反義寡核苷酸的藥代動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展

1、24012Mamiya K, Ieiro I , Shimam oto J , et al . The effects of ge 2netic polym orphisms of CY P2C9and CY P2C19on phenytoin metabolism in Japanese adult patients with epilepsy :studies in stereoselective hydroxylation and population pharmacoki 2neticsJ.Epilepsia , 1998, 39(12 :1317-1323. 13K irchhein

2、er J , Brockm oller J , Meineke I , et al . Impact ofCY P2C9amino acid polym orphisms on glyburide kinetics and on the insulin and glucose response in healthy v olunteersForeign Medical Sciences Section on Pharmacy 2004Aug ; 31(4J.Clin Pharmcol Ther , 2002, 71(4 ; 286-296.14Leger F , Seronie 2Vivien

3、 S , Makdessi J , et al . Impact ofthe biochemical assay for serum creatinine measurement on the individual carboplatin dosing :a prospective studyJ. Eur J Cancer , 2002, 38(1 :52-56.15Frame B , Miller R , Lalonde R L. Evaluation of mixturem odeling with count data using NONME MJ. J Pharma 2cokinet

4、Pharmacodyn , 2003, 30(3 :167-184.反義寡核苷酸的藥代動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展尚明美綜述劉秀文, 湯仲明, 陳惠鵬審校(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所, 北京100850摘要:反義藥物在經(jīng)歷了20年后, 又迎來(lái)了一個(gè)蓬勃的發(fā)展階段。研究結(jié)果表明, 反義藥物在抗腫瘤、抗炎和抗病毒等方面展現(xiàn)出令人鼓舞的前景, 反義寡核苷酸可能成為新藥開發(fā)新的生長(zhǎng)點(diǎn)。本文調(diào)查了近年反義寡核苷酸藥代動(dòng)力學(xué)的研究進(jìn)展, 對(duì)反義寡核苷酸的吸收、分布、代謝和排泄進(jìn)行了詳細(xì)的綜述。關(guān)鍵詞:反義; 寡核苷酸; 藥代動(dòng)力學(xué)中圖分類號(hào):R969. 1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):100120971(2004 042

5、02402061引言2反義寡核苷酸的藥代動(dòng)力學(xué)ODN 的生物化學(xué)和生物物理特性是影響這類反義寡核苷酸(ODN 是一類經(jīng)人工合成并修飾或構(gòu)建的反義載體表達(dá)的寡核苷酸片段, 它們可以通過(guò)互補(bǔ)核酸氫鍵的特異結(jié)合實(shí)現(xiàn)核酸序列的特異識(shí)別, 其長(zhǎng)度為1530mer ?？梢允枪丫跠NA 、寡聚RNA 或磷酸骨架被聚酰胺所代替的肽核酸(PNA 等, 其中寡聚DNA 最為常用。作為新型的生物技術(shù)藥物, 近年來(lái)反義藥物倍受人們的關(guān)注。ISIS 2922已經(jīng)在美國(guó)和歐洲上市, 用于治療艾滋病并發(fā)的巨細(xì)胞病毒(C M V 視網(wǎng)膜炎。另有30余種反義藥物已進(jìn)入臨床試驗(yàn)(表1 14, 它們?cè)诟鞣N腫瘤、心血管疾病、病毒感染

6、治療等方面展現(xiàn)出令人鼓舞的應(yīng)用前景, 反義藥物研究進(jìn)入蓬勃發(fā)展階段。其中, 以硫代磷酸鹽修飾為代表的第一代反義寡核苷酸(phosphorothioate anti 2sense olig onucleotide , S 2ODN 的研究最為廣泛, 唯一上市的反義藥物福米韋生(fomivirsen 和正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)的大多數(shù)ODN 均屬此類。目前, 有關(guān)ODN 藥代動(dòng)力學(xué)的文獻(xiàn)大部分是關(guān)于S 2ODN , 故本文主要介紹S 2ODN 的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)。收稿日期:2003212219基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(39870878分子藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)的基本因素。S 2ODN 分子是穩(wěn)定的聚陰離子

