康脂素藥業(yè)有限責任公司創(chuàng)業(yè)計劃書

1、康脂素藥業(yè)有限責任公司創(chuàng)業(yè)計劃書二零零零八年年四月目錄第一章：執(zhí)行概概要一、公司司簡介006二、市場場描述006三、公司司管理008四、公司司戰(zhàn)略規(guī)規(guī)劃08五、場地地及設施施008六、投資資與財務務08第二章：康脂素素新藥研研究一、產品品來源009二、原料料來源009三、新藥藥研究009臨床前前研究10劑劑量的選選擇27康脂素質質量標準準起草說說明28產品生產產工藝336產品包裝裝38品種規(guī)劃劃38第三章：生產質質量管理理一、生產產管理339二、生產產要求440三、廠房房建設441四、成本本控制441五、質量量管理441六、產品品研發(fā)442七、生產產工藝流流程42八、設備備管理442九、物料料

2、管理444第四章：公司管管理一、公司司概況445二、產品品核心競競爭力46三、公司司遠景447四、公司司組織結結構及各各部門職職能447五、公司司的發(fā)展展戰(zhàn)略49第五章：市場營營銷分析析一、市場場概述52二、市場場需求分分析53三、消費費對象和和消費者者購買特特點56四、企業(yè)業(yè)綜合分分析57第六章：市場營營銷一、目標標市場558二、市場場定位558三、營銷銷組合策策略59四、促銷銷策略661第七章 財務規(guī)規(guī)劃與投投資分析析一、資本本結構與與規(guī)模65二、資金金來源及及運用66三、投資資的可行行性分析析66四、投資資凈現(xiàn)值值和報酬酬率667五、項目目敏感性性分析69六、項目目經營安安全性分分析77

3、0七、投資資回報70第八章 財務分分析一、主要要財務假假設71二、銷售售預測771三、成本本費用核核算72四、利潤潤表773五、資產產負債表表74六、現(xiàn)金金流量表表75七、財務務指標分分析76八、風險險及其評評價77九、風險險資本的的退出78第九章：保險與與法律事事務第十章：附錄附錄一: 授權權委托78附錄二：技術實實施許可可證79附錄三：創(chuàng)業(yè)團團隊簡介介811附錄四：創(chuàng)業(yè)團團隊指導導老師884附錄五: 產品品包裝85附錄六：金銀花花外觀圖圖87附錄七：選擇地地優(yōu)勢888附錄八: 金銀銀花標準準操作規(guī)規(guī)程（SSOP）922附錄九：河南新新鄉(xiāng)地圖圖955附錄十：廠址97附錄十一一：廠區(qū)平平面圖9

4、8附錄十二二：市場場狀況問問卷調查查表99第一章：執(zhí)行概概要一、公司司簡介康脂素藥藥業(yè)有限限責任公公司（以以下簡稱稱“康脂素素藥業(yè)”）是一一家正在在籌建中中的集科科研、生生產、銷銷售為一一體的制制藥企業(yè)業(yè)，公司司堅持“關愛人人類健康康，幸福福千萬家家庭”的理念念，為大大眾做質質量好療療效佳的的藥品。公司利用用河南大大學藥學學院康文文藝博士士的科研研成果，生產和和銷售中中藥一類類新藥康脂脂素，并并逐步建建立原料料生產基基地和全全方位的的銷售網(wǎng)網(wǎng)絡。公司以科科技為第第一生產產力，特特別注重重新產品品的研發(fā)發(fā)，在投投資初期期就計劃劃建立起起以河南南大學天天然藥物物研究所所為依托托的研發(fā)發(fā)中心，并注重

5、重人才的的引進及及培養(yǎng)。公司廠址址選在鄭鄭州市東東開發(fā)區(qū)區(qū)，鄰近近亞洲最最大的中中轉站之之一鄭州火火車站。該區(qū)交交通便利利，環(huán)境境優(yōu)美，并且可可以享受受稅收優(yōu)優(yōu)惠政策策。二、市場場描述1、流行行病學狀狀況1.1我我國高血血脂人群群現(xiàn)狀20000年亞洲洲心血管管病合作作研究結結果我國國人群總總的血脂脂異?；蓟疾÷蔬_達18.6%，近幾年年隨著生生活水平平大幅度度提高，血脂異異常逐年年增加，我國血血脂異常常患者近近3億人人。1.2我我國高血血脂人群群呈現(xiàn)年年齡差異異20044年中國國 MOONICCA研究究第二次次危險因因素調查查，大多多數(shù)地區(qū)區(qū)女性的的總TCC水平明明顯高于于男性，TG水平也也存在

6、明明顯的差差異。1.3我我國高血血脂人群群的分布布特點血脂代謝謝異常在在我國不不同人群群中具有有不同的的類型特特征。我我國人群群中具有有至少一一項血脂脂異常的的人群總總數(shù)逾億億人。1.4老老年人高高血脂特特點20044年中國國 MOONICCA研究究，血脂脂異?？偪偦疾÷事矢哌_665.99%。1.5高高血脂逐逐漸低齡齡化的趨趨勢20044年4-10月月中國 MONNICAA研究組組織流行行病學調調查組,得出結結論:兒兒童高脂脂血癥現(xiàn)現(xiàn)患率明明顯增高高,具有有地區(qū)、年齡、性別的的流行病病學特征征。1.6高高血脂和和其它心心血管疾疾病的相相關性20044年中國國 MOONICCA研究究得出高高脂血

