移液器的使用校準(zhǔn)及日常維護(hù)

1、移液器（加樣槍）移液器（加樣槍）使用使用、校準(zhǔn)、校準(zhǔn)及日常維護(hù)及日常維護(hù)2022-4-22河北醫(yī)科大學(xué)新藥安全評價(jià)研究中心河北醫(yī)科大學(xué)新藥安全評價(jià)研究中心王勇1，移液器的基礎(chǔ)知識，移液器的基礎(chǔ)知識2，移液器的使用方法，移液器的使用方法3，移液器的使用注意事項(xiàng)，移液器的使用注意事項(xiàng)4，移液器快速校準(zhǔn)的方法，移液器快速校準(zhǔn)的方法5，移液器的日常維護(hù)保養(yǎng)，移液器的日常維護(hù)保養(yǎng)內(nèi)容簡介內(nèi)容簡介移液器的基礎(chǔ)知識移液器的基礎(chǔ)知識吸頭吸頭套筒套筒容量顯示窗容量顯示窗吸頭脫卸按鈕吸頭脫卸按鈕體積調(diào)節(jié)旋鈕體積調(diào)節(jié)旋鈕移液器的基本結(jié)構(gòu)移液器的基本結(jié)構(gòu)排氣式移液器排氣式移液器是指移液器活塞與吸入液體上表面之間有空氣

2、柱，在操作中，被移取的液體與活塞體之間因?yàn)榭諝庵拇嬖?，將無法直接接觸；容積式移液器容積式移液器是指移液器活塞與吸入液體上表面之間沒有空氣柱，在操作中，被移取的液體與活塞體之間因?yàn)闆]有空氣柱的存在，將可以直接接觸。移液器的基本分類移液器的基本分類標(biāo)稱容量：在給定的有效量程范圍內(nèi)最大的容量標(biāo)稱容量：在給定的有效量程范圍內(nèi)最大的容量例如標(biāo)稱容量為例如標(biāo)稱容量為100l的可調(diào)式移液器，的可調(diào)式移液器，其有效量程是其有效量程是10l-100l，但實(shí)際上，但實(shí)際上，其最小值可調(diào)節(jié)到其最小值可調(diào)節(jié)到7l左右，最大值可左右，最大值可調(diào)節(jié)到調(diào)節(jié)到110l左右，但這個(gè)范圍左右，但這個(gè)范圍7l-110l并不是廠家

3、所宣稱的量程，也不并不是廠家所宣稱的量程，也不是該移液器的有效量程。是該移液器的有效量程。移液器的容量識別移液器的容量識別移液器的使用移液器的使用正向吸液正向吸液：吸液時(shí)，將移液器按鈕按到第一檔吸液，釋放按鈕。放液時(shí)，先按到第一檔，打出大部分液體，再按下第二檔， 將余液排出。移液器的移液方式移液器的移液方式反向吸液反向吸液：適用于粘稠液體和易揮發(fā)液體。吸液時(shí)將按鈕直接按到第二檔再釋放，這樣會(huì)多吸入一些液體，打出液體時(shí)只要按到第一檔即可。此時(shí)，吸頭內(nèi)部還有多余液體，可以補(bǔ)償吸頭內(nèi)部的表面吸附。移液器的移液方式移液器的移液方式1 選擇量程合適的移液器選擇量程合適的移液器 移液器只能在特定量程范圍內(nèi)

4、準(zhǔn)確移取液體，移液器只能在特定量程范圍內(nèi)準(zhǔn)確移取液體，如超出最低或最大量程，會(huì)損壞移液器并導(dǎo)致計(jì)如超出最低或最大量程，會(huì)損壞移液器并導(dǎo)致計(jì)量不準(zhǔn)；量不準(zhǔn)；2 設(shè)定容量值設(shè)定容量值2.1 粗調(diào)：通過調(diào)節(jié)旋鈕將容量值迅速調(diào)整至接粗調(diào)：通過調(diào)節(jié)旋鈕將容量值迅速調(diào)整至接近自己的預(yù)想值；近自己的預(yù)想值；2.2 細(xì)調(diào)細(xì)調(diào)：當(dāng)容量值接近設(shè)定值以后，應(yīng)將移液當(dāng)容量值接近設(shè)定值以后，應(yīng)將移液器刻度顯示窗平行放至自己的眼前，通過調(diào)節(jié)旋器刻度顯示窗平行放至自己的眼前，通過調(diào)節(jié)旋鈕慢慢地將容量值調(diào)至預(yù)想值，從而避免視覺誤鈕慢慢地將容量值調(diào)至預(yù)想值，從而避免視覺誤差所造成的影響；差所造成的影響；2.3 設(shè)定容量值時(shí)的注

