿毛（長度超過12mm的羽毛，或 直徑超過2mm的羽毛根）/（根/10kg） <1異物不得檢出注：1.鮮凍禽肉需做淤血和硬桿毛的感官檢驗(yàn)2.淤血面積指單一整禽，或單一分割肉禽的一片淤血面積。2、