7、寡聚體, 分子量為6. 88. 5ku , 含有硫代磷酸二酯鍵, 高水溶性, 具有較強(qiáng)的核酸酶抗性。混合骨架的寡核苷酸(M BO 事實(shí)上是一類RNA , 其修飾的特點(diǎn)是將S 2ODN 糖環(huán)的22羥基替換成為甲氧基或者乙氧基, 具有更強(qiáng)的靶點(diǎn)mRNA 結(jié)合力、熱穩(wěn)定性和核酸酶抗性, 也稱為第二代寡核苷酸。PNA 在特定肽鏈上連接不同堿基構(gòu)成的, 是高穩(wěn)定性和高親和力的第三代寡核苷酸的代表。ODN 的吸收、分布、代謝和排泄是否與序列相關(guān), 目前研究的結(jié)果尚無(wú)定論。Wasan 等5用35S 標(biāo)記三種ODN , 長(zhǎng)度都是29bp , 其中25bp 是一致的, 末端(3 4bp 各不相同。對(duì)它們的動(dòng)力學(xué)

8、行為進(jìn)行比或5較后得出結(jié)論,S 2ODN 在體內(nèi)的穩(wěn)定性、血漿濃度、組織分布和消除是序列相關(guān)的, 尤其是序列能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)時(shí)。三種嗎啉代ODN 的研究結(jié)果表明, 給藥后腎濃集程度與ODN 長(zhǎng)度相關(guān), 給藥1h 后,15, 18和25mer ODN 腎中濃集量分別占給藥量的5%, 7%和22%, 其他組織中三種ODN 均是微量分布。另一方面,Liu 等6對(duì)幾條ODN 序列的藥代動(dòng)力學(xué)藥物名稱ISIS 3521ISIS 5132ISIS 2503ISIS 2302ISIS 13312ISIS 14803ISIS 104838G 3139G 1128GE M 91GE M 92GE M 132GE

9、M 231GE M 230MG 98O L 1P534003W 94c 2myb G t 21102c 2myc G ps 0193AR 177G TI 22040HG T V 43G ensert EPI 2010Im Active 疫苗INX 3280INX 3001INX 4437Resten 2NG表1正在臨床試驗(yàn)的反義寡核苷酸的一般概況創(chuàng)制公司ISIS ISIS ISIS ISIS ISIS ISIS ISIS G enta G enta Hybridon Hybridon Hybridon Hybridon Hybridon M ethylG ene Lynx Lynx Lynx

10、G enset G enset G enset G enset Lorus Therapeutics Enz o Biochem Enz o Biochem E piG enRx Immune ResponseINEX INEX INEX AVI Biochem靶點(diǎn)mRNA PK C 2c 2raf 21ra 2ras ICAM 21C M VIE 2基因ICAM 21適應(yīng)證腫瘤腫瘤腫瘤Crohn 病AIDS 病人C M V 視網(wǎng)膜炎臨床試驗(yàn)期期期期期期期期期/期期期期期期期期/期期期期期期期期期期期期期期抗感染HCVT NF 2bcl 22HIV HIV HIV C M V PK A PK

11、A DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶p53p53p53p53p53HIV HIV惡性黑素瘤AIDS 和腫瘤AIDS AIDSC M V 感染及視網(wǎng)膜炎實(shí)體瘤腫瘤腫瘤AM L , NH L 和M DS血管成形術(shù)后再狹窄C M L , AM L C M L擴(kuò)張冠脈后再狹窄AIDS AIDS核糖核苷酸三磷酸還原酶HIV HIV A 1受體腫瘤AIDS AIDS哮喘惡性腦瘤擴(kuò)張冠脈后再狹窄C M L , AM LTG F 2c 2myc c 2myb IG F 21受體c 2myc腫瘤心血管再狹窄PK C :蛋白激酶C ;PK A :蛋白激酶A ;ICAM:細(xì)胞內(nèi)粘附因子;C M V :巨細(xì)胞病毒;AIDS :獲得

