遺傳性疾病和產(chǎn)前診斷課件

1、第十一章 遺傳性疾病的實(shí)驗(yàn)診斷與產(chǎn)前診斷 中日聯(lián)誼醫(yī)院中心研究室Email：張玉成 博士/主治醫(yī)師上一頁(yè)下一頁(yè)返回第一節(jié) 概述 遺傳病或遺傳性疾?。╣enetic disease）是其發(fā)生需要有一定的遺傳基礎(chǔ)，通過(guò)這種遺傳基礎(chǔ)、并按一定的方式傳于后代發(fā)育形成的疾病。因此，遺傳病的傳遞并非是現(xiàn)成的疾病，而是遺傳病的發(fā)病基礎(chǔ)，另外，遺傳因素不僅僅是一些疾病的病因，也與環(huán)境因素一起在疾病的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中起關(guān)鍵作用，遺傳性疾病具有垂直傳遞和終生性特點(diǎn)。上一頁(yè)下一頁(yè)返回第一節(jié) 概述 下一頁(yè)產(chǎn)前診斷（prenatal diagnosis）又稱宮內(nèi)診斷（intrauterine diagnosis）指在

2、胎兒出生前對(duì)胎兒先天異常（遺傳病與非遺傳?。┖蛯m內(nèi)感染進(jìn)行診斷，是遺傳學(xué)、影像學(xué)、圍生醫(yī)學(xué)等與醫(yī)學(xué)實(shí)踐緊密結(jié)合的一門(mén)綜合學(xué)科。返回上一頁(yè)第一節(jié) 概述 下一頁(yè)目前，我國(guó)已開(kāi)展了較大規(guī)模的產(chǎn)前篩查與產(chǎn)前診斷工作，主要為21-三體綜合征、18-三體綜合征、13-三體綜合征、性染色體綜合征、胎兒神經(jīng)管缺陷（neural tube defect，胎兒神經(jīng)管缺陷）的血清學(xué)篩查，及其染色體病的產(chǎn)前診斷，常見(jiàn)遺傳病如地中海貧血等的基因診斷。返回上一頁(yè)哪些人要進(jìn)行遺傳咨詢？ 夫妻同居一年未采取避孕措施未懷孕者； 女方35歲以上，男方40歲以上高齡對(duì)象； 曾有不明原因流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)史者； 本人或家族中有染色體異

3、常者； 已發(fā)生過(guò)母兒血型不合者； 本次或上一次發(fā)生羊水過(guò)多或過(guò)少者； 接觸大量有毒有害環(huán)境因素以及患較嚴(yán)重病毒感染的孕婦者； 醫(yī)生認(rèn)為應(yīng)做咨詢和產(chǎn)前診斷者第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè) 遺傳篩查是將人群中具有風(fēng)險(xiǎn)基因型的個(gè)體檢測(cè)出來(lái)的一項(xiàng)普查工作，通過(guò)篩查，可了解遺傳性疾病在人群中的分布及影響分布的因素，估計(jì)某些疾病的致病基因頻率，分析、研究遺傳性疾病的發(fā)病規(guī)律和特點(diǎn)，為人群預(yù)防對(duì)策提供依據(jù)。根據(jù)篩查目的和對(duì)象的不同，遺傳篩查可分為群體篩查、攜帶者篩查、新生兒篩查、產(chǎn)前篩查等。返回上一頁(yè)第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)一、胎兒遺傳病的孕婦血清學(xué)篩查試驗(yàn)在產(chǎn)前篩查過(guò)程中，經(jīng)常提

4、到早孕期產(chǎn)前篩查以及中孕期產(chǎn)前篩查。早孕期篩查是指在孕712周進(jìn)行篩查，中孕期產(chǎn)前篩查是指在孕1520周進(jìn)行。返回上一頁(yè)第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)一、胎兒遺傳病的孕婦血清學(xué)篩查試驗(yàn)2 假陽(yáng)性率（false positive rate，F(xiàn)PR）：指在篩查中為高風(fēng)險(xiǎn)孕婦但在產(chǎn)前診斷中未發(fā)現(xiàn)異常的孕婦數(shù)占整個(gè)參與篩查人群中的比例。返回上一頁(yè)3 檢出率（detect rate，DR）：指通過(guò)篩查發(fā)現(xiàn)的、經(jīng)過(guò)產(chǎn)前診斷證實(shí)的胎兒異常占整個(gè)孕婦群分娩的有被篩查疾病出生缺陷的新生兒的比例第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)一、胎兒遺傳病的孕婦血清學(xué)篩查試驗(yàn)返回上一頁(yè)4 中位數(shù)值的倍數(shù)（mul

