分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技能操作

1、前言請(qǐng)?jiān)谑褂帽緯?shū)。前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明感謝您Shimadzu 分析儀器工作站 "LabSolutions" (下文指 "本軟件" 或者 "LabSolutions")。本說(shuō)明書(shū)記載了本的操作程序。請(qǐng)?jiān)谑褂帽厩白屑?xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)并遵照說(shuō)明書(shū)的內(nèi)容正確使用本。請(qǐng)妥善保管本說(shuō)明書(shū)以備今后參考。本說(shuō)明書(shū)記載內(nèi)容以用戶(hù)擁有 Windows 的基本操作知識(shí)為前提。有關(guān) Windows 的操作，請(qǐng)參考該書(shū)。附帶的使用說(shuō)明本說(shuō)明書(shū)是英文版 LabSolutions 理論說(shuō)明書(shū) (223- 60090) (修訂版C2012年3月) 的譯文。重要事項(xiàng)·

2、;如果用戶(hù)或使用場(chǎng)所發(fā)生改變，請(qǐng)將本說(shuō)明書(shū)轉(zhuǎn)交給后續(xù)用戶(hù)。·如果本說(shuō)明書(shū)丟失或損壞，請(qǐng)立即與您所在各區(qū)域內(nèi)的島津分公司。·為確保安全操作，請(qǐng)委托您所在各區(qū)域內(nèi)的島津分公司進(jìn)行安裝、調(diào)試或搬動(dòng)儀器后的重新安裝。Ó 2011-2012 Shimadzu Corporation.s.理論說(shuō)明書(shū) i·本說(shuō)明書(shū)內(nèi)容改動(dòng)恕不另行通知。·本說(shuō)明書(shū)內(nèi)容力求準(zhǔn)確，錯(cuò)誤或遺漏敬請(qǐng)?jiān)彙?#183;本說(shuō)明書(shū)歸株式會(huì)社島津制作所所有。本公司許可不得、部分或全部?jī)?nèi)容。·Microsoft、Windows、Windows 7 和 Windows XP 是美國(guó)Mi

3、crosoft Corporation在美國(guó)及其他的商標(biāo)。Adobe、 Adobe 標(biāo)志和 Adobe Reader 是美國(guó) AdobeSystems Incorporated 在美國(guó)及其他的商標(biāo)。在本說(shuō)明書(shū)中記載的其他公司名及名是各公司的商標(biāo)及商標(biāo)。此外，本說(shuō)明書(shū)中不對(duì)TM、 â標(biāo)記做明確說(shuō)明。·Microsoftâ Windowsâ 7操作系統(tǒng)被稱(chēng)作 "Windows 7"。MicrosoftâWindowsâXP 專(zhuān)業(yè)版被稱(chēng)作 "Windows XP"。·本備件的供貨期為停產(chǎn)后七

4、年。其后可能無(wú)法提供備件，敬請(qǐng)諒解。但非本公司生產(chǎn)備件的供貨期請(qǐng)參照有關(guān)廠家的規(guī)定。ii 理論說(shuō)明書(shū)使用說(shuō)明書(shū)使用說(shuō)明書(shū)的目錄¢¢使用說(shuō)明書(shū)的標(biāo)記在本說(shuō)明書(shū)中使用下列標(biāo)記表示注意和注釋?zhuān)瑫r(shí)在本說(shuō)明書(shū)中使用了下列符號(hào):理論說(shuō)明書(shū) iii標(biāo)記含義!注意具有潛在，操作不當(dāng)可能導(dǎo)致人身輕微或中度損害以及設(shè)備損壞。正確使用本的附加說(shuō)明。參考標(biāo)注參考頁(yè)數(shù)。 表示顯示在窗口中的按鈕、菜單選項(xiàng)、設(shè)置選項(xiàng)、窗口 / 子窗口以及圖標(biāo)的名稱(chēng)。舉例: 單擊 確定。名稱(chēng)內(nèi)容入門(mén)指南本指南按照實(shí)際的程序?yàn)樾掠脩?hù)描述基本操作方法。閱讀本指南了解本軟件的基本操作。操作說(shuō)明書(shū)本說(shuō)明書(shū)更詳細(xì)地描述了總體操作

5、和便利功能，例如，軟件的系統(tǒng)配置、數(shù)據(jù)處理、批處理、 結(jié)果的確認(rèn)以及報(bào)告功能。管理說(shuō)明書(shū)本說(shuō)明書(shū)描述了本軟件的系統(tǒng)管理和數(shù)據(jù)管理。請(qǐng)?jiān)诒匾獣r(shí)參閱本說(shuō)明書(shū)。安裝維護(hù)說(shuō)明書(shū)本說(shuō)明書(shū)描述了本軟件的安裝和維護(hù)。理論說(shuō)明書(shū)本說(shuō)明書(shū)描述了樣品成分的峰檢測(cè)和定量。請(qǐng)?jiān)诒匾獣r(shí)參閱本說(shuō)明書(shū)。幫助單擊屏幕上的 幫助 按鈕，或者按下 F1 鍵，顯示屏幕參數(shù)的描述、具體問(wèn)題的回答或者各種難題的解決方法。此外， 在錯(cuò)誤信息窗口上單擊 幫助 按鈕，可以顯示該錯(cuò)誤的詳情或者該錯(cuò)誤的解決方法。咨詢(xún)前，建議您先參閱該信息。保修本的保修內(nèi)容如下:1. 保修期2. 保修內(nèi)容請(qǐng)咨詢(xún)您所在區(qū)域內(nèi)的島津分公司。維修或更換零部件 (包設(shè)備

6、、零部件等短對(duì)保修期內(nèi)因本公司造成的故障將括 USB 加密鎖)。但對(duì)個(gè)人計(jì)算機(jī)及其可能無(wú)法提供同一型號(hào)的。3. 責(zé)任范圍(1) 任何情況下本公司均不對(duì)用戶(hù)的誤工費(fèi)、間接性損害和衍生性損害負(fù)任何責(zé)任。也不對(duì)因第向用戶(hù)提起的損壞賠償負(fù)任何責(zé)任。(2) 任何情況下本公司的最高賠償金額均以出廠價(jià)格或?yàn)橄蕖?. 責(zé)除下列故障不屬于保修范圍:1)2)操作不當(dāng)。非本公司或本公司指定的其他公司對(duì)本進(jìn)行的維修或改裝。3)4)與非本公司指定的硬件或軟件一起使用。因計(jì)算機(jī)損壞。造成的本故障和包括基本軟件在內(nèi)的軟件及數(shù)據(jù)5)因停電或電壓突然降的軟件及數(shù)據(jù)損壞。電源故障的故障和包括基本軟件在內(nèi)6)7)8)錯(cuò)誤關(guān)機(jī)造成的

