補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯對雌性去勢大鼠子宮形態(tài)學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究

1、補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯對雌性去勢大鼠子宮形態(tài)學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究         【摘要】  目的研究補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯對雌性去勢大鼠子宮形態(tài)學(xué)的影響。方法將60只3月齡大鼠飼養(yǎng)2周后，隨機(jī)取50只摘除雙側(cè)卵巢，余10只行假手術(shù)。50只去勢大鼠隨機(jī)分為5組；模型空白組、補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯高、中、低劑量組、六味地黃丸組，觀察各組用藥后子宮形態(tài)的變化。結(jié)果補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯能夠顯著增加去勢大鼠子宮重量，使去勢大鼠子宮內(nèi)膜明顯增厚，并能明顯增加子宮內(nèi)腺體數(shù)目及血管分布。結(jié)論 補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯可能直接作用子宮，改善子宮內(nèi)膜的狀態(tài)，從而緩解子宮萎縮的作用。 【

2、關(guān)鍵詞】  補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯 去勢大鼠 子宮形態(tài)學(xué)The Effect of BushenyangJing Decoction on the Endometrial of Female Castrate RatsAbstract：ObjectiveTo study the effect of BushenyangJing decoction on the endometrial of female castrate rats.Methods60 female SD rats of 3 months old were fed two weeks.Then 50 rats were selec

3、ted randomly and removed their ovaries,and 10 rats remained were sham operated.50 rats were divided randomly into five groups:model group,high dose group of BuShen YangJing decoction,middle dose group of BuShen YangJing decoction,low dose group of BuShenYangJing decoction,and LiuWeiDiHuang Bill grou

4、p .Every group was carried out corresponding treatment.By removing uterus,histological morphology of each layers of uterus were observed of endometrial.ResultsBuShenYangJing decoction increased the uterus index.Thickness of endometrial became thicker,and the number of glandules became higher than th

5、at of model group.ConclusionBuShenJing decoction can probably act directly on the endometrial ,by regulating the endometrial formation,and delay the atrophy of uterus in ovariectomized rats.Key words：Bushenyingjingsoup;  Castrated rat;  Histomorphology   卵巢早衰（POF）一般認(rèn)為是40歲以前卵巢功能喪失

6、，以閉經(jīng)為主要臨床表現(xiàn)，并伴有血清雌二醇水平下降和促進(jìn)腺激素水平上升，是當(dāng)今生殖醫(yī)學(xué)和生殖健康研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。我們在觀察補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯對卵巢早衰治療作用1，2的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了該方對雌性去勢大鼠子宮形態(tài)學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1  材料與方法1.1  動物及條件健康SD雌性大鼠，3月齡，體重（200±30）g，60只，由瀘州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，二級實(shí)驗(yàn)室。1.2  藥品與儀器補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯，由覆盆子、女貞子、紫河車、當(dāng)歸、黃芪等組成的中藥復(fù)方。由瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院中藥熬藥房制備。批號20051120，濃度為1.5 g生藥/ml；六味地黃丸，由吉林

7、通化震林藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)；批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z22023191；BZYI50 k型自動煎藥包裝機(jī)為中韓合資天津三延精密機(jī)械有限公司產(chǎn)品。1.3  模型建立連續(xù)觀察大鼠陰道脫落細(xì)胞變化兩周，均有正常動情周期后開始本實(shí)驗(yàn)。從60只大鼠中隨機(jī)留取10只作為假手術(shù)空白組做假手術(shù)：常規(guī)處理后，開腹并尋找到卵巢組織，取仰臥位固定于手術(shù)板上，剪去腹部被毛，消毒術(shù)區(qū)皮膚，沿下腹正中做縱行切口約2 cm，暴露卵巢及子宮角，行雙側(cè)子宮角結(jié)扎，剝離并剪除卵巢，縫合切口并消毒。術(shù)后每只大鼠予青霉素20萬單位肌肉注射1次。術(shù)后1周，開始連續(xù)觀察各組大鼠陰道脫落細(xì)胞角化指數(shù)（CD）的變化，1次/d，連續(xù)5

8、d。以CI50%定為性周期消失，即造模成功。假手術(shù)空白組以出現(xiàn)規(guī)律的動情期和動情期變化者為符合實(shí)驗(yàn)要求。手術(shù)次日假手術(shù)組大鼠死亡1只，去勢大鼠均健康。1.4  分組及給藥將去勢后大鼠50只隨機(jī)分為5組，即去勢空白組、六味地黃丸組、補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯高、中、低劑量組，每組10只；另外9只行假手術(shù)的為假手術(shù)組。各組分別標(biāo)記。給藥劑量與方法：假手術(shù)及去勢空白組：予生理鹽水1 ml/100 g體重；六味地黃丸組：配制濃度為1.44 g/ml混懸液，按1 ml/100 g體重灌胃；補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯低、中、高劑量組；分別按每100 g體重0.375，0.75， 1.5 g給藥。各組均為灌胃給藥，1次/d，連續(xù)

