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文檔簡介

1、臨床生物化學(xué)與檢驗實驗教學(xué)大綱(本科)實驗指導(dǎo)書:臨床物化學(xué)與檢驗實驗指導(dǎo),錢士勻主編,第三版,人民衛(wèi)生出版社,2009 年 2 月編寫單位:臨床生物化學(xué)實驗室臨床生物化學(xué)及檢驗實驗教學(xué)大綱課程編碼:05290010課程名稱:臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗實驗指導(dǎo)書:臨床生物化學(xué)與檢驗實驗指導(dǎo)(第三版)參考教材:臨床生物化學(xué)與檢驗(第四版)總學(xué)時:120 學(xué)時理論學(xué)時:60 學(xué)時實驗學(xué)時:60 學(xué)時適應(yīng)專業(yè):醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)一、實驗教學(xué)目的與基本要求臨床生物化學(xué)與檢驗是化學(xué)、生物化學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)相結(jié)合的一門邊緣應(yīng)用學(xué)科。 臨床生物化學(xué)與檢驗是將化學(xué)的原理和技術(shù)應(yīng)用于生物體液成分的測定,為臨床提供客觀的診

2、斷依據(jù),并為監(jiān)測疾病的發(fā)展和治療效果提供可靠的指標(biāo)。臨床生物化學(xué)及生物化學(xué)檢驗是醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)的主干課程。開設(shè)實驗課的目的:1、加深學(xué)生對臨床生化檢驗領(lǐng)域的理解,使學(xué)生將理性知識與感性知識有機的結(jié)合;2、 通過教師啟發(fā)式的教學(xué),培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度,仔細(xì)和正規(guī)的操作方法,科學(xué)和敏捷的操作思路,為今后的臨床生產(chǎn)實習(xí)打下扎實的基礎(chǔ)。3、 通過實驗以及對實驗結(jié)果地評價和分析培養(yǎng)學(xué)生分析問題和解決問題地能力。4、通過實驗課樹立學(xué)生提高臨床診斷水平,為臨床服務(wù)的意識,加強學(xué)生能力的培養(yǎng)及創(chuàng)新思維和能力的訓(xùn)練。本實驗課的基本要求:1、 使學(xué)生掌握臨床生化檢驗中常用的技術(shù)、檢測指標(biāo)數(shù)據(jù)的處理和分析方法及與臨

3、床的關(guān)系。2、掌握常見的臨床生化檢驗項目測定的原理、操作要求、注意事項、方法學(xué)評價及臨床意義。包括:蛋白類、糖類、無機離子、酶類、肝功能、非蛋白含氮化合物、血脂、血氣及酸堿分析等。、學(xué)時安排實驗名稱實驗類型實驗要求學(xué)時二乙酰一鴇法測定血清尿素驗證性必開4賴氏法測定血清ALT驗證性必開4回收實驗、干擾實驗研究性必開4方法比較實驗研究性必開4線性范圍試驗研究性必開4磷鴇酸-鎂法測定HDL-ch驗證性必開4血氣分析儀的使用驗證性必開4磷酸甘油氧化酶法測定血清膽固醇驗證性必開4磷酸苯二鈉比色法測定血清堿性磷酸酶驗證性必開4分離純化小麥胚芽中的酸性磷酸酶創(chuàng)新性必開8酶蛋白含量測定及比活性分析、酸性磷酸酶

4、時 間進程曲線創(chuàng)新性必開12實驗考試驗證性必開4總計60三、考核考核方式:選用一個實驗進行實驗考試,通過實驗操作、實驗結(jié)果與實驗報告的 書寫等項來記分。成績構(gòu)成:理論考試80%本實當(dāng)課占30%,包括平時成績5%,實驗報告20%, 實驗考試5%0四、實驗課程基本內(nèi)容二乙酰一鴇法測定血清尿素R目的要求11、掌握二乙酰一歷法測定血清尿素的操作技術(shù)與原理。2、熟悉二乙酰一歷法測定血清尿素的臨床意義。R主要內(nèi)容11、按要求加樣2、混勻沸水浴加熱12分鐘后取出再冷水浴5分鐘后,再用分光光度計處入=540nmft比色測各管A值。3、根據(jù)公式計算結(jié)果。賴氏法測定血清ALT 目的要求1、掌握二乙酰一肟法測定血清

5、尿素的操作技術(shù)與原理。2、熟悉二乙酰一肟法測定血清尿素的臨床意義。 主要內(nèi)容1、按要求加樣2、混勻后室溫放置5分鐘后,再用分光光度計處入=505nm處比色測各管A值。3、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管與酶濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。4、利用標(biāo)準(zhǔn)曲線找出標(biāo)本對應(yīng)酶活性單位?;厥赵囼?、干擾試驗 目的要求1、掌握回收、干擾試驗原理。2、熟悉回收、干擾試驗方法評價 主要內(nèi)容1、按要求制備標(biāo)本,回收試驗血清濃度為 2.2mmmol/l,干擾試驗血清濃度為6.5mmmol/l 。2、根據(jù)GOD-POD測定各標(biāo)本血糖濃度,按要求加樣。3、混勻后,37度水浴15分鐘后,再用分光光度計處入=500nmM比色測各管A 值。4、根據(jù)各計算公式得

