島津液相色譜維護(hù)課件

1、島津液相色譜維護(hù)培訓(xùn)島津國際貿(mào)易（上海）有限公司第一部分 液相色譜故障排除經(jīng)驗(yàn) 液相色譜常見問題LC 10AvpLC-20A Prominence液相色譜簡(jiǎn)易流程圖輸液泵進(jìn)樣器 色譜柱柱溫箱檢測(cè)器溶劑數(shù)據(jù)處理1.（簡(jiǎn)單）等度系統(tǒng)儲(chǔ)液瓶脫氣機(jī)泵單元手動(dòng)進(jìn)樣器色譜柱檢測(cè)器廢液瓶1234567儲(chǔ)液瓶脫氣機(jī)泵單元自動(dòng)進(jìn)樣器色譜柱檢測(cè)器廢液瓶低壓梯度單元混合器2.低壓梯度系統(tǒng)123456789儲(chǔ)液瓶脫氣機(jī)泵單元自動(dòng)進(jìn)樣器色譜柱檢測(cè)器廢液瓶混合器3.高壓梯度系統(tǒng)12345678液相色譜故障排除經(jīng)驗(yàn)故障的確定 至少要重復(fù)出現(xiàn)兩次以上初步判斷故障引起的原因 方法或硬件由經(jīng)驗(yàn)或平時(shí)的積累確定故障原因 平時(shí)做好觀

2、察和記錄當(dāng)不能確認(rèn)故障原因時(shí) 采用排除法逐一考察可能引起故障的因素確定故障能否自行處理 不要貿(mào)然拆卸不熟悉的部件常見故障因素儀器環(huán)境： 實(shí)驗(yàn)室的溫度、濕度、酸度等 實(shí)驗(yàn)室震動(dòng)、灰塵等問題 電源及地線問題使用條件： 流動(dòng)相（pH值、均勻度、氣泡等） 樣品（樣品分解、氧化、樣品溶劑等） 色譜柱（污染、堵塞、塌陷等）硬件問題： 輸液泵 進(jìn)樣器 檢測(cè)器平常保養(yǎng)-做好平常的保養(yǎng)可以有效的降低故障的發(fā)生率-做好平常的保養(yǎng)可以延長(zhǎng)儀器的使用壽命常做的保養(yǎng) 保持儀器的環(huán)境（經(jīng)常清潔儀器，尤其是灰塵） 泵的保養(yǎng)（使用緩沖鹽時(shí)要清洗柱塞，水和鹽不長(zhǎng)期保存在泵里） 進(jìn)樣器要經(jīng)常清洗，避免污染物吸附或堵塞管路 盡量進(jìn)

3、行樣品前處理 色譜柱要定期清洗，保證柱效及使用壽命 系統(tǒng)中不要長(zhǎng)期保存水和鹽，長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)應(yīng)將儀器所有部分全部更換為70以上的甲醇，避免細(xì)菌的滋生及鹽的析出。液相色譜常見問題 壓力異常（偏高、波動(dòng)） 漏液 保留時(shí)間漂移 基線問題（漂移、噪聲） 峰形異常壓力 壓力是液相色譜中最重要的指標(biāo)，要經(jīng)常關(guān)注壓力的變化。 保留時(shí)間的變化經(jīng)常是由于壓力問題引起的。 不同溶劑即使在相同流速和溫度的情況下壓力也是不同的。 記下儀器正常狀態(tài)時(shí)，在一定條件下（流速、溫度）的壓力顯示值。壓力高時(shí)首先要確認(rèn)是色譜柱堵塞還是系統(tǒng)堵塞色譜柱堵時(shí)：確認(rèn)可能造成堵塞的樣品的性質(zhì)，相應(yīng)選擇合適的清洗溶劑。系統(tǒng)堵塞，首先應(yīng)確認(rèn)是那