7、故障和包括基本軟件在內(nèi)的軟件及數(shù)據(jù)損壞。非本身造成的故障。因在高溫高濕、腐蝕性氣體或的故障。等惡劣環(huán)境中使用本而造成9)因火災(zāi)、其他自然災(zāi)害、放射性物質(zhì)和有害物質(zhì)的污染，以和等不可抗拒事故造成的故障。及、10) 安裝后自行移動(dòng)或時(shí)造成的故障。11) 消耗品或等同于消耗品的零部件。注意: 軟盤(pán)和CD/DVD-ROM等介質(zhì)也屬于消耗品。*如果附帶保修單或單獨(dú)簽署了包括保修事項(xiàng)在內(nèi)的合同，則應(yīng)遵守該文件記載的保修內(nèi)容。對(duì)于具有特殊規(guī)格和系統(tǒng)的，保修期將另行規(guī)定。如果軟件附帶的 USB 加密鎖丟失，將不再重新頒發(fā)證。iv 理論說(shuō)明書(shū)目錄1 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.1參數(shù)1參數(shù)和操作流程2半峰寬 (半峰寬)4斜

8、率 (確定峰檢測(cè)靈敏度和峰開(kāi)始 / 結(jié)束)5斜率測(cè)試6漂移 (定義基線的斜率)8未分離峰10變參時(shí)間 (更改峰檢測(cè)參數(shù)的時(shí)間)121.1.11.1.21.1.31.1.41.1.51.1.61.1.71.2識(shí)別參數(shù)141.2.1 時(shí)間窗法和時(shí)間帶法141.2.2 絕對(duì) / 相對(duì)保留時(shí)間法151.2.3 最接近峰的識(shí)別181.2.4分組211.3定量方法221.3.1 定量方法和計(jì)算公式 (含稀釋因子)231.3.2 定量方法和計(jì)算公式 (無(wú)稀釋因子)251.3.3 舍入方法271.4標(biāo)準(zhǔn)濃度的精確度和誤差281.4.1精確度 %281.4.2誤差 %282 校準(zhǔn)曲線2.1校準(zhǔn)曲線的類(lèi)型29直線

9、29折線30二次曲線和三次曲線30平均 RF31指數(shù)31手動(dòng) RF (直線、指數(shù))32使用其他成分的校準(zhǔn)曲線定量322.1.12.1.22.1.32.1.42.1.52.1.62.1.72.1.8最小二乘法和最小二乘法332.2校準(zhǔn)曲線的校正362.2.1 使用標(biāo)準(zhǔn)濃度因子創(chuàng)建校準(zhǔn)曲線362.2.2 多個(gè)目標(biāo)成分的校準(zhǔn)曲線37理論說(shuō)明書(shū) v目錄3 計(jì)算公式3.1噪音 / 漂移計(jì)算參數(shù)393.1.1 噪音計(jì)算方法393.1.2 檢測(cè)限 / 定量限系數(shù)413.1.3 漂移設(shè)置413.2QA / QC 參數(shù)42共用項(xiàng)目42校準(zhǔn)曲線42質(zhì)量44回收率44降解檢查45檢查噪音 / 漂移453.2.13.

10、2.23.2.33.2.43.2.53.2.63.33.43.53.63.7柱效計(jì)算公式46計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間53峰谷比的計(jì)算方法54背景扣除運(yùn)算55AART 保留時(shí)間計(jì)算方法573.7.1 化合物表中保留時(shí)間的計(jì)算方法573.7.2 化合物表中保留指數(shù)的計(jì)算方法604 峰純度計(jì)算方法4.1峰純度計(jì)算的基本原理634.1.1 計(jì)算相似度634.1.2 計(jì)算閾值644.1.3 計(jì)算峰純度654.1.4 峰純度計(jì)算結(jié)果舉例694.2峰純度分析的方法開(kāi)發(fā)704.2.14.2.24.2.34.2.44.2.54.2.6指定多色譜圖波長(zhǎng)70計(jì)算噪音光譜71設(shè)置波長(zhǎng)范圍72設(shè)置校正系數(shù)72光譜背景補(bǔ)償73設(shè)

11、置 純度計(jì)算選項(xiàng) 選項(xiàng)744.3方法優(yōu)化744.3.1 方法開(kāi)發(fā)744.3.2 方法驗(yàn)證764.3.3 方法驗(yàn)證結(jié)果的解釋764.3.4 應(yīng)用舉例77vi 理論說(shuō)明書(shū)1數(shù)據(jù)處理參數(shù)本章講述在本軟件數(shù)據(jù)分析中使用的數(shù)據(jù)處理參數(shù)和計(jì)算公式。在數(shù)據(jù)處理窗口的 方法視圖 中顯示數(shù)據(jù)處理參數(shù)。1本章包括如下部分:第1頁(yè)上的 "1.1參數(shù)"第14頁(yè)上的 "1.2 識(shí)別參數(shù)"第22頁(yè)上的 "1.3 定量方法"第28頁(yè)上的 "1.4 標(biāo)準(zhǔn)濃度的精確度和誤差"1.1參數(shù)根據(jù)保存在方法文件里的割以及刪除多余峰。參數(shù)進(jìn)行處理，例如，目標(biāo)

12、峰的檢測(cè)、基線波動(dòng)的扣除、未分離峰的分本節(jié)講述參數(shù)和如何用這些參數(shù)對(duì)峰進(jìn)行下文講述參數(shù)的三種不同設(shè)置方法:。 參考有關(guān)如何設(shè)置參數(shù)的參考操作說(shuō)明書(shū)。理論說(shuō)明書(shū) 1名稱(chēng)說(shuō)明參數(shù)指定了用于整個(gè)色譜圖的基本參數(shù)。通過(guò) 方法視圖 - 設(shè)置。時(shí)間程序在色譜圖上更改指定時(shí)間的參數(shù)。在 方法視圖 的 上單擊 程序 按鈕，顯示時(shí)間程序 子窗口，進(jìn)入時(shí)間程序。手動(dòng)為每一個(gè)峰手動(dòng)指定參數(shù)。所設(shè)置的參數(shù)只適用于當(dāng)前的數(shù)據(jù)文件。 在數(shù)據(jù)處理窗口中的 色譜圖視圖 上單擊鼠標(biāo)右鍵，顯示 手動(dòng)欄。1 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.1.1參數(shù)和操作流程按照下列步驟執(zhí)行。下表講述具體參數(shù)如何連接每個(gè)程序。2 理論說(shuō)明書(shū)流程參數(shù)功能<