5、tiple of median，MOM）指在產(chǎn)前篩查中，孕婦個(gè)體的血清標(biāo)志物的檢測(cè)結(jié)果是正常孕婦群在該孕周時(shí)該血清標(biāo)志物濃度中位數(shù)值的多少倍。以AFP為例，孕婦在某孕周測(cè)得AFP值為500，而該孕周時(shí)正常孕婦群的AFP中位數(shù)值為250，則該孕婦的AFP的MOM為500/250=2.0。 第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)（一） 早孕期母體外周血PAPP-A、hCG（free -hCG）二聯(lián)篩查試驗(yàn) PAPP-A是1974年報(bào)道的一種妊娠期母體血漿中逐漸增多的高分子糖蛋白，90年代初分離出PAPP-A亞基，由胎盤(pán)合體滋養(yǎng)細(xì)胞分泌，孕婦血清中可能由因子刺激其合成，非孕婦子宮內(nèi)膜、卵泡液、黃體

6、、男性精液中也有少量分泌。PAPP-A在單胎受精后32天，雙胎受精后21天即可在孕婦血清中檢出，孕7周時(shí)血清濃度上升比hCG顯著，隨孕周持續(xù)上升，足月時(shí)達(dá)高峰，產(chǎn)后開(kāi)始下降，產(chǎn)后6周即測(cè)不到。通常在21-三體綜合征胎兒母體外周血PAPP-A下降。結(jié)合孕婦年齡、孕周、孕婦體重等因素計(jì)算得出胎兒罹患21-三體的風(fēng)險(xiǎn)率。返回上一頁(yè)第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)（一） 早孕期母體外周血PAPP-A、hCG（free -hCG）二聯(lián)篩查試驗(yàn) hCG由胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌，其亞基具有特異序列，少量可呈游離狀態(tài)存在。懷孕時(shí)，母血清free -hCG的水平約是總hCG水平的1%，在妊娠早期，free

7、-hCG濃度升高很快，孕8周時(shí)達(dá)最高峰，后逐漸下降，至18周時(shí)維持在一定水平。在唐氏綜合征胎兒母血清中hCG 和free -hCG均呈現(xiàn)持續(xù)上升趨勢(shì)，分別為正常孕婦的1.82.3 MOM和2.22.5 MOM。結(jié)合母親年齡分別用hCG和free -hCG作指標(biāo)進(jìn)行唐氏綜合征篩查時(shí)發(fā)現(xiàn)，DR分別為50%和59%，F(xiàn)PR同為5%。因此認(rèn)為free -hCG較hCG在篩查中更有特異性，在孕1416周時(shí)尤佳，而且在早孕篩查時(shí)，free -hCG是高特異性的指標(biāo)。在18-三體篩查中，free -hCG表現(xiàn)為降低異常。返回上一頁(yè)第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)（一） 早孕期母體外周血PAPP-A、

8、hCG（free -hCG）二聯(lián)篩查試驗(yàn) 早孕期母體外周血PAPP-A、hCG二聯(lián)篩查試驗(yàn)，診斷疾病是胎兒唐氏綜合征。胎兒唐氏綜合征異常的早孕期孕婦血中PAPP-A水平明顯低于正常孕婦組，與hCG聯(lián)合應(yīng)用（升高），唐氏綜合征診斷率達(dá)70以上，是早孕期唐氏綜合征篩查的可靠指標(biāo)。如加上胎兒頸部透明度厚（nuchal translucency，NT）、結(jié)合孕婦年齡等因素綜合分析，唐氏綜合征診斷率可達(dá)8590，是早孕期篩查唐氏綜合征的黃金組合。返回上一頁(yè)妊娠早期孕婦體內(nèi)血清標(biāo)志物 時(shí)間: 孕12周標(biāo)志物 MoM值 水平 PAPP-A 0.43 Free-HCG 2.0-2.5 1:270為截點(diǎn)及早發(fā)現(xiàn)