4、一部份堵塞，依據(jù)情況排除。容易發(fā)生堵塞的部件 保護(hù)柱及色譜柱 線路過濾器 管路連接處 進(jìn)樣器 檢測(cè)器流通池壓力低如果壓力為零： 泵頭中沒有液體，而是充滿了氣泡 單向閥完全堵死 柱塞桿折斷 壓力傳感器損壞(流動(dòng)相流動(dòng)正常，但無壓力)如果有壓力但是壓力比正常時(shí)低： 漏液 單向閥堵塞壓力波動(dòng)壓力在短時(shí)間內(nèi)劇烈波動(dòng)。 泵頭中有氣泡 單向閥臟 柱塞密封圈漏液經(jīng)常漏液的部件泵： 柱塞密封圈 排液閥手動(dòng)進(jìn)樣器：轉(zhuǎn)子密封圈磨損檢測(cè)器： 流通池窗口（墊片損壞、透鏡破碎）接頭處漏液：（接頭松動(dòng)，接頭臟，接頭磨損， 部件不匹配） 保留時(shí)間不穩(wěn)定吸濾頭臟泵輸液不正常（壓力波動(dòng)、氣泡等）流動(dòng)相組分變化流動(dòng)相緩沖能力不夠

5、色譜柱平衡時(shí)間不夠柱溫的變化柱子問題噪音大流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成有地方漏液流動(dòng)相、泵、檢測(cè)器流通池內(nèi)有氣泡流動(dòng)相各溶劑不相溶或混和不均勻檢測(cè)池能量不足流通池被污染溫度影響（檢測(cè)器和柱溫差別太大）其他電子設(shè)備的影響基線漂移流動(dòng)相污染，變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成流動(dòng)相不均勻(脫氣，使用純度更高的溶劑)溫度波動(dòng)柱子平衡時(shí)間不夠流通池被污染或有氣泡流通池窗口破裂峰形問題死體積太大柱子被污染或堵塞色譜柱塌陷色譜柱化學(xué)或次級(jí)保留（硅羥基效應(yīng)）色譜柱被重金屬污染流動(dòng)相緩沖不足或不合適樣品溶劑選擇不當(dāng)，與流動(dòng)相之間極性差異太大樣品過載（濃度或體積）柱溫過低鬼峰流動(dòng)相被污染進(jìn)樣閥殘余峰樣品中未知物色譜柱中

6、的污染物第二部分 日常使用注意點(diǎn) 硬件基礎(chǔ)知識(shí) 容易出故障的部件及常見故障的排除 液相系統(tǒng)維護(hù)流程圖吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過濾器手動(dòng)進(jìn)樣器檢測(cè)器色譜柱一、輸液部分管線選擇材料 不銹鋼 Teflon PEEK (聚醚醚酮)尺寸 0.1 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.3 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.5 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.8 mmI.D. x 1.6 mmO.D.管線材料不銹鋼 (可用于所有連接)能承受幾千 kgf/cm2 壓力酸性或高濃度鹽環(huán)境中易腐蝕 (尤其在pH小于2時(shí))PEEK (可用于所有連接)能承受高達(dá) 250 kgf/cm2壓

7、力可在整個(gè)PH范圍(pH 1-14)內(nèi)使用 不適用于高溶解性溶劑如氯仿等Teflon (用于柱后阻尼管、反應(yīng)管和排液管)化學(xué)惰性大能承受 5 kgf/cm2 壓力接頭不銹鋼接頭 / 墊圈 主要用于輸液泵、進(jìn)樣器的連接能承受 400 kgf/cm2壓力一旦固定，墊圈不可再動(dòng)PEEK接頭 主要用于色譜柱、檢測(cè)器的連接易于安裝能承受 250 kgf/cm2壓力容易產(chǎn)生死體積不銹鋼接頭墊圈PEEK接頭死體積死體積可能會(huì)引起分離度變差和重現(xiàn)性變差等問題.管線公螺母死體積好的連接差的連接選擇原則采用 “HPLC” 級(jí)溶劑避免使用會(huì)引起柱效損失或保留特性變化的溶劑對(duì)試樣有適宜的溶解度溶劑粘度要小與檢測(cè)器相匹