12、性免疫缺陷綜合征;T NF :腫瘤壞死因子; HCV :人丙型肝炎病毒;HIV :人免疫缺陷病毒;AM L :急性髓性白血病;NH L :非何杰金淋巴瘤;M DS :骨髓增生異常綜合征;C M L :慢性髓性白血病;TG F :腫瘤生長(zhǎng)因子;IG F :胰島素樣生長(zhǎng)因子特征進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn), 不管其序列如何, 其藥代動(dòng)力學(xué)特征類似, 因此, 認(rèn)為決定藥代動(dòng)力學(xué)特征的是ODN 的化學(xué)性質(zhì), 而不是堿基序列。故ODN 序列與藥代動(dòng)力學(xué)尤其是與藥效的靶向性及靶向分布的關(guān)系問(wèn)題, 仍然是今后研究的熱點(diǎn)。2. 1給藥途徑ODN 類藥物在最初的臨床試驗(yàn)中通常采用局部注射以使病灶或靠近病灶的局部達(dá)到治療所需濃

13、度。例如, 第一個(gè)用于臨床試驗(yàn)的ODN 藥物ISIS 2105, 便是采用皮內(nèi)注射7。結(jié)果表明, 注射部位ISIS 2105的濃度的確高于體外抗病毒活性所需濃度。事實(shí)上, 現(xiàn)有大量資料證明皮內(nèi)注射和皮下注射后ODN 藥物有良好的全身吸收。如在病毒感染部位局部使用一種21mer 的寡核苷酸ISIS 2922能夠抑制人巨細(xì)胞病毒(HC M V 的復(fù)制, 其給藥途徑為玻璃體注射。與皮內(nèi)注射給藥時(shí)ODN 的廣泛吸收相反, 玻璃體注射后極少或沒有全身吸收。因此, 為了達(dá)到治療濃度, 只需注射少量藥物即可。淀粉樣蛋白前體mRNA 為靶點(diǎn)的22甲氧基乙烷ODN 小鼠腦室內(nèi)注射給藥, 結(jié)果15min 內(nèi)完全吸

14、收,3h 內(nèi)逐漸分布, 透過(guò)細(xì)胞膜, 聚集在神經(jīng)細(xì)胞和非神經(jīng)細(xì)胞的各個(gè)隔室, 注射后8h 被完全清除8。該種給藥方式繞開血腦屏障, 可用于抑制腦內(nèi)特殊基因的表達(dá)。更令人振奮的是轉(zhuǎn)基因小鼠皮下植入人myc 2N (hMY C N ODN 微滲透泵, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)瘤小鼠的腫瘤部位達(dá)到有效濃度, 且ODN 處理組腫瘤發(fā)生率明顯低于隨機(jī)對(duì)照組和空白對(duì)照組9, 這也許能夠發(fā)展成為一種新的反義藥物的治療方案。在近期的臨床試驗(yàn)中,ODN 常用的給藥途徑有皮下注射、靜脈推注和靜脈滴注等10,S 2ODN 經(jīng)這些途徑給藥后通過(guò)血漿分布到各器官中的速度比藥物代謝速度快得多, 有助于原藥到達(dá)靶器官并積累到有效濃度

15、。作為更容易被接受的途徑, 口服給藥研究也取得極大進(jìn)展。ISIS 2302灌腸毒性研究表明, 腸上皮細(xì)胞暴露于劑量高達(dá)50mg kg -1ODN 的環(huán)境中有良好的局部耐受性, 且沒有觀察到全身毒性, 但其生物利用度小于5%。De R osa 等11在大鼠和狗模型中對(duì)硅酸鹽2聚賴氨酸2ODN 微粒進(jìn)行空腸內(nèi)給藥研究, 結(jié)果表明, 大鼠對(duì)ODN 的生物利用度較好分別為25%(粉劑 和10%(懸液 , 而狗的生物利用度極低(0. 42% , 研究者正試圖用其他方法改善口服ODN 后的生物利用度。因此, 硅酸鹽2聚賴氨酸2ODN 微粒無(wú)疑是很有前途的口服制劑。此外, 有研織化學(xué)方法顯示, 肺中多種類型