9、,實(shí)行人工流產(chǎn).妊娠早期孕婦超聲形態(tài)學(xué)超聲時(shí)間:孕9-13末周頸背透明帶(nuchal translucency, NT)NT：3mm風(fēng)險(xiǎn)6%NT: 4mm風(fēng)險(xiǎn)飆升31%NT: 7.5mm風(fēng)險(xiǎn)50%第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)（二）中孕期母體外周血AFP、free -hCG（或hCG）二聯(lián)篩查實(shí)驗(yàn)正常孕婦血清中甲胎蛋白是一種胎兒來(lái)源的糖蛋白。胎兒胎兒神經(jīng)管缺陷時(shí)，大量AFP進(jìn)入羊水導(dǎo)致母血清中AFP的濃度升高，常達(dá)正常濃度的2倍以上，在開(kāi)放性脊柱裂及無(wú)腦兒中，甚至可達(dá)8倍以上，因此，運(yùn)用AFP指標(biāo)即可篩查出95%100%的無(wú)腦畸形和7090%的脊柱裂胎兒。AFP的濃度在孕24周以后

10、個(gè)體差異明顯增加，篩查胎兒神經(jīng)管缺陷時(shí)，孕1522周時(shí)測(cè)得的AFP值更有意義，妊娠早期，用AFP篩查胎兒神經(jīng)管缺陷也無(wú)效。1984年發(fā)現(xiàn)唐氏綜合征胎兒母血清AFP值降低，AFP也作為篩查唐氏綜合征胎兒的指標(biāo)之一。返回上一頁(yè)神經(jīng)管畸形Neural tube defects 是一組主要包括無(wú)腦畸形和脊柱裂等疾病的嚴(yán)重出生缺陷,大約1500個(gè)出生嬰兒中有一個(gè)嬰兒發(fā)生脊柱裂 開(kāi)放性神經(jīng)管畸形（ONTD） 基于不同人群，發(fā)生率為1/1000 95的ONTDS是偶然發(fā)生的 ,無(wú)家族史基因和環(huán)境因素可發(fā)產(chǎn)生影響放射性污染化學(xué)污染有關(guān)脊柱裂咨詢?nèi)绻麐D女生育過(guò)一個(gè)脊柱裂嬰兒，再次懷孕生育脊柱裂孩子的危險(xiǎn)性增大。

11、約1/40的可能。如果生育過(guò)二個(gè)脊柱裂的嬰兒，再次懷孕生育脊柱裂孩子的危險(xiǎn) 約1/20可能。婦女有某些慢性健康問(wèn)題，包括糖尿病，癲癇（服用某些搞癲癇藥物）都會(huì)增加生脊柱裂嬰兒的危險(xiǎn)性，約1/100。第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)（二）中孕期母體外周血AFP、free -hCG（或hCG）二聯(lián)篩查實(shí)驗(yàn)中孕期母體外周血AFP、hCG二聯(lián)篩查實(shí)驗(yàn)是最常用的產(chǎn)前篩查實(shí)驗(yàn)，可以診斷胎兒唐氏綜合征、胎兒神經(jīng)管缺陷、18-三體征。此項(xiàng)篩查實(shí)驗(yàn)對(duì)21-三體的篩查發(fā)現(xiàn)率為60%90%左右，為提高篩查的發(fā)現(xiàn)率，也可采用三聯(lián)篩查（AFP、free -hCG、uE3）等提高篩查發(fā)現(xiàn)率。篩查中要求孕婦年齡、孕

12、周即體重準(zhǔn)確；要求測(cè)定AFP和hCG的方法重復(fù)性好，變異系數(shù)（RV）5%。返回上一頁(yè)第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)（二）中孕期母體外周血AFP、free -hCG（或hCG）二聯(lián)篩查實(shí)驗(yàn)【參考范圍】在孕1522周：篩查胎兒神經(jīng)管缺陷，一般AFP2.5 MOM為高風(fēng)險(xiǎn)；篩查唐氏綜合征，風(fēng)險(xiǎn)率1/270為低風(fēng)險(xiǎn)；篩查18-三體，風(fēng)險(xiǎn)率1/350為低風(fēng)險(xiǎn)?！九R床意義】 篩查胎兒神經(jīng)管缺陷時(shí)，測(cè)得AFP2.5 MOM即為胎兒神經(jīng)管缺陷高風(fēng)險(xiǎn)，需要影像學(xué)（如B超）檢查，進(jìn)一步診斷；當(dāng)21-三體風(fēng)險(xiǎn)率1/270，18-三體風(fēng)險(xiǎn)率1/350時(shí)，須采集羊水胎兒細(xì)胞進(jìn)行染色體分析，進(jìn)一步診斷。返回上一