8、配流動(dòng)相溶劑的等級(jí)HPLC級(jí)優(yōu)級(jí)純分析純都經(jīng)過蒸餾和0.45u的過濾(除纖維毛,未溶解的機(jī)械顆粒）優(yōu)級(jí)純的純度比分析純大,但里面含有防腐劑和抗氧化劑HPLC級(jí)經(jīng)過0.2u的過濾,且除去有紫外吸收的雜質(zhì)微量分析、梯度洗脫流動(dòng)相水 / 甲醇梯度ODS 柱鬼峰Gradient Curve1ml/min, 0-100% MeOH over 10 mins and hold for15 mins.鬼峰的出現(xiàn)流動(dòng)相水的等級(jí)純化水蒸餾水去離子水波長(zhǎng) (nm)純化水去離子水因?yàn)椴患兾锏拇嬖?，去離子的吸光率較高純化水中去除了無機(jī)和有機(jī)的污染物吸光率流動(dòng)相選擇緩沖液的步驟 1 .確定最佳分離狀態(tài)時(shí)的流動(dòng)相pH 2

9、 .選擇具有與流動(dòng)相的pH相近的pKa 的緩沖液（即使?jié)舛认∫簿哂休^強(qiáng)能力的緩沖液） 3 .確認(rèn)檢測(cè)波長(zhǎng)下緩沖液是否有大的吸收 （在波長(zhǎng)210nm附近進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，不能用醋酸和 檸檬酸的緩沖液）流動(dòng)相代表性弱酸的pKa pK1 pK2pK3醋酸4.87檸檬酸3.134.766.40磷酸2.167.2112.32流動(dòng)相緩沖液的使用 使用前必須過濾 使用后一定要對(duì)柱子進(jìn)行清洗 ，以免造成腐蝕、磨損及阻塞:首先用510的甲醇水溶液沖洗10-30min（0.5-1ml/min），再用甲醇沖洗30min(0.1-0.5ml/min) 易受到細(xì)菌和霉菌的影響 注意沖洗次序，不能直接用有機(jī)溶劑沖洗流動(dòng)相流動(dòng)相

10、的更換不互溶的流動(dòng)相不能直接更換緩沖鹽不能直接用有機(jī)溶劑更換水正己烷異丙醇緩沖鹽有機(jī)溶劑水過濾：0.45um或更小孔徑濾膜 目的：除去溶劑中的微小物理顆粒，避免堵塞色譜柱，尤其是在使用無機(jī)鹽配制的緩沖液的時(shí)候必須過濾脫氣：除去在流動(dòng)相中溶解或彼此混合而產(chǎn)生的氣泡 氣泡對(duì)測(cè)定的影響： 1）泵中氣泡使液流波動(dòng)，改變保留時(shí)間和峰面積 2）柱中氣泡使流動(dòng)相繞流，峰變形 3）檢測(cè)器中的氣泡產(chǎn)生基線波動(dòng) 無在線脫氣應(yīng)注意： 1）每天脫氣 2）如使用氦脫氣，對(duì)混合溶劑脫氣時(shí)間不能過長(zhǎng)溶劑前處理流動(dòng)相處理LC-20A 日常維護(hù) 輸液泵LC-20AD并聯(lián)雙微柱塞方式高性能輸液泵LC-20AT串聯(lián)雙柱塞輸液泵 L

11、C-20AB并聯(lián)雙微柱塞高壓梯度輸液泵 送液?jiǎn)卧?xiàng)目頻率備注檢查或更換LINE FILTER6 MonthsWater 1ml/min，0.3Mpa檢查或更換PLUNGER&SEAL1 Year檢查或更換Check Valve1 Year檢查或更換Diaphragm/Flow line seal2 YearsBearing 加潤(rùn)滑脂3 Years清洗方法：異丙醇超聲5min。LC-20A 日常維護(hù) 輸液泵LC-20AD/ABLC-20A 日常維護(hù) 輸液泵LC-20ATLC-20AT吸濾頭吸濾頭部件號(hào)：228-45707-91吸濾頭部件號(hào)： 228-21984-01吸濾頭材料：不銹鋼燒結(jié)(或陶瓷