16、細(xì)胞包括塵細(xì)胞、1型和2型肺泡細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)ODN 均有吸收。最近, 對(duì)于轉(zhuǎn)基因哮喘兼過(guò)敏性肺炎小鼠的ODN 治療研究表明, 轉(zhuǎn)錄因子G ABA 23ODN 鼻內(nèi)局部給藥后, 肺對(duì)DNA 吸收良好, 從而導(dǎo)致G ABA 23表達(dá)的下調(diào), 減輕或者消除肺部炎癥。因此, 吸入給藥對(duì)肺、氣管病變可能有重要意義, 但氣溶膠給藥的途徑對(duì)其他系統(tǒng)疾病的治療是否可行還有待考證。2. 2血漿動(dòng)力學(xué)靜脈給藥后ODN 分布相半衰期(t 1/2 一般為幾分鐘, 而消除相半衰期(t 1/2 從幾十分鐘到幾十35小時(shí)不等。給HI V 病人靜脈滴注2h S 2基因表達(dá)調(diào)節(jié)子(gene expression m odul

17、ator , GE M 91(0. 1mg kg -1 , 結(jié)果發(fā)現(xiàn)藥物來(lái)源的放射性從血漿中的消除符合雙指數(shù)模型, 半衰期分別為(0. 18±0. 04 h 和(26. 71±1. 67 h 。采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE 分析檢測(cè)到原型藥物和鏈縮短的代謝物。Y u 等13比較了靜脈給予獼猴脂質(zhì)體微囊密封的S 2ODN ISIS 2503和磷酸鹽緩沖液配制的ISIS 2503后的動(dòng)力學(xué)差異。結(jié)果顯示, 微囊化的ISIS 2503以單指數(shù)模型消除, 平均半衰期為57. 8h , 而非微囊化的ISIS 2503血漿中的平均半衰期僅為1. 07h 。Maksy 2m owyc

18、h 等14用毛細(xì)管凝膠電泳法對(duì)抗炎的硫代修飾ISIS 2302在健康志愿者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)變化進(jìn)行了評(píng)價(jià), ISIS 2302劑量為0. 062. 00mg kg -1范圍內(nèi), 其在血漿中呈線性動(dòng)力學(xué)特點(diǎn), 隨劑量的進(jìn)一步增加, 出現(xiàn)非線性動(dòng)力學(xué)特點(diǎn), 呈現(xiàn)代謝飽和。給藥后很快可以在血漿中檢測(cè)到鏈縮短的n 21, n 22, n 23代謝物, 原型藥物的半衰期為5354min , ODN 總量的半衰期為6774min 。G eary 等15的研究表明,22甲氧基乙烷修飾的ISIS 2302的血漿清除率至少是ISIS 2302的10倍。臨床試驗(yàn)也常用局部注射來(lái)完成,S 2ODN 皮下注射后有一個(gè)

19、顯著的吸收過(guò)程。皮下注射的寡核苷酸峰濃度較之靜脈注射的峰濃度低, 血藥濃度時(shí)間曲線下面積(AUC 大約是相同劑量2h 靜脈滴注的1/2, 盡管同樣劑量的皮下注射和靜脈注射的血漿究證明S 2ODN 十二指腸內(nèi)給藥后8h , 在胃腸道內(nèi)容物中只能檢測(cè)到鏈縮短的代謝物,22甲氧基2乙烷基ODN 殘留一半的原型藥物, 而雙修飾(硫代和甲氧基2乙烷基混合修飾 的ODN 非常穩(wěn)定, 幾乎沒有降解12。由此可見, 利用合適的ODN 結(jié)構(gòu)和劑型有可能研制出口服有效的ODN 藥物。目前, 口服給藥后ODN 的藥理學(xué)活性和藥代動(dòng)力學(xué)研究正在進(jìn)行中。吸入劑也是一種行之有效的給藥途徑, 使用溶解狀態(tài)的ODN 氣溶膠可