13、頁(yè)妊娠中期的孕婦體內(nèi)血清標(biāo)志物(21三體) 時(shí)間: 懷孕15-20周，有二聯(lián)或三聯(lián)標(biāo)志物 MoM值 水平AFP 0.7-0.8 uE3 0.6 HCG 1.8 截?cái)帱c(diǎn)：1：270假陽(yáng)率：5%建議超聲檢查時(shí)間12周： NT孕22-24周：最佳檢出期，查大多畸形。孕3234周：查出部分畸形孕3839周：再次確認(rèn)有無(wú)畸形，監(jiān)測(cè)胎兒生長(zhǎng)發(fā)育、胎盤(pán)、羊水第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)二、TORCH綜合癥的孕前和產(chǎn)前篩查試驗(yàn)TORCH是一組病原微生物的英文名稱縮寫(xiě)。T即弓形蟲(chóng)（hoxoplasma ，TOXO）O即其他微生物（others，O）R即風(fēng)疹病毒（rubella virus，RV）C即

14、巨細(xì)胞病毒（human cytomegalovirus，CMV）H即單純皰疹病毒（herpes simplex virus，HSV）返回上一頁(yè)弓形蟲(chóng) 弓形蟲(chóng)是人畜共患的可寄生于細(xì)胞內(nèi)的原蟲(chóng)，弓形蟲(chóng)的滋養(yǎng)體形態(tài)呈新月形平均為1.55 .0 um，故名弓形蟲(chóng)。 動(dòng)物是弓形蟲(chóng)病的傳染源，貓及貓科動(dòng)物是重要傳染源。人經(jīng)胎盤(pán)的垂直傳播也具有傳染源的意義。食入未煮熟的含各發(fā)育期弓形蟲(chóng)的肉制品、蛋品、乳類或被卵囊污染的食物和水可致感染；肉類加工人員和實(shí)驗(yàn)室工作人員有可能經(jīng)口、鼻、眼角膜或破損的皮膚、粘膜感染；輸血或器官移植器也可能引起感染；節(jié)肢動(dòng)物攜帶卵囊也具有一定的傳播意義。 人對(duì)弓形蟲(chóng)普遍易感。胎兒和嬰

15、幼兒的易感性較成人高，腫瘤和免疫功能缺陷或受損患者比正常人更易感。人的易感性隨接觸機(jī)會(huì)增多而上升，但無(wú)性別上的差異 感染臨床表現(xiàn)：多為隱性感染，在組織中形成包囊，一旦機(jī)體抵抗力下降時(shí)，包囊破裂，裂殖體逸出病擴(kuò)散時(shí)可表現(xiàn)為急性癥狀，如淋巴結(jié)腫大、發(fā)熱、疲乏、頭痛、咽痛、肌肉關(guān)節(jié)痛和腹痛等感染致畸 妊娠早、中期感染可引起流產(chǎn)和胎兒多發(fā)性畸形，如腦積水、小眼、無(wú)眼癥、先天性白內(nèi)障、唇腭裂，以及先天性心臟病、肛門(mén)閉鎖和肢體畸形晚期感染可導(dǎo)致早產(chǎn)、圍生兒死亡母嬰傳播 患弓形體病的孕婦，主要通過(guò)胎盤(pán)感染胎兒或胎兒吞咽被污染的羊水而感染，母嬰平均傳播率為40%風(fēng)疹病毒（rubella virus,RV）風(fēng)疹

16、為RNA病毒，人是其唯一的自然宿主；RV通過(guò)呼吸道傳播；人類對(duì)風(fēng)疹病毒普遍易感，預(yù)后佳；孕婦屬易感人群，一旦感染便可發(fā)生子宮內(nèi)感染致胎兒畸形及嚴(yán)重后遺癥，流產(chǎn)及死亡率是正常妊娠的2-4倍。孕婦風(fēng)疹病毒感染后，85%有全身病毒感染類似感冒癥狀，15%無(wú)明顯臨床表現(xiàn)，僅有血清學(xué)支持，為隱形感染。風(fēng)疹病毒在孕8周內(nèi)感染，先天性風(fēng)疹綜合征的發(fā)病率為85%，9-12周為52%，而20周以后就很罕見(jiàn)。因此，妊娠期確定風(fēng)疹感染時(shí)間很重要；早期妊娠婦女若確診為RV應(yīng)行人工流產(chǎn)風(fēng)疹感染后累及胎兒致先天性風(fēng)疹綜合征有四個(gè)主要缺陷，其發(fā)生頻率從高到低為：先天性耳聾智力障礙先天性心臟?。ㄊ议g隔缺損、動(dòng)脈導(dǎo)管未閉）眼異

