實(shí)驗(yàn)四+氯霉素滴眼劑的制備

1、實(shí)驗(yàn)四 滴眼劑的制備一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?通過(guò)氯霉素眼藥水的制備，掌握一般滴眼劑的制備方法和質(zhì)量要求。2理解滴眼劑包裝材料的處理方法。3了解常用滴眼劑的附加劑種類；了解無(wú)菌操作法的應(yīng)用及其有關(guān)事項(xiàng)。4掌握等滲度和pH值的調(diào)節(jié)方法。二、基本概念與實(shí)驗(yàn)原理滴眼劑是指藥物與適宜輔料制成的無(wú)菌水性和油性澄明溶液、混懸液或乳狀液，供滴入的眼用液體制劑，也可以粉末、顆?；蚱b形式包裝，另備溶劑，在臨用前配成澄明溶液或混懸液。由于眼組織較為嬌嫩，敏感性強(qiáng)，故滴眼劑有如下質(zhì)量要求：（1）溶液型應(yīng)為澄明溶液，無(wú)細(xì)菌及微粒（混懸型滴眼劑粒徑不得大于15m）。（2）與淚液等滲（相當(dāng)于0.9%的氯化鈉溶液）,一般眼睛可忍受相

2、當(dāng)于0.61.5%氯化鈉溶液的滲透壓。若因調(diào)整滲透壓而影響治療濃度時(shí)，則不宜調(diào)整。（3） pH為（為使主藥穩(wěn)定或增加主藥溶解度而pH稍有出入的例外）。（4）應(yīng)在清潔無(wú)菌環(huán)境中配制，容器及用具應(yīng)滅菌，在操作過(guò)程中避免污染。一般滴眼劑為多劑量包裝，在反復(fù)使用過(guò)程中與環(huán)境及病眼接觸易造成污染，需加抑菌劑，一般滴眼劑要求無(wú)致病菌，尤其不得有銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌。用于眼外傷及手術(shù)的滴眼劑不宜加抑菌劑，應(yīng)嚴(yán)格滅菌，采用單劑量包裝。對(duì)熱穩(wěn)定的滴眼劑制備流程：原料藥配液滅菌無(wú)菌分裝質(zhì)檢印字包裝滴眼劑瓶塞洗瓶塞滅菌三、 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一） 材料與儀器材料：氯霉素、硼砂、硼酸、尼泊金乙酯、無(wú)菌蒸餾水等。儀器：

3、電子天平、燒杯（100ml）、水浴、微孔濾膜過(guò)濾器、輸液瓶、滴眼瓶、灌注器、滅菌器、pH計(jì)、澄明度檢查儀、無(wú)菌操作柜。（二） 實(shí)驗(yàn)部分氯霉素滴眼劑的制備處方 氯霉素 0.25g硼砂 0.03g硼酸 1.90g尼泊金乙酯 0.03g蒸餾水加至 100ml 制備（1）稱取硼酸、硼砂置洗凈的容器中，加熱注射用水約90ml，攪拌使完全溶解，至60時(shí)，加入氯霉素和尼泊金乙酯使溶解，加水至100ml。（2）測(cè)定pH值符合要求，用微孔濾膜過(guò)濾器過(guò)濾，濾液用250 ml輸液瓶收集，灌封，10030分鐘滅菌。（3）無(wú)菌分裝在無(wú)菌操作柜內(nèi)操作中，將滅菌的藥液分裝于已滅菌的滴眼瓶中，封口，即得。 操作要點(diǎn)和注意事項(xiàng)

4、（1）磷酸鹽對(duì)氯霉素能催化水解，氯霉素在水中的溶解度較?。?：400），故用硼酸、硼砂作緩沖劑，可增加氯霉素的溶解度，同時(shí)調(diào)節(jié)pH值和滲透壓。成品的 pH值約為6時(shí)最穩(wěn)定。（2）氯霉素滴眼劑在貯藏過(guò)程中，效價(jià)常逐漸降低，故配液時(shí)適當(dāng)提高投料量，使在有效貯藏期間，效價(jià)能保持在規(guī)定含量以內(nèi)。（3）氯霉素對(duì)熱較穩(wěn)定，配液時(shí)可加熱以加速溶解，也可用100流通蒸氣滅菌，本品中亦可用硝酸苯汞（0.005%）或尼泊金甲酯（0.02%）作抑菌劑。質(zhì)量檢驗(yàn)性狀 本品應(yīng)為無(wú)色或幾乎無(wú)色的澄明液體。檢查pH值：本品用 型pH計(jì)，在室溫 下測(cè)定，其pH值為 ?？梢?jiàn)異物：除另有規(guī)定外，玻璃容器裝的滴眼劑按注射劑項(xiàng)下的方

