藥物分析學(xué)課件：第十章 巴比妥類藥物的分析

1、第十章巴比妥類藥物的分析1巴比妥類藥物為臨床上廣泛應(yīng)用的鎮(zhèn)靜催眠藥易被濫用須監(jiān)測(cè)，臨床也多見(jiàn)搶救，需要快速鑒別分析2學(xué)習(xí)要求掌握熟悉 本類藥物鑒別實(shí)驗(yàn)及含量測(cè)定的常用方法 本類藥物的特殊雜質(zhì)及檢查方法 巴比妥類藥物 的結(jié)構(gòu)與主要理化性質(zhì) 鑒別實(shí)驗(yàn)及含量測(cè)定的原理了解本類藥物的體內(nèi)藥物分析方法2022/8/43第一節(jié) 巴比妥類藥物的分析巴比妥類藥物的分析四含量測(cè)定五體內(nèi)藥物分析三特殊雜質(zhì)檢查二鑒別實(shí)驗(yàn)一巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)4一、巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)巴比妥類藥物的基本結(jié)構(gòu)通式 (或S)55,5-取代的巴比妥類藥物 巴比妥苯巴比妥6司可巴比妥硫噴妥鈉7戊巴比妥異戊巴比妥89巴比妥類藥物通常為

2、白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點(diǎn)在空氣中穩(wěn)定，加熱多能升華該類藥物一般微溶或極微溶于水，易溶于乙醇等有機(jī)溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而難溶于有機(jī)溶劑。六元環(huán)結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定，遇酸、氧化劑、還原劑時(shí)，一般情況下環(huán)不會(huì)破裂，但與堿液共沸時(shí)則水解開(kāi)環(huán)，并產(chǎn)生氨氣巴比妥類藥物的主要理化性質(zhì)10結(jié)構(gòu) 理化性質(zhì)鑒別、檢查、含量測(cè)定苯環(huán)，硝化反應(yīng)111.弱酸性 巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中都有1,3-二酰亞胺基團(tuán)，能發(fā)生酮式和烯醇式的互變異構(gòu)，在水溶液中可以發(fā)生二級(jí)電離。123酮式烯醇式互變12由于本類藥物具有弱酸性(pKa7.3-8.4)，故可與強(qiáng)堿反應(yīng)生成水溶性的鹽類，一般為鈉鹽1.弱酸性132.水解反應(yīng)-鑒別異

3、戊巴比妥和巴比妥巴比妥類藥物的分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺結(jié)構(gòu)，與堿液共沸即水解，釋放出氨氣，可使紅色石蕊試紙變藍(lán)。示例1 JP15巴比妥的鑒別：取巴比妥0.2g，加氫氧化鈉試液10ml，加熱煮沸，則產(chǎn)生具氨臭的氣體，可使紅色石蕊試紙變藍(lán)。水解速度與溫度和pH值有關(guān)，溫度升高，或pH增高，水解加速。為增加注射劑的穩(wěn)定性，一般制成粉針劑。14本類藥物的鈉鹽，在吸濕的情況下也能發(fā)生水解。一般情況下，在室溫和pH10以下水解較慢；pH11以上隨著堿度的增加水解速度加快。2.水解反應(yīng)-鑒別異戊巴比妥和巴比妥153.與金屬離子的反應(yīng)巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有丙二酰脲(-CONHCONHCO-)或酰亞胺基團(tuán)，在合

4、適pH的溶液中，可與某些重金屬離子，如Ag+、Cu2+、Co2+、Hg2+等反應(yīng)呈色或產(chǎn)生有色沉淀與銀鹽的反應(yīng)與銅鹽的反應(yīng)與鈷鹽的反應(yīng)與汞鹽的反應(yīng)(4)(1)(2)(3)16(1)與銀鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基團(tuán)，在碳酸鈉溶液中，生成鈉鹽而溶解，再與硝酸銀溶液反應(yīng)，首先生成可溶性的一銀鹽，加入過(guò)量的硝酸銀溶液，則生成難溶性的二銀鹽白色沉淀。應(yīng)用：鑒別（一般鑒別試驗(yàn)）丙二酰脲類（ChP）含量測(cè)定 化學(xué)計(jì)量關(guān)系 11(出現(xiàn)混濁)可溶性的一銀鹽難溶性的二銀鹽白色沉淀17(1)與銀鹽的反應(yīng)-用于鑒別18(1)與銀鹽的反應(yīng)-用于含量測(cè)定19(2)與銅鹽的反應(yīng) 巴比妥類藥物在吡啶溶液中生成

