分子生物學(xué)最終版中醫(yī)醫(yī)師資格資料

1、1 基因 ：基因是基因組中的一個功能性遺傳單位,是貯存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或 rna 序列信息及表達這些信息所需的全部核苷酸序列；2 基因組 ：基因組是一個細胞或一種生物體的整套遺傳信息；3 質(zhì)粒 ：是指細菌細胞染色體意外,能獨立復(fù)制并穩(wěn)固遺傳的共價閉合環(huán)狀分子；4 蛋白質(zhì)組 ：是指一種基因所表達的全套蛋白,既包括一個細胞或一個組織或一個機體的基因所表達的全部蛋白質(zhì)；7DNA重組 : 是指不同來源的 DNA通過磷酸二酯鍵連接而重新組合成新的 DNA分子的過程,8 限制性內(nèi)切酶 : 是指能識別和水解雙鏈 DNA分子的內(nèi)特異序列的核酸水解酶；9 載體 ：是指攜帶靶 DNA片段進入宿主細胞進行擴曾和

2、表達的運載工具,常用的載體有 : 質(zhì)粒載體、噬菌體載體,病毒載體和人工染色體等；12 核酸分子雜交 ：單鏈的核酸分子在適合的條件下,與具有堿基互補序列的異核酸形成雙鏈雜交的過程；13 雜交 : 將一種核酸單鏈標記成探針,再與另一核酸單鏈進行堿基互補配對,可以形成異源核酸分子的雙鏈結(jié)構(gòu)的過程,14PCR: 是一個在體外特異的復(fù)制一段已知序列的 中獲得大量拷貝的特異核酸片段；DNA片段的過程,這項技術(shù)使人們能夠人們很快的從試管15 分子生物學(xué)檢驗 : 從基因水平上說明疾病發(fā)生氣制,明確疾病診斷,跟蹤疾病過程,指導(dǎo)個體化治療的先進技術(shù)手段；17 反義核酸 ：是用人工合成的15-25 個核苷酸片段,

3、通過堿基互補配對挑選與特定的RNA或 DNA互補結(jié)合,從而能專一性的抑制基因的轉(zhuǎn)錄與翻譯；18 核酶 : 是一類具有酶的特異性催化功能的RNA分子,能序列特異性地剪切底物RNA或修復(fù)突變的RNA；19 致病基因 ：能導(dǎo)致遺傳病或遺傳病發(fā)生相關(guān)的基因；20 血紅蛋白 ：是由于編碼血紅蛋白的基因反常而發(fā)生的一類遺傳性貧血；分兩類一反常血紅蛋白病 eg 鐮狀細胞貧血二球蛋白生成障礙性貧血也稱地中海貧血21 地中海貧血 ：也稱球蛋白生成障礙性貧血；是由于球蛋合成速率降低,引起 a 鏈和非 a 鏈缺乏稱為球蛋白生成障礙性貧血；22 血友病 ：由于基因缺陷而使其中某一凝血因子蛋白表達降低或的確造成的一種疾

4、??；分類；A 型 B 型23 轉(zhuǎn)座因子 : 一類在細菌染色體,質(zhì)?；蚴删w之間自行移動并具有轉(zhuǎn)位特性的獨立 DNA序列；24 操縱子 : 啟動基因,操縱基因和一系列緊密連鎖的結(jié)構(gòu)基因的總稱；25 單順反子 : 是真核基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物,即一條mRNA模板只含有一個翻譯起始點和一個終止點；因而一個基因編碼一條多肽鏈,每個基因轉(zhuǎn)錄有各自的調(diào)劑元件；3 原核生物基因組特性？1 具有類核結(jié)構(gòu) 2 基因組中只有一個復(fù)制起點 3 具有操縱子結(jié)構(gòu) 4 基因連續(xù)無內(nèi)含子 5 無基因重疊現(xiàn)象 6可編碼同工酶序列 7 編碼序列占基因組的 508 基因組中有重復(fù)序列 9 基因組中有轉(zhuǎn)座子4 病毒基因組的特性？1 基因的

