抗炎免疫藥物的研究進(jìn)展課件

1、抗炎免疫藥物的研究進(jìn)展邴飛虹 依據(jù)抗炎免疫藥理學(xué)的新觀點(diǎn),綜述了非甾體類抗炎免疫藥、甾體類抗炎免疫藥和疾病調(diào)修藥的藥理作用、臨床應(yīng)用及研究進(jìn)展 既往觀點(diǎn)認(rèn)為,炎癥與免疫是疾病過程中兩個(gè)獨(dú)立的過程,我國學(xué)者近年提出,炎癥與免疫是疾病的兩個(gè)側(cè)面,相互重疊不可分割 由此提出抗炎免疫藥理學(xué)的新觀點(diǎn)。根據(jù)這一觀點(diǎn)把抗炎免疫藥物重新劃分為:非甾體類抗炎免疫藥(Non-steroidal anti- inflammatory immunity drugs,NSAIDs)、甾體類抗炎免疫藥(Steroidal anti-inflammatory immunity drugs,SAIDs)和疾病調(diào)修藥(Dise

2、asemodifying drugs,DMDs)1 NSAIDs的研究進(jìn)展 NSAIDs的臨床應(yīng)用非常廣泛。它能有效減輕炎癥性疾病的癥狀與體征。迄今為止仍是全球使用最多的藥物之一。傳統(tǒng)的此類藥物包括水楊酸類、丙酸類、乙酸類、滅酸類、喜康類和吡唑酮類等。作用機(jī)制為抑制前列腺素(PG)合成。因?yàn)镻G具有擴(kuò)張血管、促進(jìn)炎性介質(zhì)滲出、產(chǎn)生或增敏痛覺等作用 PG在慢性炎癥反應(yīng)中有致炎與抗炎的雙重作用。生理?xiàng)l件下的PG能保護(hù)胃黏膜、擴(kuò)張腎血管。因此NSAIDs在應(yīng)用中難免出現(xiàn)治標(biāo)不治本,不良反應(yīng)多的弊端。目前研究的NSAIDs以不抑制PG合成,而主要影響PG致炎作用為目標(biāo)。PG還是環(huán)氧酶(COX)的主要代

3、謝產(chǎn)物 當(dāng)COX途徑受到抑制后,脂氧酶活性相應(yīng)增加,導(dǎo)致其代謝產(chǎn)物白三烯增加,而后者也是一類重要的炎癥介質(zhì),與PG有協(xié)同作用。理想的NSAIDs應(yīng)該對(duì)PG和白三烯的致炎作用有雙重拮抗作用。現(xiàn)已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的此類藥物有替尼達(dá)喜(tenidap),苯惡洛酚等 鑒于療效相近的NSAIDs常常具有不同的副作用,而對(duì)乙酰氨基酚有解熱鎮(zhèn)痛作用,卻無抗炎作用。經(jīng)過基礎(chǔ)與臨床的大量實(shí)驗(yàn),最終發(fā)現(xiàn)COX的重要亞型COX-2在藥物作用的特性及炎癥產(chǎn)生過程中起著重要作用 COX-2一般很少在正常組織表達(dá),這是因?yàn)閮?nèi)源性皮質(zhì)激素對(duì)其發(fā)揮著抑制效應(yīng)。當(dāng)炎癥發(fā)生時(shí),COX-2在炎癥組織中高度表達(dá),而且表達(dá)水平與炎癥程

4、度密切相關(guān),有學(xué)者提出COX-2屬于誘導(dǎo)性表達(dá),因此也稱誘生性環(huán)氧酶。大量COX-2選擇性抑制劑由此不斷推出(如二芳香吡唑類、二芳香咪唑類、庚烯類、環(huán)戊烯類等)COX1 和 COX2的特性比較 COX1 COX2生成 存在于正常組織經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)，存在于受損傷組織 功能催化合成 PGE2、PGI2 有穩(wěn)定和保護(hù)細(xì)胞的作用催化合成PGE2、PGI2是原炎性，具有強(qiáng)烈的致炎、致痛作用 FDA批準(zhǔn)的第一個(gè)COX-2特異性抑制劑是三環(huán)類化合物塞來昔布(celecoxib),該藥于1998年上市。隨之而來的是羅非昔布等“昔布類”(coxibs)藥物的不斷涌現(xiàn)。但臨床應(yīng)用實(shí)踐證明該類藥物療效并不比傳統(tǒng)NSAI

5、Ds樂觀,同時(shí)仍具許多不良反應(yīng)(ADR) 普遍認(rèn)為COX-2特異性抑制劑比萘普生、雙氯酚酸好,但不比尼美舒利和布洛芬等傳統(tǒng)NSAIDs好。COX-2特異抑制劑的利與弊提示體內(nèi)參與炎癥與免疫反應(yīng)的COX系列還可能存在更多亞型。另一類NSAIDs是一氧化氮釋放型NSAIDs。這類藥物是基于一氧化氮(NO)藥理學(xué)研究的基礎(chǔ),根據(jù)拼合原理發(fā)展起來 硝酸酯類、亞硝酸鹽類、S巰基谷胱甘肽都是NO適宜的供體,與阿司匹林等傳統(tǒng)NSAIDs結(jié)合,進(jìn)入體內(nèi)后釋放出NO和NSAIDs。其中NSAIDs可在體內(nèi)通過抑制COX活性發(fā)揮抗炎作用,而NO通過抑制噬中性粒細(xì)胞聚集、增加黏膜血流量促進(jìn)黏液分泌,減少自由基產(chǎn)生等