5、的烯醇式異構(gòu)體與銅吡啶試液反應(yīng)，形成穩(wěn)定的配位化合物，產(chǎn)生類似雙縮脲的呈色反應(yīng)20巴比妥類藥物呈紫堇色或生成紫色沉淀在pH較高的溶液中，5,5-二取代基不同的巴比妥類藥物與銅鹽生成的紫色化合物在氯仿中的溶解度不同5,5-二取代基的親脂性越強(qiáng)，與銅鹽生成的紫色化合物越容易溶于氯仿中含硫巴比妥類藥物則呈現(xiàn)綠色沉淀此反應(yīng)可用于本類藥物的鑒別，也可以用來(lái)區(qū)別巴比妥類和硫代巴比妥類藥物。(2)與銅鹽的反應(yīng)21(2)與銅鹽的反應(yīng)2022/8/422(3)與鈷鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物在堿性溶液中可與鈷鹽反應(yīng)，生成紫堇色配位化合物注意事項(xiàng)： a. 溶劑：無(wú)水乙(甲)醇無(wú)水條件靈敏，生成的有色產(chǎn)物較穩(wěn)定b. 堿：以

6、有機(jī)堿為好異丙胺 c. 鈷鹽：醋酸鈷、硝酸鈷或氧化鈷23(4)與汞鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物與硝酸汞或氯化汞溶液反應(yīng)，可生成白色汞鹽沉淀，此沉淀能在氨試液中溶解24與金屬離子的反應(yīng)254.與香草醛的反應(yīng)巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中，丙二酰脲基團(tuán)中的氫比較活潑，可與香草醛在濃硫酸存在下發(fā)生縮合反應(yīng)，生成棕紅色產(chǎn)物示例2 BP2009戊巴比妥的鑒別：取戊巴比妥10mg，加香草醛10mg，再加硫酸2ml，混合后，水浴加熱2min，顯棕紅色。放冷，小心加入乙醇5ml，顏色先變?yōu)樽仙?，再變?yōu)樗{(lán)色。加入乙醇后：26巴比妥類藥物的紫外吸收光譜特征和其電離的程度有關(guān) 5,5-取代的巴比妥類藥物在pH=2的酸性溶液中，因不

7、電離，幾乎無(wú)明顯的紫外吸收在pH=10的堿性溶液中，發(fā)生一級(jí)電離于240 nm處有最大吸收在pH=13的強(qiáng)堿性溶液中，發(fā)生二級(jí)電離，最大吸收紅移至255 nm處。1,5,5-取代的巴比妥類藥物,不發(fā)生二級(jí)電離，于240 nm處有最大吸收硫代巴比妥類藥物在酸性或堿性溶液中，均有較明顯的紫外吸收。 5.紫外吸收光譜特征一級(jí)電離二級(jí)電離2022/8/4275.紫外吸收光譜特征A.0.05mol/LH2SO4溶液(未電離); B.pH9.9緩沖溶液(一級(jí)電離); C.0.1mol/LNaOH溶液(二級(jí)電離) 巴比妥類藥物的紫外吸收光譜(2.5 mg/100ml)AABABC28硫噴妥的紫外吸收光譜-:

8、0.1mol/L HCl溶液;:0.1mol/L NaOH溶液5.紫外吸收光譜特征296. 薄層色譜行為特征對(duì)照品對(duì)照鑒別示例3 BP2010中苯巴比妥的TLC鑒別：取苯巴比妥供試品和對(duì)照品各適量，分別加乙醇制成每1ml中約含1mg的溶液作為供試品和對(duì)照品溶液，各量取10l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以氯仿-乙醇-濃氨水(80:15:5)混合液的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，晾干，立即于254nm紫外光下檢測(cè)。供試品溶液的主斑點(diǎn)位置和大小與對(duì)照品溶液的均一致。307. 顯微結(jié)晶巴比妥類藥物可根據(jù)其本身或與某種試劑的反應(yīng)產(chǎn)物的特殊晶型，進(jìn)行同類或不同類藥物的鑒別本身晶型：巴比妥長(zhǎng)方形結(jié)晶

9、苯巴比妥-球星-花瓣?duì)罱Y(jié)晶反應(yīng)產(chǎn)物晶型：巴比妥+銅-吡啶-十字形紫色結(jié)晶 苯巴比妥+銅-吡啶-不規(guī)則或菱形淺紫色結(jié)晶 其他巴比妥+銅-吡啶-不形成結(jié)晶，可區(qū)別。巴比妥與苯巴比妥的顯微結(jié)晶示意圖A.巴比妥結(jié)晶； B.苯巴比妥結(jié)晶巴比妥銅吡啶結(jié)晶示意圖31巴比妥類藥物主要理化性質(zhì)總結(jié)32練習(xí)巴比妥類藥物是弱酸類藥物的原因是（ ）A 在水中不溶解B 在有機(jī)溶劑中溶解C 有一定熔點(diǎn)D 在水中發(fā)生二級(jí)電離E 遇氧化劑或還原劑環(huán)狀結(jié)構(gòu)不會(huì)破裂D33練習(xí)巴比妥類藥物在下列哪種溶液中能產(chǎn)生明顯的紫外吸收（ ）A酸性 B中性 C堿性 D吡啶C34練習(xí)不屬于巴比妥類藥物性質(zhì)的是（ ）A可形成二銀鹽白色沉淀 B具紫

10、外特征吸收 C具有氧化性 D在堿溶液中加熱水解C35二、鑒別試驗(yàn)(一)丙二酰脲反應(yīng)巴比妥類藥物母核的反應(yīng)銀鹽反應(yīng)銅鹽反應(yīng)36(一)丙二酰脲反應(yīng)37(二)特征基團(tuán)反應(yīng)S元素反應(yīng)不飽和基團(tuán)反應(yīng)芳環(huán)取代基反應(yīng)硝化反應(yīng)硫酸|亞硝酸鈉甲醛|硫酸2022/8/438硫代巴比妥類分子中含有硫元素，可在氫氧化鈉溶液中與鉛離子反應(yīng)生成白色沉淀；加熱后，沉淀轉(zhuǎn)變?yōu)榱蚧U。本試驗(yàn)可供硫代巴比妥類與巴比妥類的區(qū)別。示例4 ChP中注射用硫噴妥鈉的鑒別：取本品約0.2g，加氫氧化鈉試液5ml與醋酸鉛試液2ml，生成白色沉淀；加熱后，沉淀變?yōu)楹谏?二)特征基團(tuán)反應(yīng)1.利用硫元素的鑒別試驗(yàn)白色沉淀黑色沉淀2022/8/4

11、392.利用不飽和取代基的鑒別試驗(yàn)含有不飽和取代基的巴比妥類藥物，因其分子結(jié)構(gòu)中含有丙烯基，分子中的不飽和鍵可與碘、溴或高錳酸鉀作用，發(fā)生加成反應(yīng)或氧化反應(yīng)，而使碘、溴或高錳酸鉀褪色(二)特征基團(tuán)反應(yīng)40(1)與碘試液的反應(yīng)(2)與高錳酸鉀的反應(yīng)2.利用不飽和取代基的鑒別試驗(yàn)(二)特征基團(tuán)反應(yīng)黃棕色褪去紫色 棕色413.利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)含有芳香取代基的巴比妥類藥物，與硝酸鉀及硫酸共熱，可發(fā)生硝基化反應(yīng)，生成黃色硝基化合物(1)硝化反應(yīng)(二)特征基團(tuán)反應(yīng)黃色42苯巴比妥可與硫酸-亞硝酸鈉反應(yīng)，生成橙黃色產(chǎn)物，并隨即變?yōu)槌燃t色?？捎糜趨^(qū)別苯巴比妥和其他不含芳環(huán)取代基的巴比妥類藥物。(2)與