20、在肺中獲得有效濃度。氣溶膠暴露后,ODN 以氣體形式廣泛分布于肺中。組動(dòng)力學(xué)有差異, 靶器官中的濃度卻是幾乎相等。最近完成的抗癌藥22甲氧基乙烷修飾S 2ODN ISIS 104838的期臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示, 皮下給藥后24h 達(dá)到峰濃度,200g L -1皮下注射后的生物利用度為82%16。2. 3組織分布S 2ODN 一經(jīng)給藥后, 可在體內(nèi)各組織中廣泛分2. 4代謝和排泄布, 除中樞神經(jīng)系統(tǒng)外的大多數(shù)組織中均能聚集, 特別是肝臟、腎臟、脾臟和骨髓等組織中濃度最高。例如, 靜脈注射ISIS 2302后, 在肝臟、腎皮質(zhì)、骨髓、皮膚和骨骼肌中的含量分別為22. 6%, 14%, 14%, 13%

21、和9%。但Y u 等13報(bào)道脂質(zhì)體微囊化的ISIS 2503主要分布在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng), 而游離的ISIS 2503與大部分傳統(tǒng)的小分子量藥物通過(guò)細(xì)胞色素P450代謝不同,ODN 主要通過(guò)核酸酶代謝。代謝物的性質(zhì)清楚地展現(xiàn)出ODN 代謝途徑的輪廓。毛細(xì)管電泳法和質(zhì)譜分析表明,ODN 的代謝是一個(gè)漸進(jìn)過(guò)程。具體說(shuō), 多光譜分析代謝物顯示,ODN 從32端的連續(xù)外切是在血漿中降解的主要途徑, 但腎和肝中首先從5端降解。在對(duì)ISIS 1082的研究中, 使用電噴霧質(zhì)譜確定肝勻漿代謝產(chǎn)物的分子量, 通過(guò)與計(jì)算的分子量比較發(fā)現(xiàn), 代謝物的分子量與3外切、5外切及混合切的分子量一致18。這些數(shù)據(jù)表明,ODN

22、被5外切酶、3外切酶的切除在組織中均有發(fā)生。另外, 還檢測(cè)到一系列分子量更小的代謝產(chǎn)物, 這些代謝產(chǎn)物可能是在硫代磷酯鍵連接位置硫和氧發(fā)生了交換(即氧化代謝 。S 2ODN 在血漿中的代謝很快, 幾乎在靜脈給藥后立即便可檢測(cè)到原型藥物的鏈縮短的代謝物。給藥5min 后, 全部劑量的30%40%至少被切掉一個(gè)核苷酸, 這種百分比隨時(shí)間推移略有上升。S 2ODN 皮下給藥后也可在組織(肝和腎 中檢測(cè)到類似的代謝物19。從胸腺嘧啶C 22位上標(biāo)記的14C 的代謝研究可知,ODN 最后的代謝命運(yùn)與內(nèi)源的核苷酸代謝途徑相似。C O 2是胸腺嘧啶標(biāo)記C 22位的最終產(chǎn)物, 當(dāng)S 2ODN 在硫酯鍵上用放射