6、,在胃腸道起到PG相同的胃腸黏膜保護(hù)作用,從而減少傳統(tǒng)NSAIDs的胃腸道ADR 例如:NO-雙氯滅痛、NO-Asprin等都顯示良好的抗炎作用。無論小劑量短期給藥還是連續(xù)給藥,這些NO釋放型衍生物都能有效降低胃腸道副作用,甚至對(duì)用藥前已存在的潰瘍也有一定愈合作用 研究表明,NSAIDs的臨床應(yīng)用也在拓展。除具有良好抗炎、解熱和鎮(zhèn)痛作用,用于各種炎性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、軟組織風(fēng)濕癥、骨關(guān)節(jié)炎以外,還發(fā)現(xiàn)該類藥物對(duì)腫瘤、阿爾茨海默病、血栓性疾病等療效顯著。隨著研究的不斷深入,COX-2特異性抑制劑和NO釋放型NSAIDs是未來NSAIDs類的主要代表藥物2 SAIDs SAIDs具有強(qiáng)大的抗炎

7、作用和一定的免疫抑制作用。它能阻止炎癥細(xì)胞向炎癥部位集中、抑制炎性因子釋放,抑制淋巴細(xì)胞的增殖與分化。由于SAIDs嚴(yán)重的不良反應(yīng),臨床一般不用于輕癥的炎癥免疫性疾病的常規(guī)治療,但是治療嚴(yán)重的炎癥免疫性疾病(如多發(fā)性肌炎、皮肌炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、危重感染、病情急劇惡化、急癥危象)的首選藥物 近年國內(nèi)外學(xué)者對(duì)采用低劑量糖皮質(zhì)激素治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的安全性給予重新評(píng)價(jià),發(fā)現(xiàn)低劑量糖皮質(zhì)激素治療RA時(shí)很少引起嚴(yán)重ADR(如骨質(zhì)疏松),而SARS治療中,大劑量超常規(guī)劑量使用糖皮質(zhì)激素可能會(huì)帶來較嚴(yán)重ADR的事實(shí),均說明適量應(yīng)用SAIDs對(duì)降低ADR的積極意義 近有采用糖皮質(zhì)激素“脈沖”療法(pu

8、lsed corticostereids)治療RA患者,雖療效不盡統(tǒng)一,但無明顯藥物ADR,對(duì)骨代謝只有短暫的抑制,不會(huì)引起骨質(zhì)疏松。所以有學(xué)者建議這種“脈沖”療法可用于嚴(yán)重RA病情加劇或新的SAIDs應(yīng)用之前（用小劑量脈沖療法，即每周1次，第一周255毫克，以后每周增加25毫克，至每周1015毫克。 ） 小劑量SAIDs不僅具有免疫抑制作用,還有免疫調(diào)節(jié)作用。臨床上聯(lián)合應(yīng)用生理劑量SAIDs和其他藥物,可以提高內(nèi)源性防御機(jī)制,既能發(fā)揮抗炎作用,還能抵抗細(xì)胞自身免疫反應(yīng),這是治療RA的一種切實(shí)可行的方法 SAIDs治療RA的適應(yīng)證可能有:抗炎:若應(yīng)用NSAID不能緩解RA的疼痛、晨僵、疲勞等癥

9、狀,或患者對(duì)NSAID不能耐受,可以考慮應(yīng)用低劑量SAIDs(如潑尼松);介導(dǎo)疾病調(diào)修藥作用:開始治療RA時(shí)采用短期大劑量SAIDs,減量后配合應(yīng)用DMDs;特殊適應(yīng)證:SAIDs是孕期和哺乳期RA最安全的抗炎藥。有輕度腎衰、老年人、胃腸病患者,使用小劑量SAIDs比NSAIDs好;RA的特殊類型,如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎/風(fēng)濕性肌痛重疊綜合征 一些用于治療炎癥免疫性疾病的外用劑型相繼被開發(fā)。如潑尼松尼酸酯局部外用治療類風(fēng)濕炎療效較好,且ADR很少發(fā)生。局部用藥無或少有全身用藥的嚴(yán)重ADR,因此開發(fā)外用劑型仍是今后SAIDs發(fā)展的方向之一3 DMDs研究進(jìn)展 疾病調(diào)修藥(DMDs)包括免疫抑制藥、免疫增

10、強(qiáng)藥和免疫調(diào)節(jié)藥三種。環(huán)孢素A的發(fā)現(xiàn)使得免疫抑制藥進(jìn)入了新階段。早期免疫抑制藥臨床多用于抗腫瘤,主要是利用此類藥物能夠抑制生長旺盛的細(xì)胞,也包括免疫細(xì)胞。選擇性不高 環(huán)孢素A對(duì)T淋巴細(xì)胞依賴性免疫反應(yīng)有選擇性抑制作用,可用于抑制器官移植后的排斥反應(yīng),同時(shí)也能用于炎癥免疫性疾病如RA,原發(fā)性腎小球疾病和支氣管哮喘。另一種從鏈霉菌發(fā)酵物提取出來的活性成分他羅利姆(FK506),其免疫抑制作用強(qiáng)度是環(huán)孢素A的10100倍 與FK506結(jié)構(gòu)相似的雷帕霉素在體內(nèi)外均具有抗免疫活性。最近發(fā)現(xiàn)某些廣譜抗生素,如四環(huán)素和小諾霉素也有抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用,對(duì)類風(fēng)濕有一定療效,可能會(huì)有新的應(yīng)用前景 免疫增強(qiáng)藥可通過