17、常（白內(nèi)障、青光眼）TORCH病原體先天感染的共同特點(diǎn)是，孕婦首次感染傳染給胎兒的幾率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于復(fù)發(fā)感染；懷孕早期的首次感染給胎兒的風(fēng)險(xiǎn)以及對(duì)胎兒造成的傷害遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于懷孕后期。第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)返回上一頁(yè) TORCH血清學(xué)檢測(cè)需要注意以下一些情況：1 判斷胎兒感染需要確鑿證據(jù)。確定胎兒有無(wú)TORCH感染需要進(jìn)一步行羊膜腔穿刺取羊水或經(jīng)皮取臍帶血進(jìn)行IgM測(cè)定以及分離抗原等來(lái)確診；但這些診斷均為有創(chuàng)操作，穿刺本身存在將病原帶給胎兒的危險(xiǎn)性。2 注意抗體在體內(nèi)的存在時(shí)間。IgM是感染后最早出現(xiàn)的抗體，是判斷感染的重要標(biāo)志，對(duì)IgM抗體血清學(xué)結(jié)果判必須考慮其在體內(nèi)的存在時(shí)間。 第二

18、節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)二、TORCH綜合癥的孕前和產(chǎn)前篩查試驗(yàn)返回上一頁(yè)TORCH血清學(xué)檢測(cè)需要注意以下一些情況：（3）在孕前進(jìn)行TORCH感染篩查較為適宜。（4）另外，免疫缺陷者TORCH感染可檢測(cè)不到相關(guān)抗體。第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)三、新生兒篩查試驗(yàn)新生兒篩查是指在新生兒期對(duì)某些嚴(yán)重的先天性或遺傳代謝性疾病進(jìn)行普查。這類疾病在新生兒期可無(wú)任何臨床癥狀，但體內(nèi)已有生化和激素改變。新生兒篩查可及早發(fā)現(xiàn)異常，進(jìn)行早診斷、早治療，避免發(fā)生體格和智能發(fā)育障礙等嚴(yán)重后果。返回上一頁(yè)第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)(一) 先天性甲狀腺功能低下篩查試驗(yàn)先天性甲狀腺功

19、能低下在我國(guó)的發(fā)生率約為1/4000-1/3000返回上一頁(yè)第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)(一) 先天性甲狀腺功能低下篩查試驗(yàn)先天性甲狀腺功能低下在我國(guó)的發(fā)生率約為1/4000，大部分患者可用干燥甲狀腺粉劑進(jìn)行治療。先天性甲狀腺功能低下表現(xiàn)新生兒為血中甲狀腺素（thyroid，T4）降低與促甲狀腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）升高，我國(guó)的新生兒篩查則是用標(biāo)記免疫學(xué)方法測(cè)定新生兒血漿中的 TSH，若TSH異常升高，則進(jìn)一步檢查T(mén)4以確診，進(jìn)而治療。返回上一頁(yè)第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)（二）苯丙酮尿癥篩查試驗(yàn)苯丙酮尿癥在我國(guó)人群發(fā)病約

20、為 116 500，是一種常見(jiàn)的氨基酸代謝病，屬常染色體隱性遺傳病。正常情況下，體內(nèi)苯丙氨酸代謝需要苯丙氨酸羥化酶及其輔酶四氫生物蝶吟的作用轉(zhuǎn)化為酪氨酸以合成甲狀腺素、黑色素等。苯丙氨酸轉(zhuǎn)化為酪氨酸的途徑障礙即造成苯丙氨酸及其酮酸積蓄并從尿中大量排出并在體內(nèi)蓄積，對(duì)患者神經(jīng)系統(tǒng)造成損害（患兒智能發(fā)育不全），并影響體內(nèi)色素代謝（患者皮膚即毛發(fā)顏色變淺）。低苯丙氨酸奶方 返回上一頁(yè)第二節(jié) 遺傳性疾病常用的篩查試驗(yàn) 下一頁(yè)（三）葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥篩查試驗(yàn)小兒紅細(xì)胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥是一種遺傳性溶血性疾病。由于變異類型和（或）酶缺乏程度的不同可分為5種臨床類型：蠶豆病；藥物性溶血；