12、硫酸-亞硝酸鈉的反應(yīng)示例5 ChP中苯巴比妥的鑒別(1)：取本品約10mg，加硫酸2滴與亞硝酸鈉約5mg，混合，即顯橙黃色，隨即轉(zhuǎn)橙紅色。3.利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)(二)特征基團(tuán)反應(yīng)43苯巴比妥與甲醛-硫酸反應(yīng)，生成玫瑰紅色產(chǎn)物。巴比妥和其他無(wú)芳環(huán)取代的巴比妥類藥物無(wú)此反應(yīng)，可供區(qū)別（機(jī)理待確定）(3)與甲醛-硫酸的反應(yīng)示例6 ChP中苯巴比妥的鑒別(2)：取本品約50mg，置試管中，加甲醛試液1ml，加熱煮沸，冷卻，沿管壁緩緩加硫酸0.5ml，使成兩液層，置水浴中加熱，接界面顯玫瑰紅色。3.利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)(二)特征基團(tuán)反應(yīng)443.利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)(二)特征基團(tuán)反應(yīng)與硫酸-

13、亞硝酸鈉的反應(yīng)與甲醛-硫酸的反應(yīng)舉例：苯巴比妥45巴比妥類藥物本身可直接用藥典方法測(cè)定熔點(diǎn)；其鈉鹽可利用它易溶于水，酸化后析出相應(yīng)的游離巴比妥母體，將沉淀過(guò)濾干燥后，測(cè)定熔點(diǎn)；也可以將本類藥物制備成衍生物后，再測(cè)定衍生物的熔點(diǎn)。示例7 ChP中司可巴比妥鈉的熔點(diǎn)鑒別法：取本品約1g，加水100ml溶解后，加稀醋酸5ml強(qiáng)力攪拌，再加水200ml，加熱煮沸使溶解成澄清溶液(液面無(wú)油狀物)，放冷，靜置后析出結(jié)晶，濾過(guò)；結(jié)晶在70干燥后，熔點(diǎn)約為97。(三)特征熔點(diǎn)行為示例8 ChP中苯巴比妥鈉的熔點(diǎn)鑒別法：取本品約0.5g，加水5ml溶解后，加稍過(guò)量的稀鹽酸，即析出白色結(jié)晶性沉淀，濾過(guò)，沉淀用水洗

14、凈，在105干燥后，熔點(diǎn)應(yīng)為174-178。46(三)特征熔點(diǎn)行為47(四)吸收光譜特征比較樣品與對(duì)照品的紅外光譜圖是否一致48鑒別試驗(yàn)總結(jié)49練習(xí)下列鑒別反應(yīng)中，屬于丙二酰脲類反應(yīng) 的是（ ）A 甲醛-硫酸反應(yīng)B 硫色素反應(yīng)C 銅鹽反應(yīng)D 硫酸熒光反應(yīng)E 戊烯二醛反應(yīng)C50練習(xí)下列金屬鹽中，一般不用于巴比妥藥物鑒別的是（ ）A 銅鹽B 銀鹽C 汞鹽D 鈷鹽E 鋅鹽E51練習(xí)52練習(xí)B53練習(xí)ABCA54下列反應(yīng)中，用于苯巴比妥的鑒別的是（ ）A 硫酸反應(yīng)B 甲醛-硫酸反應(yīng)C與碘液的反應(yīng)D 二硝基氯苯反應(yīng)E 戊烯二醛反應(yīng)練習(xí)B55三、特殊雜質(zhì)檢查(一)苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的合成工藝5