12、），孔徑10um故障：堵塞表現(xiàn)：管路中不斷有氣泡生成措施：用異丙醇（或5稀硝酸），超聲波清洗，再用蒸餾水清洗泵工作示意圖 凸輪柱塞桿柱塞密封圈單向閥 泵頭流動(dòng)相入口流動(dòng)相出口單向閥T泵：串聯(lián)式往復(fù)泵D泵：并聯(lián)式往復(fù)泵LC-20ATLC-20ATLC-20AD單向閥單向閥結(jié)構(gòu)球座吸液沖程排液沖程出口單向閥進(jìn)口單向閥泵頭拋光面寶石球流動(dòng)相單向閥工作原理單向閥結(jié)構(gòu)請(qǐng)不要分解閥心A和閥心B重新組裝后性能不被保證，輸液可能不穩(wěn)定注意：LC20AT主入口閥部件號(hào):228-45704-92LC20AD入口閥LC20AT副入口閥部件號(hào): 228-45704-91LC20AD出口閥部件號(hào): 228-45705-

13、91單向閥LC10ADvp出口閥LC10ATvp出口閥部件號(hào): 228-34976-91LC10ADvp入口閥部件號(hào): 228-39093-92LC10ATvp入口閥部件號(hào): 228-32166-91單向閥清洗故障：寶石球或球座受污導(dǎo)致密封不好表現(xiàn)：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大措施：打開排液閥，以異丙醇為流動(dòng)相輸液拆下單向閥，放入異丙醇中，超聲波清洗注意：超聲清洗時(shí)開口端向上放置。View故障：寶石球粘附于墊片表現(xiàn)：泵無法吸液或排液，流路不通措施：1）用針筒抽出口單向閥以產(chǎn)生負(fù)壓，使寶石球 與墊片分開 2）拆下單向閥，放入異丙醇或水中，用超聲波清洗單向閥清洗View柱塞密封圈 柱塞密封圈LC-20ADLC-

14、20ABLC-10ADvp 部件號(hào)228-35146柱塞密封圈LC-20ATLC-10ATvp部件號(hào)：228-35145取下和安裝柱塞密封圈工具柱塞密封圈的更換故障：密封圈磨損導(dǎo)致密封不良現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大或漏液措施：更換密封圈注意點(diǎn)： 拆卸泵頭前，柱塞桿復(fù)位 （PSET）流動(dòng)相泵頭清洗管路柱塞桿密封圈View柱塞桿柱塞桿LC-10ADvp用部件號(hào)：228-35281-91柱塞桿LC-10ATvp用部件號(hào)：228-35009-92柱塞桿LC-20AD/LC-20AB用部件號(hào)：228-35281-95柱塞桿LC-20AT用部件號(hào)：228-35009-93柱塞桿更換更換柱塞密封圈后仍然漏液時(shí)；柱

15、塞密封圈使用壽命短時(shí)；柱塞桿損傷時(shí)，應(yīng)更換柱塞桿。柱塞隔膜更換柱塞時(shí)，應(yīng)同時(shí)更換隔膜。隔膜損壞導(dǎo)致泵頭后部漏液時(shí)，應(yīng)更換隔膜。注意：只有D系列泵有隔膜， T系列泵由于設(shè)計(jì)不同，沒有隔膜。隔膜LC-20AD/LC-20AB/LC-10ADvp用部件號(hào)：228-32784-91View線路過濾器故障：堵塞現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力偏高措施：異丙醇（或5稀硝酸）， 超聲波清洗判斷依據(jù)：關(guān)閉排液閥，斷開出口管路，設(shè)定流速1mL/min，如壓力5kgf/cm2，則堵塞。排液閥壓力傳感器線路過濾器流動(dòng)相線路過濾器部件號(hào)：228-32744過濾器的更換舊過濾器的取出新過濾器的安裝排液閥漏液 故障：排液閥墊圈損傷或密封不

16、良現(xiàn)象：打開排液閥進(jìn)行排氣時(shí)，從裝有排液閥的螺口處漏液措施：排液閥手柄按逆時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)取下， 確認(rèn)墊圈表面有否損傷。 有損傷，進(jìn)行更換； 附有臟物，擦洗掉，再確認(rèn)。LC-20A系列泵部件號(hào)：228-45574-91LC-10Avp系列泵部件號(hào)：670-11518排液閥混合器混合器不同體積的連接方法輸液泵進(jìn)樣器色譜柱柱溫箱檢測(cè)器單一或混合溶劑等度洗脫梯度洗脫裝置：高壓梯度：用兩臺(tái)高壓輸液泵將兩種溶劑輸入低壓梯度：在常壓下將兩種溶劑（或多元溶劑）混合，然后用高壓輸液泵將流動(dòng)相輸入到色譜柱中。HPGE梯度混合器低壓梯度比例閥LPGE高壓常壓高壓/低壓梯度系統(tǒng)分析時(shí)間長(zhǎng)分離度差 MeOH / H2O