21、新生兒黃疽；感染誘發(fā)溶血；先天性非球性紅細(xì)胞性貧血。返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)一、采集胎兒細(xì)胞的方法：（一）：羊膜穿刺 使在B超的監(jiān)視下，用消毒的注射器抽取胎兒羊水。可以對(duì)抽取的羊水及其中的胎兒脫落細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，分析染色體以及生化和基因的檢測(cè)。如羊水的甲胎蛋白濃度過(guò)高時(shí)，提示胎兒可能有無(wú)腦兒、開(kāi)放性脊柱裂、脊髓脊膜膨出和腦積水等異常。 返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)一、采集胎兒細(xì)胞的方法：（一）：羊膜穿刺返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)一、采集胎兒細(xì)胞的方法：（二）：絨毛取樣術(shù)：絨毛取樣一般在妊娠79周進(jìn)

22、行，是妊娠早期診斷的方法。絨毛取樣術(shù)也是在B超監(jiān)視下，用特制的取樣器，從陰道經(jīng)宮頸進(jìn)入子宮，沿子宮壁到達(dá)取樣部位，用內(nèi)管吸取絨毛。絨毛取樣的優(yōu)點(diǎn)時(shí)檢查時(shí)間早，需要作出選擇性流產(chǎn)時(shí)，給孕婦帶來(lái)的損傷和痛苦較小，因此該方法可以在早孕期診斷胎兒遺傳病，所以很適合一些需要及早進(jìn)行診斷的應(yīng)急病例，以及某些需要進(jìn)行酶測(cè)定或DNA診斷的疾病，包括染色體病或有關(guān)基因病。返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)一、采集胎兒細(xì)胞的方法：（二）：絨毛取樣術(shù)：返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)（三）臍帶血穿刺術(shù)臍帶穿刺術(shù)是在B超的監(jiān)視下，用細(xì)針經(jīng)腹壁、子宮進(jìn)入胎兒臍帶抽取胎兒

23、血液。臍帶血管穿刺的時(shí)間一般在妊娠中期，即妊娠2022周，因?yàn)榇藭r(shí)的臍帶較為粗大，容易穿刺中血管，而且此時(shí)胎兒也較大，能夠提供較多的血樣用于診斷。本方法常用于錯(cuò)過(guò)絨毛取樣或羊膜穿刺最佳時(shí)機(jī)或羊水檢查失敗的補(bǔ)救措施，主要適應(yīng)于胎兒染色體檢測(cè)、胎兒內(nèi)分泌疾病或免疫性疾病的產(chǎn)前診斷。臍帶血穿刺的并發(fā)癥主要有胎兒感染、出血、臍帶血腫 、流產(chǎn)、早產(chǎn)、母胎輸血，但發(fā)生幾率極低。返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)（四）：胎兒鏡檢查胎兒鏡檢查又稱羊膜腔鏡。胎兒鏡檢查是在B超引導(dǎo)下用很細(xì)的纖維內(nèi)鏡（胎兒鏡）從孕婦腹壁穿刺，經(jīng)子宮壁進(jìn)入羊膜腔，觀察胎兒情況，同時(shí)還可行臍帶血和胎盤(pán)血的采集、

24、胎兒組織活檢、對(duì)異常胎兒進(jìn)行宮內(nèi)治療甚至活檢。妊娠15-20周可做胎兒鏡檢查，但以妊娠18-20周間進(jìn)行最適合。目前該項(xiàng)檢查對(duì)胎兒威脅大，易導(dǎo)致流產(chǎn)和胎死宮內(nèi)，而且胎兒鏡設(shè)備昂貴，技術(shù)要求高，因此目前應(yīng)用尚少。返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)二、染色體顯帶技術(shù)與核型分析細(xì)胞遺傳學(xué)檢查、染色體檢查或核型分析技術(shù)是輔助診斷和對(duì)染色體病確診的主要方法，也是產(chǎn)前診斷染色體病的經(jīng)典方法。隨著顯帶技術(shù)的應(yīng)用，特別是高分辨染色體顯帶技術(shù)的發(fā)展，能夠更準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)和確定更多的染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常，是診斷染色體病的金標(biāo)準(zhǔn)。返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)二、染色

25、體顯帶技術(shù)與核型分析1染色體顯帶技術(shù)顯帶技術(shù)主要分為兩大類：一類是整個(gè)染色體顯帶，包括Q帶、G帶和R帶；另一類只顯示特定染色體區(qū)段或結(jié)構(gòu)，包括顯示著絲料的C帶。顯示端粒的T帶以及顯示核仁組織區(qū)（NOR）的N帶。染色體的帶型反映了調(diào)控DNA復(fù)制、修復(fù)、轉(zhuǎn)錄和遺傳重組的基因組的功能結(jié)構(gòu)。每帶含510Mb的DNA，包含數(shù)百個(gè)基因。返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)二、染色體顯帶技術(shù)與核型分析2帶型命名原則 通過(guò)染色體顯帶技術(shù)，在染色體著絲粒分隔的短臂（p）和長(zhǎng)臂（q）上，均有一系列連續(xù)的深、淺、寬、窄不同的染色體帶。1971年在巴黎召開(kāi)的人類細(xì)胞遺傳學(xué)會(huì)議上提出了區(qū)分每個(gè)顯帶