13、>: 缺省值 : 設(shè)置范圍說(shuō)明第 1 步: 峰檢測(cè)根據(jù) 半峰寬 和 斜率 值， 首先檢測(cè)色譜圖上的峰開(kāi) 始、峰結(jié)束和峰頂。對(duì)這些參數(shù)進(jìn)行適當(dāng)設(shè)置， 使軟件只能檢測(cè)必要峰，并可以排除噪音。半峰寬最小半峰寬<3> (: sec) 0.04 200指定在分析期間檢測(cè)到的半峰寬。小于半峰寬的峰 被看做噪音。半峰寬斜率峰檢測(cè)靈敏度(定義峰開(kāi)始或峰結(jié)束)<1000>(: mV/min) 0 4 ´ 1011指定在峰檢測(cè)時(shí)用于參照的斜率。圖的斜率超過(guò)設(shè)定值的點(diǎn)被看做峰開(kāi)始，而斜率低 于設(shè)定值的點(diǎn)被看做峰結(jié)束。執(zhí)行斜率測(cè)試以從基線噪音信號(hào)中獲得合適的 斜率 值。 參考第

14、6頁(yè)上的 "1.1.4 斜率測(cè)試"變參時(shí)間更改峰檢測(cè)參數(shù)的時(shí)間<1000>(: min) 0 1000將每個(gè)設(shè)定值 ´ 2n (n = 0 14) 的半峰寬 (半峰 寬) 增加一倍，而將峰檢測(cè)靈敏度 (斜率) 減半。使用這一參數(shù)可以促進(jìn)峰，因?yàn)榇藭r(shí)的峰隨時(shí)間變得更寬。如果設(shè)置為 "0" 可以自動(dòng)調(diào)整參數(shù)。 參考第12頁(yè)上的 "1.1.7 變參時(shí)間 (更改峰檢測(cè)參數(shù)的時(shí)間)"第 2 步: 處理基線 (確定如何對(duì)重疊峰進(jìn)行)基線為計(jì)算 () 峰面積，在重疊峰的第一個(gè)峰開(kāi)始和最后一個(gè)峰結(jié)束之間假定基線。在基線波動(dòng)很明顯

15、時(shí)，視情況設(shè)置 漂移 值。漂移定義基線斜率<0> = 自動(dòng)處理(: mV/min) -107 107確定如何對(duì)重疊峰進(jìn)行。在基線斜坡 (漂移) 上方存在重疊峰的峰谷時(shí)，可以用垂直線 (A) 將峰。在基線斜坡下方存在峰谷時(shí)，可以通過(guò)峰谷 (B) 劃出基線。AB如果設(shè)置為 "0"，本軟件會(huì)自動(dòng)處理基線。也可設(shè)置負(fù)值。 參考第8頁(yè)上的 "1.1.5 漂移 (定義基線的斜率)"1.1參數(shù)1理論說(shuō)明書(shū) 3流程參數(shù)功能< >: 缺省值 : 設(shè)置范圍說(shuō)明第 3 步: 對(duì)未分離峰進(jìn)行積分垂直分割拖尾在原則上，可以用一條垂直線自動(dòng)將未分離峰分割。根

16、據(jù)設(shè)置條件，將作為拖尾峰上的峰進(jìn)行自動(dòng)處理。無(wú)自動(dòng)處理-第 4 步: 計(jì)算峰面積計(jì)算 () 每個(gè)識(shí)別峰的峰面積。無(wú)自動(dòng)處理-第 5 步: 刪除多余的小峰在屏幕和峰報(bào)告中，可以隱藏面積或高度小于設(shè)定值的峰。最小面積 /高度顯示的最小峰面積和峰高<1000>(: 計(jì)數(shù)) 0 107在 上，從 計(jì)算依據(jù) 中選擇 "面積" 或 "高度"，以定義要隱藏 (從屏幕、峰報(bào)告等) 的小峰。使用下列:面積 (mV sec)，高度 (mV)1 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.1.2 半峰寬 (半峰寬)在所有峰參數(shù)中，半峰寬 是最基本參數(shù)。本軟件根據(jù) 半峰寬 值對(duì)峰執(zhí)行檢測(cè)，在峰

17、的最優(yōu)條件下進(jìn)行。在 半峰寬 中，指定分析期間檢測(cè)峰半峰寬 (在 50% 峰高處的峰寬)。將數(shù)值設(shè)置為等于或略小于色譜圖中銳峰的半峰寬。半峰寬 的測(cè)定是 sec。半峰寬圖1-1 半峰寬噪音寬度一般小于半峰寬。通過(guò)設(shè)置目標(biāo)峰的 半峰寬，小于半峰寬度的峰將作為噪音排除。¢ 半峰寬 舉例譜圖的 半峰寬 設(shè)定值 30 與 10 進(jìn)行比較。= 30: 只能檢測(cè)一個(gè)峰。下文將同半峰寬半峰寬= 10: 能檢測(cè)兩個(gè)峰。4 理論說(shuō)明書(shū)1.1參數(shù)1.1.3 斜率 (確定峰檢測(cè)靈敏度和峰開(kāi)始 / 結(jié)束)本軟件根據(jù)斜率對(duì)峰進(jìn)行檢測(cè) (確定峰開(kāi)始 / 結(jié)束)。如果 斜率 被設(shè)置為q，如圖1-2中所示，斜率超過(guò)

18、角度 q 時(shí)為峰開(kāi)始。相反，斜率低于角度 q時(shí)，為峰結(jié)束。如果將 斜率 設(shè)置為較大的數(shù)值，本軟件將只能檢測(cè)銳峰。相反，為較小的數(shù)值時(shí)，本軟件會(huì)檢測(cè)更寬的峰，有時(shí)，還將檢測(cè)出多個(gè)噪音。1圖1-2 峰檢測(cè)和 斜率¢ 斜率 示例下文將同譜圖的 斜率 設(shè)定值 1000 與 100000 進(jìn)行比較。斜率 =1000: 將噪音峰檢測(cè)為微小峰。斜率 =100000: 只能檢測(cè)傾斜角大于 斜率 值的峰。理論說(shuō)明書(shū) 51 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.1.4 斜率測(cè)試斜率測(cè)試可以從色譜圖上的基線噪音和漂移自動(dòng)計(jì)算 斜率 值。有兩種方法可以獲得斜率值: (1) 在分析前使用檢測(cè)器信號(hào)顯示時(shí)的基線; (2) 使用已獲得