17、= 6 / 4MeOH / H2O = 8 / 2( column : ODS )使用梯度洗脫的原因當(dāng)?shù)榷认疵摃r(shí)：95%30%甲醇 濃度在最短時(shí)間內(nèi)獲得最佳的分離使用梯度洗脫的原因當(dāng)采用梯度洗脫時(shí)：梯度洗脫形式：線性梯度：在梯度洗脫時(shí)，流動(dòng)相強(qiáng)度的變化和時(shí)間成線性比例指數(shù)梯度：在梯度洗脫時(shí)，流動(dòng)相強(qiáng)度隨時(shí)間的變化呈指數(shù)關(guān)系折線梯度：梯度洗脫方式梯度洗脫形式的選擇梯度洗脫：優(yōu)點(diǎn)：可提高分離度、縮短分離時(shí)間、降低最小檢測(cè)量和提高分離精度注意事項(xiàng)：溶劑的純度要高，否則梯度洗脫的重現(xiàn)性差梯度混合的溶劑互溶性要好梯度洗脫應(yīng)使用對(duì)流動(dòng)相組成變化不敏感的選擇性檢測(cè)器（如 紫外吸收檢測(cè)器或熒光檢測(cè)器），而不能

18、使用對(duì)流動(dòng)相組成變 化敏感的通用型檢測(cè)器（如示差折光檢測(cè)器）查看空白實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)遵守分析周期。（最初的分析數(shù)據(jù)不采用）梯度洗脫要點(diǎn)1. 使用流動(dòng)相溶解樣品 - 減少溶劑峰，尤其是組分峰靠近溶劑峰時(shí)由為重要 - 保證樣品在流動(dòng)相中的溶解度，避免樣品在系統(tǒng)中尤其在柱中產(chǎn)生沉淀 2. 進(jìn)樣前最好使用0.45um 的膜進(jìn)行過濾 如果樣品很臟，要使用0.2um的膜進(jìn)行過濾3. 對(duì)于含有復(fù)雜基質(zhì)的樣品，最好過前處理小柱后再進(jìn)樣。樣品前處理混合器過濾組件常見故障：堵塞 混合器堵塞往往是由于混合器過濾組件堵塞引起的。處理方法： 按圖中結(jié)構(gòu)卸下過濾組件，5%稀硝酸或其他溶劑超生清洗或更換新的組件標(biāo)準(zhǔn)或半微量混合器

19、用部件號(hào)：228-18872-93二、進(jìn)樣部分進(jìn)樣器自動(dòng)進(jìn)樣器手動(dòng)進(jìn)樣器(7725/7725i） 原理：（六通閥） 注入方式： 1）全量注入 2）部分注入7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥 手動(dòng)進(jìn)樣器的原理圖7725/7725i手動(dòng)進(jìn)樣器結(jié)構(gòu)圖定子密封部件號(hào)：228-32211-31轉(zhuǎn)子密封(Vespel)部件號(hào)：670-12098-51(Tefzel)部件號(hào)：670-12098-56轉(zhuǎn)子密封適用范圍進(jìn)樣量和檢測(cè)器響應(yīng)的關(guān)系示意圖進(jìn) 樣 量 定量環(huán)體積一半三倍定量環(huán)體積全量注入部分注入響應(yīng)值交叉污染的原因微量注射器 紅色表示殘留樣品進(jìn)樣口清洗（1）將附件進(jìn)樣口清洗器安在注射器上。（2）清洗液（試樣溶劑或不含