7、癥癥為動脈脈粥樣硬硬化、冠冠心病等等其他心心血管疾疾病的危危險因素素。1.7調調節(jié)高血血脂藥物物1.7.1西藥藥類：他汀類類藥物包包括洛伐伐他汀、辛伐他他汀等；膽汁酸酸螯合劑劑代表有有考來烯烯、考來替替泊等；貝特類類有吉非非羅齊；煙酸類；抗氧化化劑普羅羅布考；多烯脂脂肪酸類類有 nn- 33 多烯烯脂肪酸酸。1.7.2中藥藥類：降血清膽固固醉藥物物何首烏烏、決明明、虎杖杖等和維生素素E、黃黃精、黃黃酮類、甾體類類和枯類類化合物物；對低低密度脂脂蛋白代代謝的影影響有決明子子山植及及山植黃黃酮；對甘油油三醋代代謝的影影響有黃連、黃琴、絞股藍藍、大黃黃、何首首烏、大大蒜、姜姜黃、銀銀杏葉等等。；對高

8、密密度脂蛋蛋白代謝謝的影響響：山楂楂、大黃黃等。2產品競競爭力：分別從從產品療療效競爭爭力、對比同同類產品品競爭力力和產品品市場競競爭力三三個方面面闡述產產品競爭爭力。3產品定定位產品適用用于各種種原因引引起的高高血脂血血癥、血血清膽固固醇增高高癥，也也可用于于冠心病病或慢性性肝炎患患者的高高血脂癥癥，動脈脈粥樣硬硬化的預預防和輔輔助治療療。公司建立立以后，將針對對降脂藥藥市場的的銷售現(xiàn)現(xiàn)狀，突突出產品品優(yōu)勢，建立售售前指導導，堅持持售后服服務。廣廣泛宣傳傳健康知知識，提提高人們們的健康康意識和和對本產產品的認認知度、認同度度，指導導高血脂脂人群合合理的、科學的的使用本本產品。公司初期期將在鄭

9、鄭州、開開封、洛洛陽設立立分銷中中心，采采用衛(wèi)星星媒體、地面促促銷和及及時反饋饋相結合合的方式式啟動市市場，跨跨入大型型超市、醫(yī)院藥藥房、藥藥店直銷銷直營，以產品品功效吸吸引消費費者，帶帶動品牌牌成長，再以品品牌成長長帶動企企業(yè)發(fā)展展，鞏固固繼而擴擴大市場場占有率率，并積積極拓展展廣闊的的國際市市場。三、公司司管理公司性質質屬于有有限責任任制。公司實行行事業(yè)部部型組織織機構，面對不不同的環(huán)環(huán)境，按按照產品品或類別別、市場場用戶、地域以以及不同同的業(yè)務務單位分分別成立立若干事事業(yè)部，并由這這些事業(yè)業(yè)部進行行獨立業(yè)業(yè)務經營營和分權權管理。由股東東代表組組成董事事會，任任命一名名總經理理和兩名名副總

10、經經理，分分別負責責下設的的財務部部、營銷銷部、公公關部（下設危危機管理理中心和和品牌推推廣部）、生產產部、質質量管理理部、研研發(fā)中心心和物流流部八個個部門。四、公司司戰(zhàn)略規(guī)規(guī)劃以康脂素素產品為為核心產產品，利利用技術術優(yōu)勢，積極開開發(fā)新產產品，并并積極申申請新藥藥專利，保護技技術成果果。管理理創(chuàng)新，產品創(chuàng)創(chuàng)新，營營銷策略略創(chuàng)新，充分發(fā)發(fā)揮專項項技術優(yōu)優(yōu)勢，堅堅持人力力資源戰(zhàn)戰(zhàn)略、企企業(yè)文化化戰(zhàn)略及及可持續(xù)續(xù)發(fā)展戰(zhàn)戰(zhàn)略。五、場地地及設施施 廠址：址址選在鄭鄭州市東東開發(fā)區(qū)區(qū),位于于距鄭州州東貨站站3公里里的東三三環(huán)路與與航海路路交叉處處，鄰近近亞洲最最大的中中轉站之之一鄭州火火車站。 設備包括

11、括：膠囊囊切割機機,藥用用膠囊套套合機-JNGG4000型，NNIP系系列全自自動膠囊囊充填機機，脈沖沖氣流干干燥機，溶膠罐罐等。六、投資資與財務務本公司設設立在鄭鄭州市東東開發(fā)區(qū)區(qū)，享受受“免二減減三”的稅收收優(yōu)惠政政策。公司成立立初期共共需資金金13000萬元元，其中中吸引風風險資金金5500萬元，河南大大學注入入資金5500萬萬元，短短期貸款款2500萬元。資金用用于固定定資產投投資9995萬元元，流動動資金3305萬萬元。股本規(guī)模模及結構構暫定為為：注冊冊資本為為10550萬元元，外來來風險投投資入股股3000萬元（28.57%），河河南大學學專利技技術入股股2000萬元（19.05%

12、），資資金入股股3000萬元（28.57%），同同時又引引入23家風風險投資資共同入入股2550萬元元（233.811%），利于籌籌資，化化解風險險，并為為以后擴擴大規(guī)模模做準備備在公司的的經營過過程中將將獲得充充分的市市場信息息，利用用財務杠杠桿等財財務分析析工具，為公司司在資金金管理方方面贏得得優(yōu)勢。第二章：康脂素素新藥研研究一、產品品來源該產品是是由河南南大學天天然藥物物研究所所研發(fā)，經河南南大學天天然藥物物研究所所技術轉轉讓，由由我公司司全權負負責該產產品的生生產與經經營。并并附術轉轉讓證書書（見附附錄二）。二、原料料來源金銀花為為忍冬科科植物忍忍冬Loonicceraa jaapon