19、的色譜圖上的基線。¢ 分析前的斜率測(cè)試1在 或者在 窗口的色譜圖上單擊鼠標(biāo)右鍵。在顯示的菜單中單擊 斜率測(cè)試。 窗口的 菜單中單擊 斜率測(cè)試。斜率測(cè)試開(kāi)始。本測(cè)試將使用 10 倍 半峰寬 值和 10 秒中的較大值。2顯示 設(shè)置斜率 子窗口。在確認(rèn) 斜率 框內(nèi)的數(shù)值后，單擊 設(shè)置到參數(shù)。斜率測(cè)試結(jié)果 (設(shè)置斜率 子窗口內(nèi)的 斜率 值) 即被保存為峰斜率 參數(shù)。關(guān)閉 設(shè)置斜率 子窗口。單擊 取消，可以只關(guān)閉 設(shè)置斜率 子窗口，而保存。每次斜率測(cè)試都能得到不同的斜率值。因此，在保存參數(shù)前，推薦略微增加 斜率 框內(nèi)的數(shù)值。在斜率測(cè)試中得到的數(shù)值是基于分析前的基線，不能反映分析過(guò)程中的基線漂移

20、。因此，必須注意: 不要將斜率測(cè)試結(jié)果用于可能存在很大基線漂移的梯度 LC 和程序溫度 GC 分析中。此時(shí)，可以手動(dòng)設(shè)置大于漂移值的 斜率 值，使基線峰被檢出。 參考參考 操作說(shuō)明書(shū)，了解如何從基線 (斜率試驗(yàn)) 計(jì)算斜率數(shù)值的信息。6 理論說(shuō)明書(shū)1.1參數(shù)¢ 分析后的斜率測(cè)試1234567在 再 窗口中，打開(kāi)包含色譜圖數(shù)據(jù)的數(shù)據(jù)文件。在 方法視圖 里單擊軟件進(jìn)入編輯模式。(編輯)。1選擇 顯示 ，然后單擊(程序)。時(shí)間程序 子窗口。單擊 時(shí)間程序 子窗口中的(斜率測(cè)試)。將截取框移到色譜圖上時(shí)會(huì)顯示一條垂直線。將截取框移到基線斜率測(cè)試所需的起始點(diǎn)，然后單擊鼠標(biāo)按鈕。選擇檢測(cè)不到峰、

21、短暫噪音和 漂移的部分。在起始點(diǎn)處出現(xiàn)一條垂直線。將截取框移到所需的測(cè)試終點(diǎn)，然后單擊鼠標(biāo)按鈕。在終點(diǎn)出現(xiàn)一條垂直線。指定終點(diǎn)，使測(cè)試時(shí)間能長(zhǎng)于 10 倍 半峰寬 值或者至少為 10 秒。根據(jù)在指定基線部分的噪音可以自動(dòng)計(jì)算斜率值，然后顯示 斜率測(cè)試 子窗口。在確認(rèn)顯示數(shù)值后，單擊 設(shè)置到參數(shù)。關(guān)閉 斜率測(cè)試 子窗口。斜率測(cè)試結(jié)果即被設(shè)置為 方法視圖 - 取消，在不保存數(shù)值的情況下關(guān)閉 斜率測(cè)試 子窗口。頁(yè)里的 斜率 參數(shù)。單擊一旦更改了 斜率 值，軟件就會(huì)重新執(zhí)行峰。理論說(shuō)明書(shū) 71 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.1.5 漂移 (定義基線的斜率)使用 漂移 參數(shù)指定峰波動(dòng)。如果 漂移 被設(shè)置為 "

22、;0"，可以根據(jù)設(shè)置對(duì)基線進(jìn)行自動(dòng)處理。如果 漂移 參數(shù)小，相鄰峰將被作為未分離峰，在峰谷處將被垂直分割。¢ 自動(dòng)基線校正 (漂移 = 0)如果 漂移 設(shè)置為 "0"，可以根據(jù)圖1-3中所示的內(nèi)容對(duì)基線進(jìn)行校正。當(dāng)峰谷的時(shí)間寬度 (T2) 小于前一峰的半峰寬 (T1) 時(shí)，將無(wú)法分離峰，而被垂直分割。(2) 當(dāng) T2 大于 T1 時(shí)， T2 將被作為基線處理。T1>T2: 作為未分離峰，被垂直分割。T1<T2: 作為分離峰。圖1-3 自動(dòng)基線校正 (漂移 = 0)8 理論說(shuō)明書(shū)1.1參數(shù)¢ 使用 漂移 進(jìn)行基線校正將 漂移 設(shè)置為

23、"0" 以外的數(shù)值，即使寬度小 (T2)，峰谷也會(huì)被作為基線點(diǎn)處理。1圖1-4 使用非 "0" 漂移 進(jìn)行基線校正根據(jù) 漂移 值定義的斜率 (圖中虛線) 實(shí)際由峰開(kāi)始點(diǎn) (S,) 劃出，如圖1-4中所示。如果峰結(jié)束點(diǎn) (E) 位于斜率下方，將沿著峰開(kāi)始點(diǎn) (S) 到峰結(jié)束點(diǎn) (E) 的對(duì)角線方向劃出基線。在將 漂移 參數(shù)設(shè)置為 "0" 以外的數(shù)值時(shí)，應(yīng)該使用比分析時(shí)所出現(xiàn)的實(shí)際基線漂移更大的數(shù)值。如果數(shù)值較小，峰結(jié)束點(diǎn)將降至假定的斜率下方，導(dǎo)致所有的峰都被識(shí)別為未分離峰。¢ 漂移 舉例下文將同譜圖的 漂移 設(shè)定值 100 與

24、 5000 進(jìn)行比較。漂移 = 100: 用垂直分割的峰劃出基線。漂移 = 5000: 用完全分離的峰劃出基線。理論說(shuō)明書(shū) 91 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.1.6未分離峰在根據(jù) 半峰寬 和 斜率 檢測(cè)峰，并用 漂移 校正基線時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)未分離峰。本軟件會(huì)自動(dòng)確定是將峰作為重疊峰垂直分割(垂直分割)，還是將這些峰作為出現(xiàn)在其他峰尾部 (拖尾) 的小峰處理。¢ 垂直分割原則上，可以在峰谷用垂直線將未分離峰分割。圖1-5 垂直分割¢ 拖尾軟件會(huì)根據(jù)峰高比、寬度比、峰谷高度和峰高的比值等伴隨峰是否落在拖尾峰上。漂移圖1-6 拖尾的條件如果符合下列所有條件，可認(rèn)為伴隨峰落在峰尾。峰谷高度 H