11、不同途徑增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。如胞肽(romuride)是一種比胞壁酰二肽具有更強(qiáng)免疫活性的免疫增強(qiáng)藥?？梢约せ罹奘杉?xì)胞誘導(dǎo)單核因子,刺激造血活性,使外周血白細(xì)胞和血小板增高,還能刺激補(bǔ)體生成,發(fā)揮非特異性抗感染作用 臨床用于恢復(fù)一種結(jié)構(gòu)類似左旋咪唑的tilomisole,能促進(jìn)淋巴細(xì)胞恢復(fù)和增殖,提高IL-2,INF的產(chǎn)生,可適用于治療RA 免疫調(diào)節(jié)藥具有抗炎和雙向免疫調(diào)節(jié)作用。除一些已上市的免疫球蛋白外,值得注意的是許多中草藥具有抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用。這些藥物的主要成分包括多糖、苷類和生物堿等。多糖類藥物如黃芪多糖、人參多糖、枸杞多糖、靈芝多糖、銀耳多糖、香菇多糖、豬苓多糖和云芝多糖等,均有良好

12、的免疫調(diào)節(jié)作用 與化療藥物配合使用可增加抗腫瘤效果,并能部分對(duì)抗化療藥物對(duì)正常淋巴細(xì)胞增殖的抑制作用,因此可用于一些免疫功能低下或腫瘤的輔助治療。苷類藥物如白芍總苷、人參總苷、黃芪甲苷、雷公藤多苷、三七總皂苷,也能發(fā)揮抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用,特別是白芍總苷對(duì)RA有顯著療效,已獲國家新藥證書并進(jìn)入臨床使用 生物堿類藥物包括苦豆堿川烏總堿槐果堿雷公藤新堿,表現(xiàn)抗炎和免疫抑制作用。雖目前上市品種較少,但進(jìn)入臨床研究的為數(shù)不少,相信會(huì)是一類有前途的植物來源DMDs抗炎免疫藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)的某些進(jìn)展 抗炎免疫藥理學(xué)是藥理學(xué)一門新的分支學(xué)科,其主要研究的目的是探討抗炎免疫藥物的作用,作用機(jī)制及作用的規(guī)律性,尋找

13、防治炎癥免疫功能紊亂性疾病的有效藥物,從而有助于揭示炎癥免疫功能紊亂性疾病的病因和病理機(jī)制 隨著免疫學(xué)、分子生物學(xué)、病理學(xué)等相關(guān)學(xué)科的迅速發(fā)展,抗炎免疫藥理學(xué)領(lǐng)域的研究十分活躍,涉及面很廣,研究內(nèi)容越來越豐富,而多學(xué)科的相互滲透,使抗炎免疫藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)有了較大的進(jìn)展,這無疑對(duì)抗炎免疫藥理學(xué)的發(fā)展起了積極的推動(dòng)作用 從整體動(dòng)物模型和細(xì)胞分子水平兩個(gè)方面,就近年來該領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)方法學(xué)中的某些主要進(jìn)展1 關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型 大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎(adjuvant arthritis)模型是一種T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病模型,是研究抗炎免疫藥物及治療人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物的理想的動(dòng)物模型,已普遍受到人們的重視

14、實(shí)驗(yàn)提示,AA免疫反應(yīng)高峰期脊髓背角及背根神經(jīng)節(jié)P物質(zhì)(substance P, SP)含量增多,耗竭脊髓背角SP,細(xì)胞免疫功能更為亢進(jìn),AA病情加重,人為增加脊髓背角SP含量,AA大鼠免疫水平降低。推測(cè)AA大鼠免疫反應(yīng)的同時(shí)也刺激了含SP的感覺神經(jīng)末梢,使脊髓背角SP含量增多,通過未知通路向高級(jí)中樞神經(jīng)傳遞信息,整合后產(chǎn)生某種反饋抑制,作用于免疫系統(tǒng),使之不致于反應(yīng)過強(qiáng),而起到一定的自身保護(hù)作用 提示免疫調(diào)節(jié)肽SP,特別是脊髓背角SP參與AA鼠免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。為從神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)探討AA以及多種自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)理,開發(fā)新型抗炎免疫藥物提供了新思路 型膠原關(guān)節(jié)炎(collagen typei

15、nduced arthritis, CA)是Trentham等1977年首次建立的實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎模型。1980年代至90年代初期,國外大量重復(fù),并在臨床表現(xiàn)、病理組織學(xué)和免疫學(xué)等方面進(jìn)行了廣泛深入的研究使其不斷成熟和完善 雞、小牛、大鼠的型膠原均能引起關(guān)節(jié)炎。一般可在嚙齒類動(dòng)物和靈長類動(dòng)物中產(chǎn)生。本所先后用小鼠、大鼠成功地建立了CA模型。CA與AA有許多相似之處,但在免疫指標(biāo)上也有不同 CA的免疫功能變化兼有體液免疫和細(xì)胞免疫,動(dòng)物體內(nèi)存在針對(duì)自身C的高滴度IgG抗體,這些特性更接近人的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,因治此是篩選和研究治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物的理想模型, 為今后研究人類與自身免疫有關(guān)的疾病提供了