9、30 d。1.5  子宮的采集大鼠心臟取血后，立即剪開腹腔。尋找子宮，剝離周圍脂肪組織，于宮頸上方完整剪下子宮體。濾紙稍拭后，電子分析天平稱出濕重，分組標(biāo)號并浸入10%福爾馬林液中固定。子宮重量法：將子宮濕重?fù)Q算為子宮指數(shù)：子宮指數(shù)=子宮濕重（g）/體重（g）×100%；大鼠子宮HE染色標(biāo)本制備：固定脫水和石臘包埋切片染色封片。1.6  資料統(tǒng)計(jì)與處理所有數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，定量指標(biāo)用方差分析，組間比較采用LSD，S-N-K分析。     &

10、#160;   2  結(jié)果2.1  子宮重量水平的變化及補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯對其的影響見表1及圖1。表1  補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯對去勢大鼠子宮重量的影響(略)   由表1可見，去勢后大鼠子宮明顯萎縮，低劑量補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯能夠顯著增加去勢大鼠子宮重量（P0.05），與六味地黃丸作用相當(dāng)（P0.05）。2.2  子宮形態(tài)學(xué)變化及補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯的影響見表2及圖14。由表2可知，與假手術(shù)組比較，去勢空白組大鼠子宮內(nèi)膜明顯萎縮，經(jīng)比較有顯著性差異（P= 0.009）。經(jīng)補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯治療后，各組內(nèi)膜厚度、子宮壁厚度、腺體數(shù)目均有明顯增加，與去勢空白組比較有

11、顯著性差異（P0.05或P0.01）；與六味地黃丸組比較，差異不明顯（P0.05）。表2  補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯對子宮組織形態(tài)學(xué)的影響(略)3  討論   子宮是性激素的靶器宮，性激素作用于子宮可使其蛋白質(zhì)合成增加、血管擴(kuò)張、通透性發(fā)生改變，子宮對水的攝取量增加，故可以用子宮指數(shù)來判斷性激素效應(yīng)3。子宮上存在多種激素和肽類的受體，它們的變化會引起子宮形態(tài)和功能的改變。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯能夠較明顯地提高去勢大鼠子宮指數(shù)，并增加去勢大鼠子宮中腺體及血管數(shù)量，使子宮內(nèi)膜、肌層增厚，纖維結(jié)締組織減少。由此推測藥物可能直接作用于子宮。促進(jìn)大鼠子宮生發(fā)上皮生長，提高細(xì)

12、胞、腺體和血管數(shù)目，使纖維結(jié)締組織減少，改善子宮內(nèi)膜狀態(tài)，緩解子宮萎縮。表明該方劑具有一定的營養(yǎng)子宮并改善其功能的作用，且其作用優(yōu)于六味地黃丸。方中覆盆子補(bǔ)腎益精；紫河車為血肉有情之品，益精，補(bǔ)氣，養(yǎng)血。兩藥共起泌精滋腎之協(xié)同作用。藥性論言覆盆子令“女子食之有子”。因女子以肝為先天，腎為月經(jīng)孕育之本，只有肝血充足，腎精旺盛，血海滿盈，才能陰充陽長，而攝精成孕。在本方劑的基礎(chǔ)上酌情加入黃芪、當(dāng)歸等益氣養(yǎng)血之品。黃芪補(bǔ)脾肺之氣，資生血之源，與當(dāng)歸合用，養(yǎng)血和營，則陽生陰長，氣血兩旺。全方共同發(fā)揮補(bǔ)腎養(yǎng)血之功?，F(xiàn)代藥理研究表明，覆盆子等4補(bǔ)腎中藥具有類雌激素樣作用；當(dāng)歸可使子宮DNA含量和子宮利用葡萄糖能力增加5，說明當(dāng)歸可促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成及子宮增生。有實(shí)驗(yàn)證明補(bǔ)腎中藥能提高垂體的反應(yīng)性和調(diào)節(jié)卵巢內(nèi)激素水平，對性腺軸的各個環(huán)節(jié)均有一定的調(diào)整作用6。我們推測，補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯的作用可能不是簡單的雌激素代替或單因素干預(yù)，它促進(jìn)內(nèi)分泌系統(tǒng)整體功能的改善，可能是一種多層次、多環(huán)節(jié)、多途徑的綜合反應(yīng)，其機(jī)理正在進(jìn)一步研究中?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1李宗恒，鐘雪梅，代嘉得.雌孕激素順序法與補(bǔ)經(jīng)湯治療卵巢早衰的比較觀察J.中國中醫(yī)藥科技，2002，9（3）：170.2鐘雪梅，代嘉莉，李宗恒.補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯合人工周期法治療卵巢早衰38例臨床觀察J.江蘇中醫(yī)藥，2