13、nicaa Thhunbb.、紅紅腺忍冬冬Lonniceera hyppogllauccaMMiq.、山銀銀花Loonicceraa coonfuusa DC.或毛花花柱忍冬冬Lonniceera dassysttylaa RRehdd.的干干燥花蕾蕾或帶初初開的花花，為中國藥藥典（20005年版版）收載載品種，可用于于癰腫疔疔瘡，喉喉痹，丹丹毒，熱熱毒血痢痢，風熱熱感冒，溫病發(fā)發(fā)熱，具具有清熱熱解毒，涼散風風熱之功功效。本公司以以河南省省封丘縣縣金銀花花種植基基地為原原料供應應地，其其金銀花花年產量量居全國國第一位位，20003年年該縣獲獲得全國國惟一一一家金銀銀花“原產地地”認證，2000

14、5年順順利通過過GAPP認證。三、新藥藥研究1臨床前前研究1.1 系統(tǒng)提提取分離離1.1.1金金銀花的的粗提取取:將金金銀花粉粉碎，用用丙酮：水 11：2浸浸漬提取取兩次，第一次次7天，第二次次3天，得到浸浸漬提取取液，回回收溶劑劑丙酮，得到丙丙酮部分分浸膏，兩次得得到的浸浸膏合并并，濾渣渣在分別別用相同同的方法法分別用用甲醇和和氯仿提提取，最最后得到到丙酮、甲醇和和氯仿三三個部分分。1.1.2 金銀花花的精分分離：將將所得到到的丙酮酮部分的的浸膏用用溶劑稀稀釋，用用硅膠、葡聚糖糖凝膠上上柱分離離，然后后用合適適的溶劑劑極性系系統(tǒng)進行行洗脫，經過復復雜、反反復的上上柱分離離得到單單體化合合物兩

15、個個：分別別記做化化合物AA、B。利用上上述方式式分別對對甲醇部部分和氯氯仿部分分進行系系統(tǒng)分離離，甲醇醇部分得得到一個個單體化化合物：記做化化合物CC。氯仿仿部分進進行系統(tǒng)統(tǒng)的分離離得到三三個單體體化合物物：分別別記做化化合物DD、E、F。經經過系統(tǒng)統(tǒng)分離總總共從金金銀花中中得到六六個單體體化合物物。1.1.3 六種化化合物的的結構的的測定化合物 A:黃黃色針狀狀結晶(丙酮) ,熔熔點20002201。易溶溶于丙酮酮、甲醇醇、乙酸酸乙酯。溴酚藍藍和三氯氯化鐵-鐵氰化化鉀反應應均為陽陽性,推推測其為為酚酸性性物質。UVmaxx(MeeOH,nm): 2207，2588，2994；IIR(KKB

16、r,cm ) : 34410，29255，28566，16555，16603, 15527，14555，13822，12899，1 2477，9339，8879，8233，7665，6638，5555；1H-NNMR(4000 MHHz，AAcettonee ) :7.551(11H ,d ,J =2.00 Hzz ,HH-222)，77.466(1H, dd, J = 88.2HHz，22.0 Hz，H-226)，6.888(11H, d, J =8.22 Hzz, HH-255)；113C-NMRR(1000 MMHz，Aceetonne)：1222. 8(CC-211)，1117. 2(

17、C-222)，1455. 44(C-23)，1550. 6(CC-244)，1115. 5(C-55)，1123.4(CC-266)，1167.6(CCOOHH)。化合物BB:黃色色結晶(丙酮) ,熔熔點17721174。易溶溶于丙酮酮、甲醇醇.溴酚酚藍和三三氯化鐵鐵 -鐵氰氰化鉀反反應均為為陽性,推測其其為酚酸酸性物質質。IRR(KBBr ,cm ) :34884 ,33110 ,29665 ,28440 ,1 6679,16004,115322,14443,13667,113066,12279,12446,111888,11109,10445,9974,9333 ,8856；H2NMRR(

18、4000 MMHz ,Accetoone22D6 +D22 O):7.002(11H ,2d ,J =2.0 HHz ,H222) ,6.888(11H ,dd ,J= 8.3Hzz ,11.9 Hz ,H226) ,6.778(11H ,d ,J = 8.0 HHz,HH25) ,7.447(11H2 13dd,J=16.0 HHz ,H277),6.16(1H,dd ,JJ =116.00Hz ,H228) ,3. 66(3H,ss,- OCHH3 ) ；CC2NMMR(AAcettonee2D66 +22D2 O):1277.9(C211),1111.8(C222),1499.3(C23

19、3),1500.3(C244),1166.5(C255),1233.8(C266),1466.5(C2771166.1(C288),1700.8( - COOOH)。故鑒定定該化合合物為結結構為BB?；衔顲C:白色色粉末(甲醇),熔點點19992001。易溶溶于甲醇醇、水。溴酚藍藍反應為為陽性,推測其其為有機機酸類化化合物。IR( KBBr ,cm ) :34115,331133,29936 ,17717,16770,114511,14417,1 2235,11557,9999,8544,7663,5543,14996；HH2NMRR(4000 MMHz,D2OO):5.667(11H,dd

20、,J=7.66Hz,H222),7.440(11H,dd,J=7.66Hz,H233) ,3.553(22H ,13qq,J=6.88Hz,7.22Hz , -O-CCH2 - ),1.005(33H ,t ,J =6.88 Hzz ,- CHH3)；CC2NMMR(4400 MHzz ,DD2 OO) :1677.4( - COOOH) ,1433.3(C222) ,1000.9(C233) ,57.3(-O-CCH2- ) ,16.7( - CCH3)。故故鑒定該該化合物物結構為為C。化合物DD:白色色固體(氯仿),熔點點7072。易溶溶于氯仿仿,H22NMRR(4000 MMHz,CDC