15、6三、特殊雜質(zhì)檢查(一)苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查1. 酸度控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲量中間體（II） 乙基化不完全，會(huì)與脲素縮合生成苯基丙二酰脲 C-5活潑氫，酸性強(qiáng) 甲基橙顯紅色。甲基橙試液顯紅色572乙醇溶液的澄清度控制中間體I 雜質(zhì)的量 中間體I在乙醇中溶解度小注：巴比妥類藥物性質(zhì)（微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；鈉鹽易溶于水，不溶于有機(jī)溶劑）三、特殊雜質(zhì)檢查(一)苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查3. 中性或堿性物質(zhì) 主要是中間體（I）的副產(chǎn)物：2苯基丁酰胺； 2苯基丁酰脲或分解產(chǎn)物該類物質(zhì)不溶于氫氧化鈉試液而溶于醚，而苯巴比妥相反檢查方法： 提取重量法。58三、特殊雜質(zhì)檢查(一)苯巴比妥的特殊

16、雜質(zhì)檢查3. 有關(guān)物質(zhì) HPLC法，主成分自身對(duì)照法。單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.5%，各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1.0%。乙醇溶液的澄清度控制中間體I 雜質(zhì)的量酸度控制中間體（II）副產(chǎn)物有關(guān)物質(zhì)控制未知雜質(zhì)的量中性或堿性物質(zhì) 控制中間體（I）的副產(chǎn)物59苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì)HPLC法酸度控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲在一定量供試品水溶液中，加入甲基橙指示劑不得顯紅色中性或堿性物質(zhì)控制雜質(zhì)中間體I的副產(chǎn)物2-苯基丁酰胺、2-苯基頂酰脲或分解產(chǎn)物雜質(zhì)不溶于氫氧化鈉試液但溶于乙醚，而苯巴比妥溶于氫氧化鈉試液乙醇溶液的澄清度控制中間體I雜質(zhì)的量利用雜質(zhì)在乙醇溶液中

17、溶解度小三、特殊雜質(zhì)檢查(一)苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查60(二)司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查司可巴比妥鈉的合成工藝三、特殊雜質(zhì)檢查61司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì)溶液的澄清度檢查水不溶性雜質(zhì)（新煮沸的水）中性或堿性物質(zhì)控制合成過(guò)程中的副產(chǎn)物，如酰脲、酰胺類物質(zhì)雜質(zhì)不溶于氫氧化鈉而溶于乙醚三、特殊雜質(zhì)檢查62三、特殊雜質(zhì)檢查總結(jié)63練習(xí)多選：苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查項(xiàng)目有（ ）A 酸度B 熾灼殘?jiān)麮 有關(guān)物質(zhì)D 中性或堿性物質(zhì)E 乙醇溶液的澄清度ACDE64四、含量測(cè)定(一)銀量法(二)溴量法(三)酸堿滴定法(四)紫外分光光度法(五)高效液相色譜法65四、含量測(cè)定(一)銀量法滴定劑：硝酸銀（1:

18、1反應(yīng)）溶劑：甲醇+3%無(wú)水碳酸鈉終點(diǎn)指示：電位法指示（Ag電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極）受溫度影響大，且二銀鹽有一定溶解度，使結(jié)果偏高藥典使用甲醇+3%無(wú)水碳酸鈉改善終點(diǎn)觀察2022/8/466四、含量測(cè)定(一)銀量法示例9 ChP2010中異戊巴比妥的銀量測(cè)定法：取本品約0.2g，精密稱定，加甲醇40ml使溶解，再加新鮮配制的3%無(wú)水碳酸鈉溶液15ml，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定，即得。每1ml硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3。注意事項(xiàng)：（1）無(wú)水碳酸鈉應(yīng)新鮮配制；（2）AgNO3滴定液應(yīng)新鮮配制；（3）銀電極使

19、用前應(yīng)進(jìn)行處理67(二)溴量法5位取代基中含有不飽和雙鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵可與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，可采用溴量法進(jìn)行含量測(cè)定可用于司可巴比妥鈉原料藥及其膠囊的測(cè)定四、含量測(cè)定68示例10 ChP中司可巴比妥鈉的溴量測(cè)定法：取本品約0.1g，精密稱定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加入溴滴定液(0.05mol/L)25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1min，在暗處?kù)o置15min后，注意微開(kāi)瓶塞，加入碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得。每1