16、一個(gè)極有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ? 系統(tǒng)性紅斑狼瘡動(dòng)物模型 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種病因未明,累及多個(gè)系統(tǒng),病程遷延反復(fù)的自身免疫性疾病。多年來,理想的動(dòng)物模型的缺乏一直是影響SLE研究的主要原因。自六十年代起,國內(nèi)外學(xué)者逐漸建立一系列SLE病理模型,包括自發(fā)性和實(shí)驗(yàn)性兩類(1)自發(fā)性模型: 主要包括三種品系小鼠: NZB/NZWF1(B/W)、MRL/MP-lpr(MRL-lpr) 和BXSB。NZB/NZWF1小鼠是NZB與NZW小鼠的雜交子代,可自發(fā)性出現(xiàn)免疫異常,主要表現(xiàn)為,T、B細(xì)胞的過早發(fā)育與成熟,B細(xì)胞多克隆激活,抗核抗體出現(xiàn)及免疫復(fù)合物性腎炎 MRL-Lpr小鼠的基因組合75%來自

17、LG,13%來自AKR,12%為C3H,0.3%為C57BL/6,H-2單倍型為H-2K。該鼠能自發(fā)性形成免疫復(fù)合物性腎炎,血清中有大量的抗核抗體,淋巴組織高度增生 BXSB小鼠是(C57BL/6JXSB/bLe)F1,其H-2單倍型為H-2b,可出現(xiàn)T、B細(xì)胞異常增生,胸腺萎縮,亦可產(chǎn)生大量自身抗體及免疫復(fù)合性腎炎,后期可并發(fā)嚴(yán)重關(guān)節(jié)炎。這些小鼠的共同特征是自發(fā)性出現(xiàn)一些類似于人SLE的癥狀及免疫學(xué)異常,T細(xì)胞亞群在免疫功能紊亂中起重要作用。但這些模型發(fā)病較晚、周期長,不易控制實(shí)驗(yàn)過程(2)實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)SLE動(dòng)物模型:主要包括同種異體淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠SLE模型,空腸彎曲菌誘導(dǎo)的小鼠SLE模型、

18、pristerne誘導(dǎo)小鼠SLE模型以及肽類及人抗DNA獨(dú)特抗體誘導(dǎo)的SLE模型。這些模型共同的特點(diǎn)是:自身抗體出現(xiàn)較早,一般在再次免疫14周內(nèi),12月內(nèi)基本出現(xiàn)免疫復(fù)合物性腎炎等多器官慢性炎癥表現(xiàn),實(shí)驗(yàn)方法相對(duì)簡單,而各模型各有特色 盡管上述模型與人類SLE還存在不少差距,但多種模型相互結(jié)合,為從不同側(cè)面研究SLE的病理機(jī)制提供新途徑。分別采用空腸彎曲菌CJ-S131和Pristane成功地建立SLE小鼠模型,并初步探討了免疫調(diào)節(jié)藥白芍總甙和褪黑素對(duì)SLE小鼠的雙向免疫調(diào)節(jié)作用3 免疫性肝損傷模型 對(duì)肝臟疾病的病理過程仍缺乏足夠的認(rèn)識(shí)。但肝內(nèi)免疫反應(yīng)已被公認(rèn)為造成肝損傷的重要機(jī)制之一。朱凡凡

19、采用刀豆蛋白A(ConA)和2 -去氧鳥苷改變小鼠免疫狀態(tài),再用同系小鼠肝細(xì)胞膜特異性脂蛋白(LSP)免疫小鼠,誘導(dǎo)小鼠自身免疫性肝炎模型 采用異品系小鼠LSP并在免疫LSP的同時(shí)輔以弗氏完全佐劑(FCA),使血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶 SGPT和LSP抗體滴度顯著升高。近年來,先后建立了用異種血清,包括豬、牛、馬血清,異體蛋白,包括豬白蛋白、血清球蛋白、人丙種球蛋白、人血白蛋白,卡介苗 BCG+LPS注射制作免疫肝纖維化病理模型 采用短小棒狀桿菌+LPS序貫靜脈注射建立免疫性肝損傷,該模型發(fā)病快,血SGPT在造模后16-18 h達(dá)高峰水平,并伴肝脾明顯腫大,血漿NO水平升高和脾細(xì)胞致分裂素反應(yīng)明顯下降的

20、特點(diǎn) 為模擬臨床肝炎的細(xì)胞免疫病理過程, 采用1% 2,4,6-三硝基苯基Picryl chloriele(Pcl)乙醇溶液腹部涂藥致敏,再用0.2%0.5% Pcl的橄欖油溶液肝穿刺攻擊,18 h后模型組血清轉(zhuǎn)氨酶顯著上升,肝組織壞死,炎性細(xì)胞浸潤,甚至浸及整個(gè)肝臟 上述模型的建立,為肝損傷的機(jī)制及藥效評(píng)價(jià)開辟了新的途徑,但仍與病毒性肝炎免疫損傷所致的纖維化模型有相當(dāng)大的差異。尋找新的、在免疫及病理學(xué)等方面相比更接近臨床肝炎的動(dòng)物模型仍是今后人們努力的方向 艾滋病(AIDS)是20世紀(jì)人類的頭號(hào)病魔。尋找合適的動(dòng)物模型一直是AIDS研究的重大難題之一。理想的AIDS動(dòng)物模型應(yīng)是:能感染HIV