21、Cl3 ) :1399(3HH ,tt ,JJ=6.8Hzz) ,1. 25(66HH) ,3. 65(2H ,t ,J = 6.8Hzz)；CC2NMMR(4400 MHzz,CDDCl33):63.1,-18,31.9,29.7,29.6,25.7,22.7,14.1IR( KBBr,ccm ):3 3955,29919,28550,117388,16613,14667,55,13372,12775,110600,7223。故故鑒定該該化合物物結構為為D。化合物EE:白色色固體(氯仿),熔點點5456。易溶溶于氯仿仿、乙酸酸乙酯。H2NMRR(4000 MMHz,CDCCl3):9(3H

22、,t ,J =6.88Hz),1.225(442H),1.544(4HH) ,3.777(2H ,t ,J = 6.8 HHz)。故鑒定定該化合合物結構構為E?；衔?F:黃黃色固體體(氯仿仿) ,熔點440442。易溶溶于氯仿仿、乙酸酸乙酯HH2NMRR(4000MMHz ,CDDCl33 ) :1(1H ,s ,- CCHO) ,7.222(11H ,d ,J =2.88Hz),6.552(11H ,d ,J =3.22 Hzz) ,4.77(2H,ss,H222),1.225(33H,CHH3)。故故鑒定該該化合物物結構為為F。1.2 體外實實驗研究究1.2.1試驗驗方法及及原理（1）D

23、DPPHH方法及及原理DPPHH法是220世紀紀50年年代提出出來的，最初用用于發(fā)現(xiàn)現(xiàn)食品中中的供氫氫體，后后來廣泛泛用于定定量測定定酚類物物質、黃黃酮類物物質、香香辛料類類、食品品、水果果和揮發(fā)發(fā)油等的的抗氧化化能力。DPPPH(二苯代代苦味酰?；杂捎苫?是一種種很穩(wěn)定定的以氮氮為中心心的自由由基（見見圖1），其孤對對電子在在5155nm附附近有強強吸收（其乙醇醇水溶液液顯深紫紫色）。當有供供氫能力力的抗氧氧化劑存存在時，孤對電電子被配配對，吸吸收消失失或減弱弱，而吸吸光度變變小的程程度與自自由基被被清除的的程度呈呈定量關關系，因因而可用用分光光光度法進進行定量量分析。圖1 DPPPH結構

24、構及其還還原產物物Fig.1 Strructturee off DPPPH andd itts rreduuctiion by thee anntiooxiddantt RHH（2）AABTSS方法及及原理ABTSS是一種種水溶性性的自由由基引發(fā)發(fā)劑，該該方法就就是以此此為顯色色劑，經經活性氧氧氧化后后生成穩(wěn)穩(wěn)定的藍藍綠色陽陽離子自自由基AABTSS+，向其其中加入入被測物物質，當當待測物物質中含含有抗氧氧化物時時，該物物質會與與ABTTS+發(fā)生發(fā)發(fā)應而使使反應體體系顏色色褪去，結構式式如圖22所示。在ABBTS+的最大大吸收波波長（一一般選擇擇7344 nmm）處檢檢測吸光光度的變變化。檢檢

25、測結果果與以TTrollox（6-HHydrroxyy-2,5,77,8-tettramm etthyllchrromaan-22-caarbooxyllic aciid ，即 66-羥基基-2,5,77,8-四甲基基苯并二二氫吡喃喃-2羧羧酸），一種合合成的類類似于VVE的水溶溶性物質質的對照照標準體體系比較較，換算算出被測測物質總總的抗氧氧化能力力，結果果多表示示為達到到一定濃濃度測試試物質相相當?shù)目箍寡趸苣芰λ栊枰腡Trollox的的濃度。 圖2 ABBTS及及其自由由基結構構Fig.2 Strructturee off ABBTS andd itts ffreee raadicc

26、al（3）FFRAPP方法及及原理FRAPP方法的的原理：在低ppH值的的溶液中中，F(xiàn)ee3+-三三吡啶三三啞嗪（triipyrridyyl-ttriaazinne，TTPTZZ）可被被抗氧化化劑還原原為二價價鐵形式式，呈現(xiàn)現(xiàn)出明顯顯的藍色色，并在在5933 nmm處有最最大吸收收，根據(jù)據(jù)吸光度度的大小小計算出出抗氧化化活性的的強弱。結果以以Fe2+當量或或相對于于標準抗抗氧化劑劑的能力力來表示示。1.2.2操作作方法（1）DDPPHH方法將樣品用用甲醇配配制成一一系列濃濃度，取取0.11 mll樣品加加入3.5 mml DDPPHH甲醇溶溶液（00.066 mmmol/L），混勻，30 mi

27、nn后測定定5155 nmm處吸光光度；同同法0.1 mml甲醇醇+ 33.5 ml DPPPH溶液液混勻測測定吸光光度。每每份樣品品平行操操作3次次，取平平均值。按照以以下公式式計算自自由基清清除率： DPPHH raadiccal scaavennginng rratee(%) = （AAconntrool-AAsammplee）/AAconntrool1000式中，Acoontrrol為為DPPPH本身身在測定定波長的的吸收，Asaamplle為樣樣品對DDPPHH作用后后的吸收收度數(shù)值值（除去去樣品自自身吸收收）。（2）AABTSS方法將樣品用用甲醇配配制成一一系列濃濃度，取取0.11