5、意事項(xiàng)：在調(diào)節(jié)量程時(shí)，設(shè)定容量值時(shí)的注意事項(xiàng)：在調(diào)節(jié)量程時(shí)，如果要從大體積調(diào)為小體積，則按照正常的調(diào)節(jié)如果要從大體積調(diào)為小體積，則按照正常的調(diào)節(jié)方法，旋轉(zhuǎn)旋鈕即可。但如果要從小體積調(diào)為大方法，旋轉(zhuǎn)旋鈕即可。但如果要從小體積調(diào)為大體積時(shí)，則應(yīng)先旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度，體積時(shí)，則應(yīng)先旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證量取的最高精再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證量取的最高精確度。確度。移液器的操作移液器的操作方法方法3 吸液嘴（吸液嘴（吸吸頭）的裝配：把白套筒頭）的裝配：把白套筒頂端插入吸液嘴，在輕輕用力下壓的頂端插入吸液嘴，在輕輕用力下壓的同時(shí)，把手中的移液器按逆時(shí)針

6、方向同時(shí)，把手中的移液器按逆時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)至吸液嘴卡緊。切記用力不能過旋轉(zhuǎn)至吸液嘴卡緊。切記用力不能過猛，更不能采取剁吸頭的方法來進(jìn)行猛，更不能采取剁吸頭的方法來進(jìn)行安裝。吸液嘴卡緊的標(biāo)志是略為超過安裝。吸液嘴卡緊的標(biāo)志是略為超過O型環(huán)，并可以看到連接部分形成清型環(huán)，并可以看到連接部分形成清晰的密封圈；晰的密封圈；4 預(yù)洗吸液嘴：在安裝了新的吸液嘴預(yù)洗吸液嘴：在安裝了新的吸液嘴或增大了容量值以后，應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)或增大了容量值以后，應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取、排放兩到三次，確保移的液體吸取、排放兩到三次，確保移液工作的精度和準(zhǔn)度；移液工作的精度和準(zhǔn)度；移液器的操作方法移液器的操作方法5 吸液：先將四指

7、并攏握住移液吸液：先將四指并攏握住移液器上部，用拇指按住塞桿頂端的器上部，用拇指按住塞桿頂端的按鈕，向下按到第一停點(diǎn)，再將按鈕，向下按到第一停點(diǎn)，再將吸頭垂直浸入液面吸頭垂直浸入液面23mm，緩，緩慢平穩(wěn)松開按鈕，吸上液體，并慢平穩(wěn)松開按鈕，吸上液體，并停留停留12秒鐘（粘性大的溶液可秒鐘（粘性大的溶液可加長停留時(shí)間）；加長停留時(shí)間）；移液器的操作方法移液器的操作方法6 移液：緩慢抬起移液器取出吸液移液：緩慢抬起移液器取出吸液嘴，確保吸液嘴外壁無殘留液體。嘴，確保吸液嘴外壁無殘留液體?？捎枚ㄐ詾V紙抹去吸嘴外面可能黏可用定性濾紙抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿觸及吸液嘴口；附的液滴。小心勿觸及

8、吸液嘴口；7 目測吸入的液體體積是否合理；目測吸入的液體體積是否合理；8 放液：將吸液嘴貼到容器內(nèi)壁并放液：將吸液嘴貼到容器內(nèi)壁并保持保持20-40傾斜，平穩(wěn)地把按傾斜，平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點(diǎn)，停鈕壓到第一停點(diǎn)，停1-2s（粘性大（粘性大的液體要加長停留時(shí)間）后，繼續(xù)的液體要加長停留時(shí)間）后，繼續(xù)按壓到第二停點(diǎn)，排出殘余液體。按壓到第二停點(diǎn)，排出殘余液體。松開按鈕，然后將吸液嘴沿著內(nèi)壁松開按鈕，然后將吸液嘴沿著內(nèi)壁向上移開；向上移開；9 按吸頭彈射器除去吸頭，吸取不按吸頭彈射器除去吸頭，吸取不同樣本液體時(shí)必須更換吸頭；同樣本液體時(shí)必須更換吸頭；移液器的操作方法移液器的操作方法1 正確填充吸頭