5、堿基組成相對簡潔 2 基因組的核酸序列類型較多 3 基因組中有基因重疊現(xiàn)象 4 基因組中具有操縱子 5 病毒基因可間斷可連續(xù) 6 基因組中重復(fù)序列少 7 基因組是單倍體 8 相關(guān)基因從集 9 病毒基因組含有不規(guī)章結(jié)構(gòu)基因 10 基因組中非編碼區(qū)少5 真核基因組的特性？1 單順反子結(jié)構(gòu) 2 斷裂基因 3 重復(fù)序列 4 多基因家族和假基因 5 多太性 6 基因重疊 7 端粒6 western 印跡基本過程 ：蛋白質(zhì)樣品的制備,SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)移,蛋白質(zhì)與抗體的結(jié)合及相應(yīng)的顯色反應(yīng)；和染色體重排；7DNA測序方法有？雙脫氧核苷酸末端終止法,化學(xué)斷裂法,DNA自動測序8 抑制基因

6、表達的技術(shù)有？反義核酸,核霉和脫氧核酶及小 RNA干擾；9 探針的種類,常用的標記物？探針種類 DNA探針, RNA探針,寡核苷酸探針；標記物有：放射性標記最敏銳牢靠的是 32p 標記,非放射性標記多由生物素,地高辛或熒光素標記；10 核酸分子雜交的基本原理？基本過程是變性 - 復(fù)性 - 雜交；在肯定條件下雙螺旋之間氫鍵斷裂,雙螺旋解開,DNA分子變成單鏈,形成無規(guī)章團,這一過程稱為變性；變性的 DNA只要排除變性條件,具有堿基互補區(qū)域的單鏈又可以重新結(jié)合形成雙鏈,這一過程稱為復(fù)性；依據(jù)這一條件,將一種核酸單鏈標記成探針,在于另一核酸單鏈進行堿基互補配對,可以形成異源核酸分子的雙鏈結(jié)構(gòu)這一過程

7、稱為雜家；核酸分子單鏈之間的互補堿基序列,以及堿基對之間非共價鍵的形成是核酸分子雜交的基礎(chǔ)；11PCR原理及基本過程？變性： DNA雙螺旋的氫鍵斷裂,形成單鏈分子作為反應(yīng)的模板？退火：引物與模板互補結(jié)合,形成雜交鏈；延長：依據(jù)模板鏈的序列以互補的方式一次把 形成新的 DNA雙鏈；12PCR反應(yīng)體系包括？dNTP加至 3 端, TapDNA聚合酶使雜交雙鏈不斷延長,直至模板,引物,脫氧核苷三磷酸,TapDNA聚合酶,鎂離子濃度及其它反應(yīng)因素；13 生物芯片的醫(yī)學(xué)應(yīng)用？DNA芯片的醫(yī)學(xué)應(yīng)用包括基因表達分析,基因型,基因突變和多態(tài)性分析,疾病診斷,藥物挑選,指導(dǎo)臨 床用藥,預(yù)防醫(yī)學(xué)；蛋白質(zhì)芯片的醫(yī)學(xué)

8、應(yīng)用包括特異性抗原抗體的檢測,生化反應(yīng)的檢測,疾病診斷,疾 病機制討論,藥物挑選及新藥的研發(fā)；14 雙向凝膠電泳由那兩項電泳組成？其機制是什么？聚焦凝膠電泳；其次向是以蛋白質(zhì)分子量差異為基礎(chǔ)的 不同而分別；其次向依據(jù)蛋白質(zhì)分子量不同區(qū)分；15 核酸分子雜交的過程？第一向是以蛋白質(zhì)電荷差異為基礎(chǔ)進行分別的等電 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳；第一向依據(jù)等電點電荷1 樣品制備：印跡雜交的前提是獲得具有肯定純度和完整性的核酸；2 電泳分別通過瓊脂糖凝膠電泳分別；3 印跡：將帶測定核酸分子通過肯定的方法轉(zhuǎn)移并結(jié)合到肯定的圖像支持物上；4 預(yù)雜交：將固相膜上能夠結(jié)合核酸的住點全部封閉；5 雜交：用探針與固相