21、;動(dòng)物體型小;遺傳、免疫、代謝特性較清楚;靶細(xì)胞應(yīng)該是CD4+淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞為主 靶器官應(yīng)包括血清、淋巴組織和腦,傳染方式應(yīng)類似HIV,發(fā)病癥狀與人AIDS相似。但至今尚未發(fā)現(xiàn)理想的動(dòng)物模型。近年來,有關(guān)艾滋病動(dòng)物模型的研究取得了一些進(jìn)展。常用的評(píng)價(jià)艾滋病治療藥物的鼠模型主要有(1)鼠白血病病毒模型 鼠白血病病毒(Murine leukernia virus,MULV)屬于反轉(zhuǎn)錄病毒,接種于敏感鼠后可以導(dǎo)致脾淋巴結(jié)增大,免疫抑制和機(jī)會(huì)性感染等癥狀,稱為鼠艾滋病(MAIDs)。該模型也被用于研究和評(píng)價(jià)AIDS的治療藥物以及免疫調(diào)節(jié)劑(2)嵌合鼠模型 利用嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠(SCID)缺乏功

22、能性T、B細(xì)胞,而不發(fā)生異體移植排斥反應(yīng)的特性,將胚胎組織或末梢血細(xì)胞移植給SCID,從而建立嵌合型鼠模型。其特點(diǎn)是對(duì)多種病人血液中HIV-1分離株和實(shí)驗(yàn)室HIV-1株敏感 MAIDs模型具有易建立、重復(fù)性好、安全周期短,不需特殊實(shí)驗(yàn),不造成生物災(zāi)害等特點(diǎn),作為篩選抗反轉(zhuǎn)錄病毒藥物和免疫調(diào)節(jié)劑的模型具有明顯的優(yōu)勢(shì),但MULV雖攜帶反轉(zhuǎn)錄病毒所具有g(shù)ag、pol、env等共同基因,沒有HIV-1所特有的nef等調(diào)節(jié)基因 MULV/MAIDs系統(tǒng)只能用于評(píng)價(jià)那些作用于反轉(zhuǎn)錄病毒共同基因的藥物。而SCID/HIV-1模型系統(tǒng)尚處于建立時(shí)期,操作復(fù)雜、病毒在體內(nèi)復(fù)制過程和病理生理變化尚不清楚,它是HI

23、V-1感染的小動(dòng)物模型,具有MULV/MAIDs系統(tǒng)不可比擬的優(yōu)勢(shì),是一種很有希望的小動(dòng)物模型5 早老性癡呆 早老性癡呆(Alzheimer s disease,AD)是一種與年齡相關(guān)的、進(jìn)行性神經(jīng)退化而導(dǎo)致癡呆的疾病。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn),使用抗炎藥物的人群AD發(fā)病率,癥狀及持續(xù)時(shí)間均明顯低于、輕于對(duì)照人群 炎癥免疫機(jī)制在AD的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。尤其是通過中樞小膠質(zhì)細(xì)胞的激活,釋放IL-1及IL-6等炎癥細(xì)胞因子,促進(jìn)腦內(nèi)淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor peptide,APP)變?yōu)榈矸蹣拥鞍?amyloid-peptide)及老年斑(senile plaques,SPS)

24、的形成,使神經(jīng)纖維纏結(jié),突觸減少和神經(jīng)元喪失。此外,細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激、tau過度磷酸化等均可能是AD的發(fā)病機(jī)制 對(duì)AD發(fā)病機(jī)理尚缺乏根本的了解,因此尚缺乏真正的AD模型。目前常采用的主要有: 1)AlCl3灌胃,建立大鼠老年性癡呆模型,主要病理變化為在癡呆大鼠背海馬結(jié)構(gòu)各部位可見較多的-AP樣免疫反應(yīng)神經(jīng)元和較強(qiáng)-APP表達(dá) 2)毀損Wistar大鼠邁內(nèi)特基底核(nucleus basalis of Meynert, nbM)建立AD動(dòng)物模型,其表現(xiàn)為記憶力下降,乙酰膽堿酯酶(Ach E) 銳減,-AP和tau蛋白樣免疫神經(jīng)元增加、變性、壞死細(xì)胞形成,并有人AD相似的老年斑3)采用海馬內(nèi)微量

25、注射-AP多肽誘發(fā)AD模型,注射一周,學(xué)習(xí)記憶發(fā)生改變,出現(xiàn)大量膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng),神經(jīng)原軸突退化。此外,還有鵝育覃氨酸基底前腦注射致膽堿能損傷大鼠,雙側(cè)頸總脈永久性結(jié)扎致腦缺血大鼠和D-半乳糖皮下注射后自由基增多致腦老化小鼠等 1995年以來,發(fā)達(dá)國家已用基因技術(shù)培育出早老性癡呆動(dòng)物模型,國內(nèi)已有單位引進(jìn)日本快速老化小鼠(Senencence accelerated mouse,SAM)模型,但上述模型并不具備AD的全部特征,具有一定局限性。因此,采用不同模型,多方面著手,仍是研究該類藥物的主要途徑6 移植免疫 同種異體器官移植能導(dǎo)致受體動(dòng)物產(chǎn)生排異反應(yīng)。這種反應(yīng)能被免疫抑制劑抑制或延緩,在動(dòng)物實(shí)