28、5 mml樣品品加入22.855 mll ABBTS自自由基工工作液，混勻，10 minn后測定定7344 nmm處吸光光度；同同法0.15 ml甲甲醇 + 2.85 ml ABTTS自由由基工作作液混勻勻測定吸吸光度。每份樣樣品平行行操作33次，取取平均值值。按照照以下公公式計算算自由基基清除率率： ABTSS raadiccal scaavennginng rratee(%) = （AAconntrool-AAsammplee）/AAconntrool1000式中，Acoontrrol為為ABTTS本身身在測定定波長的的吸收，Asaamplle為樣樣品對AABTSS作用后后的吸收收度數(shù)值值

29、（除去去樣品自自身吸收收）。（3）FFRAPP方法將樣品用用甲醇配配制成一一系列濃濃度，取取0.22 mll樣品加加入3.8 mml新鮮鮮配制的的TPTTZ工作作液，混混勻，337反應330 mmin后后測定5593 nm處處吸光度度。每份份樣品平平行操作作3次，取平均均值。若若所測定定樣品吸吸光度值值超過線線性范圍圍，則需需要進一一步稀釋釋樣品。1.2.3試驗驗結果1.2.3.11 DPPPH實實驗結果果見表11和表22由表22可知，化合物物DPPPH法抗抗氧化活活性由大大到小依依次是CC D E FF A B LGGL表1 陽性對對照品清清除DPPPH自自由基的的半數(shù)抑抑制濃度度樣本數(shù)(N

30、)終濃度（g/ml）A 值(XSSD)抑制率（%）IC500（g/ml）PG3-0.57780.0002-0.86632.7880.02280.000295.22131.6770.08870.000384.88830.8330.29950.001448.99330.4220.42250.000726.44330.2110.50050.000712.552BHA3-0.57750.0001-3.433316.6670.03340.000194.00938.3330.08800.000386.11534.1770.23330.000659.55932.0880.39970.000630.88431

31、.0440.47720.000317.883BHT3-0.58840.0001-18.7793111.110.04450.000292.229383.3330.06650.000288.881333.3330.20040.000465.115316.6670.34430.001741.11238.3330.42280.000726.552注：“NN”為樣本本數(shù)表2 化合物物清除DDPPHH自由基基的半數(shù)數(shù)抑制濃濃度No.樣本數(shù)(N)終濃度（g/ml）A 值(XSSD)抑制率（%）IC500（g/ml）A3-0.59930.0002-32.8863111.110.03340.000194.332

32、383.3330.03390.000093.442355.5560.12290.000178.228313.8890.45560.000522.88936.9440.52210.000311.889B3-0.58860.0002-42.22135.5550.02220.000296.22532.7880.07700.000288.00531.3990.25570.000056.11430.6990.41110.000929.88630.3550.49930.000215.887C3-0.58860.0002-1.13335.5550.02220.000296.22532.7880.07700.

33、000288.00531.3990.25570.000056.11430.6990.41110.000929.88630.3550.49930.000215.887D3-0.54440.0003-14.333355.5560.16610.001670.44316.6670.23350.000556.8838.3330.37710.000331.8834.1770.38840.000631.0062.0880.52210.00036.466E30.61160.0003-20.006355.5560.04400.000293.445327.7780.21190.000564.550313.8890

34、.40050.000234.33136.9440.50020.000417.11633.4770.55530.00098.755F30.59940.000224.661383.3330.03320.000194.556355.5560.06620.000389.662327.7780.27710.000154.440313.8890.40030.000432.33836.9440.49950.000617.000LGL3-0.59930.0002-59.443111.110.03340.000194.332383.3330.03390.000080.442355.5560.12290.0001

35、48.228313.8890.45560.000522.88936.9440.52210.000311.8891.2.3.22 ABBTS實實驗結果果由表2可可知，化化合物AABTSS法抗氧氧化活性性由大到到小依次次是C EE B F DD A LGGL圖3 Trooloxx清除AABTSS自由基基標準曲曲線表4 陽性對對照品清清除ABBTS自自由基的的半數(shù)抑抑制濃度度（N=3）No.終濃度（g/ml）A 值(XSSD)抑制率（%）IC500（g/ml）RACTT50moll/gPG-0.76640.0007-0.666155009.0091.50.03360.000195.2291.2550

36、.16690.000577.8880.62250.43340.000643.1190.311250.58800.000424.0080.15562550.65550.000414.227BHA-0.75580.0006-1.72259511.16650.00010.000199.8873.7550.01150.000498.0022.50.27710.000662.2251.2550.45520.000440.3370.62250.59990.000720.998BHT-0.75580.0008-6.04416966.111250.09940.000287.6612.550.22290.000

37、469.7796.2550.37750.000250.5533.12250.51120.000732.4451.566250.60050.001520.118表5 化合物物清除AABTSS自由基基的半數(shù)數(shù)抑制濃濃度（NN=3）No.終濃度（g/ml）A 值(XSSD)抑制率（%）IC500（g/ml）RACTT5moll/gA-0.78830.0006-4.82221255.86612.550.06670.000391.4449.37750.11180.000184.9936.2550.27740.000565.0013.12250.48800.000538.77B-0.83370.0007-

38、3.58828599.222250.06630.000592.44712.550.06680.000191.8886.2550.19960.000276.5583.12250.44480.000746.4481.566250.60080.000727.336C-0.76600.0005-1.49968699.8006.2550.00040.000199.4483.12250.16630.001078.5551.566250.36620.000552.4430.78812550.55500.000427.669D-0.77780.0005-4.03325399.955500.06600.0004