23、性同位素35S 標(biāo)記時(shí), 放射性標(biāo)記的排泄物發(fā)生了變化, 這種情況下的放射性標(biāo)記不穩(wěn)定, 最后代謝為小分子量的含硫產(chǎn)物從尿中排出, 代謝物的性質(zhì)目前正在研究中。對(duì)于寡核苷酸的排泄途徑, 目前主要為尿和糞排泄兩種。Y u 等13對(duì)S 2ODN ISIS 2302及22O 2甲基修飾的ISIS 2302的研究表明, 硫代修飾的ODN 比22O 2甲基修飾ODN 排泄速率快, 給藥后240h 后排則主要分布在肝和腎。另?yè)?jù)報(bào)道, ISIS 2503微囊化后有抗核酸酶的作用, 可減慢組織的攝取, 降低血漿消除的速度, 可能會(huì)增加ISIS 2503在作用靶點(diǎn)的分布。獼猴玻璃體內(nèi)注射ISIS 2922后,

24、視網(wǎng)膜對(duì)該藥的攝取和降解有飽和現(xiàn)象, 延長(zhǎng)給藥間隔可以避免藥物蓄積8。而另外一個(gè)混合骨架的ODN GE M 132, 也用于治療AI DS 并發(fā)的巨細(xì)胞性眼炎, 玻璃體注射后發(fā)現(xiàn)在兔眼的玻璃狀液、視網(wǎng)膜和其他眼組織中的分布隨劑量增加而遞增, 放射自顯影結(jié)果表明, 藥物分布于整個(gè)視網(wǎng)膜, 以中層為最多。對(duì)ISIS 2503在小鼠和獼猴中的分布進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),ODN 在兩種動(dòng)物中的組織分布模式相似, 均以肝和腎為主, 但在相同劑量下, 獼猴組織中的ODN 濃度較小鼠組織中高, 原型藥物完全從組織中消除的半衰期在嚙齒類動(dòng)物需12d , 在靈長(zhǎng)類動(dòng)物超過(guò)3d 15。研究表明, 重復(fù)給藥時(shí)該類化合物會(huì)在某

25、些組織中蓄積。蓄積藥物的兩個(gè)主要器官是肝和腎, 由于這種蓄積作用, 它們很可能是這類化合物的主要毒性靶器官。實(shí)際上, 在持續(xù)或亞慢性高劑量給藥的動(dòng)物中, 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這些器官有組織病理和功能性的改變。脾、骨骼、骨髓、淋巴結(jié)也有明顯的濃度積聚, 但比肝和腎要低得多。在小鼠及非靈長(zhǎng)類動(dòng)物中也存在類似現(xiàn)象15。需要強(qiáng)調(diào)的是, 各種常規(guī)的給藥方式都不能使S 2ODN 在腦脊液中達(dá)到理想的濃度, 須經(jīng)腦室內(nèi)快速給藥才可達(dá)到。這種方式的藥物分布和消除與腦血流有很大關(guān)系。為了改善ODN 的組織分布, 已經(jīng)采取了多種方式加以化學(xué)修飾和劑型設(shè)計(jì)。如ISIS 3082的32端連接膽固醇(命名為ISIS 9388 給藥

26、后3h , 肝中的分布占給藥量的(63. 7±3. 3 %, 而全程硫代修飾的ODN ISIS 3082在肝中僅占給藥量的(23. 8±3. 8 %。在ISIS 3082的32和52端各連接一個(gè)膽固醇分子形成ISIS 3989, 給藥后肝中濃集了(83. 0±0. 3 %, 脾和骨髓分別濃集了(3. 1±0. 3 %和(4. 3±0. 2 %的給藥量, 其他組織中的分布<5%17。因此, 隨著ODN 修飾和劑型的改變, 其分布將更加突出其靶向性的特點(diǎn)。出率均大于50%, 但硫代修飾ODN 的排泄物均為小分子降解物, 而22O 2甲基修飾O