26、染色體區(qū)、帶的標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)。1978年的國(guó)際會(huì)議上，制定了人類細(xì)胞遺傳學(xué)命名的國(guó)際體制（International System for human Cytogenetic Nomenclature，ISCN），提出了統(tǒng)一的符號(hào)和術(shù)語(yǔ)。 返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)二、染色體顯帶技術(shù)與核型分析3核型分析與描述按國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，正常核型的描述包括兩部分：第一部分為染色體總數(shù)，第二部分為性染色體組成，兩者之間用“，”隔開(kāi)。如正常男性的核型為46，XY。異常核型的描述除包括以上兩部分外，還包括畸變情況，也是用“，”與前面部分隔開(kāi)。“”或“”置于染色體號(hào)前，表示該染色體的增加或丟失

27、，而性染色體的增減則在染色體總數(shù)后直接以組成形式標(biāo)出；“”或“”放在相應(yīng)染色體號(hào)之后，則表示該染色體長(zhǎng)度的增加或減少。 返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)三、常用的分子生物學(xué)技術(shù)根據(jù)基因突變所涉及的范圍，基因突變可分為染色體突變、基因組突變和點(diǎn)突變?nèi)N，前兩種突變涉及的基因較多，可通過(guò)染色體分析，亦可在間期用標(biāo)記探針檢出，點(diǎn)突變涉及范圍少，常作基因分析。不同類型的基因突變有不同的檢測(cè)途徑，大致方法包括：基因探針雜交直接檢測(cè)；PCR及其衍生技術(shù)檢測(cè)；DNA測(cè)序；連鎖分析等。返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)三、常用的分子生物學(xué)技術(shù)（一）熒光原位雜交

28、熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）技術(shù)是20世紀(jì)80年代在細(xì)胞遺傳學(xué)、分子遺傳學(xué)和免疫學(xué)相結(jié)合的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新技術(shù)，通過(guò)應(yīng)用不同熒光顏色標(biāo)記的目的 DNA片段（探針），依據(jù)堿基配對(duì)原理，雜交到分裂中期染色體或間期染色質(zhì)纖維上，在熒光顯微鏡下觀測(cè)目的DNA在染色體上的位置或在間期核中的數(shù)目，從而進(jìn)行目的DNA的定性、定位和相對(duì)定量分析。返回上一頁(yè)FISH原理全染色體熒光染色體著絲粒熒光染色體端粒熒光第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)（一）熒光原位雜交返回上一頁(yè)染色體數(shù)目異常結(jié)構(gòu)模式圖21三體第三節(jié) 遺傳性疾病常用的

29、產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)三、常用的分子生物學(xué)技術(shù)（二）聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)及其衍生技術(shù)聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（polymerase chain reaction，PCR）是利用DNA聚合酶（如Taq DNA聚合酶）等在體外條件下，催化一對(duì)引物間的特異DNA片段合成的基因體外擴(kuò)增技術(shù)，利用該技術(shù)從而使DNA以對(duì)數(shù)增長(zhǎng)的方式擴(kuò)增，達(dá)到極易被檢測(cè)的數(shù)量，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)目標(biāo)基因片段的測(cè)定。在遺傳病基因突變的性質(zhì)和部位清楚的情況下，PCR技術(shù)及衍生技術(shù)可直接檢出突變部位，診斷遺傳病。返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)三、常用的分子生物學(xué)技術(shù)（四）核苷酸序列分析DNA序列分析（DNA sequ

30、encing）即DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定，是現(xiàn)代分子生物學(xué)中一項(xiàng)重要的技術(shù)，其經(jīng)典的分析方法有化學(xué)分裂法和末端終止法。DNA序列分析是檢測(cè)基因突變最直接最可信的方法，不僅可確定突變的部位，而且還可確定突變的性質(zhì)，是診斷基因異常（已知和未知）最直接和準(zhǔn)確的方法。返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)三、常用的分子生物學(xué)技術(shù)（五）微陣列比較基因組雜交微陣列比較基因組雜交（array-comparative genomic hybridization，Array-CGH）技術(shù)是將DNA克隆或cDNAs做成微陣列，本質(zhì)上是一種同時(shí)進(jìn)行的FISH試驗(yàn)，所用的克隆多達(dá)數(shù)百。Array-CG