39、92.229250.12220.000584.33212.550.19910.000375.4456.2550.29970.001261.8833.12250.42290.000744.886E-0.71120.0004-3.45531811.612.550.01110.000198.4466.2550.09960.000286.5523.12250.38880.000345.5511.566250.49960.000330.334F-0.71120.0001-3.622528233.7226.2550.16640.000476.9973.12250.39930.001244.8801.566

40、250.52260.000226.112LGL-0.67770.0002-11.776870.41500.02200.000497.005250.15540.001077.22512.550.32200.000452.7736.2550.45590.000632.221.2.3.33 FRRAP方方法實驗驗結果由表2可可知，六六種單體體化合物物ABTTS法抗抗氧化活活性由大大到小依依次是CC E B FF D A LLGL圖4 Trroloox在FFRAPP方法中中的標準準曲線表7陽性性對照品品FRAAP值（N=33）陽性對照照濃度(mmg/mml）A 值(XSSD)Trollox當當量(mo

41、ll/g）(XSSD)PG0.02250.63360.0008106117.7751388.388BHA0.02250.44490.000773833.1001211.088BHT0.12250.52280.000117488.4993.446表8化合合物FRRAP值值（N=3）樣品濃度(mmg/mml）A 值(XSSD)Trollox當當量(moll/g）(XSSD)A10.61110.0003261.3117.3B0.12250.7110.001125522.59963.06C0.066250.83340.000856977.1551755.822D0.2550.85520.0021148

42、11.97735.92E0.12250.87740.001330377.94446.97F0.066250.52270.000736555.54447.59LGL0.50.93300.0005789.6432.691.2.4結論論體外實驗驗我們研研究了這這幾種化化合物的的體外活活性，我我們得如如下結果果Tablle 33 Anntiooxiddantt acctivvitiies of Commpouund 199SamppleTEA (moll Trroloox/gg)IC500 (g/mml)ABTSSFRAPPABTSSDPPHHPG155009.009106117.771388.388

43、0.6660.866BHA59511.16673833.1001211.0881.7223.433BHT16966.11117488.4993.4466.04418.779C68699.80056977.1551755.8221.4991.133E31811.630377.94446.973.45520.006B28599.22225522.59963.063.58842.221F28233.72236555.54447.593.622524.661D25399.95514811.97735.924.03314.333A21255.866261.3117.34.82232.886LGL870.

44、41789.6432.6911.77659.44陽性對照照：TrrolooxPG：名名稱prropyyl ggalllatee，沒食食子酸丙丙酯BHA：名稱BButyylatted hyddroxxyannisoole，丁基羥羥基茴香香醚BHT：名稱BButyylatted hyddroxxytoolueene，二丁基基羥基甲甲苯A-F表表示單體體化合物物LGL表表示：部部位體外實驗驗結論：通過體體外活性性抗氧化化的研究究，提示示化合物物C有很很強的體體外抗氧氧化的活活性，為為以后的的動物實實驗進一一步的確確證提供供很好的的體外數(shù)數(shù)據(jù)，也也為接下下來的實實驗劑量量提供很很好的參參考。該該化合物

45、物有很好好的體內內研究價價值。1.3體體內試驗驗1.3.1對對得到的的六個化化合物體體內實驗驗1.3.2實驗驗目的：對化合合物進行行降血脂脂模型的的篩選，確定其其降脂療療效1.3.3 實驗驗動物：昆明小小鼠（全全部雄性性），體體重為118-220g，由河南南省醫(yī)學學研究動動物實驗驗中心提提供。1.3.4 實驗驗藥物：將分離離得到的的六個單單體化合合物分別別用CMMCNaa混懸，低溫保保存，待待用。陽陽性對照照藥為降降脂靈片片（湖南南德海制制藥有限限公司）批號：0700603322。1.3.5 試驗驗檢測試試劑：膽膽固醇(TC)試劑盒盒、甘油油三酯(TG)、低密密度脂蛋蛋白膽固固醇(LLDL-C

46、)、高密度度脂蛋白白膽固醇醇(HDDL-CC)試劑劑盒。1.3.6 實驗驗造模方方法:參照徐徐叔云藥理實實驗方法法學的的方法，取877%的基基礎飼料料，加入入2%膽膽固醇、10%豬油、0.22%膽酸酸鈉、00.2%丙基硫硫氧嘧啶啶，加熱熱、混勻勻、制成成高脂飼飼料，喂喂服100天(220只/天)。1.3.7 實驗驗步驟：隨機將將60只只小鼠分分成九組組:空白白組、模模型組、陽性對對照組、化合物物A組、化合物物B組、化合物物C組、化合物物D組，化合物物E組、化合物物F組，每組110只.1.3.8 喂養(yǎng)養(yǎng)與護理理空白組小小鼠給予予普通飼飼料(購購自河南南醫(yī)學研研究動物物實驗中中心)，其余各各組給予

47、予高脂飼飼料;各各組均自自由飲水水，每日日更換飲飲水及飼飼料，保保持動物物生活環(huán)環(huán)境通風風及清潔潔衛(wèi)生。1.3.9 給藥藥方法小鼠造模模的第一一天開始始灌胃，試驗藥藥和陽性性對照藥藥按照上上述方法法進行配配制給藥藥，其余余給0.5mllg的的生理鹽鹽水，劑劑量按人人與小鼠鼠體表面面積折算算，每日日一次，連續(xù)110天。1.3.10標本本采集小鼠灌胃胃10天天后，從從第111天起，禁食112小時時，自由由飲水，采血00.5mml，在在正常溫溫度下330000rpmm離心110分鐘鐘，分離離血清備備用。1.3.11觀察察指標及及方法1.3.11.1實實驗動物物的一般般情況:包括飲飲食、大大小便及及精