25、3 在漂移線上方 (包括漂移 = 0 時(shí))。H1 / H2 > 10 W1 / W2 > 3 H2 / H3 < 100伴隨峰充分小于主峰。伴隨峰窄于主峰。伴隨峰的起始位置高于峰高。如果符合下列任一條件，則不能認(rèn)為伴隨峰落在峰尾。峰谷高度 H3 在漂移線下方。漂移 設(shè)置為 0，軟件檢測(cè)未分辨峰的終點(diǎn)。H1 / H2 < 10兩個(gè)峰之間沒(méi)有足夠的高度差。10 理論說(shuō)明書(shū)1.1參數(shù)¢ 未分離峰的示例圖1-7為未分離峰自動(dòng)的示例。峰 A 被作為主要拖尾峰處理。B 和 C 峰被處理成位于 A 峰的尾部。注意，尾部的未分離峰 (例如 C 峰) 將不作拖尾處理，而始終被垂

26、直分割。E、 F、 G 峰為未分離峰，但是因?yàn)椴晃挥谥鞣宓奈膊浚员淮怪狈指睢?圖1-7 未分離峰的可以使用下列峰檢測(cè)標(biāo)記來(lái)指示各種處:狀態(tài)。這些峰檢測(cè)標(biāo)記可顯示在屏幕或報(bào)告中的峰表和色譜圖峰頂S:T:L:V:H:M:E:主要拖尾 / 前沿峰拖尾峰前沿峰未分離峰的第二個(gè)以后的峰 (垂直分割)水平校正基線峰手動(dòng)的峰錯(cuò)誤峰 (因?yàn)榱髁窟^(guò)大或流量不夠)理論說(shuō)明書(shū) 111 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.1.7 變參時(shí)間 (更改峰檢測(cè)參數(shù)的時(shí)間)設(shè)置 變參時(shí)間 時(shí)，本軟件在每個(gè) 變參時(shí)間 數(shù)值 ´ 2n (n = 0 14) 處可以通過(guò)將 半峰寬 增加 2 倍、將斜率 減少 1/2 對(duì)峰進(jìn)行檢測(cè)。如果 變

27、參時(shí)間 被設(shè)置為 "0"，軟件可以根據(jù)設(shè)置比例調(diào)整 半峰寬 和 斜率。要在分析時(shí)使這些參數(shù)保持不變，可以指定比分析更長(zhǎng)的時(shí)間。通常將該參數(shù)保留為 1000 (缺省值)。在分析時(shí)，建議不要更改上述參數(shù)，并且使用比分析更長(zhǎng)的時(shí)間。¢ 保持峰檢測(cè)參數(shù)恒定在梯度 LC 和程序溫度 GC 分析中，峰隨時(shí)間變得更寬。將 變參時(shí)間 值設(shè)置為大于分析時(shí)間，以保持 半峰寬 和 斜率 參數(shù)的恒定。¢ 使用 變參時(shí)間 更改峰檢測(cè)參數(shù)將 變參時(shí)間 設(shè)置為0，可以自動(dòng)對(duì)隨時(shí)間變寬的峰進(jìn)行2 倍，將 斜率 減少 1/2 (參考圖1-8)。變參時(shí)間 可將指定時(shí)間的 半峰寬 增加在 變

28、參時(shí)間 指定的時(shí)間，會(huì)再次更改這一參數(shù) (參考圖1-8)。圖1-8 更改 變參時(shí)間 時(shí)間的 半峰寬 和 斜率每次分析中 半峰寬 最多可以更改 15 次。同時(shí)包括使用值。時(shí)間程序里的 半峰寬 或者 變參時(shí)間 更改數(shù)將 變參時(shí)間 值設(shè)置成峰寬為第一個(gè)峰寬的兩倍時(shí)的時(shí)間。如果色譜圖中沒(méi)有出現(xiàn)這種峰 (峰寬為第一個(gè)峰的兩倍) 出現(xiàn)，可以根據(jù)下文方法計(jì)算 變參時(shí)間 值。舉例:圖1-9 變參時(shí)間計(jì)算12 理論說(shuō)明書(shū)1.1參數(shù)12使用在色譜圖最先提取成分的銳峰的半峰寬作為 半峰寬 參數(shù)值。在本例中為2 sec。測(cè)量色譜圖最后提取成分的小峰的保留時(shí)間和半峰寬。在本例中，保留時(shí)間 = 20 min，半峰寬 =

29、30 sec。因?yàn)樵?20 分鐘內(nèi)峰寬增加了 15 倍，將半峰寬 = 20 min ¸ 15 倍 ´ 2 = 所需的時(shí)間大約為 2.7 min1計(jì)算公式為:¢ 自動(dòng)調(diào)整 半峰寬 和 斜率 (變參時(shí)間 = 0)如果 變參時(shí)間 被設(shè)置為 "0"，隨著斜率越來(lái)越寬，軟件可以自動(dòng)調(diào)整 斜率 和 半峰寬。在等梯度 LC 和等溫 GC 分析中，峰會(huì)隨時(shí)間變得更寬。在開(kāi)始時(shí)不需要較高的峰檢測(cè)靈敏度 (低 斜率 值)，因?yàn)樵缙谙疵摲宓男甭屎艽?。更遲峰的寬度更大，軟件會(huì)自動(dòng)減小 斜率 值，從而增加峰檢測(cè)靈敏度。同樣，在開(kāi)始時(shí)，半峰寬很低，隨著峰的寬度增加，最小寬

30、度也增加。圖1-10 適合 變參時(shí)間 自動(dòng)設(shè)置的色譜圖在下列情況下，將 變參時(shí)間 設(shè)置成比分析時(shí)間 (不是 0) 更長(zhǎng)的數(shù)值。(1) 峰沒(méi)有象在梯度LC或者溫度可編程的GC分析中那樣隨時(shí)間變得更寬時(shí)。(2) 一個(gè)寬峰后出現(xiàn)一個(gè)銳峰時(shí)，如圖1-11。圖1-11 不適合 變參時(shí)間 = 自動(dòng)設(shè)置的色譜圖理論說(shuō)明書(shū) 131 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.2識(shí)別參數(shù)本軟件使用化合物表中的數(shù)值和識(shí)別參數(shù)來(lái)識(shí)別檢測(cè)到的峰。本節(jié)講述識(shí)別參數(shù)以及如何使用識(shí)別參數(shù)來(lái)識(shí)別檢測(cè)到的峰。 參考要設(shè)置識(shí)別參數(shù)，請(qǐng)參考 操作說(shuō)明書(shū)。1.2.1時(shí)間窗法和時(shí)間帶法通過(guò)設(shè)置峰識(shí)別的容許時(shí)間窗，以識(shí)別峰。只要偏離處于時(shí)間容許范圍內(nèi)，都可以將峰識(shí)