26、驗(yàn)中,多種器官可以進(jìn)行異體移植,如皮膚片、腎、心臟、小腸、肝等,可通過免疫抑制對(duì)排異反應(yīng)的抑制程度來評(píng)價(jià)免疫抑制性藥物 通過用藥組和對(duì)照組的排異時(shí)間平均值來評(píng)價(jià)免疫抑制的作用強(qiáng)度.隨著我國器官移植外科學(xué)的發(fā)展,器官移植手術(shù)在我國較大醫(yī)院已相當(dāng)普及。相對(duì)來說,移植免疫的動(dòng)物模型研究相對(duì)滯后,研究開發(fā)免疫抑制藥物對(duì)移植免疫動(dòng)物模型的影響相對(duì)較少 開展藥物對(duì)器官移植免疫動(dòng)物模型機(jī)理的研究,對(duì)提高我國移植外科醫(yī)生的臨床用藥水平,發(fā)展我國自已的免疫抑制藥物,尤其從中草藥中開發(fā)新型的免疫抑制具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義7神經(jīng)免疫功能紊亂疾病的動(dòng)物模型 神經(jīng)系統(tǒng)部分疾病的發(fā)病機(jī)制和免疫功能紊亂有關(guān)。已明確中樞神

27、經(jīng)脫髓鞘引起多發(fā)性硬化(multiple sclerosis,MS)及周圍神經(jīng)脫髓鞘病格林-巴利綜合癥(GBS)等疾病與免疫功能有關(guān) MS是以堿性髓鞘蛋白(myelin basic protein,MBP)為自身抗原,GBP則以周圍神經(jīng)髓鞘中P2蛋白為重要的抗原實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓膜炎和實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性神經(jīng)炎模型是人們研究神經(jīng)免疫性疾病的常用模型(1)實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓膜炎(EAE) 是研究MS的理想動(dòng)物模型。其發(fā)病機(jī)理,臨床體征及病理組織改變和MS相似,因此被廣泛用于研究MS的發(fā)病機(jī)理和藥物治療作用的研究,而且近年來有重要的突破 MS是一中樞神經(jīng)系統(tǒng)的自身免疫性疾病,是體內(nèi)CD4細(xì)胞對(duì)

28、自身抗原一種免疫反應(yīng),主要的自身抗原包括MBP或MBP的多肽片段、含脂蛋白(proteinlipidprotein,PLP)等在動(dòng)物小鼠、大鼠及豚鼠均能誘發(fā)成功 采用牛MBP致敏SJL小鼠建立實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓模型,分離EAE發(fā)病動(dòng)物外周血對(duì)CD4特異的T淋巴細(xì)胞,用此種細(xì)胞靜脈注入同種健康小鼠,可建立被動(dòng)轉(zhuǎn)移EAE模型。該模型可以更直接地用于研究EAE和MS的發(fā)病機(jī)理,及藥物預(yù)防和治療機(jī)理的研究(2)實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性神經(jīng)炎模型(EAN) 采用牛MBP P2蛋白加弗氏不完全佐劑,多點(diǎn)基礎(chǔ)免疫7 d后,同劑量加強(qiáng)免疫一次,一周后動(dòng)物發(fā)病。主要?jiǎng)游餅長ewis大鼠或兔。其主要表現(xiàn)為:精神萎靡、

29、體重下降,先出現(xiàn)雙下肢無力,逐漸加重到癱瘓,隨之發(fā)展到四肢癱瘓、四肢針刺反應(yīng)減退。此種動(dòng)物模型的發(fā)病機(jī)理、臨床體征及組織病理與人類格林巴利綜合征(GBS)相似,因此,EAN作為GBS的動(dòng)物模型已被國際所公認(rèn)并廣為應(yīng)用8 粘膜耐受實(shí)驗(yàn)研究方法 粘膜耐受(MT)是指粘膜通過口服或鼻腔吸入等途徑接觸蛋白質(zhì)抗原后,再用此種蛋白進(jìn)行粘膜外免疫,引起的一種系統(tǒng)低反應(yīng)狀態(tài)。1911年Wells首次用公雞卵白蛋白喂豚鼠,發(fā)現(xiàn)豚鼠對(duì)此種蛋白質(zhì)引起的過敏具有抵抗性 二硝基氯苯喂豚鼠,發(fā)現(xiàn)豚鼠對(duì)二硝基氯苯的皮膚反應(yīng)性降低。八十年代,口服耐受才應(yīng)用到炎癥免疫性疾病動(dòng)物模型的治療上.此外,研究發(fā)現(xiàn),鼻腔給予蛋白也是一種

30、有效誘導(dǎo)免疫耐受的研究的方法 粘膜耐受的機(jī)制較為復(fù)雜。一般認(rèn)為小劑量抗原口服后,通過調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分泌一些抑制性細(xì)胞因子如TGF-、IL-4、IL-10等,介導(dǎo)導(dǎo)主動(dòng)抑制,大劑量口服或吸入后,抗原通過作用胸腺、脾臟及粘膜局部伴發(fā)的淋巴組織等處的Th1、Th2細(xì)胞,使其克隆無能(clone anergy)或克隆清除(clone deletion)發(fā)揮免疫耐受作用 通過口服型膠原可以明顯抑制由型膠原誘導(dǎo)的大鼠或小鼠的關(guān)節(jié)炎;口服MBP可以對(duì)MBP誘導(dǎo)Lewis大鼠和SJL小鼠的EAE發(fā)揮明顯治療作用,通過口服耐受治療其他免疫功能紊亂性疾病的研究正在國內(nèi)外許多實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,而且走在逐步應(yīng)用臨床。因此,M