20、鹽的流動(dòng)相 等）用注射器吸入（3）在進(jìn)樣狀態(tài)下，將針孔清洗器壓接在 針導(dǎo)管上，流入清洗液1ml左右（4）使用緩沖鹽后，用水清洗流路和針孔（5）不應(yīng)用微型注射器清洗（6）清洗液可能反噴，因此注射器應(yīng)慢慢 地推壓進(jìn)樣口清洗器手柄組件針導(dǎo)管針管 手動(dòng)進(jìn)樣器定子轉(zhuǎn)子針頭密封墊彈簧不銹鋼套操作注意點(diǎn)：1）進(jìn)樣時(shí)，進(jìn)樣針應(yīng)插到底2）不使用時(shí)將針頭留在進(jìn)樣器內(nèi)3）進(jìn)樣應(yīng)使用液相色譜專用平頭進(jìn)樣針4）樣品溶液pH小于10, 常用密封墊的Vespel材質(zhì)，適用pH10, 否則換Tefzel或PEEK材質(zhì)的密封墊pH 0-145）清洗應(yīng)使用專用針口清洗器故障處理漏液 如果液體從定子和定子環(huán)之間流出、或從針孔流出，

21、或從排液口流出，上緊壓力調(diào)整螺釘，如果不成功更換轉(zhuǎn)子或定子面組件針密封漏液 針的外徑由于有偏差，在使用比針外徑小的注射器時(shí)，進(jìn)樣口不能嚴(yán)實(shí)密封，產(chǎn)生漏液，使進(jìn)樣量不準(zhǔn)。 從進(jìn)樣口取出針，用鉛筆的橡皮頭將針導(dǎo)管壓入，針密封上承受壓力使孔變小達(dá)到嚴(yán)實(shí)密封。三、分離部分色譜柱的日常保養(yǎng)購買新柱后一定要仔細(xì)閱讀說明書，確認(rèn)柱的使用條件以及清洗再生步驟，按照說明書條件測(cè)試色譜柱柱效，記錄使用壓力定期檢測(cè)柱壓和柱效不同流動(dòng)相之間轉(zhuǎn)換時(shí)應(yīng)注意溶劑的互溶性確認(rèn)樣品不會(huì)在流動(dòng)相中析出或帶有固體不溶物，請(qǐng)使用0.45um或0.2um的一次性濾膜過濾樣品，或者進(jìn)行前處理。為了延長(zhǎng)色譜柱使用壽命，請(qǐng)使用保護(hù)柱。定期用

22、合適的溶劑清洗或再生色譜柱長(zhǎng)期不用時(shí)，清洗干凈后，使用柱子說明書中指明的溶劑保存。柱子要從儀器上卸下并用堵頭密封后保存。定期用合適的流動(dòng)相清洗保存的柱子，避免干涸。峰的變形根部變寬有肩或分叉峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因1. 柱子劣化 （進(jìn)口處產(chǎn)生不均勻的空隙）2. 樣品劣化 （生成氧化物、分解物等）判斷標(biāo)準(zhǔn) 所有的峰都產(chǎn)生有肩峰或分叉時(shí)則為柱子劣化色譜柱柱效降低原因?yàn)V片或填料堵塞樣品或流動(dòng)相中雜質(zhì)吸附機(jī)械振動(dòng)產(chǎn)生空隙填料變性濾片或填料堵塞使用預(yù)柱緩沖液和溶劑使用0.45um濾膜過濾樣品溶液使用0.45um濾膜過濾反向連接色譜柱，使用清洗溶劑以小流量送液打開柱頭，清洗或更換濾片樣品或流動(dòng)相中雜質(zhì)吸附雜

23、質(zhì)會(huì)產(chǎn)生拖尾峰使用高溶解性溶劑清洗色譜柱僅幾毫米深度會(huì)被污染色譜柱取出污染填料，裝填新的填料機(jī)械振動(dòng)產(chǎn)生空隙不要撞擊色譜柱，如：色譜柱掉落或柱壓急劇變化 。8945612370 xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx000 0000 0LC-20AD :輸液時(shí)不要打開排液閥色譜柱類型色譜柱的類型及適用范圍硅膠基底聚合物基底pH 范圍2 7.5寬范圍有機(jī)溶劑所有有限制壓力 200 kgf/cm2低壓溫度寬范圍60產(chǎn)生峰變形的原因柱進(jìn)口污染柱內(nèi)存在空隙 樣品過載溶解樣品的溶劑選擇不當(dāng)二次保留效應(yīng)擔(dān)體表面存在硅醇基擔(dān)體表面殘留重金屬溶解樣品的溶劑選擇不當(dāng)最好不要選擇

