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1、檢測血清ALT四種不同方法的比較分析                  作者:許友山,余偉,劉曉,夏衛(wèi)【關鍵詞】  獻血者;ALT;速率法;干化學法;賴氏法摘要 目的:比較四種不同ALT檢測方法結果的精確性和相關性。 方法:用日立7600020全自動生化分析儀、Microlab 300 半自動生化儀、 Reflotron plus 快速全自動干式生化分析儀和賴氏法同時檢測血清ALT。 結果:精密度測定,干式法測定的ALT的變異

2、系數(shù)(CV)值為8.33%,微量速率法、賴氏法和大生化速率法CV值分別為8.02%、 10.32%和 7.59%。干式法、微量速率法和賴氏法與大生化速率法的相關系數(shù)(r)分別為0.990 2、0.981 6和0.917 6。結論:干式法和半自動生化儀檢測結果準確、快速、方便,與大生化速率法線形相關密切,統(tǒng)計均差異無顯著性(P0.05)。關鍵詞 獻血者;ALT;速率法;干化學法;賴氏法獻血者健康檢查標準規(guī)定獻血者ALT的檢測方法為賴氏法,但目前隨著全自動加樣系統(tǒng)在血站的應用,ALT的測定方法多采用微板速率法,但國內(nèi)也有血站為了方便無償獻血者采用干化學試劑條檢測血清ALT。針對這一情況,筆者對12

3、2份血清標本用四種不同方法進行檢測比較,現(xiàn)報告如下。1材料與方法1.1標本來源80份本站獻血員血清,42份無錫市二院門診患者血清。1.2干化學試劑條法(簡稱干式法)用Reflotron plus 快速全自動干式生化分析儀及專用試劑條(德國羅氏公司試劑條批號745138)儀器設置溫度為37 ,按操作要求取血清32 l到試紙條上,放入測量室滑門,123 S即自動讀結果。1.3微量ALT速率檢測法(簡稱微量速率法)用Microlab 300 半自動生化儀和ALT檢測試劑(北京中生北控生物有限公司試劑批號011031),儀器設置溫度為37 , 測定波長340 nm。1.4大生化速率法用日立760002

4、0全自動生化儀及其ALT檢測試劑(日本第一化學藥品株式會社試劑1批號066 RCC試劑2 批號048 REC),儀器設置溫度為37 ,操作嚴格按照儀器、試劑說明書進行。1.5賴氏法用KY2000 Clinical spectrophotometer 及ALT檢測試劑(上海榮盛生物有限公司 試劑批號20040822),操作嚴格按照儀器、試劑說明書進行。1.7統(tǒng)計學方法應用直線相關分析和2檢驗。         2結果2.1方法的準確度和精密度比較四種檢測方法對各自ALT質控血清進行20次測定,結果見表1。表1四種方法

5、檢測質控血清的檢測結果(略)2.2四種不同的方法檢測122份血清ALT活性結果比較見表2表2四種方法測定ALT結果對照(略)3討論ALT 是一種非血漿特異酶,是肝功能檢驗的重要指標,是反映肝細胞受損最敏感的指標1。由于ALT活性濃度的檢測彌補了肝炎病毒感染的“窗口期”抗體檢測漏檢問題,因此ALT的檢測對于降低輸血風險,預防肝炎傳播具有積極的意義2。從表1精密度的測定結果表明,對于質控血清的測定,四種方法均有較好的精密度,都處于試劑所規(guī)定的范圍內(nèi)。由表2可見,與大生化速率法相比,其他三種方法的符合率都高于95%,經(jīng)2檢驗其他三種方法與大生化速率法之間差異均無顯著性(P0.05)。經(jīng)直線相關分析統(tǒng)

6、計得到干式法與大生化速率法的相關系數(shù)r=0.990 2,微量速率法與大生化速率法相關系數(shù)r=0.981 6,賴氏法與大生化速率法相關系數(shù)r=0.917 6。由此可見干式法測定ALT值與微量速率法及臨床應用的大生化速率法測得的ALT結果有很好的相關性。賴氏法作為ALT活性檢測的傳統(tǒng)方法,至今仍為獻血者健康檢查標準規(guī)定的ALT活性檢測方法。在常規(guī)操作中,由于工作量巨大,加樣和加試劑都不可避免存在一定誤差,使其準確度、精密度受到很大的的影響3。在本次實驗中賴氏法的不合格率明顯高于其他三種方法。干式法的試紙條不僅可以測定血清,而且還可以對血漿和全血標本進行測定,其排除溶血、脂肪血對結果的干擾也是其他方

7、法無法比及的4。此外Reflotron plus 快速全自動干式生化分析儀同Microlab 300 半自動生化儀一樣,都具有體積較小,攜帶方便,操作簡單,用時較短(Microlab 300 半自動生化儀僅需1 min左右)特點,但就成本而言,干式法比賴氏法和速率法相比成本要高,可如果考慮采后單純ALT不合格的報廢血液產(chǎn)生的費用,其成本并不算高。在測定122份血清中微量速率法的漏檢率為1.64%,干式法的漏檢為2.45%,為了進一步減少采集后特別是機采血小板的采后ALT的報廢,降低昂貴耗材的浪費,根據(jù)本實驗室的實際情況,與大生化速率法相比,通過線性回歸方程計算,把干氏法的臨界值降為30 U/L(試劑廠家提供的臨界值為40 U/L)??傊?,隨著獻血模式的逐步改變,應用干化學試劑條法或Microlab 300 半自動生化儀做采前的ALT的檢測,在進一步提高血液質量的同時,可大大降低采后單純ALT的報廢率,很好地節(jié)約了采集和檢驗成本,充分避免了不合格血的采集,具有良好的社會效益和經(jīng)濟效益。參考文獻:1康格非.臨床生物化學和生物化學檢驗M. 北京:人民衛(wèi)生出版社,1998:160.2石延社. 丙酮酸氧化酶與賴氏法檢測ALT的比較J. 臨床輸血與檢驗,20

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