5、法檢查，但塑料容器或有色溶液的滴眼劑，應(yīng)于30005000LX光照度下用目檢視；溶液應(yīng)澄明，不得有玻璃屑、較大纖維、色塊和其他不溶性異物和結(jié)塊現(xiàn)象。 （見(jiàn)藥劑學(xué)實(shí)驗(yàn) 頁(yè)滴眼劑的檢查方法）四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論1、 將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表中。表3-1 氯霉素滴眼劑的質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果項(xiàng)目性狀pH值可見(jiàn)異物結(jié)果（標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定）本品為 液體（應(yīng)為無(wú)色澄明液體）（應(yīng)為6.07.0） （應(yīng)無(wú)異物）結(jié)論2、 分析產(chǎn)品質(zhì)量情況，討論影響產(chǎn)品質(zhì)量的主要實(shí)驗(yàn)步驟。3、 結(jié)合本實(shí)驗(yàn)的處方，討論滴眼劑處方設(shè)計(jì)應(yīng)考慮的問(wèn)題。五、思考題1、 處方中硼酸、硼砂、尼泊金乙酯起什么作用？用冰點(diǎn)降低法計(jì)算氯霉素滴眼劑是否等滲？2、 滴眼劑中選擇

6、抑菌劑應(yīng)考慮哪些問(wèn)題？3、 調(diào)節(jié)pH值和滲透壓時(shí)應(yīng)注意哪些方面？附一、無(wú)菌室標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)程 1.目的 本規(guī)程旨在為無(wú)菌操作及無(wú)菌室的保護(hù)提供一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)程。2.適用范圍 生測(cè)實(shí)驗(yàn)室 3.責(zé)任者 QC主管、生測(cè)員 4.定義 無(wú) 5.安全注意事項(xiàng) 嚴(yán)格無(wú)菌操作，防止微生物污染；操作人員進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)先關(guān)掉紫外燈。 6.規(guī)程 6.1.無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間，無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在20-24，濕度保持在45-60%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。6.2.無(wú)菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。6.3.嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染，已污染者應(yīng)停止使用。6.4.無(wú)菌室應(yīng)備有工

7、作濃度的消毒液，如5的甲酚溶液，70的酒精，0.1的新潔爾滅溶液，等等。6.5.無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。 6.6.需要帶入無(wú)菌室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法滅菌。6.7.工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。 6.8.無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上，并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室，再用紫外燈輻照滅菌20分鐘。6.9.供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不

8、得開(kāi)啟，以防污染。檢查前，用70的酒精棉球消毒外表面。6.10.每次操作過(guò)程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。6 .11.吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。6.12.接種針每次使用前后，必須通過(guò)火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。6.13.帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒，24小時(shí)后取出沖洗。 6.14.如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3的來(lái)蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí)，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。6.15.凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁

9、污染下水道。6.16.無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺(tái)開(kāi)啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌培養(yǎng)皿若干，無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻至約45的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ml，放至凝固后，倒置于3035培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，證明無(wú)菌后，取平板35個(gè)，分別放置工作位置的左中右等處，開(kāi)蓋暴露30分鐘后，倒置于3035培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過(guò)1個(gè)菌落，10000級(jí)潔凈室平均不得超過(guò)3個(gè)菌落。如超過(guò)限度，應(yīng)對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行徹底消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。7.參照 藥品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法 中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范中 (無(wú)菌檢查法)章節(jié) 中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) YY/T0188

10、.6-1995藥品檢驗(yàn)操作規(guī)程 8.分發(fā)部門(mén) 質(zhì)量管理部 無(wú)菌室技術(shù)指導(dǎo)說(shuō)明 在獲得了無(wú)菌環(huán)境和無(wú)菌材料后，我們還要保持無(wú)菌狀態(tài)，才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的現(xiàn)象，在微生物學(xué)中我們叫做污染雜菌。防止污染是微生物學(xué)工作中十分關(guān)鍵的技術(shù)。一方面是徹底滅菌，另一方面防止污染，是無(wú)菌技術(shù)的兩個(gè)方面。另外，我們還要防止所研究的微生物，特別是致病微生物或經(jīng)過(guò)基因工程改造了的本來(lái)自然界不存在的微生物從我們的實(shí)驗(yàn)容器中逃逸到外界環(huán)境中去。為了這些目的，在微生物學(xué)中，有許多措施。 無(wú)菌室一般是在微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)專辟一個(gè)小房間?？梢杂冒?/p>