9、正確填充吸頭 當(dāng)某一吸頭的建議（標(biāo)稱）范圍為最大吸頭容量（標(biāo)當(dāng)某一吸頭的建議（標(biāo)稱）范圍為最大吸頭容量（標(biāo)稱容量）的稱容量）的 10% 至至 100% 時(shí)，可在時(shí)，可在 35% 至至 100% 這一這一較小以及優(yōu)化的范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)最高精確度。較小以及優(yōu)化的范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)最高精確度。 在此范圍內(nèi)移液會(huì)減少對操作人員技法的要求，并在此范圍內(nèi)移液會(huì)減少對操作人員技法的要求，并可將結(jié)果準(zhǔn)確度提高?？蓪⒔Y(jié)果準(zhǔn)確度提高。 當(dāng)達(dá)到標(biāo)稱容量的當(dāng)達(dá)到標(biāo)稱容量的 50% 時(shí)可提供最佳結(jié)果。時(shí)可提供最佳結(jié)果。2 吸液時(shí)保持垂直入液角吸液時(shí)保持垂直入液角 使入液角盡可能地接近垂直位置，否則垂直液柱較使入液角盡可能地接近垂直位

10、置，否則垂直液柱較小，這樣將會(huì)吸入過多樣品。小，這樣將會(huì)吸入過多樣品。 分液時(shí)，吸頭應(yīng)當(dāng)與容器壁保持較小角度，從而確分液時(shí)，吸頭應(yīng)當(dāng)與容器壁保持較小角度，從而確保良好的排液效果。保良好的排液效果。3 分液技法分液技法 對于大多數(shù)應(yīng)用而言，建議在分液時(shí)將吸頭的末端對于大多數(shù)應(yīng)用而言，建議在分液時(shí)將吸頭的末端貼靠容器壁。這可減少或者消除分液后殘留在吸頭上的樣貼靠容器壁。這可減少或者消除分液后殘留在吸頭上的樣品。沿側(cè)壁向上滑動(dòng)吸頭末端將移液器撤下，從而去除吸品。沿側(cè)壁向上滑動(dòng)吸頭末端將移液器撤下，從而去除吸頭孔處的任何殘留液滴。頭孔處的任何殘留液滴。移液器的使用注意事項(xiàng)移液器的使用注意事項(xiàng)4 吸頭入

11、液深度吸頭入液深度 正確的吸頭入液深度對于微量移液器正確的吸頭入液深度對于微量移液器尤為重要。如果吸頭入液過深，則隨著壓力尤為重要。如果吸頭入液過深，則隨著壓力的加大，吸液量將會(huì)增多。保留在吸頭表面的加大，吸液量將會(huì)增多。保留在吸頭表面的液體會(huì)影響結(jié)果。如果吸頭入液太淺，則的液體會(huì)影響結(jié)果。如果吸頭入液太淺，則會(huì)造成空氣進(jìn)入，從而產(chǎn)生氣泡以及導(dǎo)致容會(huì)造成空氣進(jìn)入，從而產(chǎn)生氣泡以及導(dǎo)致容量不準(zhǔn)確。正確的入液深度可使準(zhǔn)確度提高量不準(zhǔn)確。正確的入液深度可使準(zhǔn)確度提高達(dá)達(dá) 5%。 移液器容量移液器容量 入液深度入液深度 2 與 10ul 1mm 20 與 100ul 2-3mm 200 與 1000u