48、神狀狀態(tài)的變變化等。1.3.11.2總總膽固醇醇的測定定:用酶酶反應試試劑藥盒盒測定。1.3.11.3甘甘油三酯酯的測定定:用酶酶終點法法測定。1.3.11.4低低密度脂脂蛋白的的測定:聚乙酸酸硫酸沉沉淀法。1.3.11.5高高密度脂脂蛋白的的測定:磷烏酸酸一鎂沉沉淀法。1.3.11.6血血液流變變學的測測定:用用NxEE-5型型血液流流變儀測測定。1.3.11.7肝肝臟病理理切片的的檢查。1.3.12 統(tǒng)計計學處理理 所所得數(shù)據(jù)據(jù)以平均均值士標標準差(X士ss)表示示，各標標本均數(shù)數(shù)的比較較采用方方差分析析的t檢檢驗和qq檢驗。1.3.12.1結結果1.3.12.2一一般情況況動物精精神狀態(tài)

49、態(tài)良好，所有給給藥組小小鼠的大大便、小小便明顯顯增多，飲食尚尚可，灌灌胃前后后無明顯顯不良反反應。1.3.12.3 六個化化合物對對血清總總膽固醇醇(TCC)的影影響模型組明明顯高于于空白組組(P0.001),模型組組血清TTC值明明顯高于于藥物CC組(PP0.005）, 藥物物C組和和空白組組的血清清TC值值沒有明明顯差異異(P0.001)。見表11表1各組組小鼠血血清膽固固醇(TTC)水水平的比比較(XX土s)組別樣品數(shù)量量TC值(mmoolll)空白組101.91180土土0.224433模型組107.46625士士2.114066陽性對照照組104.83330士士0.776877A10

50、7.40056士士2.445633B96.98878士士2.669788C91.93328士士0.225466D106.56676士士2.334322E85.23347士士2.554899F107.89956士士3.448866結論：化化合物CC由明顯顯降低小小鼠血清清總膽固固醇，并并且降脂脂可以降降到正常常水平。1.3.12.4六六個化合合物對血血清甘油油三脂(TG)的影響響，模型型組明顯顯高于空空白組(P00.011),模模型組血血清TGG值明顯顯高于藥藥物C組組(P00.055）, 藥物CC組和空空白組的的血清TTG值沒沒有明顯顯差異(P00.011)。如如下表22表2各組組小鼠血血清膽

51、固固醇(TTG)水水平的比比較(XX土s)組別樣品數(shù)量量TG值(mmoolll)空白組101.40050土土0.227911模型組102.47763士士0.113033陽性對照照組101.73305士士0.112700A102.41157士士0.445633B92.56678士士0.448788C91.41128士士0.225466D102.55586士士0.332522E82.24447士士2.557899F102.84476士士3.446633結論：化化合物CC有明顯顯降低小小鼠血清清甘油三三脂，并并且降脂脂可以降降到正常常水平1.3.12.5 六個化化合物對對低密度度脂蛋白白膽固醇醇（L

52、DDL）對對和高密密度脂蛋蛋白膽固固醇（HHDL）的影響響模型組血血清低密密度脂蛋蛋白膽固固醇（LLDL）明顯高高于空白白組(PP0.01),模型型組血清清LDLL值明顯顯高于藥藥物C組組(P0.005）, 藥物物C組和和空白組組的血清清LDLL值沒有有明顯差差異(PP0.01)。模型組的的高密度度脂蛋白白膽固醇醇（HDDL）明明顯高于于空白組組(P0.001),模型組組血清HHDL值值明顯高高于藥物物C組(P00.055）, 藥物CC組和空空白組的的血清HHDL值值沒有明明顯差異異(P 00.055)。見見表11.5.9血液液學檢查查結果比比較3個個劑量組組喂養(yǎng)大大鼠 330d 后血紅紅蛋白

53、含含量、紅紅細胞計計數(shù)、白白細胞計計數(shù)均正正常值范范圍內(P00.055)1.5.10對對大鼠臟臟體比的的影響 各劑劑量組臟臟體比指指標與對對照組比比較物顯顯著性差差異（PP0.05）1.5.11病病理組織織學檢查查比較大體標標本檢查查未發(fā)生生明顯病病變,因此僅僅選正常常對照組組及高劑劑量組作作組織病病理學檢檢查。高高劑量組組大鼠的的肝、腎腎、胃、脾、腸腸發(fā)片染染色后光光鏡檢查查結果未未見特異異性病理理改變。表5病理理組織學學檢查比比較1.5.12結結論：從從總體看看30dd 喂養(yǎng)養(yǎng)試驗化化合物CC對大鼠鼠生長發(fā)發(fā)育無不不良影響響, 血血常規(guī)、血清生生化指標標均在正正常值范范圍內, 病理理學檢

54、查查未見特特異性病病變。表表明無明明顯毒性性, 為為產品應應用的安安全性提提供實驗驗依據(jù)。1.6藥藥效學評評價：化化合物CC能有效效降低小小鼠TCC、TGG、HDDL、LLDL，并且降降脂效果果非常顯顯著，沒沒有發(fā)現(xiàn)現(xiàn)任何的的毒性作作用，為為高效低低毒類藥藥物，非非常有開開發(fā)價值值，根據(jù)據(jù)中藥藥非臨床床安全性性研究概概論要要求，金金銀花為為藥食同同源類中中藥，安安全性高高，在金金銀花中中提取得得到的化化合物CC經過動動物毒理理學實驗驗，沒有有發(fā)現(xiàn)任任何毒副副作用，所以按按照有關關要求，臨床前前研究只只需要急急性毒性性實驗和和長期毒毒性試驗驗數(shù)據(jù)。2劑量的的選擇小鼠實驗驗選擇劑劑量為225mgg