31、別為化合物表中 的峰。有兩種方法可設(shè)置時(shí)間容許范圍: 時(shí)間窗 或 時(shí)間帶。單擊單選按鈕，選擇其中法。¢ 時(shí)間窗法時(shí)間窗法定義了與峰保留時(shí)間成正比的容許時(shí)間范圍。保留時(shí)間越長(zhǎng)，絕對(duì)峰容許范圍就越大 (參考圖1- 12)。使用這種方法可以一次指定所有峰的容許時(shí)間范圍。根據(jù)數(shù)值大小，在同一容許時(shí)間范圍內(nèi)可以檢測(cè) 多個(gè)峰。時(shí)間窗法能用于峰寬和保留時(shí)間都隨時(shí)間而增加的等梯度 LC 和等溫 GC 分析。圖1-12 時(shí)間窗法14 理論說(shuō)明書(shū)1.2 識(shí)別參數(shù)¢ 時(shí)間帶法時(shí)間帶法為每個(gè)峰定義了不同的容許范圍。使用這種方法可以為每個(gè)峰指定最佳的容許時(shí)間范圍 (參考圖1-13)。時(shí)間帶法用于峰寬

32、和保留時(shí)間保持相對(duì)不變的等梯度 LC 和等溫 GC 分析。1圖1-13 時(shí)間帶法可以在 化合物表 的 表樣式 子窗口中設(shè)置 時(shí)間帶 參數(shù)。識(shí)別上的 缺省帶時(shí)間 值可用作所有峰的缺省帶時(shí)間。1.2.2 絕對(duì) / 相對(duì)保留時(shí)間法本軟件根據(jù)保留時(shí)間對(duì)峰進(jìn)行識(shí)別?？梢詫⒈Ａ魰r(shí)間指定為絕對(duì)保留時(shí)間 (從分析開(kāi)始時(shí)計(jì)算) 或者相對(duì)保留時(shí)間 (用參比峰校正)。選擇 絕對(duì)保留時(shí)間 或者 相對(duì)保留時(shí)間 作為 識(shí)別方法。¢ 絕對(duì)保留時(shí)間本軟件根據(jù)下列計(jì)算公式識(shí)別目標(biāo)峰。這一計(jì)算公式使用設(shè)置的每個(gè)峰標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間和容許時(shí)間范圍。無(wú) 需指定參比峰。這種方法一般用于峰的識(shí)別。T :t :W :目標(biāo)峰的標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)

33、間目標(biāo)峰實(shí)測(cè)保留時(shí)間< WT t目標(biāo)峰的容許時(shí)間范圍理論說(shuō)明書(shū) 151 數(shù)據(jù)處理參數(shù)¢ 相對(duì)保留時(shí)間本軟件可以先校正可能由分析條件的變化所導(dǎo)致的任何保留時(shí)間偏差，然后再進(jìn)行峰的識(shí)別。首先，通過(guò) 絕對(duì)保留時(shí)間識(shí)別設(shè)置的參比峰。然后根據(jù)下列計(jì)算公式識(shí)別目標(biāo)峰。這種方法可用于保留時(shí)間隨時(shí)間變化的連續(xù)分析，以及分析開(kāi)始的時(shí)間誤差比較明顯的分析。T :T1 :t :t1 :W :目標(biāo)峰的標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間參比峰的標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間目標(biāo)峰實(shí)測(cè)保留時(shí)間 參照峰實(shí)測(cè)保留時(shí)間目標(biāo)峰的時(shí)間容許范圍TT1- ´ tt1< W使用多個(gè)參比峰能更精確地校正保留時(shí)間。如果兩個(gè)參比峰之間存在目標(biāo)峰 (參

34、考圖1-14)，可以根據(jù)下列計(jì)算公式，同時(shí)使用兩個(gè)參比峰對(duì)該峰進(jìn)行識(shí)別。T :目標(biāo)峰的標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間參比峰 1 的標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間ì t t1üT1 :T2 :t :t1 :t2 :W :T í´ (T2 T1) + T1 ý< Wît2 t1þ參比峰 2 的標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間目標(biāo)峰實(shí)測(cè)保留時(shí)間參比峰 1 實(shí)測(cè)保留時(shí)間參比峰 2 實(shí)測(cè)保留時(shí)間目標(biāo)峰的時(shí)間容許范圍圖1-14 相對(duì)保留時(shí)間法使用下列計(jì)算公式得到相對(duì)保留時(shí)間:RRT :t1 :t1 t0相對(duì)保留時(shí)間目標(biāo)峰的保留時(shí)間參比峰的保留時(shí)間死時(shí)間RRT = -t2 t0t :2t

35、0 :16 理論說(shuō)明書(shū)1.2 識(shí)別參數(shù)¢ 參比峰和內(nèi)標(biāo) (ISTD) 峰選擇參比峰，以識(shí)別具有相對(duì)保留時(shí)間的峰。選擇 ISTD，用內(nèi)標(biāo)法定量峰。1不論是使用時(shí)間窗法還是時(shí)間帶法，參比峰和 ISTD 峰都被識(shí)別為容許時(shí)間范圍內(nèi)的最大高度 (或面積) 峰。如果在該容許時(shí)間范圍內(nèi)存在比預(yù)期峰更大的峰，該峰有可能會(huì)被錯(cuò)誤識(shí)別為參比 (或者 ISTD) 峰，從而引起其他峰的識(shí)別和定量錯(cuò)誤。采用下列方法可以避免識(shí)別錯(cuò)誤: (1) 選擇最大高度 (或面積) 峰作為參比峰或者 ISTD 峰; (2) 使用更小的容許時(shí)間范圍，使得比預(yù)期峰大的峰處于容許時(shí)間范圍內(nèi)。圖1-15 參比峰的識(shí)別理論說(shuō)明書(shū) 1