27、DN 的排泄物部分為原型藥物。通過(guò)糞便排出率小于10%。尿排泄同樣也是具有手性的GE M 91的主要排出途徑, 但不同的是一直到給藥后6h , 尿中的大部分放射性主要是原型藥物。一系列實(shí)驗(yàn)表明,ODN 修飾不同, 代謝和排泄速度有差別, 也許ODN 的化學(xué)性質(zhì)決定其穩(wěn)定性和代謝途徑。有人對(duì)正常小鼠和腫瘤移植小鼠單次或多次給藥后的生物分布進(jìn)行研究, 采用35S 標(biāo)記, 放射性分析表明,ODN 主要經(jīng)尿排泄, 且主要以代謝物形式排出。隨著毛細(xì)管電泳技術(shù)的成熟, 研究者開始采用毛細(xì)管凝膠電泳(CGE 分離定量原型藥物和代謝物。Y u 等13對(duì)ISIS 2503在獼猴和小鼠中的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了比較研究

28、(獼猴2h 靜脈滴注, 小鼠靜脈推注 固相提取后用CGE 法檢測(cè)原型藥物, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)在兩種動(dòng)物中經(jīng)尿排泄均是次要途徑, 且隨劑量增加尿排泄率隨之增加(劑量為2050mg kg -1, 尿排泄率為12%29% 。3結(jié)語(yǔ)lationJ. Nucleic Acids Res , 2003, 31(18 :5282-5290. 5Wasan EK, Waterhouse D , S ivak O , et al . Plasma proteinbinding , lipoprotein distribution and uptake of free and lipid 2ass ociatedBC L

29、 22antisenseolig odeoxynucleotides(G 3139 in human melanoma cells J . Int J Pharm , 2002, 241(1 :57-64.6Liu G, Zhang S , He J , et al . The in fluence of chain lengthand base sequence on the pharmacokinetic behavior of 99mT c 2m orpholinos in mice J. Q J Nucl Med , 2002, 46反義藥物作為一類新型化學(xué)合成藥物, 是最容易實(shí)現(xiàn)的基

30、因治療手段之一。S 2ODN 是目前最常用的類型, 其生物物理性質(zhì)是藥代動(dòng)力學(xué)的決定因素。藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)表現(xiàn)為:口服吸收較少, 須經(jīng)非腸道途徑給藥, 血藥的消除顯示二房室模型特征, t 1/2多小于1h , t 1/2kg -1一般大于30h , 劑量高于2mg 可能出現(xiàn)代謝飽和。藥物主要分布于肝臟、腎臟、脾臟、骨髓和骨骼肌等。3核酸外切酶的降解是主要的消除途徑, 多以代謝物形式經(jīng)尿排出體外。對(duì)于已經(jīng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的S 2ODN , 它們是否能夠成為有效的治療藥物尚需解決以下問(wèn)題:(1 體內(nèi)有效輸送到靶部位; (2 與特異性雜交無(wú)關(guān)的序列依賴效應(yīng); (3 降低大量生產(chǎn)成本; (4 最佳靶序列的測(cè)

31、定; (5 穿過(guò)細(xì)胞膜的能力。近年來(lái), 各種修飾ODN 在體內(nèi)外研究中表現(xiàn)出更高的親和力、活性和穩(wěn)定性, 隨著反義機(jī)制的闡明, 計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)的優(yōu)化, 以及大規(guī)模合成成本的降低, 反義藥物必將以它高度的分子特異性和高效低毒的優(yōu)點(diǎn), 為藥物研究開辟一個(gè)嶄新的時(shí)代。參考文獻(xiàn)1Rudin C M , K ozloff M , H offman PC , et al . Phase studyof G 3139, a bcl 22antisense olig onucleotide , combined with carboplatin and etoposide in patients with

32、 small 2cell lung cancerJ. J Clin Oncol , 2004, 22(6 :1110-1117. 2T aylor AH , al 2Azzawi F , Pringle J H , et al . Inhibition ofendometrial carcinoma cell growth using antisense estrogen receptor olig odeoxyribonucleotides J . 2002, 22(6C :3993-4003.3Jones M B , Michener C M , Blanchette JO , et al