12、l 3-6mm 5000ul 與 10ML 6-10mm移液器的使用注意事項(xiàng)移液器的使用注意事項(xiàng)5 吸頭入液時(shí)間吸頭入液時(shí)間 在將樣品吸入吸頭時(shí)，在樣品中的入液在將樣品吸入吸頭時(shí)，在樣品中的入液時(shí)間是良好移液技法中的關(guān)鍵因素。在平穩(wěn)時(shí)間是良好移液技法中的關(guān)鍵因素。在平穩(wěn)松開定位銷按鈕之后，必須進(jìn)行短暫暫停，松開定位銷按鈕之后，必須進(jìn)行短暫暫停，然后再從樣品中取出，以確保將全量樣品吸然后再從樣品中取出，以確保將全量樣品吸入吸頭中。如果量較大以及對于粘性物質(zhì)而入吸頭中。如果量較大以及對于粘性物質(zhì)而言，必須在等候較長時(shí)間后再取出，因?yàn)橐蒲?，必須在等候較長時(shí)間后再取出，因?yàn)橐埔浩髦械臍馐倚枰幻腌姷臅r(shí)

13、間才能實(shí)現(xiàn)均液器中的氣室需要一秒鐘的時(shí)間才能實(shí)現(xiàn)均衡。衡。6 吸液速率吸液速率 移液器的吸液速率不盡相同，因此會(huì)移液器的吸液速率不盡相同，因此會(huì)對結(jié)果的精度與準(zhǔn)確度產(chǎn)生影響。用戶應(yīng)使對結(jié)果的精度與準(zhǔn)確度產(chǎn)生影響。用戶應(yīng)使用以一種平穩(wěn)并且受控的方式釋放移液器定用以一種平穩(wěn)并且受控的方式釋放移液器定位銷按鈕。釋放過快的定位銷可能出現(xiàn)的最位銷按鈕。釋放過快的定位銷可能出現(xiàn)的最常見后果是：氣霧會(huì)進(jìn)入移液器套柄中，從常見后果是：氣霧會(huì)進(jìn)入移液器套柄中，從而損壞移液器的內(nèi)部部件。而損壞移液器的內(nèi)部部件。移液器的使用注意事項(xiàng)移液器的使用注意事項(xiàng)使用使用設(shè)備設(shè)備及物品及物品：電子天平（測量范圍：電子天平（測量

14、范圍200g；分度值；分度值0.1mg）；燒杯）；燒杯（50ml）1個(gè)；燒杯（個(gè)；燒杯（100ml）1個(gè)；定性濾紙若干小塊個(gè)；定性濾紙若干小塊；超純水；超純水80ml1 打開電子天平，空載調(diào)零打開電子天平，空載調(diào)零；2 放入小燒杯待天平顯示穩(wěn)定后，按下歸零鍵歸零。給移液放入小燒杯待天平顯示穩(wěn)定后，按下歸零鍵歸零。給移液器上安裝相應(yīng)的吸液嘴，對移液器的槍頭進(jìn)行預(yù)洗器上安裝相應(yīng)的吸液嘴，對移液器的槍頭進(jìn)行預(yù)洗；6 重復(fù)重復(fù)5次執(zhí)行次執(zhí)行3-5條。條。記錄完畢，將移液器的容量調(diào)至下一記錄完畢，將移液器的容量調(diào)至下一被檢點(diǎn)繼續(xù)。被檢點(diǎn)遵循從小到大的原則進(jìn)行調(diào)整；被檢點(diǎn)繼續(xù)。被檢點(diǎn)遵循從小到大的原則進(jìn)行

15、調(diào)整；5 待天平顯示穩(wěn)定后，馬上讀取并記錄此時(shí)電子天平顯示出待天平顯示穩(wěn)定后，馬上讀取并記錄此時(shí)電子天平顯示出的數(shù)值。記錄完畢將電子天平復(fù)零；的數(shù)值。記錄完畢將電子天平復(fù)零；4 使用移液器移取被檢容量的超純水至天平的小燒杯內(nèi)使用移液器移取被檢容量的超純水至天平的小燒杯內(nèi)；3 將移液器的容量調(diào)至被檢點(diǎn)將移液器的容量調(diào)至被檢點(diǎn)。被檢被檢點(diǎn)一般選擇最小，中間點(diǎn)一般選擇最小，中間和最大容量值。也可以是某一指定的容量點(diǎn)和最大容量值。也可以是某一指定的容量點(diǎn)；移液器快速校準(zhǔn)的方法移液器快速校準(zhǔn)的方法 tKmV%100VVVEV%1001VSn移液器實(shí)際容量計(jì)算：將所測得的質(zhì)量值帶入以下公式，求得移液器在當(dāng)