6、出回收率、干擾率、回收濃度、干擾濃度。5、對結(jié)果進行討論分析。方法比較試驗 目的要求1、掌握方法比較試驗原理。2、熟悉方法比較試驗方法學(xué)評價。 主要內(nèi)容1、用GOD-POD測定兩種不同濃度血清標(biāo)本血糖濃度,按要求加樣。2.混勻后,37度水浴15分鐘后,再用分光光度計處入=500nm處比色測各管A 值。3、再用鄰甲苯胺法測定原 GOD-POD所用標(biāo)本血糖濃度,按要求加樣。4、混勻后,置沸水浴中煮沸5 分鐘后,取出再冷水浴5 分鐘后,再用分光光度計處6 = 630nmM比色測各管A值。5、 集合全組同學(xué)數(shù)據(jù),用直線回歸分析法進行統(tǒng)計學(xué)處理,得出回歸方程y=a+bx及相關(guān)系數(shù)r 。6、根據(jù)回歸方程及

7、相關(guān)系數(shù)對被評價實驗進行分析評價。線性范圍試驗 目的要求1、掌握線性范圍的操作技術(shù)與原理。2、掌握線性范圍的數(shù)據(jù)處理。 主要內(nèi)容1、用GOD-POD測定血清標(biāo)本血糖濃度,按要求加樣。2、混勻后,37度水浴15分鐘后,再用分光光度計處入=500nmt比色測各管A 值。先從低濃度往高濃度測一次,再從高到低再測一次,記下數(shù)據(jù)。3、數(shù)據(jù)處理,描散點圖。4、方法學(xué)評價分析。磷鎢酸 - 鎂法測定HDL-ch 目的要求1、掌握磷鎢酸- 鎂沉淀法測定高密度脂蛋白- 膽固醇的操作技術(shù)與原理。2、熟悉磷鎢酸- 鎂沉淀法測定高密度脂蛋白- 膽固醇的臨床意義。 主要內(nèi)容1、 取血清標(biāo)本和沉淀劑,充分混勻置室溫10分鐘

8、后3000轉(zhuǎn)離心15分鐘, 吸取上清液進行下一步操作。2、按要求加樣,混勻37度水浴5-10分鐘后,再用分光光度計處入=546nmft比色測各管A3、根據(jù)公式求出標(biāo)本中HDL ch 濃度。血氣分析儀的使用 目的要求1、掌握血氣分析儀的操作與原理。2、熟悉血氣分析的常用指標(biāo)臨床意義。 主要內(nèi)容1、講解各指標(biāo)意義2、血氣分析原理3、練習(xí)使用血氣分析儀。膽固醇氧化酶法測定血清總膽固醇 目的要求1、膽固醇氧化酶法測定血清總膽固醇的原理。2、膽固醇氧化酶法測定血清總膽固醇的方法及臨床意義。 主要內(nèi)容1、取血清標(biāo)本按要求加樣。2、混勻37度水浴5-10分鐘后,再用分光光度計處入=546nm#比色測各管A3

9、、根據(jù)公式求出標(biāo)本中血清總膽固醇濃度。磷酸苯二鈉比色法測定法測定血清堿性磷酸酶 目的要求1、掌握磷酸苯二鈉比色法測定血清堿性磷酸酶的操作技術(shù)與原理。2、熟悉磷酸苯二鈉比色法測定血清堿性磷酸酶的臨床意義。 主要內(nèi)容1、先用標(biāo)準(zhǔn)管按要求加樣,2、立即混勻,再用分光光度計處入=510nm處比色測各管A值。3、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管與各管對應(yīng)A值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。4、血清標(biāo)本中ALP的測定,按要求加樣。5、立即混勻,再用分光光度計處入=510nm處比色測A值。6、利用標(biāo)準(zhǔn)曲線找出標(biāo)本對應(yīng)酶活力單位。還原鉬藍(lán)法測定血清磷(實驗考試) 目的要求1、掌握還原鉬藍(lán)法測血磷的操作技術(shù)與原理。2、熟悉還原鉬藍(lán)法測血磷的臨床意義。

10、 主要內(nèi)容1、制備血清濾液:取血清標(biāo)本0.2ml和三氯醋酸3.8ml,充分混勻置室溫10分鐘后 3000 轉(zhuǎn)離心 5 分鐘,吸取上清液進行下一步操作。2、按要求加樣,混勻37度水浴10分鐘后,再用分光光度計處入=650nm處比色測各管A3、根據(jù)公式求出標(biāo)本中血清磷的濃度。分離純化小麥胚芽中的酸性磷酸酶 目的要求1、掌握分離純化小麥胚芽中酸性磷酸酶的原理。2、熟悉分離純化小麥胚芽中酸性磷酸酶的操作方法。 主要內(nèi)容1、小麥胚芽的準(zhǔn)備:新鮮小麥浸泡4 小時后灑水放簍中蓋雙層紗布,2-3 天后剪麥芽備用。2、用離速冷凍離心機,依次按要求加樣離心取上清液,記錄體積。3、數(shù)據(jù)處理。酶蛋白含量測定及比活性分

11、析、ACP 濃度 -速度曲線 目的要求1、掌握酶蛋白含量測定及比活性分析的原理。2、酶蛋白含量測定及比活性分析的操作方法。3、掌握ACP 濃度 -速度曲線、pH-ACP 酶活性曲線的原理及意義 主要內(nèi)容酶蛋白含量測定:1、先用標(biāo)準(zhǔn)管按要求加樣2、立即混勻,室溫放置2分鐘,再用分光光度計處入=595nm#比色測各管A值。3、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管蛋白質(zhì)濃度為橫坐標(biāo),各管對應(yīng)A值為縱座標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。4、測定各上清液中蛋白質(zhì)含量,按要求加樣。5、立即混勻,再用分光光度計處入=595nm處比色測A值。6、利用標(biāo)準(zhǔn)曲線在曲線上找出各上清液所對應(yīng)的蛋白質(zhì)含量。酶活性測定及比活性分析:1、先做標(biāo)準(zhǔn)管按要求加樣2、立即混勻,室溫放置10分鐘,再用分光光度計處入=510nm處比色測各管A 值。3、

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