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34、study in cyn om olgus m onkeysJ. T oxicology , 1997, 120(2 :145-155.8White P J , G ray AC , F ogarty RD , et al . C 25propyne 2m odi 2fied olig onucleotides penetrate the epidermis in ps oriatic and not normal human skin after topical applicationJ. J Invest Dermatol , 2002, 118(6 :1003-1007.9Burkhar

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38、sue disposition of 22O 2(22methoxy ethyl m odified antisense olig onucleotides inm onkeysJ. J Pharm Sci , 2004, 93(1 :48-59.14Maksym owych WP , Blackburn W D Jr , T ami JA , et al . Arandomized , placebo controlled trial of an antisense olig odeoxynucleotide to intercellular adhesion m olecule 21in

39、the treatment of severe rheumatoid arthritisJ. J Rheuma 2tol , 2002, 29(3 :447-453.15G eary RS , Y u RZ. Pharmacokinetics of a tum or necrosisfactor 2alpha phosphorothioate 22O 2(22methoxyethyl 2m odi 2fied antisense olig onucleotide :comparis on across species J. Drug Metab Dispos , 2003, 31(11 :14

40、19-1428.16Sewell K L , G eary RS , Baker BF , et al . Phase trial ofISIS 104838, a 22methoxyethyl m odified antisense olig onu 24Michel T , Martinand 2Mari C. Cationic phosphoramidate al 2pha 2olig onucleotides efficiently target single 2stranded DNA and RNA and inhibit hepatitis C virus IRES 2media

41、ted trans 2國(guó)外醫(yī)學(xué)藥學(xué)分冊(cè) 2004 年 8 月 31 卷 第 4 期 第 cleotide targeting tumor necrosis factor2alpha J . J Phar2 macol Exp Ther , 2002 , 303 (3 :1334 - 1343. macol Exp Ther , 2002 ,302 (2 :619 - 626. 245 tribution of a phosphorothioate oligodeoxynucleoside within rodents following intravenous administration J

42、 . Biochem Pharmacol , 2001 , 62 (3 :297 - 306. 偏頭痛是一種常見病 、 多發(fā)病 , 呈間歇性發(fā)作 , 一般為中度到重度頭痛 ,并伴有神經(jīng)性 、 胃腸性和自 律性的神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂 。在美國(guó)和西歐的發(fā)病率 為 11 % ( 女性 15 % 18 % , 男性 6 % ,1 %的人每周 至少有 1 d 發(fā)作 。該病的發(fā)病特點(diǎn)為強(qiáng)度大 、 多發(fā) 、 持續(xù)時(shí)間長(zhǎng) ,對(duì)生活質(zhì)量的影響與其他慢性疾病如 抑郁癥 、 骨關(guān)節(jié)炎 、 糖尿病等相似 。WHO 指出 ,與精 神病 、 四肢癱瘓 、 癡呆癥一樣 , 偏頭痛是一種使人失 去行為能力的慢性疾病 ,發(fā)病年齡為

43、2555 歲 。 1 偏頭痛的相關(guān)癥狀 胃腸功能紊亂是偏頭痛發(fā)作常見的癥狀 , 主要 表現(xiàn)為惡心 、 嘔吐 ,這決定了藥物療效和藥物優(yōu)先選 擇的原則 。偏頭痛發(fā)作時(shí) ,即使無(wú)惡心癥狀 ,也可能 導(dǎo)致胃排空延遲和口服藥物吸收減少 , 惡心可影響 服藥的能力 ,而嘔吐導(dǎo)致藥物損失 。已設(shè)計(jì)出非口 服用藥和無(wú)需液體 、 不加劇惡心/ 嘔吐癥狀的口服制 劑 ,避免了出現(xiàn)胃腸道功能紊亂 。 2 治療偏頭痛的歷史 17 Bijsterbosch MK, Manoharan M , Dorland R , et al . bis2 18 Graham MJ , Crooke ST , Lemondis K , et al . Hepatic dis2 M 摘要 : 偏頭痛是一種常見病 、 多發(fā)病