16、前溫度下的實(shí)際容量值；式中：V 在當(dāng)前溫度下的移液器的實(shí)際容量，L； m 被檢移液器所排出的超純水質(zhì)量， mg； K(t) 測定值m和測定時(shí)超純水溫度的比例系數(shù)；式中：V 標(biāo)稱容量，L； 5次測量的算數(shù)平均值，L移液器的容量重復(fù)性計(jì)算：將換算得到的實(shí)際容量值帶入以下公式，求得移液器在當(dāng)前溫度下的容量重復(fù)性；式中：n-1 標(biāo)準(zhǔn)偏差； n 測量次數(shù)； S 重復(fù)性；移液器的容量相對誤差計(jì)算：將換算得到的實(shí)際容量值帶入以下公式，求得移液器在當(dāng)前溫度下的容量相對誤差；移液器快速校準(zhǔn)的數(shù)據(jù)處理移液器快速校準(zhǔn)的數(shù)據(jù)處理表一表一 移液器容量允許誤差和測量重復(fù)性移液器容量允許誤差和測量重復(fù)性移液器移液器的評價(jià)標(biāo)

17、準(zhǔn)的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)1 將移液器調(diào)整至最小量程，按照校準(zhǔn)方法得到當(dāng)前的將移液器調(diào)整至最小量程，按照校準(zhǔn)方法得到當(dāng)前的實(shí)際容量值，根據(jù)與標(biāo)示容量值的差值，通過移液器上實(shí)際容量值，根據(jù)與標(biāo)示容量值的差值，通過移液器上的調(diào)準(zhǔn)旋鈕進(jìn)行調(diào)整；的調(diào)準(zhǔn)旋鈕進(jìn)行調(diào)整；2 當(dāng)調(diào)整后測得的實(shí)際容量值與標(biāo)示容量值符合表當(dāng)調(diào)整后測得的實(shí)際容量值與標(biāo)示容量值符合表1要求要求時(shí)，將移液器容量調(diào)整至中間量程繼續(xù)測量。中間量程時(shí)，將移液器容量調(diào)整至中間量程繼續(xù)測量。中間量程符合要求時(shí)，再調(diào)整至最大量程繼續(xù)測量。符合要求時(shí)，再調(diào)整至最大量程繼續(xù)測量。3 如果中間量程或者最大量程有一個(gè)不符合表如果中間量程或者最大量程有一個(gè)不符合表1要求

18、時(shí)，要求時(shí)，則需重新調(diào)整至最小量程繼續(xù)修正。直到則需重新調(diào)整至最小量程繼續(xù)修正。直到3個(gè)量程的值都個(gè)量程的值都符合表符合表1要求為止。要求為止。4 修正完畢的移液器，需重新進(jìn)行校準(zhǔn)。修正完畢的移液器，需重新進(jìn)行校準(zhǔn)。5 最小量程低于最小量程低于10L的，不進(jìn)行修正。如果最大量程和的，不進(jìn)行修正。如果最大量程和中間量程符合校準(zhǔn)要求的，繼續(xù)使用，否則返廠維修。中間量程符合校準(zhǔn)要求的，繼續(xù)使用，否則返廠維修。移液器的修正移液器的修正方法方法1 如長時(shí)間不使用，要把移液槍的量程調(diào)至最大值的如長時(shí)間不使用，要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧；刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧；2 定期清潔移液定期清潔移液器器外壁，可以用外壁，可以用95%酒精或酒精或60%的異的異丙醇，再用蒸餾水擦拭，自然晾干；丙醇，再用蒸餾水擦拭，自然晾干；3 使用時(shí)要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法是吸取液體后使用時(shí)要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法是吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，看看液面是否下降。如果漏液，懸空垂直放置幾秒中，看看液面是否下降。如果漏液，則檢查吸液嘴是否匹配和彈簧活塞是否正常；則檢查吸液嘴是否匹配和彈簧活塞是否正常；4 當(dāng)移液