31、T的研究,對(duì)于炎癥免疫性疾病的治療提供了新的思路9 結(jié)語 炎癥與免疫是機(jī)體的兩種不同功能,但又密切相關(guān)不可分割,其相互之間的關(guān)系,錯(cuò)縱復(fù)雜。抗炎免疫藥理學(xué)主要研究藥物對(duì)炎癥和免疫功能的作用及其機(jī)制,為炎癥免疫性疾病的藥物治療提供理論基礎(chǔ) 多數(shù)抗炎免疫藥物在發(fā)揮抗炎作用的同時(shí),又影響機(jī)體的免疫功能,使機(jī)體異常的免疫狀態(tài)(升高或降低)恢復(fù),而對(duì)正常的免疫功能無明顯影響;抗炎免疫藥物多作用于炎癥免疫功能的不同環(huán)節(jié),但離不開機(jī)體神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境的相互影響,且不同品種、性別年齡的動(dòng)物對(duì)抗炎免疫藥物的反應(yīng)可能不同 在進(jìn)行抗炎免疫藥理學(xué)研究時(shí),應(yīng)合理選擇不同的實(shí)驗(yàn)方法,尤其注意要:1)正常與病理動(dòng)物模型

32、相結(jié)合;2)體內(nèi)與體外實(shí)驗(yàn)互相補(bǔ)充;3)多種方法、多項(xiàng)指標(biāo)綜合評(píng)價(jià) 注意選擇敏感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。市場(chǎng)上出現(xiàn)相當(dāng)多品種的抗炎免疫藥物,但其臨床應(yīng)用效果遠(yuǎn)沒有達(dá)到理想的水平。其主要原因是炎癥免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性,現(xiàn)行的抗炎免疫藥理方法尚難以確切地評(píng)價(jià)其療效 當(dāng)今抗炎免疫藥理學(xué)的研究在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域里,既是熱點(diǎn)所在,亦面臨著巨大的戰(zhàn),相信在未來的發(fā)展中將會(huì)有新的突破11醉翁亭記 1反復(fù)朗讀并背誦課文，培養(yǎng)文言語感。2結(jié)合注釋疏通文義，了解文本內(nèi)容，掌握文本寫作思路。3把握文章的藝術(shù)特色，理解虛詞在文中的作用。4體會(huì)作者的思想感情，理解作者的政治理想。一、導(dǎo)入新課范仲淹因參與改革被貶，于慶歷六年寫下岳陽樓記

33、，寄托自己“先天下之憂而憂，后天下之樂而樂”的政治理想。實(shí)際上，這次改革，受到貶謫的除了范仲淹和滕子京之外，還有范仲淹改革的另一位支持者北宋大文學(xué)家、史學(xué)家歐陽修。他于慶歷五年被貶謫到滁州，也就是今天的安徽省滁州市。也是在此期間，歐陽修在滁州留下了不遜于岳陽樓記的千古名篇醉翁亭記。接下來就讓我們一起來學(xué)習(xí)這篇課文吧！【教學(xué)提示】結(jié)合前文教學(xué)，有利于學(xué)生把握本文寫作背景，進(jìn)而加深學(xué)生對(duì)作品含義的理解。二、教學(xué)新課目標(biāo)導(dǎo)學(xué)一：認(rèn)識(shí)作者，了解作品背景作者簡介：歐陽修(10071072)，字永叔，自號(hào)醉翁，晚年又號(hào)“六一居士”。吉州永豐(今屬江西)人，因吉州原屬廬陵郡，因此他又以“廬陵歐陽修”自居。謚

34、號(hào)文忠，世稱歐陽文忠公。北宋政治家、文學(xué)家、史學(xué)家，與韓愈、柳宗元、王安石、蘇洵、蘇軾、蘇轍、曾鞏合稱“唐宋八大家”。后人又將其與韓愈、柳宗元和蘇軾合稱“千古文章四大家”。關(guān)于“醉翁”與“六一居士”：初謫滁山，自號(hào)醉翁。既老而衰且病，將退休于潁水之上，則又更號(hào)六一居士?？陀袉栐唬骸傲缓沃^也？”居士曰：“吾家藏書一萬卷，集錄三代以來金石遺文一千卷，有琴一張，有棋一局，而常置酒一壺?！笨驮唬骸笆菫槲逡粻?，奈何？”居士曰：“以吾一翁，老于此五物之間，豈不為六一乎？”寫作背景：宋仁宗慶歷五年(1045年)，參知政事范仲淹等人遭讒離職，歐陽修上書替他們分辯，被貶到滁州做了兩年知州。到任以后，他內(nèi)心抑郁

35、，但還能發(fā)揮“寬簡而不擾”的作風(fēng)，取得了某些政績。醉翁亭記就是在這個(gè)時(shí)期寫就的。目標(biāo)導(dǎo)學(xué)二：朗讀文章，通文順字1初讀文章，結(jié)合工具書梳理文章字詞。2朗讀文章，劃分文章節(jié)奏，標(biāo)出節(jié)奏劃分有疑難的語句。節(jié)奏劃分示例環(huán)滁/皆山也。其/西南諸峰，林壑/尤美，望之/蔚然而深秀者，瑯琊也。山行/六七里，漸聞/水聲潺潺，而瀉出于/兩峰之間者，釀泉也。峰回/路轉(zhuǎn)，有亭/翼然臨于泉上者，醉翁亭也。作亭者/誰？山之僧/曰/智仙也。名之者/誰？太守/自謂也。太守與客來飲/于此，飲少/輒醉，而/年又最高，故/自號(hào)曰/醉翁也。醉翁之意/不在酒，在乎/山水之間也。山水之樂，得之心/而寓之酒也。節(jié)奏劃分思考“山行/六七里”