31、H基于與細(xì)胞核分裂中期CGH同樣的原理，來(lái)自對(duì)照者（或參考者）的全基因組DNA與來(lái)自測(cè)試者（或患者）的全基因組DNA分別用兩種不同的熒光基團(tuán)標(biāo)記，這兩種被標(biāo)記的全基因組DNA作為探針與微陣列上的核酸靶點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)性雜交。 返回上一頁(yè)第三節(jié) 遺傳性疾病常用的產(chǎn)前診斷診斷技術(shù) 下一頁(yè)四、遺傳性疾病的植入前診斷方法植入前遺傳學(xué)診斷（preimplantation genetic diagnosis，PGD） ，“植入前”是指受精卵分裂的卵裂球和囊胚種植入子宮內(nèi)膜之前獲取胚胎細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)診斷，將遺傳病的診斷時(shí)間提前到胚胎植入前，即在體外受精（in vitro fertilization，IVF）發(fā)育至68

32、細(xì)胞期的胚胎中活檢單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)分析后，再選擇正常胚胎移植回母體子宮，以避免異常胎兒。PGD把遺傳性疾病控制在胚胎發(fā)育的最早階段，是輔助生殖技術(shù)與遺傳學(xué)診斷技術(shù)相結(jié)合而形成的一種孕前診斷技術(shù)。 返回上一頁(yè)第四節(jié) 常見(jiàn)遺傳性疾病的實(shí)驗(yàn)診斷 下一頁(yè)染色體異?；蚧兪窍忍煨远喟l(fā)畸形、不明原因的智力發(fā)育遲緩以及胎兒自然流產(chǎn)的重要原因。疾病診斷的傳統(tǒng)方法都是從癥狀入手，但是，針對(duì)遺傳病的產(chǎn)前診斷卻不同，一些遺傳病患者雖然接受了親代的致病基因，卻要等到出生后若干年，乃至中年以后才出現(xiàn)癥狀，因此實(shí)驗(yàn)檢查在遺傳病的診斷中起決定作用。返回上一頁(yè)第四節(jié) 常見(jiàn)遺傳性疾病的實(shí)驗(yàn)診斷 下一頁(yè)一、染色體數(shù)量異常疾病人

33、類正常生殖細(xì)胞精子和卵子各含有23條染色體，稱為一個(gè)染色體組，而正常體細(xì)胞是由精、卵結(jié)合成受精卵，再經(jīng)卵裂發(fā)育而成的，故含有46條染色體。把含有一個(gè)染色體組的精、卵稱為單倍體，人的體細(xì)胞因含有兩套染色體組而稱作二倍體（diploid，2n）。以二倍體為標(biāo)準(zhǔn)，其他人細(xì)胞的染色體數(shù)目超過(guò)或少于46條，即稱為染色體數(shù)目畸變，它包括整倍體異常和非整倍體異常兩大類。 返回上一頁(yè)第四節(jié) 常見(jiàn)遺傳性疾病的實(shí)驗(yàn)診斷 下一頁(yè)一、染色體數(shù)量異常疾病121-三體綜合征返回上一頁(yè)唐氏綜合征 是人類最常見(jiàn)的一種染色體病。由于在配子（生殖細(xì)胞）形成期或核子期（約在受精后24小時(shí)內(nèi)）細(xì)胞內(nèi)多了一條 21號(hào)染色體 母親生育年齡21三體綜合征發(fā)病率45歲1/50母親生育年齡與21三體綜合征發(fā)病率之間的關(guān)系第四節(jié) 常見(jiàn)遺傳性疾病的實(shí)驗(yàn)診斷 下一頁(yè)一、染色體數(shù)量異常疾病218-三體綜合征（愛(ài)德華綜合征）18三體綜合癥的產(chǎn)生多由母親卵母細(xì)胞減數(shù)分裂時(shí)發(fā)生的18號(hào)染色體不分離所致。返回上一頁(yè)第四節(jié) 常見(jiàn)遺傳性疾病的實(shí)驗(yàn)診斷 下一頁(yè)一、染色體數(shù)量異常疾病313-三體綜合征（帕陶綜合征）:13三體綜合癥在新生兒中統(tǒng)計(jì)的發(fā)病率差異較大，約為 1210001/5000。返回上一頁(yè)第四節(jié) 常