9、膜上的核酸結(jié)合；6 洗膜：除去固相膜上未雜交的游離探針和形成非特異性雜交低的探針；16 鐮狀細胞貧血發(fā)生的機制？7 分析：通過放射自顯影或或化學(xué)分析待測核酸片段的大小和含量；鐮狀細胞貧血患者由于b 珠蛋白基因中第六位密碼子存在單個堿基的突變,由原先GAG轉(zhuǎn)變成 GTG,結(jié)果使 B 珠蛋白鏈的第六位氨基酸殘基由原先的谷氨酸轉(zhuǎn)變成結(jié)氨酸轉(zhuǎn)變后的反常血紅蛋白稱為鐮狀血紅蛋白；17 影響雜交速率和雜化分子穩(wěn)固性的因素1 溫度 2 離子強度和甲酰胺濃度3 探針種類和濃度4 核酸分子大小和濃度5 雜交時間 6 雜交促進擠7 非特性雜交18 簡述雙脫氧末端終止法測序的原理；以待測單鏈DNA為模板,寡聚核苷酸

10、為引物,在DNA聚合酶的作用下,按堿基互補原就合成互補 DNA單鏈,在合成過程中鏈可終止于雙脫氧核苷酸處,獲得不同長度的 而得到待測 DNA分子的堿基序列；19 病毒感染的分子生物學(xué)檢測策略是什么？DNA單鏈,在經(jīng)電泳分別,讀序A,一般性檢出策略,供應(yīng)是否存在某種病毒感染；B 完整性檢出策略,對病毒存在做出明確帶菌者和潛在感染者仍有對病毒拷貝數(shù),基因分型,基因亞型及耐藥性監(jiān)測；20HBV基因組結(jié)構(gòu)以及表達產(chǎn)物HBV是帶有部分單鏈區(qū)的環(huán)狀 DNA雙鏈分子,由兩條鏈組成,長鏈和短鏈；長鏈長度固定,攜帶病毒全部編碼信息；HBV基因組長鏈有 6 個開放讀碼框架, 其中 S.C.X.P 是最主要 表達產(chǎn)

11、物 :1 ,S 區(qū) 外膜蛋白 C 區(qū),核心區(qū)蛋白；P 區(qū), DNA多聚酶蛋白 x 區(qū), x 蛋白；21 寫出 HIV 基因組結(jié)構(gòu)及表達產(chǎn)物；由兩條相同的正義 RNA組成； 兩段為長末端重復(fù)序列 LTR,LTR是順勢調(diào)控序列,包含啟動子增強子負調(diào)控區(qū),掌握前病毒的表達；LTR之間為編碼區(qū),包含 9 個基因,各基因存在重復(fù)序列,有部分,也有完全重疊；表達產(chǎn)物, 結(jié)構(gòu)基因 gap 多聚蛋白前體 env 包膜前體蛋白 pol 編碼合成前體蛋白 調(diào)控基因 tat 反式激活的轉(zhuǎn)錄因子； rev 促進大分子量 mRNA轉(zhuǎn)運 nef 負調(diào)劑蛋白22 寫出結(jié)合分枝桿菌基因組結(jié)構(gòu)特點；環(huán)狀雙鏈 DNA,4000 個基因,其基因序列高度保守,基因組大多數(shù)插入序列位于基因間或非編碼區(qū)共有 3924 個開放閱讀框,其中91有潛在的編碼才能,有三個毒力因子:mce,過氧化氫酶,過氧化物酶,和 siga 23 等電聚膠凝邁電泳機理依據(jù)蛋白質(zhì)分子靜電荷或等電點進行分別的技術(shù),在等電聚焦過程中,電場所采納的載體兩性電解質(zhì)有脂肪族多氨基的羧基,可在電場形成正極酸性,負極堿性的連續(xù) ph 梯度,蛋白質(zhì)在連續(xù)梯度中電