36、為什么不能劃分為“山/行六七里”？明確：“山行”意指“沿著山路走”，“山行”是個(gè)狀中短語，不能將其割裂。“望之/蔚然而深秀者”為什么不能劃分為“望之蔚然/而深秀者”？明確：“蔚然而深秀”是兩個(gè)并列的詞，不宜割裂，“望之”是總起詞語，故應(yīng)從其后斷句?！窘虒W(xué)提示】引導(dǎo)學(xué)生在反復(fù)朗讀的過程中劃分朗讀節(jié)奏，在劃分節(jié)奏的過程中感知文意。對(duì)于部分結(jié)構(gòu)復(fù)雜的句子，教師可做適當(dāng)?shù)闹v解引導(dǎo)。目標(biāo)導(dǎo)學(xué)三：結(jié)合注釋，翻譯訓(xùn)練1學(xué)生結(jié)合課下注釋和工具書自行疏通文義，并畫出不解之處?！窘虒W(xué)提示】節(jié)奏劃分與明確文意相輔相成，若能以節(jié)奏劃分引導(dǎo)學(xué)生明確文意最好；若學(xué)生理解有限，亦可在解讀文意后把握節(jié)奏劃分。2以四人小組為單

37、位，組內(nèi)互助解疑，并嘗試用“直譯”與“意譯”兩種方法譯讀文章。3教師選擇疑難句或值得翻譯的句子，請(qǐng)學(xué)生用兩種翻譯方法進(jìn)行翻譯。翻譯示例：若夫日出而林霏開，云歸而巖穴暝，晦明變化者，山間之朝暮也。野芳發(fā)而幽香，佳木秀而繁陰，風(fēng)霜高潔，水落而石出者，山間之四時(shí)也。直譯法：那太陽一出來，樹林里的霧氣散開，云霧聚攏，山谷就顯得昏暗了，朝則自暗而明，暮則自明而暗，或暗或明，變化不一，這是山間早晚的景色。野花開放，有一股清幽的香味，好的樹木枝葉繁茂，形成濃郁的綠蔭。天高氣爽，霜色潔白，泉水淺了，石底露出水面，這是山中四季的景色。意譯法：太陽升起，山林里霧氣開始消散，煙云聚攏，山谷又開始顯得昏暗，清晨自暗而

38、明，薄暮又自明而暗，如此暗明變化的，就是山中的朝暮。春天野花綻開并散發(fā)出陣陣幽香，夏日佳樹繁茂并形成一片濃蔭，秋天風(fēng)高氣爽，霜色潔白，冬日水枯而石底上露，如此，就是山中的四季?！窘虒W(xué)提示】翻譯有直譯與意譯兩種方式，直譯鍛煉學(xué)生用語的準(zhǔn)確性，但可能會(huì)降低譯文的美感；意譯可加強(qiáng)譯文的美感，培養(yǎng)學(xué)生的翻譯興趣，但可能會(huì)降低譯文的準(zhǔn)確性。因此，需兩種翻譯方式都做必要引導(dǎo)。全文直譯內(nèi)容見我的積累本。目標(biāo)導(dǎo)學(xué)四：解讀文段，把握文本內(nèi)容1賞析第一段，說說本文是如何引出“醉翁亭”的位置的，作者在此運(yùn)用了怎樣的藝術(shù)手法。明確：首先以“環(huán)滁皆山也”五字領(lǐng)起，將滁州的地理環(huán)境一筆勾出，點(diǎn)出醉翁亭坐落在群山之中，并縱

39、觀滁州全貌，鳥瞰群山環(huán)抱之景。接著作者將“鏡頭”全景移向局部，先寫“西南諸峰，林壑尤美”，醉翁亭坐落在有最美的林壑的西南諸峰之中，視野集中到最佳處。再寫瑯琊山“蔚然而深秀”，點(diǎn)山“秀”，照應(yīng)上文的“美”。又寫釀泉，其名字透出了泉與酒的關(guān)系，好泉釀好酒，好酒叫人醉?！白砦掏ぁ钡拿直惆抵型赋觯缓笠觥白砦掏ぁ眮?。作者利用空間變幻的手法，移步換景，由遠(yuǎn)及近，為我們描繪了一幅幅山水特寫。2第二段主要寫了什么？它和第一段有什么聯(lián)系？明確：第二段利用時(shí)間推移，抓住朝暮及四季特點(diǎn)，描繪了對(duì)比鮮明的晦明變化圖及四季風(fēng)光圖，寫出了其中的“樂亦無窮”。第二段是第一段“山水之樂”的具體化。3第三段同樣是寫“樂”，但卻是寫的游人之樂，作者是如何寫游人之樂的？明確：“滁人游”，前呼后應(yīng)，扶老攜幼，自由自在，熱鬧非凡；“太守宴”，溪深魚肥，泉香酒洌，美味佳肴，應(yīng)有盡有；“眾賓歡”，投壺下棋，觥籌交錯(cuò)，說說笑笑，無拘無束。如此