11、材和玻璃建造。面積不宜過(guò)大，約 4 5 平方米即可，高 2.5 米左右。無(wú)菌室外要設(shè)一個(gè)緩沖間，緩沖間的門(mén)和無(wú)菌室的門(mén)不要朝向同一方向，以免氣流帶進(jìn)雜菌。無(wú)菌室和緩沖間都必須密閉。室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過(guò)濾裝置。無(wú)菌室內(nèi)的地面、墻壁必須平整，不易藏污納垢，便于清洗。工作臺(tái)的臺(tái)面應(yīng)該處于水平狀態(tài)。無(wú)菌室和緩沖間都裝有紫外線燈，無(wú)菌室的紫外線燈距離工作臺(tái)面 1 米。工作人員進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)穿滅過(guò)菌的服裝、戴帽子。 當(dāng)前無(wú)菌室多存在于微生物工廠，一般實(shí)驗(yàn)室則使用超凈臺(tái)。超凈臺(tái)其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺(tái)面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃。通過(guò)電動(dòng)裝置使空氣通過(guò)高效過(guò)濾器具后進(jìn)入工作臺(tái)面，

12、使臺(tái)面始終保持在流動(dòng)無(wú)菌空氣控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動(dòng)的氣簾防止外部帶菌空氣進(jìn)入。 在條件較困難的地方，也可以用木制無(wú)菌箱代替超凈臺(tái)。無(wú)菌箱結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，便于移動(dòng)，箱正面開(kāi)有兩個(gè)洞，不操作時(shí)用推拉式小門(mén)擋住，操作時(shí)可以將雙臂伸進(jìn)去。正面上部裝有玻璃，便于在內(nèi)部操作，箱內(nèi)部裝有紫外線燈，從側(cè)面小門(mén)可以放進(jìn)去器具和菌種等。 無(wú)菌操作技術(shù)當(dāng)前不僅在微生物學(xué)研究和應(yīng)用上起著舉足輕重的作用，而且在許多生物技術(shù)中也被廣泛應(yīng)用。例如轉(zhuǎn)基因技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)等。附二：可見(jiàn)異物檢查法（燈檢法：應(yīng)在暗室中進(jìn)行）1、檢查裝置：A 帶有遮光板的日光燈光源：光照度可在10004000lx范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。B

13、不反光的黑色背景；C 不反光的白色背景和底部（供檢查有色異物）； D 反光的白色背景（指遮光板內(nèi)側(cè)）。檢查人員條件  遠(yuǎn)距離和近距離視力測(cè)驗(yàn)，均應(yīng)為4.9或4.9以上矯正后視力應(yīng)為5.0或5.0以上；應(yīng)無(wú)色盲。2、檢查法：溶液型及混懸型供試品  除另有規(guī)定外，取供試品20支（瓶），除去容器標(biāo)簽，擦凈容器外壁，必要時(shí)將藥液轉(zhuǎn)移至潔凈透明的專用玻璃容器內(nèi)；置供試品于遮光板邊緣處，在明視距離（指供試品至人眼的清晰觀測(cè)距離，通常為25cm），分別在黑色和白色背景下，手持供試品頸部輕輕旋轉(zhuǎn)和翻轉(zhuǎn)容器使藥液中存在的可見(jiàn)異物懸?。ㄗ⒁獠皇顾幰寒a(chǎn)生氣泡），用目檢視，每次

14、檢查時(shí)間20S。無(wú)色供試品溶液，檢查時(shí)的光照度應(yīng)為10001500lx；用透明塑料容器包裝或有色供試品溶液，光照度應(yīng)為20003000lx；混懸型供試品僅檢查色塊、纖毛等明顯可見(jiàn)異物，光照度為4000lx。3、結(jié)果判定： 各類注射劑、滴眼劑在旋轉(zhuǎn)時(shí)均不得檢出煙霧狀微粒柱，且不得檢出金屬屑、玻璃屑、長(zhǎng)度或最大粒徑超過(guò)2的纖維和塊狀物等明顯外來(lái)污染的可見(jiàn)異物。除此之外的其他可見(jiàn)異物（如2以下的短纖維及點(diǎn)、塊等）如有檢出，除另有規(guī)定外，應(yīng)分別符合下列規(guī)定： 溶液型靜脈用注射液、注射用濃溶液20支（瓶）檢查的供試品中，均不得檢出可見(jiàn)異物。如檢出其他可見(jiàn)異物的供試品僅有1支（瓶），應(yīng)另取20支（瓶）同法復(fù)試，均不得檢出。 溶液型非靜脈用注射液20支（瓶）檢查的供試品中，均不得檢出可見(jiàn)異物。如檢出有其他可見(jiàn)異物，應(yīng)另取20支（瓶）同法復(fù)試，初、復(fù)試的供試品中，檢出其他可見(jiàn)異物的供試品不得超過(guò)2支（瓶）。 溶液型滴眼劑  20支（瓶）檢查的供試品中，均不得檢出可見(jiàn)異物。如檢出有其他可見(jiàn)異物，應(yīng)另取20支（瓶