24、高溶解性的試劑作為溶解樣品的溶劑甲醇 作為溶劑20 uLCaffeine乙醇 作為溶劑20 uLCaffeine乙醇 作為溶劑10 uLCaffeine最好注入少量樣品柱溫箱分析結(jié)果重現(xiàn)性好提高柱效降低柱壓保證檢測(cè)穩(wěn)定性 常用檢測(cè)器紫外檢測(cè)器（包括二極管陣列檢測(cè)器）熒光檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器電導(dǎo)檢測(cè)器蒸發(fā)光散射檢測(cè)器質(zhì)譜檢測(cè)器原理：基于被分析組分對(duì)特定波長(zhǎng)紫外光的選擇性吸收定量基礎(chǔ)：朗伯比耳定律，AKCL優(yōu)點(diǎn)： 1）靈敏度高 2）對(duì)溫度和流速不敏感 3）可用于梯度洗提缺點(diǎn)：僅適用于測(cè)定有紫外吸收的物質(zhì)紫外檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器（SPD-M20A） -二十一世紀(jì)標(biāo)準(zhǔn)紫外檢測(cè)器色譜定

25、性依據(jù)： 保留時(shí)間 常規(guī)紫外檢測(cè)器 峰純度 二極管陣列檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器 樣品池二極管陣列光柵D2 / W 燈每一組分可在每一波長(zhǎng)處得到一吸光度值二極管陣列檢測(cè)器1）采集三維譜圖2）峰純度檢驗(yàn)3）光譜庫檢索4）可以發(fā)現(xiàn)單波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)未測(cè)到的峰二極管陣列檢測(cè)器的優(yōu)點(diǎn)原理：基于被分析組分發(fā)射的熒光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)： 1）靈敏度極高，是最靈敏的檢測(cè)器之一 2）選擇性好 3）對(duì)溫度和流速不敏感，可用于梯度洗脫缺點(diǎn)：僅適用于測(cè)定可產(chǎn)生熒光的物質(zhì)可檢測(cè)物質(zhì)：多環(huán)芳烴、霉菌毒素、酪氨酸、色氨酸、卟啉、兒茶酚氨等（具有對(duì)稱共軛體系） 熒光檢測(cè)器原理：連續(xù)測(cè)定流通池中溶液折射率來測(cè)定試樣中各組分濃度。優(yōu)點(diǎn)：通

26、用型檢測(cè)器，缺點(diǎn)：1）對(duì)溫度變化敏感2）對(duì)溶劑組成變化敏感，不能用于梯度檢測(cè)3）屬于中等靈敏度的檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器原理：根據(jù)物質(zhì)在某些介質(zhì)中電離后所產(chǎn)生的電導(dǎo)變化來測(cè)定電離物質(zhì)含量。廣泛應(yīng)用于離子色譜法優(yōu)點(diǎn)：對(duì)流動(dòng)相流速和壓力的改變不敏感，可用于梯度洗脫缺點(diǎn)：對(duì)溫度變化敏感（每升高1度，電導(dǎo)率增加2%-2.5%)用途：主要用于離子色譜檢測(cè)水溶性無機(jī)和有機(jī)離子電導(dǎo)檢測(cè)器原理: 色譜柱后流出物在通向檢測(cè)器途中，被高速氮?dú)鈬姵伸F狀液滴，溶質(zhì)形成不揮發(fā)的微小顆粒，被載氣帶到檢測(cè)系統(tǒng)。進(jìn)入散射室中，檢驗(yàn)散射光的強(qiáng)度。優(yōu)點(diǎn): 消除了溶劑干擾以及溫度變化帶來的基線漂移，可梯度洗脫，靈敏度高缺點(diǎn)：不能使用不揮發(fā)性性鹽做流動(dòng)相，如磷酸鹽。 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器質(zhì)譜檢測(cè)器強(qiáng)大的定性和選擇性能力多組份樣品的準(zhǔn)確定性； 未充分分離組份峰的鑒別；消除雜質(zhì)干擾；可作為便捷的定性分析用于合成和衍生反應(yīng)的研究；作NMR預(yù)分析的