55、/kgg,折合合人用量量為2.77mmg/kkg,按按照700kg的的人體重重，每天天服用1193.9，一一天三次次每次服服用644.6mmg,(膠囊劑劑每次22粒，每每粒含主主藥322.3 mg)，服用用劑量合合理，可可以進行行臨床實實驗。3康脂素素質量標標準起草草說明3.1金金銀花原原料質量量標準名稱金銀花花。金銀銀花為忍忍冬科植植物忍冬冬Lonniceera japponiica Thuunb.、紅腺腺忍冬LLoniicerra hhypooglaaucaa Miiq.、山銀花花Lonniceera connfussa DDC.或或毛花柱柱忍冬LLoniicerra ddasyystyy

56、la Rehhd.的的干燥花花蕾或帶帶初開的的花。:我國大大部地區(qū)區(qū)均產，而以山山東產量量最大，河南產產的質量量較佳。性狀忍科 呈棒狀狀，上粗粗下細，略彎曲曲，長223ccm，上上部直徑徑約3mmm，下下部直徑徑約1.5mmm。表面面黃白色色或綠白白色，貯貯久色漸漸深，密密被短柔柔毛。偶偶見葉狀狀苞片。花萼綠綠色，先先端5裂裂，裂片片有毛，長約22mm。開放者者花冠筒筒狀，先先端二唇唇形；雄雄蕊5個個，附于于筒壁，黃色；雌蕊11個，子子房無毛毛。氣清清香，味味淡、微微苦。鑒別取本品品粉末00.2gg，加甲甲醇 55ml，放置112小時時，濾過過，濾液液作為供供試品溶溶液。另另取化合合物C對對照

57、品，加甲醇醇制成每每 1mml含 1mgg的溶液液，作為為對照品品溶液。照薄層層色譜法法（附錄錄 B）試驗，吸取供供試品溶溶液100200l，對對照品溶液110l，分分別點于于同一以以羧甲基基纖維素素鈉為黏黏合劑的的硅膠HH薄層板板上，以以醋酸丁丁酯甲甲酸水水 （77:2.5:22.5）的上層層溶液為為展開劑劑，展開開，取出出，晾干干，置紫紫外光燈燈（3665nmm） 下下檢視。供試品品色譜中中，在與與對照品品色譜相相應的位位置上，顯相同同顏色的的熒光斑斑點。檢查按中中國藥典典（220055年版一一部附錄錄 D）膠囊項項下規(guī)定定，對本本品樣品品進行了了檢查，結果符符合規(guī)定定。水分 照水分分測定

58、法法（附錄錄 H第第二法）測定，不得超超過122.0%總灰分 不得得超過110.00%（附附錄 K）。酸不溶性性灰分 不得得超過33.0%（附錄錄 K）。重金屬以以及有害害元素 照鉛鉛、鎘、砷、汞汞、銅測測定法（附錄 B原原子吸收收分光光光度法或或附錄D電感感耦合等等離子體體質譜法法）測定定，鉛、鎘、砷砷、汞、銅分別別不能超超過千分分之五、千分之之三、千千分之二二、千分分之二、百萬分分之二十十。含量測測定照照高效液液相色譜譜法（附附錄 D）測定。色譜條件件與系統(tǒng)統(tǒng)適用性性試驗: 用十十八烷基基硅烷鍵鍵合硅膠膠為填充充劑；乙乙腈-00.4磷酸溶溶液（113：887）為為流動相相；檢測測波長為為3

59、277nm。理論板板數(shù)按CC峰計算算不低于于10000。對照品溶溶液的制制備: 精密稱稱取C對對照品適適量，置置棕色量量瓶中，加500甲醇醇制成每每1mll含4g的溶溶液，即即得（110以下保保存）。供試品溶溶液的制制備: 取本品品粉末約約0.55g，精精密稱定定，置具具塞錐形形瓶中，精密加加50甲醇550mll，稱定定重量，超聲處處理300分鐘，放冷，再稱定定重量，用500甲醇醇補足減減失的重重量，搖搖勻，濾濾過，精精密量取取續(xù)濾液液5mll，置225mll棕色量量瓶中，加500甲醇醇至刻度度，搖勻勻，即得得。 測定法: 分別別精密吸吸取對照照品溶液液與供試試品溶液液各510l，注注入液相相

60、色譜儀儀，測定定，即得得。 本品含CC（C116H118O99）不得得少于11.5。 原料藥藥材金金銀花：上述鑒鑒別方法法是采用用薄層色色譜法，將原料料藥材與與金銀花花對照藥藥材進行行展開，顯色對對比。若若斑點顏顏色相同同，展開開位置相相同，則則原料藥藥材合格格。3.2質質量標準準1名稱、漢語拼拼音 康脂素素 KAANG ZHII SUU本品主要要成分是是金銀花花提取分分離化合合物，有有調血脂脂之功效效。提取取得到化化合物CC具有降降血脂作作用，是是本品的的主藥，根據(jù)其其英文名名Kanng llipiid，譯譯為康脂脂素。2制法：金銀花花的提取取分離工工藝見下下述產品品質量標標準部分分2.1儀