36、71 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.2.3 最接近峰的識(shí)別¢ 在相同容許時(shí)間范圍內(nèi)的多個(gè)峰容許時(shí)間范圍峰 1峰 2圖1-16 在相同容許時(shí)間范圍內(nèi)的多個(gè)峰同一容許時(shí)間范圍內(nèi)出現(xiàn)多個(gè)峰時(shí)，可以使用 峰選擇 下拉菜單對(duì)峰進(jìn)行識(shí)別。從 所有峰 、最接近峰 和最大峰、相似度、所有峰+相似度、最接近峰+相似度 和 最大峰+相似度中選擇。18 理論說(shuō)明書(shū)參數(shù)說(shuō)明所有峰將所有峰識(shí)別成化合物。最接近峰選擇并識(shí)別保留時(shí)間與化合物表中設(shè)置的標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間最接近的峰。最大峰在峰容許寬度范圍內(nèi)選擇并識(shí)別最大峰面積/高度的峰。根據(jù) 定量處理中 計(jì)算依據(jù) 的設(shè)置，決定使用峰面積還是峰高度。相似度 (PDA)在峰容許寬度范圍內(nèi)，

37、并在該峰的保留時(shí)間光譜和化合物表的標(biāo)準(zhǔn)光譜中，選擇并將識(shí)別最大相似 度值的峰。在用內(nèi)標(biāo)法識(shí)別內(nèi)標(biāo)化合物時(shí)，忽略設(shè)置，將最大峰識(shí)別為內(nèi)標(biāo)化合物。所有峰+相似度 (PDA)在峰容許寬度范圍內(nèi)，對(duì)大于相似度閾值的所有峰進(jìn)行識(shí)別。最接近峰+相似度 (PDA)選擇一個(gè)最接近化合物表中的標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間的峰，對(duì)該峰大于相似度閾值時(shí)進(jìn)行識(shí)別。最大峰+相似度 (PDA)在峰容許寬度范圍內(nèi)，選擇最大峰面積/高度的峰，對(duì)該峰大于相似度閾值時(shí)進(jìn)行識(shí)別。 根據(jù) 定量處理中 計(jì)算依據(jù) 的設(shè)置，決定使用峰面積還是峰高度。1.2 識(shí)別參數(shù) 識(shí)別 ISTD 峰和參比峰時(shí)，即使 峰選擇 被設(shè)置為 所有峰 、最接近峰 或者 相似度

38、(PDA)，本軟件將始終收集容許時(shí)間范圍內(nèi)的最大面積 (高度) 峰。1圖1-17 識(shí)別 ISTD 峰和參比峰 如果峰在2個(gè)以上的化合物表ID的容許時(shí)間范圍，將根據(jù) "在重疊時(shí)間容許范圍內(nèi)的一個(gè)峰及其 ID 號(hào)"，先決定峰的ID號(hào)，然后再通過(guò) 峰選擇 進(jìn)行峰識(shí)別。¢ 在重疊時(shí)間容許范圍內(nèi)的一個(gè)峰及其 ID 號(hào)當(dāng)不同 ID 號(hào)的多個(gè)容許時(shí)間范圍重疊，并有一個(gè)峰落在重疊的部分，本軟件將根據(jù)所用的時(shí)間窗法或時(shí)間帶法進(jìn)行峰的識(shí)別。圖1-18 在兩個(gè)時(shí)間容許范圍內(nèi)的峰 時(shí)間窗法該峰被識(shí)別為 ID 號(hào)，其標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間與峰保留時(shí)間最接近。在 圖1-18的例子中，峰被識(shí)別為 ID

39、號(hào) 2。 時(shí)間帶法用最小的 ID 號(hào)對(duì)峰進(jìn)行識(shí)別。在圖1-18的例子中，峰被識(shí)別為 ID 號(hào) 1。理論說(shuō)明書(shū) 191 數(shù)據(jù)處理參數(shù)¢ ID 號(hào)不同的相鄰峰峰非常接近時(shí)，如圖1-19所示，很難指定每個(gè)峰的容許時(shí)間范圍?？梢允褂脮r(shí)間窗法，然后將每個(gè)峰保留 時(shí)間設(shè)置為同一個(gè)數(shù)值進(jìn)行識(shí)別和定量。此時(shí)，將按照分辨率的順序識(shí)別峰。在時(shí)間窗法中，峰選擇 數(shù)值將變?yōu)闊o(wú)效。因此，如果檢測(cè)到多余峰， 峰和 ID 號(hào)可能會(huì)不一致，從而引起識(shí)別錯(cuò)誤。峰 1峰 2圖1-19 相鄰峰20 理論說(shuō)明書(shū)1.2 識(shí)別參數(shù)1.2.4 分組分組是根據(jù)類(lèi)型 (例如同系物和同分異構(gòu)體) 將峰進(jìn)行分組，從而對(duì)每組進(jìn)行計(jì)算。有兩

40、種分組類(lèi)型: 組校準(zhǔn) 和 濃度合計(jì)。1¢ 組校準(zhǔn)本軟件首先得到分組峰的面積 (或高度) 總和。然后，創(chuàng)建該組的校準(zhǔn)曲線以及執(zhí)行該組的定量。每組的面積 / 高度是指同一組化合物的面積 / 高度總和。¢ 濃度合計(jì)本軟件首先創(chuàng)建每個(gè)分組化合物的校準(zhǔn)曲線，然后單獨(dú)對(duì)峰進(jìn)行定量。隨后將所有分組化合物的濃度相加， 得到組濃度。理論說(shuō)明書(shū) 211 數(shù)據(jù)處理參數(shù)1.3定量方法本軟件使用下列六種類(lèi)型的定量方法。下文說(shuō)明適用于每種定量方法的計(jì)算公式和舍入方法。22 理論說(shuō)明書(shū)定量方法說(shuō)明面積歸一法每一個(gè)峰面積 (高度) 對(duì)所有峰面積 (高度) 的比。校正面積歸一法使用標(biāo)準(zhǔn)樣品 (或者來(lái)自文獻(xiàn))

41、，可以首先得到所有待測(cè)成分的靈敏度校正因子。使用該校正因子可以校正從未知樣品中測(cè)得的峰面積 (高度)。然后得到校正的峰面積 (高度) 對(duì)所有峰面積(高度) 的比。內(nèi)標(biāo)法通過(guò)向標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品中都添加 ISTD 物質(zhì)，對(duì)目標(biāo)峰進(jìn)行定量。通過(guò)該方法可以得到穩(wěn)定結(jié)果，減少進(jìn)樣誤差。(1) 將一定量的 ISTD 物質(zhì)添加到含有已知量目標(biāo)成分的標(biāo)準(zhǔn)樣品中。(2) 根據(jù)目標(biāo)峰和 ISTD 峰之間的面積 (高度) 比和成分濃度比分析標(biāo)準(zhǔn)樣品和創(chuàng)建校準(zhǔn)曲線。(3) 從含有相同 ISTD 物質(zhì)的未知樣品中獲得目標(biāo)峰和 ISTD 峰之間的面積比。(4) 使用從上述校準(zhǔn)曲線 (第 2 步) 獲得的濃度比定量目標(biāo)成