20、ml溴滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于13.01mgC12H17N2NaO3。四、含量測(cè)定干擾與樣品反應(yīng)的溴與KI反應(yīng)的溴69(三)酸堿滴定法巴比妥類藥物呈弱酸性（pKa7.3-8.4） ，可作為一元酸以標(biāo)準(zhǔn)堿液直接滴定1. 在水-乙醇混合溶劑中的滴定溶劑：水-乙醇滴定劑：NaOH指示劑：麝香草酚酞異戊巴比妥鈉水醇溶解麝香草酚酞NaOH淡藍(lán)色此法終點(diǎn)判斷較困難四、含量測(cè)定70示例11 ChP中異戊巴比妥醇溶液的滴定測(cè)定法：取本品約0.5g，精密稱定，加乙醇20ml溶解后，加麝香草酚酞指示劑6滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得。每1ml氫氧化鈉滴定液

21、(0.1mol/L)相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3?？刹捎秒娢环ㄖ甘窘K點(diǎn)四、含量測(cè)定712. 在膠束水溶液中的滴定在有機(jī)表面活性劑的膠束水溶液進(jìn)行滴定，用指示劑或電位法指示終點(diǎn)；表面活性劑能改變巴比妥類藥物的離解平衡，使滴定終點(diǎn)變化明顯溶劑：表面活性劑（溴化十六烷基三甲基芐胺或氯化四癸基二甲基芐胺）水溶液滴定劑：NaOH滴定液指示劑：麝香草酚酞四、含量測(cè)定723. 在非水溶液中的滴定巴比妥類藥物在非水溶劑中的酸性增強(qiáng)，用堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定時(shí)，終點(diǎn)較為明顯溶劑：二甲基甲酰胺、甲醇、丙酮、氯仿、無(wú)水乙醇、苯、吡啶、甲醇-苯(15:85)、乙醇-氯仿(1:10)等滴定劑：甲醇鉀(鈉)的甲醇

22、或乙醇溶液、氫氧化四丁基胺的氯苯溶液等指示劑：麝香草酚藍(lán)，也可用玻璃-甘汞電極以電位法指示終點(diǎn)四、含量測(cè)定73(四)紫外分光光度法在酸性介質(zhì)中幾乎不電離，無(wú)明顯的紫外吸收在堿性介質(zhì)中電離為具有紫外吸收特征的結(jié)構(gòu)藥物max(nm)溶劑巴比妥240538pH9.4硼酸鹽緩沖液苯巴比妥253320NaOH液(0.1mol/L)戊巴比妥240310pH9.4硼酸鹽緩沖液異戊巴比妥238440pH9.4硼酸鹽緩沖液司可巴比妥240330pH9.4硼酸鹽緩沖液硫噴妥305930pH9.4硼酸鹽緩沖液四、含量測(cè)定741. 直接測(cè)定的紫外分光光度法將供試品溶解后，直接測(cè)定對(duì)照品溶液和供試品溶液的吸光度（max

23、處），再計(jì)算藥物的含量示例12 ChP注射用硫噴妥鈉的含量測(cè)定：取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量(約相當(dāng)于硫噴妥鈉0.25g)，置500 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取此溶液用0.4%氫氧化鈉溶液并定量稀釋制成每1ml中約含有5 g的溶液；另取硫噴妥鈉對(duì)照品，加0.4%氫氧化鈉溶液并定量稀釋制成每1ml中約含有5 g的溶液。照分光光度法，在304 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，根據(jù)每支的平均裝量計(jì)算。每1ml硫噴妥相當(dāng)于1.091mg的C11H17N2NaS。四、含量測(cè)定752. 提取分離后的紫外分光光度法巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機(jī)溶劑中易溶，而其鈉鹽在水中易溶巴比妥類