42、分。外標(biāo)法 (絕對(duì)校準(zhǔn)曲線法)創(chuàng)建校準(zhǔn)曲線，顯示標(biāo)準(zhǔn)濃度和峰面積 (高度) 之間的關(guān)系。將未知樣品的峰面積 (高度) 標(biāo)在該標(biāo)準(zhǔn)曲線上，即可定量目標(biāo)成分。帶比例因子的校正面積歸一法將總定量數(shù)值計(jì)算成稀釋因子 (或者樣品體積，如果沒(méi)有設(shè)置稀釋因子) 而不是 100，得到每種成分的含量。標(biāo)準(zhǔn)添加法在相同條件下測(cè)量添加已知量標(biāo)準(zhǔn)成分的未知樣品和未添加已知量標(biāo)準(zhǔn)成分的未知樣品。使用測(cè)得的兩個(gè)峰面積 (高度) 間的差異對(duì)標(biāo)準(zhǔn)成分進(jìn)行定量。本方法可用于目標(biāo)成分的相對(duì)靈敏度隨溶劑組成或已有成分 (如頂空 GC) 而變化的分析。1.3 定量方法1.3.1 定量方法和計(jì)算公式 (含稀釋因子)在 系統(tǒng)配置 窗口中

43、，將 數(shù)據(jù)處理設(shè)置 子窗口的 稀釋因子 設(shè)置成 應(yīng)用 或者 不使用。¢ X - 軸上的面積 / 高度123理論說(shuō)明書(shū)定量方法一點(diǎn)兩點(diǎn)含量面積歸一法-含量 (%) = -Ai- ´ 100-åAi校正面積歸一法F1 = C1-A1F1 = C1- C2- -A1 A2F2 = C2 F1 ´ A2F1 A F2含量 (%) = -i-i-i´ 100å(F1i Ai + F2i)內(nèi)標(biāo)法F1 = -C1- ¤ - A1-Cisn1 Aisn1F1 = æ - C1- -C2-ö ¤ æ -

44、A1- -A2-öè - ø è - øCisn1 Cisn2Aisn1 Aisn2F2 = - C2- F1 ´ - A2-Cisn2Aisn2含量 =æF1i Ai + F2 ö ´ Wisn ´ DFACTè -iø -AisnWspl外標(biāo)法(絕對(duì)校準(zhǔn)曲線法)F1 = C1-A1F1 = C1- C2- -A1 A2F2 = C2 F1 ´ A2含量 = F1i Ai + F2i ´ DFACT-Wspl帶比例因子的校正面積歸一法F1 = C1-A1

45、F1 = C1- C2- -A1 A2F2 = C2 F1 ´ A2F1 A F2含量 (%) = -i-i-i´ DFACTå(F1i Ai + F2i)標(biāo)準(zhǔn)添加法-F1 = C1- C2- -A1 A2F2 = C2 F1 ´ A2含量 =-F2i- ´ DFACT-Wspl1 數(shù)據(jù)處理參數(shù)¢ X - 軸上的濃度A1 :A2 :C1 :C2 :Aisn1 : Aisn2 : Cisn1 : Cisn2 : Wspl1 : Wspl2 : F1i : F2i :Ai : Aisn : Wspl : Wisn :DFACT :標(biāo)準(zhǔn) 1

46、 的峰面積 (高度) 標(biāo)準(zhǔn) 2 的峰面積 (高度) 標(biāo)準(zhǔn) 1 的濃度 (成分量) 標(biāo)準(zhǔn) 2 的濃度 (成分量)標(biāo)準(zhǔn) 1 的第 N 個(gè) ISTD 峰的峰面積 (高度) 標(biāo)準(zhǔn) 2 的第 N 個(gè) ISTD 峰的峰面積 (高度) 標(biāo)準(zhǔn) 1 的第 N 個(gè) ISTD 峰的濃度 (化合物量) 標(biāo)準(zhǔn) 2 的第 N 個(gè) ISTD 峰的濃度 (化合物量) 標(biāo)準(zhǔn) 1 的樣品體積標(biāo)準(zhǔn) 2 的樣品體積斜率校正因子常數(shù)校正因子峰面積 (高度)第 N 個(gè) ISTD 峰的面積 (高度)樣品體積第 N 個(gè) ISTD 的量稀釋因子24 理論說(shuō)明書(shū)定量方法一點(diǎn)兩點(diǎn)含量面積歸一法-含量 (%) = -Ai´ 100-

47、29;Ai校正面積歸一法F1 = A1-C1F1 = A1- A2- -C1 C2F2 = A2 F1 ´ C2(A F2 ) ¤ F1i含量 (%) = -i-i´ 100å(Ai F2)i ¤ F1i內(nèi)標(biāo)法F1 = A1 ¤ Aisn1-C1 ¤ Cisn1F1 = æ - A1- -A2-ö ¤ æ -C1- -C2-öè - ø è - øAisn1 Aisn2Cisn1 Cisn2F2 = - A2- F1 ´ -C

48、2-Aisn2Cisn2含量 = (Ai ¤ Aisn F2i) ´ Wis ´ DFACT- -F1iWspl外標(biāo)法(絕對(duì)校準(zhǔn)曲線法)F1 = A1-C1F1 = A1- A2- -C1 C2F2 = A2 F1 ´ C2含量 = Ai F2i ´ DFACT- -F1iWspl帶比例因子的校正面積歸一法F1 = A1-C1F1 = A1- A2- -C1 C2F2 = A2 F1 ´ C2含量 (%) = - (Ai F2) ¤ F1i - ´ DFACTå(AiF2i) ¤ F1i標(biāo)準(zhǔn)添加

49、法-F1 = A1- A2- -C1 C2F2 = A2 F1 ´ C2含量 = F2i ´ DFACT- -F1iWspl1.3 定量方法1.3.2 定量方法和計(jì)算公式 (無(wú)稀釋因子)¢ X - 軸上的面積 / 高度1理論說(shuō)明書(shū) 25定量方法一點(diǎn)兩點(diǎn)含量面積歸一法-含量 (%) = -Ai- ´ 100-åAi校正面積歸一法F1 = C1-A1F1 = C1- C2- -A1 A2F2 = C2 F1 ´ A2含量 (%) = - F1i Ai F2i´ 100-å(F1i Ai + F2i)內(nèi)標(biāo)法F1 = -C1- ¤ - A1-Cisn1 Aisn1F1 = æ - C1- -C2-