24、藥物溶解氯仿提取加酸酸化堿液提取振搖，棄去水相層pH7.2-7.5緩沖溶液測(cè)定吸光度調(diào)節(jié)堿提取液pH值四、含量測(cè)定76(五)高效液相色譜法適用于復(fù)方制劑中巴比妥類藥物的分析示例13 ChP苯巴比妥片的含量采用HPLC測(cè)定：色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn) 用辛烷基硅烷建和硅膠為填充劑；以乙腈-水(30:70)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm。理論塔板數(shù)按苯巴比妥峰計(jì)算不低于2000，苯巴比妥與相鄰色譜峰的分離度應(yīng)符合要求。測(cè)定法 取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于苯巴比妥30mg)，置50ml容量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲處理20分鐘使苯巴比妥溶解，放冷，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，

25、精密量取濾液1ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10l，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取苯巴比妥對(duì)照品，精密稱定，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含苯巴比妥60g的溶液，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。四、含量測(cè)定77四、含量測(cè)定總結(jié)78五、巴比妥類藥物的體內(nèi)藥物分析RPLCHPCEGC-MSLC-MS(4)(1)(2)(3)798081取苯巴比妥（M=232.24）對(duì)照品用適量溶劑配成10ug/ml的對(duì)照品溶液。另取50mg的苯巴比妥鈉（M=254.22）供試品溶于水，加酸，用三氯甲烷提取蒸干后。殘?jiān)眠m當(dāng)溶劑配成100ml溶液，取1ml，稀釋至50ml作

26、為供試品溶液。在240nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值。對(duì)照液為0.431，供試液為0.392.計(jì)算苯巴比妥鈉的百分含量。82取苯巴比妥0.4045g，加入新制的碳酸鈉試液16ml使溶解，加丙酮12ml與水 90ml，用硝酸銀滴定液（0.1025mol/L）滴定至終點(diǎn)，消耗硝酸銀滴定液16.88ml，求苯巴比妥的百分含量？每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于23.22mg的C12H22N2O3。2022/8/483第二節(jié) 苯并二氮雜類藥物的分析苯并二氮雜藥物的分析四含量測(cè)定五體內(nèi)藥物分析三特殊雜質(zhì)檢查二鑒別實(shí)驗(yàn)一苯并二氮雜藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)84一、苯并二氮雜類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)苯環(huán)與七元含氮雜環(huán)稠

27、合而成的有機(jī)藥物(一)典型藥物85NN12345671,4-苯并二氮雜89地西泮奧沙西泮勞拉西泮86氯硝西泮氯氮三唑侖87苯并二氮雜類藥物通常為白色或微黃色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；具有一定的熔點(diǎn)該類藥物一般不溶或極微溶于水，溶于丙酮或三氯甲烷等有機(jī)溶劑(二)主要理化性質(zhì)881.弱堿性藥物結(jié)構(gòu)中二氮雜環(huán)為七元環(huán)，環(huán)上的氮原子具有堿性，苯基的取代使堿性降低藥物的pKa值與其在不同pH時(shí)主要是以何種分子形式(質(zhì)子化分子H2A+；中性分子HA；去質(zhì)子化分子A)存在有關(guān)陽(yáng)離子中性分子陰離子892.水解性在強(qiáng)酸性溶液中，本類藥物可水解，形成相應(yīng)的二苯甲酮衍生物（主要有關(guān)物質(zhì)）3.UV吸收特性90二、鑒別試驗(yàn)(一)化學(xué)鑒別反應(yīng)1. 沉淀反應(yīng) 氯氮 橙紅色沉淀 阿普唑侖 鹽酸氟西泮 KBiI4 也生成橙紅色沉淀 氯硝西泮 放置后，沉淀顏色變深， 因此可以相互區(qū)別。阿普唑侖 + 遇硅鎢酸 白色沉淀，藥典中也用于鑒別。912. 硫酸熒光反應(yīng)本類藥物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，顯不同顏色的熒光 地西泮 黃綠色 黃色 氯氮 黃色 紫色 艾司唑侖 + H2SO4 亮綠色 + 稀硫酸 天藍(lán)色 硝西泮 淡藍(lán)色 藍(lán)綠色 奧沙西泮 淡黃綠色示例14 地西泮的硫酸-熒光反應(yīng)鑒別：取地西泮約10mg，加硫酸3ml，振搖使溶解，在紫外光燈(365nm)下檢視，顯黃綠色熒光